周 芬,計 徐,吳義景,吳 東

(安徽省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所//畜禽產品安全工程安徽省重點實驗室，安徽 合肥 230031)

農業(yè)農村部于2019-07發(fā)布第194號公告，明確規(guī)定自2020-07-01起，飼料中禁止添加抗生素，旨在徹底解決飼料中抗生素濫用問題。隨著飼料中抗生素的退出，尋找抗生素替代品成為了廣大養(yǎng)殖工作者亟待解決的的問題。止痢草又名牛至，是一種潛在的天然抗生素和藥物生長促進劑[1]，其提取物中的主要活性物質香芹酚和百里香酚具有抗菌、抗氧化、促消化、調節(jié)免疫等特性[2]。本試驗旨在比較添加不同比例的止痢草提取物對育雛、育成期蛋雞生長性能、血清免疫生化指標及腸道菌群的影響，為止痢草提取物替代抗生素提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

15%金霉素預混劑由安徽某飼料有限公司提供;止痢草提取物(好力高501)由廣州某生物工程技術有限公司提供。

1.2 試驗動物與分組

試驗選用0日齡蛋雛雞360只，公母各半，隨機分為3組：抗生素對照組、止痢草提取物低劑量組、止痢草提取物高劑量組；每個組120只，設3個重復(圈)，每個重復40只(公母各半)；試驗期110 d。試驗分三個階段：育雛期(0～42 d)階段、育成前期(43～70 d)階段和育成后期(71～110 d)階段。試驗添加量詳見表1。

表1 試驗分組情況

1.3 試驗日糧及飼養(yǎng)管理

試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。試驗每個重復單圈飼養(yǎng)，按常規(guī)飼養(yǎng)管理及免疫程序進行。

表2 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 測定指標及方法

1.4.1生長性能指標測定

試驗雞在0、42、70日齡和試驗結束時進行空腹稱量各重復雞體重和各重復飼料消耗量，統(tǒng)計各組平均日增重、日采食量和料重比。

1.4.2血清免疫、生化指標測定

測定于試驗結束時，每重復選取1只體重相近的雞，翅靜脈采血，3 000 r/min離心15 min，分裝血清，于-20℃保存?zhèn)溆?；進行血清中免疫球蛋白IgA、IgG和IgM含量，總抗氧化能力(T-AOC)、總蛋白(TP)、尿素氮(BUN)含量的測定。

1.4.3腸道菌群的測定

每重復選取1只雞，于無菌操作臺中取腸道內容物0.5 g于10 ml的滅菌離心管中，加入無菌生理鹽水4.5 ml，用漩渦混合儀混勻后進行10-5～10-9倍比稀釋，每個稀釋度3個重復，乳酸桿菌和大腸桿菌分別在MRS瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基購自杭州天和微生物試劑有限公司。細菌計數(shù)采用平板計數(shù)法進行統(tǒng)計，最終以每克腸道內容物中細菌個數(shù)的對數(shù)lg(CFU/g)表示。

1.5 數(shù)據(jù)分析處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件ANOVA模塊進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析，用Duncan法進行多重比較，試驗結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞生長性能的影響

由表3和表4可以看出，在育成期，止痢草提取物組平均日增重比抗生素組有升高趨勢，但是差異不顯著(P>0.05)?？股亟M與試驗組之間平均日采食量差異也不顯著(P>0.05)。

表3 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞平均日增重的影響 g

表4 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞平均日采食量的影響 g

由表5可以看出，在整個試驗期，試驗組相對于抗生素組料重比均有所下降，但差異不顯著(P>0.05)，僅育成前期止痢草提取物低劑量組料重比顯著低于抗生素組(P<0.05)。

表5 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞料重比的影響

2.2 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞血清免疫、生化指標的影響

由表6可以看出，在育雛期，各試驗組IgA含量均顯著高于抗生素組(P<0.05)，低劑量組和高劑量組IgA含量相比抗生素組分別提高了24.14%、58.05%；IgG含量分別提高了4.52%、8.44%，但差異不顯著(P>0.05)；各組IgM、T-AOC含量與抗生素組相比差異不顯著(P>0.05)；抗生素組總蛋白含量顯著低于各試驗組(P<0.05)，和各試驗組相比分別低了11.53%、10.08%；抗生素組尿素氮含量顯著高于各試驗組(P<0.05)，和各試驗組相比分別高了9.77%、16.32%。

表6 不同比例止痢草提取物對育雛期蛋雞血清免疫生化指標的影響

由表7可以看出，在育成前期，各試驗組IgA含量和抗生素組相比分別提高了13.98%、66.13%,高劑量組與抗生素組差異顯著(P<0.05)；各試驗組IgG含量比抗生素組顯著提高了18.67%、26.44%(P<0.05)；各試驗組IgM含量比抗生素組下降了20.98%、13.49%，且低劑量組與抗生素組差異顯著(P<0.05)；低劑量組T-AOC含量顯著高于抗生素組(P<0.05)；各試驗組總蛋白含量顯著高于抗生素組(P<0.05)，和抗生素組相比分別提高了10.59%、9.59%；抗生素組尿素氮含量比試驗組高了7.73%、19.08%，且高劑量組與抗生素組差異顯著(P<0.05)。

表7 不同比例止痢草提取物對育成前期蛋雞血清免疫、生化指標的影響

由表8可以看出，在育成后期，各試驗組IgA含量顯著高于抗生素組(P<0.05)，和抗生素組相比分別提高了56.54%、39.27%；各試驗組IgG含量比抗生素組分別提高了7.77%、25.70%，且高劑量組和抗生素組差異顯著(P<0.05)；試驗組IgM含量比抗生素組顯著提高了18.02%、17.65%(P<0.05)；低劑量組T-AOC含量顯著高于抗生素組(P<0.05)；各試驗組總蛋白質含量分別比抗生素組顯著上升了4.88%、4.88%(P<0.05)；抗生素組尿素氮含量顯著高于各試驗組(P<0.05)，和各組相比分別高了21.04%、24.84%。

表8 不同比例止痢草提取物對育成后期蛋雞血清免疫、生化指標的影響

2.3 不同比例止痢草提取物替代抗生素對蛋雞腸道微生物菌群的影響

由表9可以看出和抗生素組相比，試驗組腸道大腸桿菌數(shù)有下降趨勢，分別下降了10.47%和6.89%，其中低劑量組和抗生素組相比差異顯著(P<0.05)；各組間腸道乳酸桿菌數(shù)差異不顯著(P>0.05)。

表9 不同比例止痢草提取物對蛋雞腸道菌群的影響

3 討論

3.1 不同比例止痢草提取物對蛋雞生產性能的影響

史東輝等發(fā)現(xiàn)，止痢草提取物能提高肉雞增重并改善飼料轉化率[3]，任景樂等[4]在蛋雛雞日糧中添加止痢草提取物，平均日增重有顯著提高，而料蛋比有一定的降低，史東輝等研究發(fā)現(xiàn)止痢草提取物改善了肉仔雞的料重比，但對日增重無顯著影響[5]。本試驗中與抗生素相比，添加止痢草提取物育成期蛋雞日增重有一定程度的提高，料重比有下降趨勢，且在育成前期低劑量組顯著低于抗生素組，表明止痢草提取物替代抗生素對蛋雞生長性能無不良影響，并有一定的促進作用。

3.2 不同比例止痢草提取物對蛋雞血清免疫生化指標的影響

免疫球蛋白能幫助機體抵抗細菌、病毒等外來侵害，是動物體內具有抗體活性的物質[6],吳東等[7]報道在肉雞日糧中添加止痢草提取物替代抗生素IgA和IgM含量均有一定程度的提高；胡曉飛等[8]發(fā)現(xiàn)在肉雞基礎日糧中添加100 mg/kg牛至油，在生長前期能刺激機體迅速產生抗體，提高免疫力；朱曉磊等[9]研究表明，止痢草中提取的百里香精油能顯著提高肉雞血清中IgM、IgA、IgG的水平。本試驗中添加了止痢草提取物替代抗生素在蛋雞整個生長過程中IgA含量均有顯著提高，IgG含量也有一定程度的提高，IgM含量在生長前期不明顯，在71～110 d階段也有顯著提高，與之前的報道基本一致，表明止痢草提取物替代抗生素對提高蛋雞免疫力有良好的促進作用。

止痢草提取物中的百里香酚和香芹酚能為脂肪氧化中第一步產生的自由基提供氫離子，延緩過氧化過程，所以具有很強的抗氧化能力[10]。本試驗中，相對于抗生素組，止痢草提取物組血清中總抗氧化能力都有一定程度的提高，表明止痢草提取物在抗氧化能力方面優(yōu)于抗生素。血清中總蛋白是機體蛋白質的主要來源，也是機體各類營養(yǎng)物質的載體[11],和尿素氮的水平能反映機體對蛋白質的吸收利用和對氨基酸代謝情況[12],本試驗結果止痢草提取物替代抗生素血清中總蛋白水平顯著上升，尿素氮水平有不同程度的下降，表明止痢草提取物可以促進機體對蛋白質的吸收利用，增強氨基酸代謝。

3.3 不同比例止痢草提取物對蛋雞腸道菌群的影響

有研究發(fā)現(xiàn)，止痢草提取物可以有效抑制雞腸道大腸桿菌等有害菌，對乳酸桿菌沒有影響[13-15]，本試驗中添加止痢草提取物替代抗生素蛋雞腸道大腸桿菌數(shù)有下降趨勢，且低劑量組與抗生素組相比差異顯著，乳酸桿菌雖有上升趨勢但無明顯差異，和上述報道基本一致。表明止痢草提取物替代抗生素能有效維護腸道中有益菌數(shù)量，降低腸道有害菌，維護腸道菌群平衡。

4 結論

在蛋雞日糧中添加止痢草提取物替代抗生素，可以在一定程度上改善蛋雞的生長性能，提高其機體免疫和抗氧化水平，對蛋雞腸道微生物菌群的平衡也有一定的促進作用。