何啟云 閆 康 貝為成

1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢430070；2.廣西揚(yáng)翔農(nóng)牧有限責(zé)任公司，廣西貴港537100；3.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，武漢430070；4.生豬健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心，武漢430070

豬傳染性胸膜肺炎（Porcine infectious pleuropneumonia，PCP）是由胸膜肺炎放線桿菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）引起的一種高度傳染性以及致死性的豬呼吸道疾病。該病在世界各地廣泛分布，病豬臨床表現(xiàn)以呼吸道癥狀為主，分為急性型、亞急性型和慢性型3 種。對(duì)于急性和亞急性病例，其特征是纖維素性出血性胸膜肺炎，而慢性病例的特征是纖維素性壞死性胸膜肺炎[1]。接觸該生物體可能導(dǎo)致慢性感染，以致動(dòng)物無法生長(zhǎng)；即使豬可以存活，它們?nèi)詴?huì)成為無癥狀的攜帶者，將疾病傳播給健康的豬群[2]。目前，APP 有幾種毒力因子，包括脂多糖（LPS）、外毒素（Apx）、膠囊多糖、蛋白酶、IV 型菌毛、Flp 菌毛、粘附素的自轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和生物膜形成[1,3]。此外，APP 有眾多種血清型，各血清型之間交叉免疫保護(hù)力較弱，導(dǎo)致該病的防控有著較大的困難，該病在我國(guó)的流行趨勢(shì)日漸上升，現(xiàn)已成為我國(guó)豬群主要的細(xì)菌性呼吸道傳染病之一，給我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，做好豬傳染性胸膜肺炎的防控迫在眉睫。自APP 被發(fā)現(xiàn)以來，世界各地的專家學(xué)者對(duì)該病原菌的研究持續(xù)不斷，特別是在研究其致病機(jī)制方面做了很多工作，這也對(duì)防控該病的傳播起到了至關(guān)重要的作用。本文就近年來豬傳染性胸膜肺炎的防控進(jìn)展進(jìn)行綜述，為提高豬傳染性胸膜肺炎的防控效果、減少經(jīng)濟(jì)損失提供理論參考。

1 豬傳染性胸膜肺炎概述

1.1 病原學(xué)

APP 屬于巴氏桿菌科、放線桿菌屬，在草蘭氏染色鏡檢時(shí)常為球狀或短桿狀，從新鮮病料分離的細(xì)菌還可見兩極著色現(xiàn)象。該菌在電鏡下可觀察到有菌毛及鞭毛，菌體表面還有莢膜，但無芽孢[4]。APP在鮮血瓊脂平板中37 ℃培養(yǎng)24 h，其菌落呈圓形、灰白色、針尖大小表面稍凸，邊緣整齊，呈β 溶血。APP 抵抗力弱，在干燥條件下容易死亡，一般在4 ℃條件下能存活7～10 d，對(duì)外界環(huán)境條件敏感。根據(jù)APP 的生長(zhǎng)是否需要煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD），APP 菌株可被分為兩類，即生物I 型（NAD 依賴型）和生物II 型（非NAD 依賴型）[5]。在生化特性方面，APP 能發(fā)酵果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，一些菌株還可發(fā)酵甘露糖、木糖、乳糖和阿拉伯糖等，不能發(fā)酵山梨醇、七葉苷和鼠李糖等，尿素酶試驗(yàn)陽性，VP、MR 以及靛基質(zhì)試驗(yàn)為陰性[6-7]。

APP 的血清型根據(jù)其莢膜多糖（CPS）和脂多糖（LPS）的差異劃分，最新的研究發(fā)現(xiàn)APP 的血清型已達(dá)18 種，包括血清型1～18 型，其中16、17 及18型為近年來新發(fā)現(xiàn)的血清型[8-12]。2015年，Sárk zi 等[11]最早報(bào)道在匈牙利的疑似發(fā)病豬病料中發(fā)現(xiàn)血清16 型。后來，Bossé 等[13]通過全基因組測(cè)序及建立的PCR 診斷方法對(duì)莢膜位點(diǎn)進(jìn)行分析，證實(shí)了該菌株跟先前報(bào)道的15 種血清型的新血清型有所區(qū)別。血清型17、18 型也是Bossé 等研究者通過對(duì)丹麥、美國(guó)、西班牙、意大利及德國(guó)等國(guó)家分離到的“非典型”菌株進(jìn)行全基因組測(cè)序，結(jié)果顯示這些菌株可分為2 種新的CPS 類型，即I 型cps 基因（血清17型）和II 型cps 基因（血清18 型）。近年來，陸續(xù)開發(fā)出新的多重PCR 分型方法將血清17、18 型與之前報(bào)道的血清型進(jìn)行區(qū)分。

1.2 流行病學(xué)

1957年，APP 在英國(guó)首次被分離出來[14]。自此以后，該病相繼在中國(guó)、美國(guó)、歐洲、加拿大以及墨西哥等許多國(guó)家和地區(qū)暴發(fā)和流行。在我國(guó)，由趙萍等[15]在1990年首次發(fā)現(xiàn)并報(bào)道該病，不同地區(qū)流行的血清型有所差異，主要以1、3 和7 型為主。PCP最主要的傳染源是發(fā)病豬和帶菌豬，并且康復(fù)豬也能夠作為病原長(zhǎng)期攜帶者[16]。該病的主要傳播途徑是通過豬與豬之間直接接觸、排泄物接觸以及短距離空氣傳播等，其中豬與豬之間的直接接觸是PCP的主要傳播方式[17-18]。APP 對(duì)各年齡段的豬只都易感，易感性最高的是3月齡豬；每個(gè)季節(jié)都能暴發(fā)，但在氣溫較低的冬季和春季暴發(fā)較多[19]。APP 常跟豬流感病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒和豬肺炎支原體等病原發(fā)生混合感染或繼發(fā)感染[20-22]。此外，也有相關(guān)文獻(xiàn)[22-25]報(bào)道APP 跟副豬嗜血桿菌、多殺性巴氏桿菌和豬鏈球菌等細(xì)菌發(fā)生混合感染。豬群中廣泛存在這些混合感染，這一現(xiàn)象也導(dǎo)致了病情的加速傳播，給我國(guó)和全世界所有養(yǎng)豬國(guó)家的規(guī)模化養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失并加大了疾病的防控難度。

2 豬傳染性胸膜肺炎防治措施

目前，對(duì)豬傳染性胸膜肺炎的防控主要通過提高飼養(yǎng)管理水平、藥物防治以及免疫接種等。良好的飼養(yǎng)管理和接種疫苗能夠明顯降低發(fā)病率；另外，面對(duì)臨床疾病，使用抗生素治療能夠控制嚴(yán)重性和擴(kuò)散。

2.1 飼養(yǎng)管理

為預(yù)防豬傳染性胸膜肺炎，養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)提高養(yǎng)殖管理的科學(xué)化水平。首先，保證豬舍及其飼養(yǎng)環(huán)境的清潔衛(wèi)生，做到及時(shí)清理糞便及其雜物，保證豬舍的通風(fēng)換氣良好。其次，高度重視消毒工作，制定嚴(yán)格的消毒衛(wèi)生制度。開展消毒工作能有效控制疾病的發(fā)生，提高整體防控效果，平時(shí)要定期或不定期對(duì)豬場(chǎng)和飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，一般常規(guī)消毒，每周1 次，不留死角、全方位消毒[26]。值得注意的是，豬舍及飼養(yǎng)環(huán)境要選擇性地使用消毒藥，同時(shí)也應(yīng)該進(jìn)行交叉性使用消毒藥物，以防病菌產(chǎn)生耐藥性。另外，車輛和人員進(jìn)入豬場(chǎng)前嚴(yán)格消毒，并做好相關(guān)登記[27]。最后，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出制度，定期對(duì)豬群進(jìn)行監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)陽性豬立即淘汰；引種時(shí)，嚴(yán)格進(jìn)行隔離檢疫，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，及時(shí)淘汰陽性豬，若1 個(gè)月無可視癥狀方可轉(zhuǎn)群，防止外來病菌混入豬群[28]。

2.2 藥物防治

藥物是防控的基礎(chǔ)，研究[29-30]表明，頭孢噻呋、替米考星、氟苯尼考、四環(huán)素類、沙星類藥物對(duì)APP有很好的敏感性，可用于豬傳染性胸膜肺炎的預(yù)防與治療。彭娟等[31]通過藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，分離到的強(qiáng)毒力型APP 對(duì)喹諾酮類的諾氟沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星等均較敏感，但對(duì)氨基糖苷類的大觀霉素和慶大霉素耐藥，這與其他文獻(xiàn)中報(bào)道的一致。值得注意的是，對(duì)頭孢類藥物沒有顯示耐藥性，而對(duì)大環(huán)內(nèi)酯和多肽類的抗生素顯示一定程度的耐藥，這可能與豬場(chǎng)用藥的差異有關(guān)[32]。此外，有研究[33]發(fā)現(xiàn)，病豬群的飼料和水的攝入量大大減少。因此，建議通過腸胃外注射治療受影響的豬。除了給藥途徑之外，還必須考慮適當(dāng)?shù)亟o藥和給藥間隔以及所選抗生素的生物利用度和作用機(jī)理。通常，抗生素治療的成功取決于首次接觸細(xì)菌時(shí)是否具有足夠的組織濃度來殺死細(xì)菌，這可以通過適當(dāng)?shù)慕o藥方案來實(shí)現(xiàn)[34]。在最近的一項(xiàng)研究中，用0.66 mg/kg 馬波沙星治療被App 感染的12 周齡豬可在48 h 內(nèi)達(dá)到90%的殺菌效果[35]。

一般而言，使用抗生素會(huì)增加出現(xiàn)耐藥性APP菌株的風(fēng)險(xiǎn)，抗生素的不規(guī)范使用將會(huì)導(dǎo)致APP 產(chǎn)生較強(qiáng)的耐藥性，這對(duì)防控十分不利[36]。頭孢類、四環(huán)素類、磺胺類以及氟苯尼考等抗生素對(duì)胸膜肺炎放線桿菌有較強(qiáng)的抑菌作用。當(dāng)豬場(chǎng)發(fā)病較重時(shí)，盡可能避免選擇使用本豬場(chǎng)常用的抗菌藥，防止形成耐藥性[19]。因此，對(duì)于治療抗菌劑的選擇必須仔細(xì)考慮，特別是對(duì)于被認(rèn)為至關(guān)重要的抗菌劑，如氟喹諾酮類。針對(duì)豬傳染性胸膜肺炎的抗生素使用需要更加可持續(xù)的控制措施。

2.3 免疫接種

免疫接種是防控APP 感染的有效手段，相比于藥物治療，免疫接種避免了使用大量藥物后帶來的耐藥性的產(chǎn)生以及藥物殘留等問題。目前臨床上常用的疫苗主要有三大類，分別是滅活疫苗、基因工程苗及亞單位疫苗，此外口服疫苗、弱毒疫苗、Ghosts 疫苗等也有相關(guān)學(xué)者在進(jìn)行研究。其中，滅活疫苗是市場(chǎng)上使用最多的疫苗，其優(yōu)點(diǎn)是安全、無散毒風(fēng)險(xiǎn)、不返祖返強(qiáng)以及便于運(yùn)輸和儲(chǔ)存，但是滅活疫苗不能清除病原，需多次免疫、副作用大而且交叉保護(hù)力差。我國(guó)常見的商品化滅活疫苗為APP 1、3 及7 型強(qiáng)毒株作為制苗菌株，制成的油佐劑三價(jià)滅活苗，如武漢科前與成都中牧的三價(jià)滅活苗[37]。亞單位疫苗是當(dāng)前疫苗研發(fā)的熱點(diǎn)趨勢(shì)，它能有效控制中大豬發(fā)病，有效減少死亡率和肺臟病變，目前上市苗只有進(jìn)口苗，成本高，我國(guó)主要使用的是默沙東公司的愛普克疫苗，其推薦的免疫程序?yàn)? 周齡起首免，間隔4 周后二免，免疫時(shí)需注意疫苗恢復(fù)到24～28 ℃，并建議免疫前豬群禁食6 h以上，如果場(chǎng)內(nèi)感染壓力高可在免疫之前投予治療劑量的抗生素或添加維生素，使豬群健康度更穩(wěn)定，也可適當(dāng)延后免疫日齡[38]。目前，市面上的很多疫苗仍存在價(jià)格昂貴或交叉保護(hù)力差等缺點(diǎn)。因此，為了應(yīng)對(duì)APP 臨床流行情況的不斷改變、有效防控APP 感染，不僅要做好生物安全防控，還應(yīng)該加快研發(fā)更加安全、高效、持久穩(wěn)定、對(duì)眾多血清型都有效且價(jià)格低廉的新型豬傳染性胸膜肺炎疫苗的步伐。

3 結(jié) 語

豬傳染性胸膜肺炎在我國(guó)的流行日益嚴(yán)重，已經(jīng)給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的威脅，做好傳染性胸膜肺炎的防控至關(guān)重要。總的來說，一要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和做好消毒工作，二要堅(jiān)持藥物治療為輔，三要做好免疫接種，貫徹以預(yù)防為主、治療為輔、防治結(jié)合的原則。值得注意的是，針對(duì)豬胸膜肺炎的商業(yè)疫苗尚未完全成功地預(yù)防疾病。因此，在提高生物安全管理的同時(shí)，當(dāng)前迫切需要了解APP 目前的臨床流行情況，并研制出成本低、副作用小、免疫保護(hù)性強(qiáng)、交叉保護(hù)力強(qiáng)的新型疫苗，以此有效地防控豬傳染性胸膜肺炎的傳播，提高防控效果，減少對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的威脅。