孫婷婷,郭 凡,伊爾夏提·地里夏提,賽亞爾·斯迪克
(1.伊犁師范大學 化學與環(huán)境科學學院,新疆 伊犁 835000;2.伊犁師范大學 化學與環(huán)境科學學院 新疆普通高等學校天然產(chǎn)物化學與應用重點實驗室,新疆 伊犁 835000)
沙棘為胡頹子科植物,是一種雌雄異株的落葉性灌木或小喬木。新疆光熱資源豐富,沙棘果及葉子的營養(yǎng)物質(zhì)含量較高[1-4]。沙棘耐寒冷、耐干旱,適應性強,可以在鹽堿化土地上生存,因此被廣泛用于水土保持。中國是沙棘資源最豐富的國家,沙棘面積占世界沙棘總面積的95%[5]。我國沙棘的故鄉(xiāng)是新疆,新疆地區(qū)沙棘總產(chǎn)量在我國的占比超過1/2。伊犁沙棘葉子小,植株高3~4 m,枝條和軀干生有鋒利的刺,屬于胡頹子科沙棘,在新疆天山南北都有分布。沙棘的根、莖、葉、花、果,特別是沙棘果實,含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)。新疆沙棘不僅是營養(yǎng)豐富的食品,還是治療心臟病、高血壓等疾病的良藥,健胃消食、活血散瘀,其葉片、果肉和種子含有豐富的黃酮類成分,具有止咳平喘、抗腫瘤等功效[6-11]。
伊犁的小檗系小檗科小檗屬植物,是中亞地區(qū)特有的集藥用、食用、生態(tài)、觀賞價值于一體的多年生帶刺落葉灌木,具有抗逆性強、抗寒、抗旱、耐修剪、耐鹽堿的特點[12-14]。研究結(jié)果表明,小檗屬植物含多種小檗堿類、酚酸類、黃酮類和有機酸類化合物,具有抗腫瘤、抗氧化、降血壓、改善記憶和抑菌等藥理作用[15-18]。小檗屬植物三顆針為我國藥典收錄藥材[19]。目前,國內(nèi)外對小檗屬植物的研究主要集中于根莖中的小檗堿類成分,對其他部位的研究相對較少。
黃銅是人體必需營養(yǎng)素,具有抗癌、抗氧化的作用且直接源于天然植物。黃酮類化合物幾乎存在于沙棘和小檗的所有部位[20-22]。為合理開發(fā)沙棘和小檗資源,提高資源的附加值、促進資源的深度加工利用,本實驗采用分光光度法對新疆伊犁河谷野生沙棘和小檗中總黃酮的質(zhì)量分數(shù)進行了比較研究。
實驗樣品是采自新疆伊犁河谷的野生沙棘和小檗果實,新鮮采集,自然晾干至恒重,待測。蘆丁標準品購自上海金穗生物科技有限公司,氫氧化鈉、無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁等試劑均為分析純。
紫外-可見分光光度計(UⅤ-2550,日本島津)。
沙棘和小檗果經(jīng)粉碎后分別過80目和100目的篩子,細粉于烘箱中60 ℃干燥4 h待用。
準確稱取0.030 4 g蘆丁標準品溶解轉(zhuǎn)入100.0 mL容量瓶,用95%乙醇定容至刻度線,搖勻,得0.300 0 mg/mL蘆丁對照品溶液。分別準確取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL蘆丁對照品溶液置于10.0 mL容量瓶中,加0.3 mL 5%亞硝酸鈉溶液,搖勻,放置6 min;加0.3 mL 10.000 0%硝酸鋁溶液,搖勻,放置6 min;添加4.0 mL 4%氫氧化鈉溶液以及95%乙醇定容至刻度,搖勻,放置12 min;在450~600 nm波長內(nèi)測定吸光度,確定510 nm處是最大吸收波長并測得吸光度A。以蘆丁對照品溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線,得到回歸方程:Y=0.065+0.003 52X,R=0.998 86。其中,Y為吸光度,X為黃酮質(zhì)量濃度,單位為“mg/mL”,在0.015 0~0.150 0 mg/mL線性關(guān)系良好。
測定小檗時,分別準確取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL蘆丁對照品溶液置于10.0 mL容量瓶中,其他同上?;貧w方程:Y=0.008 1+12.203 94X,R=0.999 18,在0.015 2~0.076 0 mg/mL線性關(guān)系良好。
分別稱取沙棘和小檗樣品5.000 0 g,加入100.0 mL乙醇浸泡24 h,控溫85 ℃,水浴加熱3 h、加熱回流5 h,趁熱過濾,分別加入100.0 mL無水乙醇溶解待測。
分別取沙棘和小檗樣品溶液1.0 mL和3.0 mL加入10.0 mL比色管,按與標準曲線相同的方法顯色測定。根據(jù)標準曲線計算出沙棘和小檗樣品總黃酮平均質(zhì)量分數(shù)分別約為1.24%和0.36%。
分別準確取0.2 mL沙棘標準溶液和0.5 mL樣品溶液置于10.0 mL比色管中,取0.5 mL小檗標準溶液和3.0 mL樣品溶液置于10.0 mL比色管中,按與標準曲線相同的方法顯色測定,測得沙棘和小檗平均回收率分別為97.540 0%、98.500 0%。
黃酮類化合物是中草藥的重要有效成分,在含有黃酮類成分的中草藥及其制劑生產(chǎn)中控制質(zhì)量和制定藥品標準時,多以黃酮類成分的質(zhì)量分數(shù)為依據(jù)。本實驗采用紫外-可見分光光度法測定伊犁河谷沙棘和小檗中總黃酮的質(zhì)量分數(shù),方法簡便、快速、準確率高。沙棘總黃酮平均質(zhì)量分數(shù)為1.235 9 mg/g,加樣回收率為97.540 0%,RSD為1.560 0%。沙棘和小檗果實含有黃酮類化合物,且總黃酮質(zhì)量分數(shù)較高,其降壓的藥理作用很有可能與此有關(guān)。由此可見,新疆沙棘和小檗有較高的營養(yǎng)保健價值和藥用價值,具有一定的開發(fā)利用前景和優(yōu)勢。