付 敏,陳天寶,賴靖雯,歐陽佚亭,陳 敏,曾洪良
(四川省畜牧科學(xué)研究院,動(dòng)物遺傳育種四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn),四川成都 610000)
肉羊養(yǎng)殖是我國部分地區(qū)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的主要產(chǎn)業(yè),且羊肉消費(fèi)需求總體呈加速增長趨勢,總量供不應(yīng)求[1-2]。簡州大耳羊是我國人工培育的肉用山羊新品種,生長快、體格高大、肉品質(zhì)好,深受養(yǎng)羊戶和消費(fèi)者的歡迎,目前在我國南方飼養(yǎng)廣泛[3],在脫貧攻堅(jiān)和鄉(xiāng)村振興中發(fā)揮中重要作用。近年,越來越多養(yǎng)殖場開始探索用全價(jià)混合飼糧舍飼肉羊,促進(jìn)飼養(yǎng)科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化,減少管理成本[4]。然而,現(xiàn)行《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 816—2004)已不能完全滿足肉羊新品種的飼養(yǎng)需要和適應(yīng)新的養(yǎng)殖方式。因此,探索適宜的、高效的飼糧營養(yǎng)供給對提高肉山羊生產(chǎn)效率具有重大的指導(dǎo)意義。
能量和蛋白作為影響營養(yǎng)物質(zhì)消化與代謝的重要因素,會(huì)顯著影響生產(chǎn)效率,如添加不當(dāng)會(huì)影響環(huán)境。目前,已有較多研究來探索能量[5]、蛋白質(zhì)[6-7]以及能量/蛋白質(zhì)[8-10]對山羊生產(chǎn)性能的影響,由于品種和飼養(yǎng)環(huán)境差異較大,結(jié)果卻不盡一致。目前,關(guān)于簡州大耳羊?qū)Φ鞍踪|(zhì)和能量需要量的研究鮮有報(bào)道,導(dǎo)致生產(chǎn)上缺乏相應(yīng)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。因此,本試驗(yàn)旨在研究全舍飼條件下不同能氮比全價(jià)混合飼糧對生長育肥期簡州大耳羊生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)、瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響,為合理制定簡州大耳羊等快大型山羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選擇體重(26.16±2.39)kg、健康的5月齡簡州大耳羊64 只(公母各半),隨機(jī)分為4 組,每組4 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)4 只羊,分別飼喂ME/N 為0.59、0.51、0.43、0.35 MJ/g 的全價(jià)顆粒飼糧,飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。試驗(yàn)預(yù)試期10 d,正試期30 d,分別在正試期第1 天和第30 天08:00 稱取試驗(yàn)羊空腹體重。
表1 飼糧組成及營養(yǎng)成分(干物質(zhì)基礎(chǔ))
1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)于2020 年9 月1 日—10 月10 日在簡陽市簡州大耳羊育種場育肥羊舍開展,公母分圈飼養(yǎng),全舍飼,試驗(yàn)前對圈舍消毒、試驗(yàn)期間按照羊場規(guī)范管理,自由飲水,自由采食,每日按照前一天采食量的105%給料,08:30 和16:30 喂料,保持采食后料槽內(nèi)仍有少量余料。每天08:00 回收前一天余料并稱重,準(zhǔn)確記錄日采食量、溫度、天氣、羊只糞便、反芻、健康狀況等情況。
1.3 樣品采集
1.3.1 血清樣品采集 在試驗(yàn)第30 天,早上空腹稱重后,采用一次性真空采血管采集前腔靜脈血。采血后及時(shí)將采血管置于室內(nèi)靜置30 min 后,3 500 r/min 離心15 min 制備血清,使用1 mL 移液槍吸取血清樣品到500 μL EP 管,冷凍保存待測。
1.3.2 瘤胃液采集 在試驗(yàn)第30 天早上自由采食2.5 h后,每組隨機(jī)選擇8 只羊(公母各半),使用胃管式瘤胃液采集器采集瘤胃液,棄去初始瘤胃液,然后不同深度吸取50 mL 瘤胃液,經(jīng)4 層紗布過濾后,用便攜式pH 計(jì)測定pH,然后分裝于10 mL 離心管冷凍保存。
1.4 檢測指標(biāo)及方法
1.4.1 飼料營養(yǎng)成分 飼料中水分、粗脂肪、粗灰分、鈣和磷含量參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[13]的方法測定。總能用德國IKA C6 000 gs 氧彈式量熱儀測定,粗蛋白質(zhì)采用丹麥FOSS 2300 全自動(dòng)凱氏定氮儀測定,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維采用丹麥FOSS1020(M6)纖維分析儀測定。尿能采用濾紙法測定[14]。
1.4.2 生長性能 根據(jù)試驗(yàn)羊初始體重、末重、試驗(yàn)時(shí)間,計(jì)算凈增重(ANG)和平均日增重(ADG),記錄試驗(yàn)羊每天采食量,計(jì)算干物質(zhì)日采食量(DMI)和耗料增重比(F/G)。
1.4.3 血清生化指標(biāo)及瘤胃揮發(fā)性脂肪酸 采用BS-420全自動(dòng)生化分析儀測定血清葡萄糖、尿素氮、總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶含量。將瘤胃液于3 000 r/min 4℃低溫離心后,采用塞默飛TRACE1300 氣相色譜,參照Erwin 等[15]的方法測定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸(VFA)。
1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010 進(jìn)行初步整理,用SPSS 20.0 軟件One-Way ANOVA 程序進(jìn)行單因素方差分析,組間采用Duncan's 法進(jìn)行多重比較,結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,P<0.05 表示差異顯著。
2.1 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊生產(chǎn)性能的影響 試驗(yàn)期間,試驗(yàn)羊反芻情況正常,未出現(xiàn)群體拉稀狀況。如表2 所示,0.43 ME/N 組DMI 較0.51ME/N 組增加了8.48%(P<0.05),其他3 組差異不顯著。0.43 ME/N組ADG 高于另外3 組(P<0.05),且較0.59 ME/N 組提高了34.47%。而0.43 ME/N 組F/G 低于0.59 ME/N組(P<0.05)。
表2 不同能氮比飼糧對育肥期山羊生產(chǎn)性能的影響
2.2 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊血清生化指標(biāo)的影響 如表3 所示,隨著能氮比降低,血清尿素氮(R2=0.736,P<0.01)和白蛋白(R2=0.171,P<0.01)呈線性增加。0.35 ME/N 組谷草轉(zhuǎn)氨酶低于0.43 ME/N組(P<0.05)。不同能氮比飼糧對球蛋白、甘油三酯、血糖、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶的濃度沒有顯著影響。
表3 不同能氮比飼糧對簡州大耳羊血清生化指標(biāo)的影響
2.3 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 由表4 可知,0.43 ME/N 組飼糧pH 低于其他3 組(P=0.06);總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)濃度、乙酸和丙酸比例、乙酸/丙酸均無顯著差異。但丁酸、戊酸、異丁酸和異戊酸比例均差異顯著(P<0.05),0.59 ME/N 組丁酸比例高于其他3 組(P<0.05);戊酸比例隨著飼糧ME/N 降低而增高(P<0.05);異丁酸和異戊酸比例均以0.35 ME/N 組最高,高于試驗(yàn)0.59 ME/N組(P<0.05)。
表4 不同能氮比飼糧對育肥肉山羊瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的影響
3.1 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊生產(chǎn)性能的影響 肉山羊生長性能直接影響羊場經(jīng)濟(jì)效益,因此提高肉山羊ADG 和降低F/G 至關(guān)重要。研究表明,生產(chǎn)中4~6 月齡簡州大耳羊公羔ADG 為139.83 g/d,母羔ADG 為130.33 g/d[16]。志莉等[17]將飼糧精料蛋白質(zhì)水平從15.7%增加到20.7%,4~5 月齡雌性簡州大耳羊ADG 從119 g/d 增加到152 g/d,低于本研究結(jié)果,F(xiàn)/G從18.98 降到12.33,高于本研究結(jié)果,原因可能是飼糧形態(tài)和營養(yǎng)成分不同,本研究采用全價(jià)顆粒飼糧,增加了食糜通過消化道速度進(jìn)而提高了DMI,而對于生長育肥期山羊,適當(dāng)提高DMI 可以提高生產(chǎn)效率[18-19]。本研究中結(jié)果表明,隨著ME/N 降低,ADG 表現(xiàn)為先增后降低的趨勢,F(xiàn)/G 表現(xiàn)為先降低后增高的趨勢,均在0.43 ME/N 組表現(xiàn)最佳,原因可能是當(dāng)能量水平一致,山羊的生長性能受蛋白水平的影響,蛋白質(zhì)供給量達(dá)到一定閾值時(shí)其熱增耗較高,能量利用率下降,山羊ADG 隨蛋白水平的增加而下降[18,20];當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)供給不足時(shí),消化酶的合成量減少,并抑制瘤胃細(xì)菌的發(fā)酵作用,導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解大于合成,從而影響飼料消化率,降低了ADG[18]。另外,提高飼糧脂肪含量會(huì)降低反芻動(dòng)物DMI[18]。本研究中,0.51ME/N 組試驗(yàn)羊DMI 低于其他三組,原因可能是0.51 ME/N 組飼糧脂肪含量較其他三組高。
3.2 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊清生化指標(biāo)的影響 血清尿素氮、總蛋白、白蛋白是反映機(jī)體氮代謝的重要指標(biāo),血清總蛋白、白蛋白含量高則有利于提高機(jī)體代謝水平和免疫力;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)攝入不足時(shí)會(huì)引起血清總蛋白含量降低[21]。血清尿素氮與機(jī)體氮沉積、蛋白質(zhì)和氨基酸利用率呈負(fù)相關(guān),其含量越高,表明機(jī)體蛋白質(zhì)的平衡狀況越差[22]。本研究結(jié)果顯示,隨著能氮比降低,血清尿素氮呈線性極顯著增加(R2=0.736),總蛋白差異不顯著。這與Wang 等[23]用不同蛋白濃度(125、132、140、148、156 g/kg)飼糧在初始體重為20.7 kg 公湖羊上的研究結(jié)果一致。因此,持續(xù)提高飼糧氮含量并不能增加機(jī)體對氮的利用。
血糖、總膽固醇和甘油三酯分別是反映機(jī)體能量消化代謝和脂肪消化代謝情況的主要標(biāo)志性物質(zhì),葡萄糖作為機(jī)體的臨時(shí)能量庫,反映了動(dòng)物能量代謝的動(dòng)態(tài)平衡[24]。柏峻等[25]在錦江牛上的研究結(jié)果表明,血糖濃度增高,機(jī)體內(nèi)糖代謝增強(qiáng),促進(jìn)了自身營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,進(jìn)而提高了ADG。本研究也表明,0.43 ME/N 組試驗(yàn)羊血糖濃度最高,其ADG 也最高。堿性磷酸酶是一種去磷酸化的酶,有利于細(xì)胞新城代謝和再生,但活性過高預(yù)示著肝臟異常。本研究4 組試驗(yàn)羊堿性磷酸酶無顯著差異。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝臟中重要的轉(zhuǎn)氨酶,在氨基酸代謝中發(fā)揮中重要作用。本研究中0.43 ME/N組谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性顯著增高。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要催化生成α-酮戊二酸和天冬氨酸,在三羧酸循環(huán)中發(fā)揮重要的作用。因此,提高谷草轉(zhuǎn)氨酶的濃度間接提高了能量利用效率,使得0.43 ME/N 組生產(chǎn)性能更優(yōu)。
3.3 不同能氮比飼糧對生長育肥期簡州大耳羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 在反芻動(dòng)物中,瘤胃作為特殊的消化器官,在消化過程中起著重要的作用,瘤胃pH、VFA 的組成和比例基本能反映瘤胃發(fā)酵情況。瘤胃pH 是反映瘤胃內(nèi)環(huán)境的重要指標(biāo),一般 pH 維持在5.7~6.8[26]。本研究中試驗(yàn)羊瘤胃pH 均在正常偏低狀態(tài)。一方面是飼料的精粗比較傳統(tǒng)養(yǎng)殖更高,另一方面飼料顆粒較小,導(dǎo)致反芻次數(shù)和進(jìn)入瘤胃的唾液減少,從而降低瘤胃pH[27]。VFA 是反芻動(dòng)物能量需要的主要組成部分,其濃度代表了其產(chǎn)生與消耗之間的平衡,以及相互轉(zhuǎn)化的結(jié)果。研究認(rèn)為,肉牛瘤胃中TVFA 濃度范圍在30~200 mmol/L[26]。本研究中TVFA 濃度較許多研究結(jié)果更高[28-31],與侯沛君等[14]研究結(jié)果相近。TVFA 增高主要有幾方面原因:一方面全價(jià)顆粒飼糧原料的粉碎粒度較細(xì),且水分含量低,精粗比較高;二是相比于傳統(tǒng)養(yǎng)殖,飼喂全價(jià)顆粒飼糧會(huì)導(dǎo)致肉羊短時(shí)間采食量高,但又減少了口腔咀嚼次數(shù)和瘤胃反芻次數(shù),導(dǎo)致瘤胃內(nèi)容物水分含量減少;三是全價(jià)顆粒飼糧含有較高的玉米、豆粕和麩皮,這些原料可發(fā)酵碳水化合物含量高,肉羊采食后可迅速被降解,產(chǎn)生大量有機(jī)酸[32];四是采樣時(shí)間為采食后2.5 h,此時(shí)是瘤胃發(fā)酵高峰期,瘤胃VFA生成速度大于吸收速度。瘤胃VFA 濃度不能直接反映瘤胃內(nèi)VFA 的產(chǎn)量,但是瘤胃內(nèi)VFA 的比例一般會(huì)相對穩(wěn)定。本研究中不同試驗(yàn)組乙酸、丙酸比例、乙酸/丙酸沒有顯著性差異,但是0.59 ME/N 組丁酸比例顯著高于其他3 組。研究表明,飼料中糖分含量較高或者瘤胃微生物原蟲數(shù)量較高且為內(nèi)毛目原蟲(主要代謝終產(chǎn)物為乙酸和丁酸)的情況下,表現(xiàn)為丁酸比例升高[26]。本研究中試驗(yàn)0.59 ME/N 組處于高能氮比飼糧結(jié)構(gòu),玉米的含量較高,可能導(dǎo)致瘤胃內(nèi)糖酵解的數(shù)量超過蛋白質(zhì)水解數(shù)量,促進(jìn)瘤胃內(nèi)糖含量增加。異丁酸和異戊酸主要作為某些瘤胃細(xì)菌重要的生長因子,其比例增加有利于細(xì)菌的合成。
本研究結(jié)果表明,不同能氮比全價(jià)顆粒飼糧可顯著影響生長育肥期簡州大耳羊生長性能、血清生化指標(biāo)和瘤胃發(fā)酵,且能氮比為0.43 MJ/g(代謝能9.67 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)14.07%)時(shí)簡州大耳羊表現(xiàn)出較優(yōu)的生產(chǎn)性能,進(jìn)一步降低能氮比不能提高生產(chǎn)性能。長期飼喂全價(jià)顆粒飼糧對瘤胃發(fā)酵的影響還有待進(jìn)一步研究。