復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)仔豬斷奶應(yīng)激的臨床效果試驗(yàn)

李瑞娟，梁 娜，馮 芳，梁思嘉，姜國(guó)均，高紅梅

（1.河北新華科極獸藥集團(tuán)有限公司 051430；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 071000；3.石家莊市畜產(chǎn)品和獸藥飼料質(zhì)量檢測(cè)中心 050000）

仔豬早期斷奶后易產(chǎn)生腹瀉、生長(zhǎng)緩慢、免疫力下降等多器官、系統(tǒng)的應(yīng)激連鎖反應(yīng)，臨床上多以斷奶仔豬基礎(chǔ)日糧中單一或者聯(lián)合添加一定劑量的抗生素能預(yù)防或緩解病原菌引起的應(yīng)激反應(yīng)。然而，長(zhǎng)期、大量的不合理添加導(dǎo)致藥殘、細(xì)菌耐藥性日益增強(qiáng)，使得抗生素對(duì)各種細(xì)菌性疾病的治療效果下降，甚至給人類(lèi)健康帶來(lái)威脅。

因此，越來(lái)越多抗生素性質(zhì)的藥物性飼料添加劑被禁用，例如，2016年7月農(nóng)業(yè)部公告第2428號(hào)發(fā)布禁令，停止硫酸黏菌素用于動(dòng)物促生長(zhǎng)。天然植物飼料因具有安全、無(wú)毒副作用、無(wú)殘留且能提高飼料利用效率等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛使用。本試驗(yàn)從天然植物飼料原料中篩選的中藥組方，研究其對(duì)仔豬斷奶后引起應(yīng)激反應(yīng)的效果，例如生長(zhǎng)性能下降、腹瀉、免疫功能等，為斷奶仔豬新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)與市場(chǎng)推廣提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)選用河北某種豬場(chǎng)150頭“杜×長(zhǎng)×大”三元斷奶仔豬，斷奶日齡為出生30天，體況良好，體重范圍8±0.5kg。

1.1.2 試驗(yàn)藥品、試劑、儀器設(shè)備

復(fù)方中草藥添加劑由河北新華科極獸藥集團(tuán)提供，配方組成：黃芪、白術(shù)、茯苓、甘草等，仔豬日糧由河北方田飼料有限公司提供。酶標(biāo)儀（RT2100C）美國(guó)雷杜公司；電子天平等。豬瘟疫苗購(gòu)自廣東永順生物制藥有限公司（批號(hào)20180716）；豬瘟抗體ELIS檢測(cè)試劑盒購(gòu)自天津索羅門(mén)生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)分組及處理

試驗(yàn)分組及處理詳見(jiàn)表1。將試驗(yàn)仔豬隨機(jī)分為5組，每組30頭。試驗(yàn)A組為基礎(chǔ)日糧對(duì)照組，B組、C組、D組分別拌料添加3g/kg、4g/kg、5g/kg復(fù)方中草藥添加劑1周，試驗(yàn)E組拌料添加30mg/kg的硫酸粘菌素，連續(xù)添加7d，試驗(yàn)期至60日齡結(jié)束。常規(guī)免疫，在34日齡，60日齡按試驗(yàn)計(jì)劃進(jìn)行樣本采集和處理，稱(chēng)量各豬只體重，計(jì)算料重比。

表1 試驗(yàn)動(dòng)物分組及處理

1.2.2 試驗(yàn)日糧營(yíng)養(yǎng)及管理

參加試驗(yàn)仔公豬于23日齡去勢(shì)，30日齡時(shí)斷奶后，仔豬從產(chǎn)房轉(zhuǎn)入保育舍，進(jìn)入試驗(yàn)周期至60日齡結(jié)束，盡量安排同窩仔豬在同一欄內(nèi)，防止互咬，欺生現(xiàn)象，其余標(biāo)準(zhǔn)均相同。保育舍為高床全漏糞網(wǎng)床模式，舍內(nèi)每天清掃兩次，保持豬舍衛(wèi)生、空氣、環(huán)境溫、濕度適宜。試驗(yàn)用仔豬基礎(chǔ)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平均按NRC（1998）標(biāo)準(zhǔn)配置，見(jiàn)表2。

表2 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧配方

1.2.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.2.3.1 豬瘟抗體效價(jià)檢測(cè)

按試驗(yàn)計(jì)劃分別于34日齡、48日齡和60日齡靜脈采血2mL，析出血清，用ELISA試劑盒檢測(cè)其血清抗體水平，其操作方法和判定標(biāo)準(zhǔn)，均按說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.3.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定

34日齡、60日齡時(shí)稱(chēng)重，分別計(jì)算出初始平均體重、期末平均體重、平均增重；稱(chēng)量并記錄每欄、每日飼料消耗量，計(jì)算料重比；觀察并記錄仔豬食欲、精神狀態(tài)、糞便狀態(tài)、發(fā)病、死亡情況。

料重比計(jì)算方法：試驗(yàn)期內(nèi)所消耗標(biāo)準(zhǔn)飼料量（kg）/同期增重（kg）

1.2.3.3 仔豬腹瀉率的測(cè)定

試驗(yàn)期間每天早上8:30觀察并記錄仔豬糞便情況。

腹瀉率計(jì)算方法：{(每欄仔豬腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù))/(每欄仔豬總頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))}×100%。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析與處理

采用SPSS22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，采用單因素方差分析法對(duì)試驗(yàn)斷奶仔豬的增重進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以Mean±SD表示，根據(jù)發(fā)病記錄的頭次數(shù)，分別統(tǒng)計(jì)計(jì)算腹瀉率。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)斷奶仔豬豬瘟疫苗免疫應(yīng)答的影響

首先，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值做標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如圖1所示，R2為0.9833，表明線性關(guān)系良好，并由此標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各樣品的豬瘟抗體的含量。

圖1 豬瘟抗體標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

結(jié)果詳見(jiàn)表3，34日齡時(shí)，各試驗(yàn)組之間豬瘟抗體水平相近，差異不顯著（P>0.05）。48、60日齡時(shí)，C組（4g/kg）和D組（5g/kg）豬瘟抗體水平均極顯著高于A組（空白對(duì)照）、B組（3g/kg）和E組（硫酸粘菌素）（p<0.01）。C組（4g/kg）和D組（5g/kg）組間抗體水平相近，差異不顯著（p>0.05）。表明，C組（4g/kg）、D組（5g/kg）本復(fù)方中草藥添加劑能極顯著升高仔豬豬瘟疫苗的抗體水平，增強(qiáng)免疫效果，且隨劑量增加抗體水平隨之增加。

表3 復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)斷奶仔豬豬瘟抗體效價(jià)的影響 （單位：pg/ml）

注：此表同列內(nèi)不同小寫(xiě)字母之間表示差異顯著(P<0.05)；不同大寫(xiě)字母之間表示差異極顯著(P<0.01)。

2.2 復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率指標(biāo)的影響

結(jié)果詳見(jiàn)表4。34日齡時(shí)，各試驗(yàn)組之間仔豬平均體重差異不顯著（P>0.05）。到60日齡時(shí)，平均體重和試驗(yàn)期平均增重指標(biāo)，C組（4g/kg）、E組（硫酸粘菌素）均高于A組（空白對(duì)照）、B（3g/kg）組，差異顯著（p<0.05），B組與A組相比，無(wú)顯著差異（P>0.05）；料重比指標(biāo)，C組（4g/kg）、D組（5g/kg）和E組（硫酸粘菌素）的料重比顯著低于A組（空白對(duì)照）（p<0.05），C組（4g/kg）與E組（硫酸粘菌素）無(wú)顯著差異（P>0.05）；腹瀉率指標(biāo)，B、C、D、E組顯著低于A組（P<0.05），其中C組（4g/kg）與E組（硫酸粘菌素）極顯著降低腹瀉率（p<0.01），兩組效果相當(dāng)。試驗(yàn)表明，添加4g/kg中草藥添加劑可降低料重比15.85%，腹瀉率降低31.35%。

表4 復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率指標(biāo)的影響

3 討論與結(jié)論

對(duì)比各組試驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，以拌料方式給予本組方4g/kg，連續(xù)7天，料重比與腹瀉率均顯著下降，且與藥物性飼料添加劑硫酸粘菌素組差異不顯著；與空白對(duì)照組相比，料重比降低15.85%，腹瀉率降低31.25%。在提升免疫效果方面，4g/kg，5g/kg劑量本組方均能提升斷奶仔豬豬瘟疫苗的抗體效價(jià)水平，增強(qiáng)免疫效果，且呈現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。

本研究結(jié)果表明了由本公司研發(fā)的黃芪、白術(shù)、茯苓、甘草等組成的復(fù)方中草藥添加劑的促生長(zhǎng)效果與已禁用的藥物飼料添加劑硫酸黏菌素相當(dāng)，可以替代藥物飼料添加劑硫酸黏菌素，作為新型飼料添加劑用于仔豬斷奶應(yīng)激促生長(zhǎng)的臨床應(yīng)用，通過(guò)提高斷奶仔豬疫苗免疫后的抗體水平而增強(qiáng)其免疫功能，另外，對(duì)仔豬斷奶后的腹瀉也有較好保健作用。