花 蕊，郁萬(wàn)文，李婷婷，汪貴斌，曹福亮

（南京林業(yè)大學(xué) 南方現(xiàn)代林業(yè)協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210037）

銀杏Ginkgo biloba是中國(guó)特有的，集食用、藥用、材用和景觀等多種用途于一身的珍貴經(jīng)濟(jì)樹(shù)種[1]。隨著銀杏葉中黃酮類(lèi)和萜內(nèi)酯等物質(zhì)的藥用價(jià)值不斷被認(rèn)識(shí)和開(kāi)發(fā)，銀杏葉用林資源的培育及加工利用成為銀杏產(chǎn)業(yè)發(fā)展的熱點(diǎn)[2]。在所有必需營(yíng)養(yǎng)元素中，氮是限制植物生長(zhǎng)、產(chǎn)量和品質(zhì)形成的首要元素，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育、生理代謝及產(chǎn)量和品質(zhì)的形成發(fā)揮重要作用[3-5]。目前，許多研究涉及到氮素形態(tài)及配比對(duì)植物生長(zhǎng)、有效成分含量及目標(biāo)收獲物產(chǎn)量的影響[6]。2 種氮素NO3--N 和NH4+-N 在形態(tài)上的差異導(dǎo)致植物對(duì)其吸收、運(yùn)輸和同化等過(guò)程產(chǎn)生不同反應(yīng)，從而影響植物生長(zhǎng)發(fā)育、生物量積累和次生代謝[7-10]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，混合形態(tài)氮素營(yíng)養(yǎng)較單一形態(tài)氮素營(yíng)養(yǎng)更有利于大部分植物的生長(zhǎng)發(fā)育，氮素利用率更高，混合形態(tài)和單一形態(tài)氮素的最佳配比因植物種類(lèi)、生長(zhǎng)環(huán)境及生長(zhǎng)發(fā)育期不同而存在差異[11-14]。 葉用銀杏是以葉片為目標(biāo)收獲物，高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)是其種植的主要目標(biāo)，而氮肥是影響銀杏葉生長(zhǎng)發(fā)育和品質(zhì)的主要營(yíng)養(yǎng)元素[15-16]。鄭軍等[17]、黃東靜等[18]經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，銨硝配施能夠顯著促進(jìn)碳氮化合物的積累，提高相關(guān)酶活性，其中25∶75 或50∶50 的銨硝配比供應(yīng)更有利于銀杏的碳氮代謝。目前，有關(guān)氮素形態(tài)及配比對(duì)銀杏苗生長(zhǎng)、葉產(chǎn)量及有效成分含量影響的研究報(bào)道較為鮮見(jiàn)，忽視了氮素形態(tài)及配比對(duì)銀杏生長(zhǎng)和葉品質(zhì)的影響。另外，生產(chǎn)實(shí)踐中普遍使用單一氮肥，且存在超量的現(xiàn)象[19-22]。課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn)，以盆栽銀杏生長(zhǎng)和葉黃酮含量為衡量指標(biāo)，銀杏以每盆2 g 的供氮水平為宜[23]。本研究中，在參考黃東靜[23]和吳家勝等[24]的研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，采用每盆2 g 的氮供給水平，以0∶100、25∶75、50∶50、75∶25、100∶0 的硝銨配比進(jìn)行盆栽試驗(yàn)，以苗木生長(zhǎng)、葉生物量、葉綠素含量、葉中NPK含量、初生代謝物含量、次生代謝物含量及產(chǎn)量等為指標(biāo)，開(kāi)展硝銨配比對(duì)銀杏苗生長(zhǎng)及葉品質(zhì)影響的研究，探究促進(jìn)葉用銀杏高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的硝銨配比，為合理高效利用氮素和提高銀杏葉經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)地位于南京林業(yè)大學(xué)白馬基地。供試對(duì)象為未經(jīng)過(guò)施肥處理的2年生半同胞家系銀杏幼苗。2020年1月，選擇長(zhǎng)勢(shì)均一、無(wú)病蟲(chóng)害銀杏苗，移栽于上口徑30 cm、下口徑25 cm、高27 cm 底部帶孔的聚乙烯塑料盆中，每盆裝10 kg 黃壤干土，盆下配有托盤(pán)防止養(yǎng)分流失。土壤理化性質(zhì)為全氮含量5.45 g/kg、全磷含量0.95 g/kg、全鉀含量10.87 g/kg、銨態(tài)氮含量3.00 mg/kg，硝態(tài)氮含量 6.12 mg/kg，pH 6.45。銀杏栽植后，置于通風(fēng)良好的遮雨棚內(nèi)進(jìn)行常規(guī)管理，5月中旬轉(zhuǎn)移到溫室大棚內(nèi)適應(yīng)1 周后進(jìn)行施肥試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，每盆總氮量為 2 g，設(shè)置5 種硝銨比[m(NO3--N)∶m(NH4+-N)]，以不施氮肥為對(duì)照（CK），其中NO3--N 和NH4+-N分別由分析純(CaNO3)2·4H2O 和(NH4)2SO4提供，各處理詳見(jiàn)表1。另外，各處理均施加相同量的磷鉀肥，以平衡各處理間除氮肥以外的差異。每個(gè)處理45 盆，每盆2 株。所有盆栽苗隨機(jī)擺放，互不遮擋。2020年5月25日傍晚，將各處理每盆所需肥料使用分析天平稱(chēng)量并溶解于300 mL 蒸餾水中依次一次性澆入盆土中，試驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行定期定量澆水及除草等常規(guī)管理。

表1 銀杏苗不同硝銨配比施肥處理試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1 Experimental design of fertilizer treatments with different ammonium nitrate ratios for ginkgo seedlings

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 植株生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

1）相對(duì)生長(zhǎng)量：分別使用卷尺和游標(biāo)卡尺測(cè)定施肥前及施肥后90 d 時(shí)每處理植株的苗高和地徑，計(jì)算相對(duì)生長(zhǎng)量（Ir）。

式中：M1為5月25日施肥前的苗高或地徑，M2為施肥后90 d 時(shí)的苗高或地徑。

2）葉生物量：施肥后90 d 時(shí)每處理隨機(jī)取5株，用蒸餾水洗凈并擦干后，帶回實(shí)驗(yàn)室將每株葉片放入牛皮紙信封中，在80 ℃下烘干至恒質(zhì)量，稱(chēng)取葉干質(zhì)量。

3）葉面積參數(shù)：施肥后90 d 時(shí)，采集每處理植株朝南方向枝條的頂部、中部、基部的功能葉15 片拍照測(cè)定，并使用Photoshop 軟件測(cè)定葉面積，再將其烘干至恒質(zhì)量稱(chēng)取質(zhì)量，計(jì)算比葉干質(zhì) 量（ms）。

式中：ml為葉干質(zhì)量，Sl為葉面積。

1.3.2 葉片生理指標(biāo)測(cè)定

施肥后90 d 時(shí)，采集每株樹(shù)朝南方向枝條的頂部、中部、基部的功能葉，用蒸餾水洗凈并使用吸水紙擦干，將各部位葉片混合后放入干冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室，轉(zhuǎn)移至-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

葉綠素含量采用無(wú)水乙醇提取法測(cè)定，可溶性糖含量采用蒽酮比色法測(cè)定，可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定[25]，全氮含量采用凱式定氮法測(cè)定，全磷含量采用鉬銻抗比色法測(cè)定，全鉀含量采用火焰光度法測(cè)定，萜內(nèi)酯含量采用分光光度法測(cè)定[26]，黃酮的提取及含量測(cè)定參照文獻(xiàn)[27]，略有改動(dòng)。

式中：Ct為總黃酮含量，C槲為槲皮素含量，C山為山奈酚含量，C異為異鼠李素含量。

式中：Yt為單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，ml′為單株葉干質(zhì)量。

式中：Y萜為單株萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，C萜為萜內(nèi)酯 含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2019 和SPSS 25.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量

2.1.1 不同硝銨配比對(duì)銀杏苗生長(zhǎng)的影響

不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)狀況見(jiàn)表2。由表2 可知，不同硝銨配比處理顯著影響了銀杏苗單葉的生長(zhǎng)（P＜0.05）。按照單葉面積由高到低排序，各處理依次為T(mén)3、T1、T4、T2、T5、CK，除T4與T2、T5與CK 處理間無(wú)顯著差異 （P＞0.05），其他各處理間均有顯著差異（P＜ 0.05），其中T3處理的單葉面積比CK 提高了12.88%。按照單葉干質(zhì)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)3、T4、T2、T5、T1、CK，其中T3處理的單葉干質(zhì)量比CK 提高了13.77%，T3、T4與T1、CK 處理間有顯著差異（P＜0.05），其他各處理間均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。按照比葉干質(zhì)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T3、CK、T2、T1，T1和T2處理的比葉干質(zhì)量低于對(duì)照，除了T4與T1處理間有顯著差異（P＜0.05），其他各處理間均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

由表2 可知，不同硝銨配比處理顯著影響了銀杏苗高和地徑的生長(zhǎng)（P＜0.05）。按照苗高相對(duì)生長(zhǎng)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T3、T2、T5、T1、CK，除T4與T3處理間無(wú)顯著差異（P＞0.05），T4與其他處理間均有顯著差異 （P＜0.05），其中T4處理的苗高相對(duì)生長(zhǎng)量比CK 提高了61.95%。按照地徑相對(duì)生長(zhǎng)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T2、T5、T3、T1、CK，T2、T3、T4、T5處理之間均無(wú)顯著差異（P＞0.05），其他處理間有顯著差異（P＜0.05），其中T4處理的地徑相對(duì)生長(zhǎng)量比CK 提高了50.26%。

表2 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)狀況?Table 2 Growth of ginkgo seedlings under different ammonium nitrate treatments

2.1.2 不同硝銨配比對(duì)銀杏葉葉綠素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的影響

不同硝銨配比處理下銀杏苗葉片的葉綠素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量見(jiàn)表3。由表3 可知，按照葉片的葉綠素含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)5、T4、T2、T3、T1、CK，其中T5處理葉片的葉綠素含量最高，比CK 提高了31.05%。按照葉片的可溶性糖含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T3、T2、T1、T5、CK，除T4與CK、T1、T5處理間有顯著差異（P＜0.05），其他各處理間均無(wú)顯著差異（P＞0.05），其中T4處理葉片的可溶性糖含量比CK 提高了16.08%。按照葉片的可溶性蛋白含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T3、T2、T1、CK， 除T4與CK、T1、T2，T5與CK 處理間有顯著差異（P＜0.05），其他各處理間均無(wú)顯著差異（P＞0.05），其中T4處理葉片的可溶性蛋白含量比CK 提高了9.39%。按照葉片的N含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T3、T2、T1、CK，其中T4處理與T3、T2、T1、CK 差異顯著（P＜0.05），T4處理葉片的N 含量比CK提高了23.21%。按照葉片的P 含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T3、T2、T5、T1、CK，其中T4處理與T1、CK 差異顯著（P＜0.05），T4處理葉片的P 含量比CK 提高了44.74%。按照葉片K 含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T3、T2、T5、T1、CK，各處理間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同硝銨配比處理下銀杏苗葉片的葉綠素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量?Table 3 Chlorophyll and nutrient contents of leaves of G.biloba seedlings treated with different ammonium nitrate ratios

2.1.3 不同硝銨配比對(duì)銀杏葉次生代謝物含量及其經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量的影響

不同硝銨配比處理下銀杏苗葉片的次生代謝物含量及其單株經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量見(jiàn)表4。由表4 可知，不同硝銨配比處理顯著影響了單株葉生物量、次生代謝物含量及其單株經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量（P＜0.05）。按照單株葉生物量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T3、T5、T2、T1、CK，其中T4與T5、T2、T1、CK處理之間差異顯著（P＜0.05），T4處理的單株葉生物量比CK 提高了42.00%。按照葉片的總黃酮含量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T1、CK、T3、T2，其中T4處理葉片的總黃酮含量最高，比CK 提高了22.59%。按照葉片的萜內(nèi)酯含量由高到低排序，各處理依次為CK、T5、T2、T4、T1、T3，其中T3的萜內(nèi)酯含量最低，比CK 減少了24.55%。按照單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T3、T1、T2、CK，其中T4處理的總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量最高，比CK 提高了74.22%。按照單株萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量由高到低排序，各處理依次為T(mén)4、T5、T2、T3、CK、T1，其中T4處理的單株萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量最高，比CK 提高了27.91%。

表4 不同硝銨配比處理下銀杏苗葉片的次生代謝物含量及其單株經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量?Table 4 Secondary metabolite content of leaves of G.biloba seedlings treated with different ammonium nitrate ratios and their economic yield per plant

2.2 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的相關(guān)性

不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表5。對(duì)其中影響葉產(chǎn)量、總黃酮含量及其單株經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量、萜內(nèi)酯含量及其單株經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量的主要因子進(jìn)行分析。由表5 可知，單株葉生物量與苗高相對(duì)生長(zhǎng)量、地徑相對(duì)生長(zhǎng)量、單葉干質(zhì)量、葉片可溶性糖含量、葉片可溶性蛋白含量、葉片N 含量、葉片P 含量、葉片K 含量、單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量顯著或極顯著正相關(guān)（P＜0.05或P＜0.01），葉片總黃酮含量?jī)H與單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量顯著正相關(guān)（P＜0.05），葉片萜內(nèi)酯含量與單葉面積極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），單株黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量與葉片可溶性糖含量、葉片可溶性蛋白含量、葉片N 含量、葉片P 含量、葉片K 含量、單株葉生物量、葉片總黃酮含量顯著或極顯著正相關(guān)（P＜0.05 或P＜0.01），單株萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量與比葉干質(zhì)量、葉片葉綠素含量、葉片可溶性蛋白含量、葉片N 含量、單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量顯著或極顯著正相關(guān)（P＜0.05 或P＜0.01）。

表5 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)?Table 5 Correlation coefficients of growth and leaf quality and yield indicators of ginkgo seedlings treated with different ammonium nitrate ratios

2.3 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的主成分分析

為了更好地評(píng)價(jià)硝銨配比處理的施肥效果，并篩選出適用于葉用銀杏栽培的硝銨配比，將銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量共16 個(gè)指標(biāo)進(jìn)行主成分分析，結(jié)果見(jiàn)表6。由表6 可知，第1 主成分的特征值為10.769，方差貢獻(xiàn)率為67.31%，是最主要的主成分；第2 主成分的特征值為2.959，方差貢獻(xiàn)率為18.50%；第3 主成分的特征值為1.253（＞1），方差貢獻(xiàn)率為7.83%。前3 個(gè)主成分的累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到93.63%（＞85%），表明前3 個(gè)主成分代表了16 個(gè)指標(biāo)的93.63%的綜合信息，因此，前3 個(gè)主成分可以較好地反映這16 個(gè)指標(biāo)的相對(duì)重要性及各指標(biāo)間的關(guān)系。

對(duì)16 個(gè)指標(biāo)在各主成分上的因子載荷進(jìn)行分析，結(jié)果見(jiàn)表6。由表6 可知：對(duì)第1 主成分影響較大的指標(biāo)有苗高相對(duì)生長(zhǎng)量、地徑相對(duì)生長(zhǎng)量、單葉干質(zhì)量、葉片可溶性糖含量、葉片可溶性蛋白含量、葉片NPK 含量、單株葉生物量和單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，主要綜合了NPK 吸收利用及生長(zhǎng)、初生代謝和葉產(chǎn)量等相關(guān)信息；對(duì)第2 主成分影響較大的是葉片萜內(nèi)酯含量和單葉面積，其中單葉面積起負(fù)效應(yīng)；對(duì)第3 主成分影響較大的是葉片葉綠素含量和總黃酮含量，其中葉綠素含量發(fā)揮負(fù)效應(yīng)。第1 主成分包含的信息主要與初生代謝相關(guān)，第2、3 主成分包含的信息主要與次生代謝相關(guān)。

表6 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的主成分荷載矩陣及方差貢獻(xiàn)率Table 6 Principal component load matrices and variance contributions of growth and leaf quality and yield indicators of ginkgo seedlings treated with different ammonium nitrate ratios

根據(jù)因子載荷矩陣，計(jì)算出特征向量矩陣，以X1、X2、X3……X16分別代表苗高相對(duì)生長(zhǎng)量、地徑相對(duì)生長(zhǎng)量、單葉面積、單葉干質(zhì)量、比葉干質(zhì)量、葉片葉綠素含量、葉片可溶性糖含量、葉片可溶性蛋白含量、葉片N 含量、葉片P 含量、葉片K 含量、單株葉生物量、葉片總黃酮含量、葉片萜內(nèi)酯含量、單株總黃酮經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量、單株萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量等原始數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化值，得到各主成分得分的線性方程：

F1=0.279X1+0.277X2+0.145X3+0.270X4+ 0.189X5+0.234X6+0.2667X7+0.285X8+0.285X9+ 0.294X10+0.288X11+0.296X12+0.131X13-0.156X14+ 0.269X15+0.238X16；

F2=-0.164X1-0.015X2-0.491X3- 0.178X4+0.331X5+0.123X6-0.059X7+0.179X8+ 0.035X9-0.084X10-0.145X11-0.035X12+0.355X13+ 0.471X14+0.193X15+0.352X16；

F3=0.136X1-0.368X2+0.128X3+0.237X4+ 0.160X5-0.527X6+0.297X7-0.048X8-0.295X9- 0.079X10+0.007X11-0.013X12+0.457X13-0.043X14+ 0.262X15-0.081X16。

式中：F1、F2和F3分別代表第1、2、3 主成分的得分。

根據(jù)計(jì)算出的各主成分得分，以各主成分的貢獻(xiàn)率作為權(quán)重，計(jì)算各處理的綜合得分。3 個(gè)主成 分的權(quán)重值分別為67.306%、18.493%、7.834%，綜 合得分計(jì)算公式為F=0.673F1+0.185F2+0.078%F3，計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表7。由表7 可知，各硝銨配比處理的肥效綜合得分由大到小依次為T(mén)4、T3、T5、T2、T1、CK，說(shuō)明各硝銨配比處理能有效調(diào)控銀杏的生長(zhǎng)發(fā)育和葉品質(zhì)。其中，高比例的硝銨配比處理（T4）的表現(xiàn)較佳，單施硝態(tài)氮處理（T5）促進(jìn)銀杏葉生長(zhǎng)發(fā)育和提高葉品質(zhì)的效果優(yōu)于單施銨態(tài)氮處理（T1），銀杏苗表現(xiàn)出一定的喜硝特性。

表7 不同硝銨配比處理下銀杏苗的生長(zhǎng)和葉片品質(zhì)及產(chǎn)量指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)結(jié)果Table 7 Results of a comprehensive evaluation of growth and leaf quality and yield indicators of ginkgo seedlings treated with different ammonium nitrate ratios

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明，氮素通過(guò)影響銀杏的養(yǎng)分吸收和光合同化等過(guò)程，影響植株的生長(zhǎng)及葉產(chǎn)量和品質(zhì)。同等施氮水平下，硝銨配施不同程度地促進(jìn)了銀杏生長(zhǎng)及葉產(chǎn)量、葉片葉綠素含量、葉片可溶性糖含量、葉片可溶性蛋白含量和葉片主要礦質(zhì)元素N、P、K 含量的提高。施用適宜形態(tài)和配比的氮素較施用單一形態(tài)的氮素更有利于葉產(chǎn)量和品質(zhì)的提高，銀杏表現(xiàn)出喜硝性，其中(NO3

--N)和(NH4+-N)質(zhì)量比為75∶25 的T4處理能有效促進(jìn)銀杏植株生長(zhǎng)、葉綠素含量提高、初生代謝物積累、NPK 的吸收、葉片總黃酮積累，同時(shí)提高葉產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，可以將其作為葉用銀杏種植園的施氮配方。

施氮是調(diào)控植物生長(zhǎng)和次生代謝的重要手段。植物對(duì)氮源具有一定的偏好，不僅取決于自身的生理特性，還與環(huán)境中提供的氮素形態(tài)有關(guān)[28-30]。有研究結(jié)果表明，適宜的氮素形態(tài)及配比能有效促進(jìn)川芎Ligusticum chuanxiong[31]、半夏Pinellia ternata[32]和甘草Glycyrrhiza uralensis[33]等藥用植物的生長(zhǎng)，提高其產(chǎn)量和品質(zhì)。本研究中得到了較為一致的結(jié)論：硝銨配比顯著影響了銀杏葉片的葉綠素含量、可溶性蛋白含量，且隨著肥料中硝比例的升高，總體呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，其中葉綠素含量在全硝處理下達(dá)到最大值，可溶性蛋白含量在高比例的硝銨配比處理（T4）下達(dá)到最大值，說(shuō)明高比例的硝銨配比處理和單一硝態(tài)氮處理更有利于葉綠素和可溶性蛋白的合成和積累。各硝銨配比處理顯著促進(jìn)了銀杏苗葉中N、P 的積累 （P＜0.05），同樣促進(jìn)了K 的積累，但效果不顯著（P＞0.05）；葉中N、P、K 含量?jī)蓛砷g存在極顯著的線性正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），說(shuō)明氮素的施入促進(jìn)了葉中P、K 元素的積累，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的協(xié)同性。隨著供硝比例的升高，葉中P、K 含量總體呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，且硝銨配施的效果優(yōu)于施用單一形態(tài)的氮素，施硝態(tài)氮的效果優(yōu)于施銨態(tài)氮。通過(guò)主成分分析提取出3 個(gè)獨(dú)立的主成分，綜合排名結(jié)果表明高比例的硝銨配比處理（T4）的綜合得分最高。綜合分析結(jié)果表明，硝銨配施通過(guò)影響銀杏各項(xiàng)生理指標(biāo)（如促進(jìn)葉綠素合成）以及初生代謝過(guò)程（如促進(jìn)可溶性糖和可溶性蛋白的合成），從而影響了銀杏地上部分的生物量和葉中有效成分的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量（如促進(jìn)葉生物量、葉中總黃酮含量的升高等）。

氮素是各種含氮化合物的重要組成元素，不同形態(tài)的氮素可能通過(guò)影響植物體內(nèi)的碳氮代謝，來(lái)影響其次生代謝產(chǎn)物的含量[34-36]。各硝銨配比處理顯著促進(jìn)了銀杏苗葉生物量的積累，且隨著供硝比例的升高總體呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，硝銨配施優(yōu)于施用單一形態(tài)的氮素，施硝態(tài)氮的效果優(yōu)于施銨態(tài)氮。不同形態(tài)的氮素配合施用可提高銀杏葉的產(chǎn)量，但是其葉中活性成分含量的變化與葉片干質(zhì)量增加的趨勢(shì)不一致。氮肥顯著影響了銀杏苗葉中總黃酮和萜內(nèi)酯含量，其中高比例的硝銨配比處理和施用單一形態(tài)的氮素處理均有利于葉中總黃酮的積累，而低比例的硝銨配比處理不利于總黃酮的積累；各氮素處理均不利于葉中萜內(nèi)酯的積累，且各處理葉中萜內(nèi)酯含量均顯著低于對(duì)照。相對(duì)于葉中次生代謝物質(zhì)含量的變化，不同氮肥配比對(duì)于銀杏群體產(chǎn)量的影響更值得關(guān)注。氮肥顯著提高了銀杏苗葉總黃酮和萜內(nèi)酯的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，高比例的硝銨配比處理（T4）和單施硝態(tài)氮肥處理的效果最優(yōu)，結(jié)合氮肥對(duì)總黃酮和萜內(nèi)酯含量的影響，可知氮肥對(duì)銀杏苗葉總黃酮和萜內(nèi)酯經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量的正效應(yīng)主要是葉生物量貢獻(xiàn)的。

邢世巖等[37]在研究銀杏葉生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律時(shí)發(fā)現(xiàn)，4月15日—6月14日是銀杏單葉干質(zhì)量增加最快的階段，此階段葉干質(zhì)量生長(zhǎng)量占全年的96.30%，說(shuō)明銀杏屬于前期生長(zhǎng)型樹(shù)種，因此在植株生長(zhǎng)前期按照75∶25 的硝銨配比供應(yīng)足量氮肥利于葉的形態(tài)建成，可提高葉產(chǎn)量。本研究結(jié)論是在溫室盆栽條件下獲得的，所篩選出的硝銨配比應(yīng)進(jìn)一步通過(guò)大田試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，方可推廣應(yīng)用。