方丹，徐雙嬌，田新權(quán)，雷博，馬磊，彭軍

(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部棉花產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室/棉花生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所，河南 安陽(yáng) 455000)

能力驗(yàn)證(Proficiency Testing)是指利用實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)來(lái)判定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的一項(xiàng)活動(dòng)，是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制、檢測(cè)能力提升和確認(rèn)新的檢測(cè)項(xiàng)目行之有效的手段之一[1]。根據(jù)《農(nóng)業(yè)部產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試機(jī)構(gòu)管理辦法》和《農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)考核方法》等規(guī)定，每年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部對(duì)具備能力驗(yàn)證相關(guān)項(xiàng)目(參數(shù))檢測(cè)資質(zhì)的農(nóng)業(yè)農(nóng)村部產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試機(jī)構(gòu)(以下簡(jiǎn)稱“部級(jí)質(zhì)檢機(jī)構(gòu)”)和承擔(dān)2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)任務(wù)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)開(kāi)展農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)能力驗(yàn)證。

通過(guò)能力驗(yàn)證活動(dòng)，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室存在的系統(tǒng)誤差，實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行狀態(tài)，有效保障檢測(cè)工作的科學(xué)性、公正性和合理性，同時(shí)推動(dòng)了農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)的質(zhì)量管理和技術(shù)水平的不斷提升，規(guī)范檢測(cè)業(yè)務(wù)工作流程，確保為正確評(píng)價(jià)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全水平提供客觀、公正、科學(xué)、有效的檢測(cè)數(shù)據(jù)?，F(xiàn)以2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部組織開(kāi)展的農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證活動(dòng)為例，將測(cè)定方法和結(jié)果分析描述如下。

1 材料與方法

1.1 考核樣品 本次能力驗(yàn)證考核共發(fā)放A、B兩組樣品，每組樣品均包括1份考核樣和1份空白樣，每份樣品的質(zhì)量約為150g。A組樣品的基質(zhì)為結(jié)球甘藍(lán)，B組樣品的基質(zhì)為桃，樣品寄出時(shí)為冷凍勻漿狀態(tài)。

1.2 檢測(cè)方法 采用《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》(GB23200.113-2018)[2]中的方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)儀器 安捷倫8890A-7000D氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，渦旋振蕩器、氮吹儀(可控溫)、分析天平(感量0.01g)、離心機(jī)。

1.4 試劑 乙腈、丙酮、乙酸乙酯均為色譜純?cè)噭?、陶瓷均質(zhì)子(P/N： 5982-9313)、0.22μm微孔濾膜(有機(jī)相)、QuEChERS前處理提取包(P/N： 5982-5650 CH)和凈化包(P/N： 5982-5056)。

1.5 色譜條件 色譜柱VF-1701ms(14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛細(xì)管柱，30m×0.25mm×0.25μm)；色譜柱溫度：70℃保持1min，然后以40℃/min程序升溫至150℃，再以15℃/min升溫至240℃，再以8℃/min升溫至290℃，保持9.5min；純度≥99.999%氦氣為載氣，流速1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度：280℃；1μL進(jìn)樣量；不分流進(jìn)樣方式；離子源溫度280℃；傳輸線溫度280℃；多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM掃描方式(每種農(nóng)藥分別選擇一對(duì)定量離子、一對(duì)定性離子)[2]。

1.6 檢測(cè)項(xiàng)目 敵敵畏、甲胺磷、異丙威、乙酰甲胺磷、滅線磷、治螟磷、甲拌磷、六六六、五氯硝基苯、二嗪磷、氧樂(lè)果、嘧霉胺、樂(lè)果、百菌清、莠滅凈、乙烯菌核利、甲霜靈、毒死蜱、甲基對(duì)硫磷、異丙甲草胺、馬拉硫磷、倍硫磷、三氯殺螨醇、殺螟硫磷、三唑酮、二甲戊靈、甲基異硫磷、對(duì)硫磷、水胺硫磷、甲拌磷、甲拌磷亞砜、滴滴涕、腐霉利、丙溴磷、殺撲磷、多效唑、蟲(chóng)螨腈、聯(lián)苯菊酯、三唑磷、甲氰菊酯、異菌脲、亞胺硫磷、氯氟氰菊酯、伏殺硫磷、氯菊酯、氯苯醚啶醇、噠螨靈、醚菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、蠅毒磷、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、苯醚甲環(huán)唑、溴氰菊酯共56種農(nóng)藥。

2 檢測(cè)過(guò)程及結(jié)果

2.1 農(nóng)藥殘留初步定性定量實(shí)驗(yàn) 10g A-CK、B-CK、A和B樣品中分別加入10mL乙腈，充分渦旋混勻，加入QuEChERS提取試劑包和一個(gè)均質(zhì)子，立即手搖震蕩1min，5 000rpm離心5min，取6mL上層清液加入凈化包，渦旋1min，5 000rmp離心5min，取上清液1mL，40℃氮吹至近干，加入1mL乙酸乙酯復(fù)溶，經(jīng)0.22μm濾膜過(guò)濾后裝入進(jìn)樣瓶，上機(jī)測(cè)定。

2.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn) 分別稱取3個(gè)10g相同蔬菜空白樣品A、B，各平行稱取3份，加入2.1篩選出的農(nóng)藥單標(biāo)，使農(nóng)藥含量盡量與初篩定量含量接近。分別按2.1進(jìn)行前處理及上機(jī)檢測(cè)。計(jì)算3個(gè)空白樣品加標(biāo)回收率，如果數(shù)值在70%～120%之間，可上報(bào)結(jié)果。

2.3 檢測(cè)結(jié)果 (表1～2)可以看出，A組結(jié)球甘藍(lán)質(zhì)量控制樣品的回收率為80.9%～103.8%，B組桃質(zhì)量控制樣品的回收率為81.1%～102.1%，結(jié)果表明，樣品的檢測(cè)結(jié)果是可信任的，并一次性順利通過(guò)此次能力驗(yàn)證。

表1 A組中農(nóng)藥殘留檢測(cè)數(shù)據(jù)

表2 B組中農(nóng)藥殘留檢測(cè)數(shù)據(jù)

3 農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證的探討

3.1 儀器設(shè)備 實(shí)驗(yàn)儀器在能力驗(yàn)證時(shí)很重要，及時(shí)落實(shí)設(shè)備儀器的維護(hù)，保證其性能符合檢測(cè)要求[3]；維持儀器設(shè)備的清潔性，例如準(zhǔn)備一支新的色譜柱，不容易出現(xiàn)污染后的各種不正常數(shù)據(jù)，進(jìn)樣口要保持干凈，換用新的進(jìn)樣墊，新的襯管和新的“O”型圈，進(jìn)樣針需要多次清洗，必要時(shí)換新的。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

(1)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)，一定要用未失效且新打開(kāi)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，如果標(biāo)液稀釋后放的時(shí)間較長(zhǎng)，可能會(huì)降解，濃度不準(zhǔn)，甚至出峰的個(gè)數(shù)也會(huì)不同，準(zhǔn)備能力驗(yàn)證樣品時(shí)，現(xiàn)打開(kāi)標(biāo)液，稀釋后進(jìn)樣，確定保留時(shí)間與峰面積。

(2)定量過(guò)程多采用至少5個(gè)點(diǎn)校準(zhǔn)，如果使用單點(diǎn)校準(zhǔn)，當(dāng)標(biāo)液濃度與樣品濃度差異較大時(shí)，則導(dǎo)致結(jié)果定量偏差。

(3)在農(nóng)殘實(shí)驗(yàn)中，不同基質(zhì)對(duì)不同農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)都是不一樣的，所以在最終結(jié)果的校正時(shí)一定要配制基質(zhì)曲線，這是影響檢測(cè)結(jié)果是否準(zhǔn)確的重要因素之一。

3.3 樣品前處理操作 在日常工作中要加強(qiáng)對(duì)前處理的練習(xí)，否則容易出現(xiàn)平行樣品不平行、回收率低等問(wèn)題。如兩個(gè)平行樣品的測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差較大，先排除儀器問(wèn)題后，問(wèn)題會(huì)出現(xiàn)在前處理環(huán)節(jié)，氮吹時(shí)，要使兩個(gè)平行樣品氮吹近干的狀況一致，則氣體流速快慢要盡量一致[4]，必要時(shí)兩個(gè)平行樣品氮吹在同一根氮吹針上完成，氮吹管不能離液面太近，一般為2cm左右，防止污染，氮吹時(shí)，需有試驗(yàn)人員看管，在液體近干時(shí)要保留一滴，用洗耳球吹一下，底部潮濕即可，如果完全干燥，則會(huì)使回收率偏低[5]。

3.4 加強(qiáng)培訓(xùn)與練習(xí) 為順利通過(guò)能力驗(yàn)證，工作中要加強(qiáng)培訓(xùn)與練習(xí)。及時(shí)對(duì)能力驗(yàn)證中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行總結(jié)，對(duì)關(guān)鍵點(diǎn)進(jìn)行詳細(xì)記錄，進(jìn)行日常加標(biāo)回收試驗(yàn)，對(duì)出現(xiàn)的問(wèn)題及時(shí)解決，最好對(duì)每種農(nóng)藥都做加標(biāo)回收試驗(yàn)，記錄他們的回收率，對(duì)回收率低的與高的農(nóng)藥，查找原因，并找到解決辦法。

4 總結(jié)

綜上所述，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)能力驗(yàn)證結(jié)果，直接反映了農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)能力，如何提高檢測(cè)隊(duì)伍自身的工作質(zhì)量與工作效率顯得尤為重要。通過(guò)日常的檢測(cè)工作、借助網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)等多種方式參加技術(shù)培訓(xùn)活動(dòng)，不斷提高檢測(cè)人員的理論素質(zhì)和專業(yè)技術(shù)水平，深入了解國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)和前沿現(xiàn)狀。本文以農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品能力驗(yàn)證為例分享實(shí)戰(zhàn)中的技巧，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)提高能力驗(yàn)證水平提供參考與借鑒。