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      脈沖光技術(shù)對(duì)肉制品保鮮的研究進(jìn)展

      2021-12-02 21:12:47王志琦徐寶才王兆明
      包裝與食品機(jī)械 2021年5期
      關(guān)鍵詞:李斯特肉制品殺菌

      王志琦,趙 鐘,周 輝,徐寶才,王兆明

      (1.合肥工業(yè)大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院,合肥 230601;2.安徽省尚康食品有限公司,安徽六安 237143)

      0 引言

      肉制品營(yíng)養(yǎng)豐富,在生產(chǎn)、加工、運(yùn)輸和儲(chǔ)藏過(guò)程中極易被微生物污染,導(dǎo)致腐敗變質(zhì),從而喪失食用價(jià)值。熱殺菌技術(shù)在有效殺滅食品中腐敗微生物和病原菌的同時(shí),也對(duì)食品熱敏性營(yíng)養(yǎng)成分和感官品質(zhì)造成很大的影響。脈沖光(Pulsed light,PL)殺菌是一種新型非熱加工技術(shù),具有快速、高效、處理溫度低、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)。1999年,PL已獲得美國(guó)藥品食品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)在食品加工、生產(chǎn)處理等方面的應(yīng)用[1]。PL技術(shù)具有高能量(35 MW)、瞬時(shí)殺菌(10-2~10-3ms)和廣光譜(200~1 100 nm)的特點(diǎn)[2],與紫外系統(tǒng)相比,PL具有較大的輸入能量,可以在非常短的時(shí)間內(nèi)在食品表面產(chǎn)生大量的能量,但根據(jù)FDA法規(guī),PL處理食品的能量密度不能超過(guò)12 J/cm2[3]。PL能夠有效殺滅食品在加工和儲(chǔ)存過(guò)程中所污染的有害微生物,從而達(dá)到食品延長(zhǎng)儲(chǔ)存和保鮮的目的[4]。本文綜述了PL技術(shù)已探明的殺菌機(jī)理,以及PL對(duì)肉制品表面微生物的滅菌效果和理化性質(zhì)及感官品質(zhì)等的影響,為PL技術(shù)在肉制品的保鮮研究提供理論參考。

      1 脈沖光作用機(jī)理研究

      脈沖光是一種廣譜光,其中的近紅外光能輻射能量,可使細(xì)胞表面局部升溫至50~150 ℃,破壞細(xì)菌細(xì)胞壁,使細(xì)胞液蒸發(fā),破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),導(dǎo)致細(xì)菌死亡[5]。有研究結(jié)果表明脈沖形式提供能量主要表現(xiàn)在脈沖次數(shù)和脈沖持續(xù)時(shí)間,在達(dá)到相等總能量的情況下,脈沖提供的功率較連續(xù)光輻照功率更大,每次脈沖的持續(xù)時(shí)間更短,峰值功率更大,具有更高的滲透能力[6]。

      脈沖紫外光(PL-UV)的光化學(xué)效應(yīng)和光熱效應(yīng)在殺菌機(jī)理中起著關(guān)鍵作用[7]。微生物細(xì)胞中的核酸吸收大量紫外光,在PL-UV輻射條件下形成丙二嗪和甲基二嗪的同分異構(gòu)體。微生物代謝功能障礙遺傳和死亡。在光熱效應(yīng)快速、高能、強(qiáng)脈沖光輻射的條件下,細(xì)胞內(nèi)的水可以瞬間蒸發(fā),導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂,微生物在幾秒鐘內(nèi)死亡,且PL照射通過(guò)改變細(xì)菌DNA結(jié)構(gòu)防止細(xì)菌細(xì)胞復(fù)制和分裂[8]。

      2 脈沖光對(duì)肉制品的殺菌作用研究

      2.1 影響脈沖光殺菌的因素

      脈沖總能量是PL殺菌效果最重要的決定因素。脈沖閃光燈發(fā)出的能量與到達(dá)樣品表面的能量不同,受到脈沖次數(shù)、單次脈沖能量、脈沖頻率、閃照距離、傳播介質(zhì)的影響[9]。由于PL的光線穿透力有限,樣品厚度以及處理對(duì)象成分都會(huì)影響PL的殺菌效果。

      PL試驗(yàn)的結(jié)果會(huì)受到微生物的菌株年齡的影響[10]。FARRELL 等[11]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)14 h的白色念珠菌對(duì)PL的敏感性高于培養(yǎng)24 h的白色念珠菌,相同的趨勢(shì)也發(fā)生在生長(zhǎng)16 h和 24 h的大腸桿菌(E.coli O157:H7)培養(yǎng)物。CUDEMOS等[12]同樣發(fā)現(xiàn)熒光蠟狀芽孢桿菌和釀酒酵母在靜止?fàn)顟B(tài)時(shí)比在潛伏期或指數(shù)生長(zhǎng)期對(duì)PL的抗性更強(qiáng)。微生物的吸光性也是影響PL殺菌效果的一項(xiàng)重要因素。主要因?yàn)镻L處理過(guò)程中,一些液體中的光吸收溶質(zhì)(如蛋白質(zhì)等)作用,導(dǎo)致撞擊細(xì)胞的光子數(shù)量顯著減少,從而降低了 PL 殺傷微生物的效果[13]。ARTíGUEZ 等[14]研究了 β-乳球蛋白和 β-酪蛋白對(duì)PL滅活無(wú)害李斯特菌的影響。在低蛋白濃度下( β-乳球蛋白和 β-酪蛋白最高10 mg/mL),施加的最低通量PL(0.2 J/cm2)可導(dǎo)致細(xì)胞計(jì)數(shù)減少超過(guò)7 log。但是,當(dāng)該菌懸浮在較高蛋白質(zhì)濃度的溶液中時(shí),需要更高的PL通量才能致使無(wú)害李斯特菌產(chǎn)生類似的減少。

      2.2 脈沖光對(duì)肉制品的殺菌效果

      GANAN等[15]在2種即食干腌肉制品(salchichon and loin)的表面,測(cè)試了PL對(duì)降低李斯特菌和鼠傷寒沙門氏菌的效果。當(dāng)施加11.9 J/cm2的照射通量時(shí),2種微生物的最大對(duì)數(shù)減少量在1.5到1.8 lg(cfu/cm2)之間,且在貯藏30 d(室溫)內(nèi)未出現(xiàn)色澤和感官上的變化。LIU等[16]采用PL-UV照射方法,對(duì)肉制品進(jìn)行如下脈沖光參數(shù)的處理:脈沖能量為8 J,進(jìn)行300次PL照射,有效照射距離為10 cm;紫外線照射功率6 W,有效照射距離為11 cm,照射時(shí)間為5 min。PL-UV照射后,干腌肉中細(xì)菌總數(shù)由6.89下降到4.53 lg(CFU/g),微球菌和葡萄球菌數(shù)量從6.49下降到4.10 lg(CFU/g),霉菌和酵母菌數(shù)量從5.45下降到4.28 lg(CFU/g),乳酸菌由3.97增加到4.55 lg(CFU/g),并且未檢出大腸桿菌。RAJKOVIC等[17]發(fā)現(xiàn)PL對(duì)肉制品中李斯特菌和大腸桿菌有殺滅作用,但隨著脈沖間隔時(shí)間的延長(zhǎng),滅菌效果變差。在對(duì)干發(fā)酵香腸表面的李斯特菌、大腸桿菌、鼠傷寒沙門菌和金黃色葡萄球菌采用3 J/cm2的PL-UV研究中,發(fā)現(xiàn)抑制作用分別為2.24,2.29,2.25,2.12 lg(CFU/g)。HIERRO 等[18]在真空包裝熟火腿和博洛尼亞香腸的切片表面接種李斯特菌,用 0.7,2.1,4.2,8.4 J/cm2PL 處理,經(jīng)過(guò)8.4 J/cm2PL的處理,使煮熟火腿中的李斯特菌減少了1.78 lg(cfu/cm2),博洛尼亞香腸切片中的單核增生李斯特菌減少了1.11 lg(cfu/cm2)。在作者的另一項(xiàng)研究中[19],通過(guò)對(duì)牛肉和金槍魚切片表面接種約3 lg(cfu/cm2)的李斯特菌、大腸桿菌、鼠傷寒沙門氏菌和副溶血性弧菌,用相同強(qiáng)度的PL對(duì)接種后的樣品進(jìn)行處理,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)8.4,11.9 J/cm2PL的處理使選定的病原體滅活了約 1 lg(cfu/cm2),而經(jīng)過(guò) 2.1,4.2 J/cm2PL 處理的樣品中病原體的失活率低于1 lg(cfu/cm2)。KRAMER等[20]研究了PL對(duì)包裝好的法蘭克福香腸(2種不同的腸衣)、水煮火腿片和雞肉冷切片的滅菌效果,結(jié)果表明,PL處理可以使火腿切片和雞肉冷切塊表面的彎曲乳桿菌減少約1個(gè)log單位,而法蘭克福香腸切片表面減少約3~4個(gè)log單位,在貯藏過(guò)程中李斯特菌保持在減少量的水平。HAUGHTON等[21]研究了高強(qiáng)度光脈沖(HILP)技術(shù)(3 Hz,最大505 J/脈沖,脈沖持續(xù)時(shí)間360 μs)對(duì)雞肉及其包裝材料和表面材料的滅菌效果。經(jīng)30 s HILP處理后,液體中的空腸桿菌、大腸桿菌和腸炎沙門氏菌完全滅活。將空腸桿菌、大腸桿菌和腸炎沙門氏菌接種到包裝材料和接觸表面上5 s后,觀察到分別降低了3.56,4.69,4.60 lg(cfu/cm2)。HILP對(duì)空腸桿菌、大腸桿菌和腸炎沙門氏菌的抑制作用最大,分別為1.22,1.69,1.27 lg(cfu/g)。NICORESCU 等[22]以生烤豬肉(RPR)、烤豬肉(RP)和三文魚(RS)為研究對(duì)象,研究了PL對(duì)需氧菌群和熒光假單胞菌的影響。發(fā)現(xiàn)在RP樣品中,微生物滅活的最大值達(dá)到3.4 lg(CFU/g)。結(jié)果證明PL技術(shù)對(duì)需氧菌群和熒光假單胞菌都有滅活的潛力,但是為了達(dá)到滿意的滅菌水平和產(chǎn)品質(zhì)量,必須采用中等的PL強(qiáng)度。

      OZER等[23]研究了PL-UV對(duì)大腸桿菌和李斯特菌對(duì)鮭魚魚片滅菌的效果。在輸入電壓為3 800 V時(shí),滅菌系統(tǒng)在燈表面產(chǎn)生5.6 J/cm2的PL,將魚皮或魚肉側(cè)接種的鮭魚魚片(8 cm×1.5 cm)置于培養(yǎng)皿中。對(duì)于大腸桿菌經(jīng)過(guò)60 s PL照射后,魚肉側(cè)的菌落最大減少量為1.09 lg(CFU/g),而經(jīng)過(guò)30 s PL照射,魚皮側(cè)的菌落最大減少量為0.86 lg(CFU/g)。對(duì)于李斯特菌,魚皮側(cè)60 s PL照射且在8 cm處的最大減少量為1.02 lg(CFU/g),而魚肉側(cè)60 s PL照射在8 cm處的最大減少量為0.74 lg (CFU/g)。CHEIGH 等[24]研究了 IPL(強(qiáng)脈沖光)對(duì)接種于固體培養(yǎng)基表面上的李斯特菌和對(duì)比目魚、鮭魚、蝦片等海鮮產(chǎn)品的滅活作用。在固體培養(yǎng)基上,UV-C照射1 000 s使李斯特菌減少約4個(gè)log單位,而IPL以1.75 mJ/cm2的能量密度處理180 s(900次脈沖)使其降低了約6個(gè)log單位,處理過(guò)程中的溫升(< 2.0 ℃)可以忽略不計(jì)。在海鮮產(chǎn)品上,同樣使用1.75 J/cm2的IPL處理,分別使接種在蝦、鮭魚和比目魚魚片上的李斯特菌減少約2.2,1.9,1.7個(gè)log單位,透射電鏡觀察清楚地表明,與UV-C處理的細(xì)胞不同,IPL處理的李斯特菌的細(xì)胞壁被破壞、細(xì)胞質(zhì)收縮和胞質(zhì)內(nèi)物質(zhì)滲漏。

      3 脈沖光處理對(duì)肉制品貯藏期間品質(zhì)影響研究

      國(guó)內(nèi)外學(xué)者在研究PL對(duì)肉制品殺菌作用的同時(shí),也評(píng)價(jià)了PL處理對(duì)肉品感官品質(zhì)、脂肪氧化、pH值等品質(zhì)指標(biāo)的影響。

      3.1 感官品質(zhì)的影響

      評(píng)定食品感官品質(zhì)較為普遍的方法主要是感官評(píng)價(jià),該方法能夠直接發(fā)現(xiàn)食品感官性狀的異常,甚至是食品品質(zhì)的微觀變化。在我國(guó),食品感官品質(zhì)評(píng)價(jià)主要由評(píng)價(jià)員通過(guò)視覺(jué)、嗅覺(jué)、味覺(jué)及觸覺(jué)等對(duì)食品進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

      肉及肉制品會(huì)因腐敗而發(fā)生色澤及肌肉組織結(jié)構(gòu)的變化,而肌肉組織結(jié)構(gòu)的變化會(huì)最終改變產(chǎn)品的質(zhì)地。PL處理的肉制品的感官品質(zhì)與肉制品的種類、脈沖次數(shù)、單次脈沖能量、脈沖頻率、閃照距離和傳播介質(zhì)有關(guān)。FERNáNDEZ等[25]研究了在真空包裝的西班牙Serrano和伊比利亞2種干腌即食火腿切片表面接種無(wú)毒李斯特菌,使用 2.1,4.2,8.4 J/cm2PL-UV 照射。在 4 ℃和20 ℃貯藏期間,一些揮發(fā)性化合物的濃度增加,如甲氧基、二甲基二硫化物和1-辛-3-酮,這些化合物雖然在儲(chǔ)存過(guò)程中消失,但仍有少量的硫味和金屬味。KEKLIK等[26]將抗藥性鼠傷寒沙門氏菌菌株接種在未包裝和真空包裝無(wú)骨雞胸肉表面上,在距PL-UV室石英窗5,8,13 cm的距離處用 PL 處理 5,15,30,45,60 s。通過(guò)輕度(13 cm持續(xù)5 s)、中度(8 cm持續(xù)30 s)和極端(5 cm持續(xù)60 s)處理,發(fā)現(xiàn)輕度和中度處理后,顏色沒(méi)有顯著變化。

      TOMASEVIC[27]對(duì) 4 種海鮮產(chǎn)品(金槍魚、鮭魚、比目魚和螃蟹)分別使用1~5個(gè)光脈沖(脈沖持續(xù)時(shí)間300 μs,脈沖強(qiáng)度 3.4 J/cm2),以每2秒1個(gè)脈沖的速率進(jìn)行處理。在采用各種IPL處理后,所有海鮮產(chǎn)品樣本均被評(píng)定為可接受,感官評(píng)價(jià)總分值等于或大于4.6(總分值5.0)。IPL處理后氣味變化最顯著。PL處理降低了金槍魚的L*(亮度值),但只有在較高強(qiáng)度的處理(17 J/cm2)后,a*(紅度值)和b*(黃度值)與對(duì)照組沒(méi)有顯著差異。低劑量的脈沖光(3.4 J/cm2)對(duì)金槍魚的顏色值沒(méi)有影響,但鮭魚樣品的L*值會(huì)顯著降低,而a*和b*值不受IPL處理的影響。比目魚和蟹肉樣品顯示,與L*值和a*值相比,其b*值對(duì)IPL更敏感。在對(duì)2種紅肉(牛肉和豬肉)、2種家禽(雞肉和火雞)和3種野味肉(鹿、兔和袋鼠)為樣品的研究中,采用相同的試驗(yàn)方法。PL處理后,所有肉、禽和野味樣品的氣味都發(fā)生了顯著變化,在研究的肉類中,只有火雞在處理后的得分低于良好質(zhì)量等級(jí)。FIGUEROA-GARCíA 等[28]研究結(jié)果表明,IPL可以影響海鮮產(chǎn)品的顏色,但變化不大,這與以前的一些結(jié)果相反。在0.5~2 J/cm2的通量范圍內(nèi)應(yīng)用IPL照射鯰魚魚片時(shí),沒(méi)有觀察到儀器的顏色參數(shù)變化,因此認(rèn)為IPL處理不會(huì)導(dǎo)致海鮮產(chǎn)品的顏色發(fā)生明顯變化。

      脈沖能否顯著影響色澤及感官性質(zhì)不僅與PL本身選擇的參數(shù)有關(guān),一定程度上還由產(chǎn)品的類型及性質(zhì)決定。所以在保證較好殺菌效果的同時(shí),應(yīng)減少PL的處理參數(shù),以此來(lái)保持產(chǎn)品的感官品質(zhì)。

      3.2 脂肪氧化的影響

      隨著肉制品貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),脂肪在微生物和氧氣的作用下發(fā)生氧化分解,進(jìn)而影響產(chǎn)品品質(zhì),這是肉及肉制品品質(zhì)下降的一個(gè)重要原因。硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì)(thiobarbituric acid reactive substances,TBARs)的值與肉類的脂肪氧化程度呈正相關(guān),TBARs值越大,脂肪的氧化程度越髙,酸敗也越嚴(yán)重,因此常把TBARs值作為肉及肉制品脂肪氧化的一個(gè)重要指標(biāo)[29]。

      FERNáNDEZ等研究了PL對(duì)西班牙Serrano和伊比利亞2種干腌即食火腿的表面殺菌效果。在4 ℃和20 ℃貯藏期間,Serrano火腿中的過(guò)氧化物值與最初的過(guò)氧化物值相比增長(zhǎng)了2倍;在2種溫度下,發(fā)現(xiàn)PL未使干腌火腿的過(guò)氧化值高于正常水平。在伊比利亞火腿中,所有樣品在4 ℃下儲(chǔ)存30 d后,過(guò)氧化值仍接近初始水平。當(dāng)儲(chǔ)存在20 ℃時(shí),對(duì)照樣品和經(jīng)2.1 J/cm2處理的切片也顯示出接近初始值的最終值。除了8.4 J/cm2處理并保存在20 ℃的樣品顯示最高值,第15 d的過(guò)氧化值比初始水平高出70%~80%,在儲(chǔ)存結(jié)束時(shí)呈輕微下降趨勢(shì)。WAMBURA等[30]研究了PL-UV光照對(duì)火腿色澤、質(zhì)地和脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性的影響。將100 g生火腿(厚度5 mm)樣品在紫外線系統(tǒng)中處理 60,90,120 s。另取 100 g 未處理樣品作為對(duì)照。離燈中心軸的距離分別為4.5,8.3,14.6 cm。結(jié)果表明,對(duì)照組,4.5 cm/60 s,4.5 cm/90 s,4.5 cm/120 s,8.3 cm/60 s,8.3 cm/90 s,8.3 cm/120 s,14.6 cm/60 s,14.6 cm/90 s,14.6 cm/120 s的脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性在貯藏14 d后分別下降了 21%,67%,53%,54%,39%,71%,75%,56%,58%,55%。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng),脂質(zhì)氧化穩(wěn)定性降低的程度更高,但隨著離燈距離的增加而降低??偟膩?lái)說(shuō),樣品的顏色和質(zhì)地與處理時(shí)間和樣品離燈的距離成反比。NICORESCU等[22]以生烤豬肉(RPR)、烤豬肉(RP)和三文魚(RS)為研究對(duì)象,發(fā)現(xiàn)暴露于3,10 J/cm2PL處理的樣品沒(méi)有引起脂質(zhì)過(guò)氧化。而暴露在30 J/cm2的RS和RP樣品中,MDA含量顯著增加,分別增加了39.3%和25.5%。PL處理的樣品氧化過(guò)程較快,可能是熱效應(yīng)促進(jìn)其氧化,并且氧化反應(yīng)產(chǎn)生的過(guò)氧化物也使肉中脂質(zhì)的氧化穩(wěn)定性降低[31]。而在ELMNASSER等[32]研究PL處理對(duì)牛奶蛋白質(zhì)組分的影響過(guò)程中發(fā)現(xiàn)了PL并不能引起脂質(zhì)的氧化,這也許是由于PL處理的對(duì)象是液體的緣故。

      3.3 pH值變化

      pH值是影響肉制品中細(xì)菌繁殖的一個(gè)較為重要的因素。在肉制品的貯藏過(guò)程中,食品的pH值主要變化發(fā)生在兩方面:(1)蛋白質(zhì)被分解成氨基酸,導(dǎo)致產(chǎn)品pH值下降;(2)碳水化合物被微生物分解,生成有機(jī)酸,導(dǎo)致產(chǎn)品pH值下降[33]。因此對(duì)pH值控制在預(yù)防肉制品腐敗變質(zhì)方面具有重要意義。

      LIU等[16]采用PL-UV照射對(duì)干腌肉處理,在30 d貯藏期間,4組干腌肉樣品的pH值均呈上升趨勢(shì),這是因?yàn)槿獾鞍追纸獬蓧A性氨和有機(jī)堿等胺類化合物,促進(jìn)了細(xì)菌的繁殖。PL-UV處理后的pH值為6.03±0.005,貯藏5 d后的pH值為6.10±0.01,但PL-UV照射抑制了肉制品的肉蛋白分解,最后測(cè)得的pH值低于對(duì)照組。董颯爽[34]以冷卻分割雞胸肉為研究對(duì)象進(jìn)行PL殺菌處理,以pH值作為技術(shù)指標(biāo)的一部分,發(fā)現(xiàn)在脈沖能量為300~500 J時(shí),pH值無(wú)顯著變化,在脈沖距離為9~15 cm時(shí),pH值隨著脈沖距離的增大而增大,且脈沖時(shí)間對(duì)pH值的影響很小。

      4 展望

      脈沖光技術(shù)作為一種綠色低溫殺菌技術(shù),對(duì)肉制品品質(zhì)相比其他加工方式而言影響很小。PL技術(shù)比傳統(tǒng)的殺菌方法具有突出優(yōu)勢(shì),但是要將其商業(yè)化仍然存在一些問(wèn)題需要研究和解決。PL技術(shù)對(duì)平整的固體表面及透明液體具有較好的殺菌效果;由于存在遮光效應(yīng)和光的折射、反射、散射等的作用,PL在凹凸不平的肉制品表面會(huì)降低殺菌效果;PL作為電磁波,滲透力有限,肉制品的厚度也會(huì)影響滅菌效果。

      相信隨著研究的深入和科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步,脈沖光在肉制品工業(yè)中的應(yīng)用會(huì)得到更多的關(guān)注。未來(lái)可充分發(fā)揮PL與其他食品殺菌方式(如超高壓處理[35]、低溫等離子體處理[36]、熱處理[37]、聲熱處理[38]、超聲波處理等)的互補(bǔ)優(yōu)勢(shì),并且可以同食品包裝方法如使用納米包裝材料相結(jié)合[39],開(kāi)發(fā)更為有效的肉制品殺菌方法,推動(dòng)對(duì)PL技術(shù)的深度開(kāi)發(fā)和廣泛利用。

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