張宸瑜 彭壘 紀(jì)敬斌 矯文捷

1976年Sanger博士在Viroids中第一次發(fā)現(xiàn)環(huán)狀RNA（circular RNAs, circRNAs）[1]，在之后的一段時(shí)間內(nèi)，circRNA普遍被認(rèn)為是由于剪接錯(cuò)誤產(chǎn)生的副產(chǎn)物，并不具有已知的生物功能[2]。近些年來(lái)，得益于RNA測(cè)序技術(shù)的不斷更新和進(jìn)步，目前已經(jīng)有成千上萬(wàn)種circRNA被發(fā)現(xiàn)并引起人們的重視與深入研究。CircRNA是一種單鏈共價(jià)閉合的環(huán)狀RNA分子，通常由前體核糖核酸反向剪接而來(lái)，下游5’端剪接位點(diǎn)（剪接供體）和上游的3’端剪接位點(diǎn)（剪接受體）相連接從而產(chǎn)生首尾相連的circRNA[3]，也正因?yàn)槿绱耍琧ircRNA比線性RNA更能夠抵抗核酸外切酶降解從而比線性RNA更加穩(wěn)定[4]。CircRNA的功能主要包括提供微小核糖核酸（microRNA, miRNA）結(jié)合位點(diǎn)從而充當(dāng)miRNA海綿、調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄、與蛋白質(zhì)結(jié)合、作為蛋白質(zhì)翻譯模板等[2]。研究[5]發(fā)現(xiàn)在不同細(xì)胞和組織中，不同circRNA的表達(dá)是不相同的，即具有組織特異性，大多數(shù)circRNA在不同的疾病和腫瘤中往往異常表達(dá)，這使通過(guò)circRNA來(lái)鑒別不同的疾病和腫瘤成為了可能。除此之外，circRNA的異常表達(dá)可能會(huì)影響腫瘤的發(fā)生與進(jìn)展，因此通過(guò)干預(yù)circRNA表達(dá)或抑制其功能的方法可能用于治療或者輔助治療腫瘤和疾病。

腫瘤免疫治療方法主要包括免疫檢查點(diǎn)抑制劑療法、癌癥疫苗、過(guò)繼性免疫治療和溶瘤病毒等。自William Coley首次利用Coley毒素激活免疫系統(tǒng)治療癌癥，從而開(kāi)創(chuàng)腫瘤免疫治療先河以來(lái)[6]，腫瘤免疫治療取得了長(zhǎng)足進(jìn)展。2011年以及2014年細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4）抗體伊匹單抗（Ipilimumab）和程序性細(xì)胞死亡受體1（programmed cell death-1, PD-1）抗體帕博利珠單抗（Pembrolizuamb）獲得批準(zhǔn)可被用于黑色素瘤的治療，標(biāo)志著腫瘤免疫檢查點(diǎn)療法時(shí)代的開(kāi)始[7]。腫瘤免疫治療是目前腫瘤治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，目前已經(jīng)有研究[8]表明circRNA可以在腫瘤免疫治療中起到一定作用。CircRNA主要作為一種競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA（competing endogenous RNA, ceRNA）或miRNA海綿發(fā)揮功能，通過(guò)利用結(jié)合位點(diǎn)與miRNA競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，從而阻礙miRNA與下游的mRNA結(jié)合，最終阻礙其原有的功能從而影響腫瘤免疫；少數(shù)研究中circRNA通過(guò)與RNA聚合酶II結(jié)合形成復(fù)合體直接調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄從而影響腫瘤的免疫，例如過(guò)表達(dá)的circRNA CDR1-AS可使趨化素樣因子超家族4（CKLF-like MARVEL transmembrane domain 4, CMTM4）和趨化素樣因子超家族6（CKLF-like MARVEL transmembrane domain 6, CMTM6）mRNA表達(dá)水平增加，最終導(dǎo)致PD-L1表達(dá)水平增加。本文將對(duì)circRNA在以肺癌為首的腫瘤免疫治療研究中的進(jìn)展作一綜述。

1 CircRNA與免疫檢查點(diǎn)療法

由T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫是目前腫瘤免疫治療的熱點(diǎn)，CTLA-4和PD-1是T細(xì)胞表面的共抑制受體，當(dāng)其分別與相對(duì)應(yīng)的配體結(jié)合后，T細(xì)胞的抗腫瘤活性將受到抑制[9]，從而使腫瘤細(xì)胞得以逃避免疫系統(tǒng)的殺傷。通過(guò)使用免疫檢查點(diǎn)抑制劑可以激活T細(xì)胞的抗腫瘤活性，進(jìn)而消滅腫瘤細(xì)胞[10]。目前已經(jīng)有多項(xiàng)關(guān)于circRNA影響CTLA-4、PD-1、程序性死亡配體-1（programmed cell death ligand-1, PD-L1）等的表達(dá)從而影響腫瘤免疫逃逸的研究，本綜述主要描述目前比較常見(jiàn)的免疫檢查點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的circRNA之間的聯(lián)系及可能的影響，所涉及的circRNA總結(jié)于表1。

表1 環(huán)狀RNA與免疫檢查點(diǎn)療法Tab 1 CircRNA and immune checkpoint therapy

1.1 CircRNA影響CTLA-4的表達(dá) CTLA-4（CD152）是第一代免疫檢查點(diǎn)的靶標(biāo)，屬于免疫球蛋白超家族，通常以低水平表達(dá)，并且在細(xì)胞活化的早期階段有著重要的調(diào)節(jié)作用[11]。CTLA-4作為一種在T淋巴細(xì)胞膜表面發(fā)揮功能的免疫調(diào)節(jié)受體，卻主要存在于細(xì)胞內(nèi)囊泡中，通過(guò)內(nèi)吞作用形成循環(huán)與降解[12,13]，在與其配體結(jié)合后可以負(fù)性調(diào)節(jié)免疫，從而抑制T細(xì)胞的抗腫瘤活性。有研究團(tuán)隊(duì)[14]通過(guò)生信分析發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的circ-UBAP2在胰腺癌中可以抑制has-miR-494的表達(dá)從而促進(jìn)胰腺癌的進(jìn)展，同時(shí)通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)趨化因子受體4（C-X-C motif chemokine receptor 4, CXCR4）、多配體蛋白聚糖1（syndecan 1, SDC1）、鋅指結(jié)合蛋白1（zinc finger E-box binding homeobox 1, ZEB1）和低氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 subunit alpha,HIF1α）是circ-UBAP2/has-miR-494 ceRNA網(wǎng)絡(luò)的潛在靶標(biāo)，且既往已有其他研究發(fā)現(xiàn)miR-494可以抑制CXCR4的表達(dá)，研究團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)CXCR4與ZEB1的表達(dá)和CTLA-4與PD-1的表達(dá)呈正相關(guān)，表明CXCR4和ZEB1的高表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致CTLA-4與PD-1表達(dá)升高從而促進(jìn)腫瘤免疫逃逸，因此circ-UBAP2有可能通過(guò)調(diào)控has-miR-494進(jìn)而調(diào)控CXCR4和ZEB1的方式，最終調(diào)控CTLA-4與PD-1的表達(dá)，從而抑制抗原呈遞并促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的免疫逃逸，使腫瘤細(xì)胞逃脫免疫系統(tǒng)的殺傷，使腫瘤進(jìn)一步發(fā)展。

1.2 CircRNA影響PD-1的表達(dá) PD-1是一種由288個(gè)氨基酸構(gòu)成的I型跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族，是一種重要的免疫抑制分子。其結(jié)構(gòu)由包含一個(gè)IgV結(jié)構(gòu)域的胞外結(jié)構(gòu)域、疏水性跨區(qū)和胞質(zhì)區(qū)構(gòu)成[15]。胞質(zhì)尾部有由兩個(gè)酪氨酸殘基分別構(gòu)成的免疫受體酪氨酸抑制基序（immune-receptor tyrosine-based inhibitory motif, ITIM）和免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)換基序（immune-receptor tyrosine-based switch motif, ITSM），ITSM內(nèi)的酪氨酸殘基磷酸化從而使PD-1介導(dǎo)的免疫抑制發(fā)揮作用，故PD-1在免疫應(yīng)答中有著重要的負(fù)性調(diào)控作用[16]。

對(duì)于circRNA在PD-1免疫檢查點(diǎn)療法中的作用而言，circRNA主要通過(guò)提供結(jié)合位點(diǎn)，即作為miRNA海綿而發(fā)揮作用。目前共有5項(xiàng)研究[14,17-20]發(fā)現(xiàn)circRNA可以對(duì)PD-1免疫檢查點(diǎn)療法產(chǎn)生影響，除了circ-UBAP2是通過(guò)生信分析發(fā)現(xiàn)其可能影響PD-1的表達(dá)[14]外，其余4個(gè)circRNA均通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了其通過(guò)充當(dāng)miRNA海綿從而發(fā)揮作用的具體機(jī)制，根據(jù)circRNA是否影響PD-1表達(dá)可將circRNA分為直接作用（circRNA-002178[17]和circ-0001068[18]）與間接作用（circ-0020710[19]和circFGFR1[20]）兩類。

直接作用是指circRNA通過(guò)一系列復(fù)雜機(jī)制作用影響到PD-1的表達(dá)，以來(lái)自肺腺癌細(xì)胞的circRNA-002178為例，研究團(tuán)隊(duì)證明了癌細(xì)胞可以分泌含有circRNA-002178的外泌體，這些外泌體將circRNA-002178轉(zhuǎn)運(yùn)至CD8+T細(xì)胞中并顯著富集。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)circRNA-002178與miR-28-5p之間有兩個(gè)可以用于結(jié)合的結(jié)合位點(diǎn)，因此circRNA-002178在T細(xì)胞中可以充當(dāng)miR-28-5p的miRNA海綿從而降低miR-28-5p的水平。既往有研究[17]發(fā)現(xiàn)miR-28-5p可以通過(guò)與T細(xì)胞中PD-1的3′UTR相結(jié)合從而抑制PD-1的表達(dá)，因此降低的miR-28-5p會(huì)使PD-1表達(dá)升高，故最終的結(jié)果表明高表達(dá)的circRNA-002178可以促進(jìn)PD-1的表達(dá)。與circRNA-002178類似，來(lái)自卵巢癌細(xì)胞的circ-0001068也是通過(guò)外泌體被轉(zhuǎn)運(yùn)至T細(xì)胞并通過(guò)兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與miR-28-5p結(jié)合，降低的miR-28-5p導(dǎo)致與PD-1的結(jié)合減少?gòu)亩龠M(jìn)PD-1的表達(dá)[18]，進(jìn)而促進(jìn)了腫瘤的免疫逃逸。

間接作用是指circRNA并不影響PD-1的表達(dá)，而是通過(guò)減少免疫細(xì)胞浸潤(rùn)等方式形成免疫抑制微環(huán)境從而降低PD-1免疫檢查點(diǎn)療法的療效。有研究[21]發(fā)現(xiàn)circ-0020710在黑色素瘤中可以通過(guò)提供結(jié)合位點(diǎn)從而作為miR-370-3p的miRNA海綿與miR-370-3p相結(jié)合，通過(guò)分析還發(fā)現(xiàn)CXC趨化因子配體12［chemokine (C-X-C motif)ligand 12, CXCL12］是miR-370-3p的下游靶標(biāo)，故通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了circ-0020710可以通過(guò)海綿作用使miR-370-3p表達(dá)降低進(jìn)而導(dǎo)致CXCL12的表達(dá)上調(diào)。CXCL12又可以招募免疫抑制細(xì)胞使細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocyte,CTL）耗竭，最終導(dǎo)致CTL的浸潤(rùn)減少形成免疫抑制微環(huán)境，而包括CTL浸潤(rùn)減少在內(nèi)的多種免疫抑制機(jī)制往往會(huì)導(dǎo)致PD-（L）1抑制劑治療無(wú)效。因此作者團(tuán)隊(duì)通過(guò)實(shí)驗(yàn)最終證實(shí)了circ-0020710可以通過(guò)circ-0020710/miR-370-3p/CXCL12軸形成免疫抑制微環(huán)境從而降低PD-1免疫檢查點(diǎn)療法的療效，同時(shí)還通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了將circ-0020710/CXCL12軸的抑制劑與PD-1抑制劑聯(lián)用可以提高PD-1治療的療效[19]。與circ-0020710類似，2019年一項(xiàng)關(guān)于非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）的研究[20]表明circFGFR1可以通過(guò)作為miR-381-3p的miRNA海綿從而上調(diào)CXCR4的表達(dá)，而既往研究[22,23]發(fā)現(xiàn)CXCR4可以阻止CTL的浸潤(rùn)以及導(dǎo)致PD-1抑制劑耐藥，故上調(diào)的CXCR4可導(dǎo)致免疫抑制微環(huán)境最終使circFGFR1發(fā)揮免疫抑制作用，此外作者團(tuán)隊(duì)還通過(guò)回顧性分析證明了高表達(dá)circFGFR1的患者對(duì)PD-1免疫抑制劑的抗藥性更強(qiáng)。

1.3 CircRNA影響PD-L1的表達(dá) PD-L1是一種I型跨膜糖蛋白，由1個(gè)IgV區(qū)、1個(gè)IgC區(qū)、1個(gè)跨膜疏水區(qū)和一個(gè)細(xì)胞質(zhì)尾部結(jié)構(gòu)域組成[24]。PD-L1在不同類型的腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平不同，但是在大部分惡性腫瘤中高表達(dá)，同時(shí)表達(dá)水平也與患者的預(yù)后緊密聯(lián)系[25]。PD-L1在與免疫細(xì)胞的PD-1特異性識(shí)別結(jié)合后，可以抑制淋巴T細(xì)胞的活化，從而幫助腫瘤細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)的殺傷[24]，通過(guò)對(duì)PD-1或PD-L1的阻斷可以激活抗腫瘤免疫進(jìn)而殺傷腫瘤細(xì)胞[26]。

目前共有9項(xiàng)circRNA對(duì)PD-L1免疫檢查點(diǎn)療法的影響研究，除了has-circ-0000190是通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法發(fā)現(xiàn)其高血漿水平與高血漿PD-L1水平存在聯(lián)系（P=0.028,3）[27]以及circRNA CDR1-AS可能通過(guò)調(diào)節(jié)CMTM6和CMTM4所需轉(zhuǎn)錄因子的功能或表達(dá)最終影響PD-L1水平[8]外，circRNA-002178（肺腺癌）、circ-CPA4（NSCLC）、circ-0000284（NSCLC）、circCHST15（肺癌）、circKRT1（口腔鱗狀細(xì)胞癌）、circ-KRT6C（大腸癌）和hascirc-0003288（肝細(xì)胞癌）均通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了circRNA提供結(jié)合位點(diǎn)，充當(dāng)miRNA海綿影響下游靶標(biāo)表達(dá)，最終影響PD-L1表達(dá)的機(jī)制[17,28-33]。以circ-0000284為例，有研究[29]發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了circ-0000284的序列中存在可與miR-377-3p結(jié)合的結(jié)合位點(diǎn)，其可在癌細(xì)胞中充當(dāng)miRNA海綿從而負(fù)性調(diào)控下游靶標(biāo)miR-377-3p，此外在尋找miR-377-3p的下游靶標(biāo)時(shí)發(fā)現(xiàn)miR-377-3p可以與PD-L1中的3′UTR相結(jié)合進(jìn)而抑制PD-L1的表達(dá)，之后通過(guò)使用miR-377-3p抑制劑發(fā)現(xiàn)miR-377-3p抑制劑對(duì)PD-L1的表達(dá)有促進(jìn)作用，因此證實(shí)了PD-L1是miR-377-3p的下游靶標(biāo)。該研究最終通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了高表達(dá)的circ-0000284在NSCLC中可以通過(guò)circ-0000284/miR-377-3p/PD-L1軸促進(jìn)PD-L1的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸作用。

Eri Tanaka的研究團(tuán)隊(duì)針對(duì)結(jié)腸癌中circRNA CDR1-AS的研究[8]發(fā)現(xiàn)，circRNA CDR1-AS的高表達(dá)可導(dǎo)致CMTM4和CMTM6的表達(dá)水平升高，其具體機(jī)制不明，但目前已有的結(jié)果表明CMTM6和CMTM4的表達(dá)上調(diào)可能是由circRNA CDR1-AS通過(guò)調(diào)節(jié)CMTM6和CMTM4所需的轉(zhuǎn)錄因子間接實(shí)現(xiàn)，CMTM4和CMTM6是PD-L1重要的調(diào)控分子，它們可以維持細(xì)胞表面PD-L1的穩(wěn)定性[34,35]，因此circRNA CDR1-AS的高表達(dá)最終導(dǎo)致結(jié)腸癌細(xì)胞膜表面的PD-L1水平增加。

2 CircRNA與過(guò)繼性免疫治療

腫瘤過(guò)繼性免疫治療的原理主要是將自體或異體的免疫細(xì)胞在體外進(jìn)行處理，培養(yǎng)出有抗腫瘤活性的效應(yīng)細(xì)胞，并回輸至腫瘤患者體內(nèi)從而達(dá)到抗腫瘤的目的。這種療法包括淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（lymphokine-activated killer, LAK）、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（tumor infiltrating lymphocyte, TIL）、樹突狀細(xì)胞（dendritic cell, DC）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine induced killer, CIK）、自然殺傷細(xì)胞（natural killer, NK）、T細(xì)胞受體（T cell receptor,TCR-T）、嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor, CAR-T）等[36,37]，本綜述中涉及到的能夠?qū)^(guò)繼性免疫治療產(chǎn)生影響的circRNA總結(jié)于表2。

表2 環(huán)狀RNA與過(guò)繼性免疫治療Tab 2 CircRNA and adoptive cellular immunotherapy

目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的能影響過(guò)繼性免疫治療的circRNA研究共5項(xiàng)，分別為circSnx5、circARSP91（肝細(xì)胞癌）、circ-0000977（胰腺癌）、has-circ-0007456（肝細(xì)胞癌）和circUHRF1（肝細(xì)胞癌）[38-42]。通過(guò)研究[38]發(fā)現(xiàn)circSnx5可以作為微調(diào)DC功能的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，這表明其可能作為免疫相關(guān)疾病的潛在治療途徑。剩余4個(gè)circRNA均與NK細(xì)胞有關(guān)，其中對(duì)circARSP91的研究發(fā)現(xiàn)其能夠加強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的殺傷以及癌細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞毒性的敏感性，NK細(xì)胞殺傷力的增強(qiáng)與circARSP91促進(jìn)UL16結(jié)合蛋白1（UL16 binding protein 1, ULBP1）的表達(dá)并幫助NK細(xì)胞識(shí)別腫瘤細(xì)胞有關(guān)，但目前circARSP91調(diào)控ULBP1表達(dá)機(jī)制的解釋仍不全面[39]；Circ-0000977、has-circ-0007456和circUHRF1則均通過(guò)作為miRNA海綿的功能來(lái)影響NK細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤免疫作用[40-42]。

一項(xiàng)關(guān)于circ-0000977的研究[40]發(fā)現(xiàn)缺氧可以誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞中circ-0000977的表達(dá)顯著增加，circ-0000977可以通過(guò)提供結(jié)合位點(diǎn)充當(dāng)miR-153的海綿。MiR-153則可以與下游靶標(biāo)缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor 1-alpha, HIF1α）和解整合素金屬蛋白酶10（a disintegrin and metalloproteinase domain 10, ADAM10）結(jié)合從而對(duì)HIF1A、ADAM10的表達(dá)有抑制作用，當(dāng)circ-0000977過(guò)表達(dá)時(shí)將解除miR-153對(duì)HIF1A和ADAM10表達(dá)的抑制作用。ADAM10可以增強(qiáng)膜表面MHC I類相關(guān)分子A（membrane MHC class I-related molecule A, mMICA）從癌細(xì)胞表面脫落轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄訫ICA（soluble MICA, sMICA），sMICA又可以和NK細(xì)胞的表面活化性受體D（natural killer group 2 member D, NKG2D）結(jié)合，從而導(dǎo)致NK細(xì)胞反應(yīng)低下。因此癌細(xì)胞表面mMICA的降低和NK細(xì)胞上的NKG2D降低可以促進(jìn)腫瘤的免疫逃逸[43]，過(guò)表達(dá)的circ-0000977最終使胰腺癌細(xì)胞更好地逃避NK細(xì)胞的殺傷[40]。

與circ-0000977類似，has-circ-0007456與circUHRF1分別通過(guò)miR-6852-3p/細(xì)胞間黏附因子-1（intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1）和miR-449c-5p/T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白-3（T cell immunoglobulin and mucin domain3, TIM-3）途徑調(diào)控NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫。Hascirc-000745可使miR-6852-3p的表達(dá)下調(diào)進(jìn)而使下游靶標(biāo)ICAM-1的表達(dá)上調(diào)，既往已有研究[41]發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1可以與NK細(xì)胞上的淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1（lymphocyte function associated antigen-1, LFA-1）結(jié)合從而調(diào)節(jié)NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間的黏附，因此過(guò)表達(dá)的hascirc-0007456將會(huì)使NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間的黏附增加從而增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤作用，而circUHRF1則通過(guò)充當(dāng)miR-449c-5p的miRNA海綿使miR-449c-5p的表達(dá)下調(diào)，則TIM-3作為miR-449c-5p的下游靶標(biāo)表達(dá)將會(huì)上調(diào)，而TIM-3在既往研究中被發(fā)現(xiàn)是NK細(xì)胞的主要抑制性受體之一，TIM-3的高表達(dá)將會(huì)使NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫能力降低，因此高表達(dá)的circUHRF1將會(huì)降低NK細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤免疫能力[42]。

3 CircRNA與腫瘤疫苗

腫瘤疫苗是通過(guò)將含有腫瘤特異性抗原（tumor specific antigen, TSA）或腫瘤相關(guān)抗原（tumor-associated antigen, TAA）的腫瘤細(xì)胞、外泌體（exosomes, EXO）、多肽及核酸序列等轉(zhuǎn)入患者體內(nèi)以誘發(fā)機(jī)體自身免疫應(yīng)答的方法，從而抑制腫瘤生長(zhǎng)甚至清除腫瘤達(dá)到治療腫瘤的目的。腫瘤疫苗分為預(yù)防性腫瘤疫苗和治療性腫瘤疫苗，但是腫瘤疫苗的免疫原性比較低，所以常常需要配合合適的免疫佐劑聯(lián)合應(yīng)用，來(lái)增加誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的成功率，目前有一項(xiàng)研究[44]發(fā)現(xiàn)circFOREIGN具有激活先天免疫的潛力，它可以有效刺激免疫基因的表達(dá)，因此circFOREIGN可以在體內(nèi)充當(dāng)疫苗佐劑誘導(dǎo)抗腫瘤免疫。

4 CircRNA與溶瘤病毒

溶瘤病毒是一類可以自我復(fù)制的腫瘤殺傷型病毒，其在腫瘤細(xì)胞內(nèi)選擇性自我復(fù)制并殺滅腫瘤細(xì)胞，被感染的腫瘤細(xì)胞裂解后除了可以釋放子代病毒繼續(xù)感染周圍的腫瘤細(xì)胞外，還可以釋放腫瘤源性抗原以進(jìn)一步激活免疫反應(yīng)，從而達(dá)到利用抗腫瘤免疫抑制腫瘤進(jìn)展的目的[45]。有研究[46]提示溶瘤痘苗病毒介導(dǎo)的抗腫瘤作用可以通過(guò)circRNA-103598/miR-23a-3p/白細(xì)胞介素-6（interleukin-6）軸來(lái)進(jìn)行調(diào)控，circRNA-103598高表達(dá)的甲狀腺乳頭狀癌感染溶瘤痘苗病毒后所表現(xiàn)出的抗腫瘤作用比circRNA-103598低表達(dá)的甲狀腺乳頭狀癌更好。

5 總結(jié)和展望

CircRNA是近些年來(lái)研究的熱點(diǎn)，其在腫瘤方面的研究方向主要集中在作為腫瘤標(biāo)志物、影響腫瘤進(jìn)展轉(zhuǎn)移及預(yù)后上，在與腫瘤免疫治療相關(guān)方向上的研究仍比較少。CircRNA具有異常穩(wěn)定、高度保守且具有組織表達(dá)特異性的特性，且circRNA往往在腫瘤等疾病中異常表達(dá)，因此其在腫瘤標(biāo)志物領(lǐng)域中的前景十分廣闊，例如hascirc-0000190在一項(xiàng)關(guān)于胃癌的研究[47]中被認(rèn)為是比癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）和糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9, CA19-9）更加優(yōu)異的新型胃癌診斷標(biāo)志物。液體活檢是一種全新的、十分具有前景的非侵入型的檢測(cè)方法，這種方法可以用于分析循環(huán)腫瘤DNA（circulating tumor DNA, ctDNA）、循環(huán)腫瘤細(xì)胞等。CtDNA是一種由于腫瘤細(xì)胞的死亡裂解而被釋放到血液循環(huán)中的DNA小片段，它可以在很多種癌癥患者血液中被檢測(cè)到并且具有一定的特異性與靈敏性，因此可以通過(guò)液體活檢檢測(cè)患者血液中的ctDNA以便診斷腫瘤或監(jiān)測(cè)其進(jìn)展[48]。與ctDNA類似，很多腫瘤表達(dá)的circRNA可以通過(guò)外泌體被分泌至血液中，并且相比較于分泌circRNA的腫瘤細(xì)胞，外泌體中的circRNA更加穩(wěn)定且富集，這使得circRNA可以與ctDNA一樣，在血液中可以充當(dāng)腫瘤標(biāo)志物被液體活檢檢測(cè)到，從而用于檢測(cè)腫瘤和預(yù)測(cè)免疫治療療效[49]。

除了可以作為腫瘤標(biāo)志物外，circRNA在腫瘤免疫治療相關(guān)方向中也已經(jīng)展現(xiàn)出了應(yīng)用前景。免疫治療是近些年來(lái)具有非常廣闊前景的治療角度和研究方向，雖然目前在免疫檢查點(diǎn)抑制劑療法上已經(jīng)取得了突破性的進(jìn)展，但是除此以外的其他免疫療法仍然處于前期研究狀態(tài)，暫時(shí)無(wú)法在臨床上大規(guī)模應(yīng)用。單就免疫檢查點(diǎn)抑制劑療法而言，該療法也僅僅是對(duì)一部分患者效果明顯，因此還需要進(jìn)一步的研究以尋找共同特征以用于指導(dǎo)患者的治療方案選擇與用藥。在免疫檢查點(diǎn)療法中，circRNA不僅可以作為標(biāo)志物用于預(yù)測(cè)使用免疫檢查點(diǎn)抑制劑的患者的療效[27]、指導(dǎo)患者用藥，還可以通過(guò)使用對(duì)應(yīng)的circRNA抑制劑調(diào)控其表達(dá)從而獲得更好的療效[19]。針對(duì)除了免疫檢查點(diǎn)療法的其他免疫治療方法而言，通過(guò)調(diào)控circRNA有希望提高人體免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的免疫作用。通過(guò)基礎(chǔ)與臨床研究的進(jìn)一步結(jié)合，circRNA有望在以肺癌為首的多種腫瘤的免疫治療中開(kāi)辟新的道路，為患者提供新選擇，使患者獲得更好的生活質(zhì)量和更長(zhǎng)的生存時(shí)間；同時(shí)也可以推動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)療的進(jìn)展，為免疫治療提供新的方向。