董小慧，汪 瑩，王國(guó)凡，龐凌予，鐘書(shū)琪，譚明濤，葉 彩

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

0 引 言

皮膚衰老的主要表現(xiàn)就是皮膚老化。由皮膚的表皮萎縮及其與真皮的交界處逐漸變平而引起的皮膚結(jié)構(gòu)和功能的老化是自然老化。當(dāng)皮膚長(zhǎng)期暴露在陽(yáng)光中的紫外線(xiàn)下時(shí)，會(huì)呈現(xiàn)出皺紋、松弛、色斑和毛細(xì)管擴(kuò)張等老化現(xiàn)象，這稱(chēng)為光老化[1-3]。紫外線(xiàn)(UV)主要分為三部分：UVC(200～280 nm)、UVB(280～315 nm)和UVA(315～400 nm)。紫外線(xiàn)波長(zhǎng)越大，透入人體皮膚的深度也越大。

羅馬洋甘菊傳統(tǒng)用途為治療腸胃氣脹、感冒、止吐、解痙和鎮(zhèn)靜劑等。由于根據(jù)對(duì)羅馬洋甘菊揮發(fā)油的GC-MS分析[4],其精油和純露的功效極佳，被消費(fèi)者廣泛使用，但是其生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量廢渣，這些副產(chǎn)物中含有大量的生物活性化合物，會(huì)造成環(huán)境問(wèn)題和生物污染，因此合理利用廢渣并解決環(huán)境污染是急需解決的問(wèn)題[5]。

近年來(lái)消費(fèi)者越來(lái)越關(guān)注產(chǎn)品的作用和成分來(lái)源，相比于化學(xué)合成化妝品，更青睞于溫和、低價(jià)的植物提取成分化妝品，對(duì)天然成分化妝品的需求也越來(lái)越多。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)多酚類(lèi)化合物是羅馬洋甘菊蒸餾廢渣的主要成分之一，而多酚類(lèi)化合物已被現(xiàn)有的文獻(xiàn)證明是潛在的抗氧化劑、美白劑、抗衰老劑和防曬劑。但迄今為止尚未有關(guān)于羅馬洋甘菊蒸餾廢渣在化妝品方面的研究。實(shí)驗(yàn)將從體外紫外分光光度計(jì)法，測(cè)定羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)继嵛锛案骷?jí)萃取物的SPF值，評(píng)估其作為防曬劑的潛力。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

721G紫外分光光度計(jì)(上海精科有限公司)；SQP型電子天平(北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；SZ-97A自動(dòng)三重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)；甲醇(分析級(jí)；天津凱通化學(xué)試劑有限公司)；三蒸水(實(shí)驗(yàn)室自制)；各級(jí)萃取物：乙醇提取物、石油醚萃取物、erlvjiawan 萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃余物

1.2 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)崛?/h3>

得出最佳提取工藝參數(shù)為乙醇濃度50%，提取溫度60℃，液固比50 mL/g。所得的醇提物分別用PE、CH2Cl2、EAC、NBA依次萃取，從而得到各部分萃取物。

1.3 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)腿∥锏墓獗Ｗo(hù)試驗(yàn)

測(cè)定樣品的防曬因子(SPF)的常用方法分為人體測(cè)試法和體外測(cè)試法。其中，體外測(cè)試法中的紫外分光光度法測(cè)定SPF值簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)。實(shí)驗(yàn)用體外紫外分光光度計(jì)法，測(cè)定羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)继嵛锛案骷?jí)萃取物的SPF值，評(píng)估其作為防曬劑的潛力。

1.3.1 樣品及溶劑的配制

樣品的配制：精密稱(chēng)取羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)继嵛锛案骷?jí)萃取物各2.0 mg于離心管中，用甲醇(萃余物用三蒸水)溶解并定容至20 mL，則樣品濃度為100 μg/mL。

1.3.2 試驗(yàn)過(guò)程

以與樣品相同溶劑為空白進(jìn)行基線(xiàn)校正，使用1 cm石英比色皿于紫外分光光度計(jì)下在200～400 nm(間隔5 nm)波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描樣品。使用Mansur等人的公式計(jì)算其SPF值，即：

式中:EE(λ)-紅斑效應(yīng)譜；I(λ)-太陽(yáng)強(qiáng)度光譜；Abs(λ)樣品的吸光度；CF校正因子(= 10)。 EE × I的值是恒定且已知的，由Sayre等人確定，列于表1中。通過(guò)不同波長(zhǎng)的吸光度值相加即得到SPF值。所有樣品重復(fù)三次。

表1 在波長(zhǎng)從290到320 nm中以每隔5nm共七點(diǎn)的EE×I (模擬太陽(yáng)光)乘積值

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

每次實(shí)驗(yàn)都做三次并取平均值，所有數(shù)據(jù)均由平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)偏差(Mean ± SD，n= 3)表示，并用SPSS16軟件的方差分析(ANOVA)評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，將P<0.05的值作為統(tǒng)計(jì)顯著性水平。

2 結(jié)果與討論

2.1 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)腿∥锟偠喾雍康姆治?/h3>

各樣品中總多酚的含量見(jiàn)表2，從表可知，總多酚的含量順序?yàn)椋阂宜嵋阴ポ腿∥?> 正丁醇萃取物 > 醇提物 > 二氯甲烷萃取物 > 石油醚萃取物 > 萃余物。醇提物中的總多酚經(jīng)過(guò)萃取而達(dá)到分離，在乙酸乙酯及正丁醇中富集的較多。

表2 羅甘蒸餾殘?jiān)继嵛锛案骷?jí)萃取物總多酚含量

不同樣品之間差異顯著用不同字母a,b,c…表示(p< 0.05)，樣品間差異不顯著用同一字母表示

2.2 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)腿∥锏墓獗Ｗo(hù)活性分析

2.2.1 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)腿∥锏娜庾V掃描圖譜分析

紫外線(xiàn)(UV)波長(zhǎng)范圍200～280 nm、280～315 nm和315～400 nm，可分別對(duì)應(yīng)UV輻射的UVC、UVB和UVA三類(lèi)。UVC可被臭氧層吸收，UVA主要使皮膚曬黑，而UVB則會(huì)把皮膚曬傷，因此，防曬范圍為UVA與UVB。羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)继嵛锛案骷?jí)萃取物的全光譜掃描如圖1。從圖中可看出，乙酸乙酯萃取物在UVA與UVB范圍內(nèi)具有強(qiáng)吸收，并且明顯高于其他樣品，其次是正丁醇萃取物及醇提物，而石油醚與二氯甲烷萃取物及萃余物幾乎無(wú)作用。此順序與其化學(xué)成分中總酚含量的高低相一致。通常，植物提取物，特別是含有黃酮和色素的提取物，因?yàn)楸旧韼в蓄伾?，可以在某些特定的波長(zhǎng)下吸收對(duì)應(yīng)的光。

圖1 羅馬洋甘菊醇提物及各級(jí)萃取物在200-400 nm波長(zhǎng)的吸光度

2.2.2 羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)腿∥锏腟PF值分析

通過(guò)Mansur公式，求得醇提物及各級(jí)萃取物在100 μg/mL的SPF，將其結(jié)果列于表3中。

表3 羅馬洋甘菊醇提物及其各級(jí)萃取物在100 μg/mL下的SPF值

不同樣品之間差異顯著用不同字母a,b,c…表示(p< 0.05)，樣品間差異不顯著用同一字母表示

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，乙酸乙酯萃取物在100 μg/mL時(shí)SPF達(dá)到了29.754，其次為正丁醇萃取物，為12.658，乙醇提取物的SPF值僅為8.265。通過(guò)與其他作者報(bào)道的芳香植物提取物相比，羅馬洋甘菊乙酸乙酯萃取物的SPF值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他植物，如桂樹(shù)皮醇提物，其在100 μg/mL時(shí)的SPF值3.462[6]，生姜醇提物在 200和400 μg/mL的SPF值分別為1.44和1.82[7]，胡蘿卜的乙酸乙酯萃取物在2000 μg/mL時(shí)的SPF值為24.25[8]，因此羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)捎糜诨瘖y品中的防曬成分，尤其是乙酸乙酯萃取物，具有極高的光保護(hù)價(jià)值。

3 結(jié) 論

將羅馬洋甘菊蒸餾殘?jiān)崛∥镞M(jìn)行溶劑梯度萃取，分析各萃取物的總多酚含量，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯萃取物所含的總多酚含量最多。通過(guò)紫外分光光度計(jì)法結(jié)合Mansur公式計(jì)算，得出羅馬洋甘菊乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及醇提物均有較好的光保護(hù)活性，且乙酸乙酯萃取物效果最好。