我國豬群偽狂犬病病毒變異株感染人的警示

牛中偉，張 軍

（法國詩華動物保健公司，北京 100102）

皰疹病毒是一群有囊膜的DNA病毒，生物學(xué)特性相似，歸類為皰疹病毒科。目前總共發(fā)現(xiàn)了100多種，分為α、β、γ三大亞科。其中代表性的α皰疹病毒有3種：人的皰疹病毒、雞的馬立克氏病病毒和哺乳動物尤其豬偽狂犬病病毒。

偽狂犬病，顧名思義是一種以疾病癥狀的方式命名的病種，因早期發(fā)現(xiàn)該病時主要見于一些終末宿主如貓、狗等伴侶動物表現(xiàn)類似狂犬病的癥狀而得名。我國第一例偽狂犬病病例報道為1947年上海的1只貓。偽狂犬病病毒具有廣泛的哺乳動物宿主，豬是唯一的自然儲毒庫，感染后有的豬癥狀輕微甚至不被發(fā)現(xiàn)。其他動物感染后表現(xiàn)奇癢、狂犬病類似癥狀終歸死亡。近年國內(nèi)豬場偽狂犬病“變異株”流行及人Covid-19疫情背景下，偽狂犬病病毒的人獸共患問題引起國內(nèi)外廣泛關(guān)注。

1 國內(nèi)豬群偽狂犬病病毒的變異

1950年國內(nèi)證實偽狂犬病病毒存在以來，家養(yǎng)豬群一直飽受偽狂犬病病毒的困擾。偽狂犬病病毒感染豬群不分日齡、種群：可以造成公豬的不育、母豬的死胎流產(chǎn)等繁殖障礙；也可以感染產(chǎn)房仔豬造成神經(jīng)癥狀、腹瀉死亡；保育、育肥豬的感染引起呼吸道疾病、細(xì)菌繼發(fā)感染等，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。豬只日齡越小對偽狂犬病病毒越易感，產(chǎn)房仔豬感染死亡率近100%。

1970年為控制國內(nèi)豬群偽狂犬病，我國引入匈牙利偽狂犬病疫苗Bartha株免疫豬只。偽狂犬病弱毒疫苗Bartha-k61為人工傳代致弱，缺失主要毒力基因gE，使用至今有60年歷史，是同期世界上最優(yōu)秀的疫苗之一。其良好的安全性及高效的保護(hù)幫助很多國家控制了當(dāng)?shù)刎i群偽狂犬病，應(yīng)用配套區(qū)分疫苗、野毒的檢測試劑盒，很多國家也成功在家養(yǎng)豬群凈化了該病。我國自免疫該疫苗以來，很好控制了國內(nèi)豬群偽狂犬病，到20世紀(jì)90年代很少有豬偽狂犬病流行的報道，絕大多數(shù)豬場也放松了對豬偽狂犬病的警惕。

偽狂犬病病毒為雙鏈DNA病毒，遺傳相對穩(wěn)定。雖然公認(rèn)的偽狂犬病病毒只有一個血清型，但不同分離株毒力有明顯差異，現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)能找出這些毒株的遺傳差異，并研究其與毒力表型的關(guān)聯(lián)。基于全基因組測序，人們習(xí)慣把歐美及中國的偽狂犬病毒株分成兩類：基因Ⅰ型、基因Ⅱ型。歐美毒株多為基因Ⅰ型，比如我國引入的弱毒疫苗Bartha株；亞洲尤其中國流行基因Ⅱ型，包括20世紀(jì)國內(nèi)豬群偽狂犬病流行期間分離的經(jīng)典毒株Fa、Ea、Sc等，以及一些以這些豬場分離株為基礎(chǔ)研發(fā)的弱毒疫苗HB98、SA215株等?；蛐偷牟煌]有影響疫苗的效果，Bartha-k61幫助我國很好地控制了20世紀(jì)豬群偽狂犬病的流行并持續(xù)使用至今。

研究者的關(guān)注點不同，分類結(jié)果也會不同。巴西學(xué)者Fonseca依據(jù)偽狂犬病病毒gC基因?qū)⑹澜绺鞯氐膫慰袢《局攴譃?個基因型，剛好與依據(jù)分離地域建立的毒株分類結(jié)果相符，表明1902年Aujeszky確診首例偽狂犬病以來，隨著國際貿(mào)易、養(yǎng)殖量、規(guī)模及密度不斷擴(kuò)大，偽狂犬病病毒在世界傳播并繼續(xù)演變?yōu)榫哂械胤教攸c的毒株。Fonseca同時發(fā)現(xiàn)了明顯的病毒重組跡象。所以人們要習(xí)慣偽狂犬病病毒具有毒株多樣性，雖然它只有一個血清型！

2011年以后，中國免疫豬群暴發(fā)偽狂犬病引起了人們的警覺，尤其華北、中原地區(qū)疫情初期很多豬場家養(yǎng)的貓、狗感染偽狂犬病死亡。童光志課題組率先分離了毒株，并進(jìn)行了測序和毒力研究，證實了其與國內(nèi)經(jīng)典毒株毒力和遺傳的差異。雖然早期的毒力實驗動物選擇有所爭議，但后續(xù)研究者的跟進(jìn)報道和重復(fù)驗證，讓國內(nèi)存在毒力增強的偽狂犬病變異株這一提法深入人心，不同課題組陸續(xù)分離到了變異株HN1201、ZJ01、TJ等，同時也在緊鑼密鼓地開展相應(yīng)毒株的疫苗研發(fā)。據(jù)報2013年國內(nèi)有9個省區(qū)分離到變異株，2016年時分離出變異株的省區(qū)就達(dá)到了23個。“變異株”的提法是與原經(jīng)典毒株Fa、Ea、Sc等進(jìn)行了區(qū)分，無論經(jīng)典還是變異毒株其基因型還是屬于我國地域性的基因Ⅱ型。變異毒株的出現(xiàn)除了引發(fā)國內(nèi)豬群新一輪偽狂犬病流行外，也引起了人們對公共衛(wèi)生方面的擔(dān)憂

2 人感染偽狂犬病病毒的近況及歷史

人Covid-19疫情初期，張文宏教授曾提到華山醫(yī)院感染收治的病例：來自江西的某豬場女工因豬糞水入眼引發(fā)疾病，表現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、視力受損，NGS（高通量測序技術(shù)）和Real-time PCR確認(rèn)病原為國內(nèi)變異株偽狂犬病病毒。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、河南省人民醫(yī)院及動物疫病控制中心聯(lián)合報道了4例偽狂犬病病毒感染引起的人急性腦炎病例，成功分離出PRV hsD-1/2019致病株，完善了Koch's假說證據(jù)鏈。

2018年至今國內(nèi)報道人感染偽狂犬病病毒23例，21例經(jīng)NGS確認(rèn)，患者大都是養(yǎng)豬人、屠夫、獸醫(yī)、豬肉販等。高福院士也撰文：偽狂犬病是被忽視的人獸共患病嗎？

人是否能感染偽狂犬病病毒一直存在爭議。2001年Skinner對455名疑似患者和高危人群進(jìn)行偽狂犬病病毒中和抗體調(diào)查，結(jié)果都為陰性，人工感染高含量病毒也未見任何癥狀。1914年最早報道的2例疑似人感染病例為兩名實驗員，接觸病貓后表現(xiàn)虛弱、咽喉痛、奇癢、不安，抗體檢測和病毒分離失?。?940年兩名實驗員，1963年4名種豬場工人接觸病狗，1983年兩名游客因照顧病貓感染，以上案例都沒有確診。1986年3名歐洲人接觸患病動物后出現(xiàn)發(fā)熱、虛弱、盜汗、疲憊等癥狀，近一年時間才恢復(fù)，3人在病后半年至一年內(nèi)檢測到特異性中和抗體，但沒有做IgG、IgM分型，不足以直接證明被感染。

筆者接聽豬場工人電話咨詢時，也不乏被問到給豬免疫偽狂犬病疫苗時不小心打到自己手上、胳膊上會不會被感染、該如何處理的情況，極少個例出現(xiàn)有胳膊腫脹的，但難以確診因疫苗毒引起，絕大多數(shù)工人未做任何處理且未有進(jìn)一步發(fā)展。但短期內(nèi)變異株偽狂犬病感染人數(shù)量激升且確診，不得不讓人擔(dān)憂。

3 人感染偽狂犬病病毒的生物學(xué)和環(huán)境基礎(chǔ)

偽狂犬病病毒通過糖蛋白gD與細(xì)胞nectin-1受體結(jié)合入侵宿主細(xì)胞，人與豬細(xì)胞的nectin-1受體結(jié)構(gòu)相似，氨基酸同源性＞90%，存在跨物種傳播的可能。

中國是世界最大的生豬產(chǎn)地，有龐大的從業(yè)人員，生產(chǎn)模式多樣。檢測水平提高，尤其NGS的應(yīng)用讓很多傳染病得以確診，豬病流行與人感染病例“暴發(fā)”時間上重疊，加重了人們的疑慮。但相對于龐大的從業(yè)人員基數(shù)，確診的感染病例還是少數(shù)。偽狂犬病的跨種傳播僅局限于個別毒株、特定條件？還是大量的隱性感染未被發(fā)現(xiàn)？這需要做深入研究。從業(yè)人員屬于密接人群，需重視偽狂犬病感染人的風(fēng)險并采取防護(hù)措施。豬群內(nèi)偽狂犬病的傳播除了母仔、精液的垂直傳播外，體液分泌如唾液、鼻液，排泄物如尿液、糞便等含有大量病毒污染周圍環(huán)境。如在華山醫(yī)院確診被感染的江西女工，由豬舍糞水內(nèi)污染的偽狂犬病病毒濺入眼睛而直接感染。

4 豬群偽狂犬病凈化

Elizabeth通過神經(jīng)系統(tǒng)感染模式動物的研究，發(fā)現(xiàn)偽狂犬病病毒的毒力與感染神經(jīng)系統(tǒng)的能力呈負(fù)相關(guān)。強毒株過早地致死宿主并未入侵中樞神經(jīng)，弱毒如Bartha株等相比強毒即使將宿主致死，也獲得了幾倍的存活時長并占位中樞神經(jīng)。種間傳播表明毒株已經(jīng)在選擇壓力下改變，人感染并確診病例數(shù)增多是一個危險的信號?？刂撇艋瘋魅驹词歉镜某雎?。

我國自免疫Bartha株，在1990-2010年間控制了偽狂犬病流行，但盲目樂觀坐失了強制免疫和檢測凈化的機會，許多偽狂犬病變異株流行的地區(qū)，當(dāng)時正減免甚至不免偽狂犬病疫苗，張文宏教授報道的江西病例其所在豬場也沒免疫。高頻次、大劑量偽狂犬病疫苗免疫恢復(fù)后，2015年以來變異株的流行明顯降低。但在非洲豬瘟疫情期間，很多豬場定點清除過程中采取的靜默生產(chǎn)，讓偽狂犬病等的免疫陷入混亂；大量三元母豬未經(jīng)馴化培育入群；為恢復(fù)生產(chǎn)多來源背景不明的豬只混群，又讓很多豬場偽狂犬病大量轉(zhuǎn)陽?，F(xiàn)階段，即使免疫，大家對偽狂犬病的期望普遍采取免疫不發(fā)病的心態(tài)，也增加了其繼續(xù)流行的風(fēng)險?？刂曝i群偽狂犬病，DIVA免疫凈化是關(guān)鍵。疫苗研發(fā)依然沒有脫離缺失gE基因的方向，gE抗體的鑒別診斷已經(jīng)深入人心。考慮人獸共患的風(fēng)險及種間傳播，經(jīng)典疫苗安全有效的情況下應(yīng)審慎地推進(jìn)變異株弱毒疫苗的大規(guī)模接種，避免人為的選擇壓力和適應(yīng)。運用現(xiàn)有的、保守、低風(fēng)險、有效的手段，配以嚴(yán)格的凈化控制偽狂犬病是當(dāng)務(wù)之急。

（參考文獻(xiàn)略）