反芻動物梭菌性腸胃炎的防治

楊方敏/河南省濮陽市濮陽縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 457100

梭菌真胃炎和腸炎是家畜的常見臨床疾病，特別是在低日齡的反芻動物中。產(chǎn)氣莢膜梭菌A、B、C 和 D 型是最常見的原因，但也有報道稱由艱難梭菌引起的腸炎。商業(yè)產(chǎn)氣莢膜C 和 D型產(chǎn)氣莢膜疫苗可有效預(yù)防 B、C 和 D型菌株引起的疾病，但不能為 A 型菌株提供足夠的保護。當早期發(fā)現(xiàn)臨床病例時，如果及時提供治療，可能會得到較好的保護效果。預(yù)防接種和生物安全管控等方法與疾病的診斷和治療綜合統(tǒng)一的防治計劃有希望從反芻動物養(yǎng)殖場凈化產(chǎn)氣莢膜梭菌從而根除梭菌性腸胃炎。

1 發(fā)病原因

導(dǎo)致反芻動物產(chǎn)氣莢膜梭菌過度生長和毒素表達的潛在因素被認為是多因素的。梭菌性皺胃炎和腸胃炎涉及三個關(guān)鍵因素：一是胃腸道內(nèi)存在產(chǎn)氣莢膜梭菌，二是足夠的碳水化合物或蛋白質(zhì)等營養(yǎng)以支持細菌生長，三是胃腸道蠕動性降低導(dǎo)致胃腸道內(nèi)細菌階段性過度生長。

C 型產(chǎn)氣莢膜梭菌在動物生活的環(huán)境中無處不在，被認為是健康反芻動物的正常菌群。產(chǎn)氣莢膜梭菌通過糞便的排出在環(huán)境中持久存在很長時間。

由于產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的所有形式的消化道疾病似乎都與富含可溶性碳水化合物、蛋白質(zhì)或者同時含有兩種的飼料攝入量增加有關(guān)。大量飼喂谷物、反芻動物在谷物上覓食、突然獲得優(yōu)質(zhì)草料或在一段饑餓后過度喂食也被視為該病的影響因素。單獨喂食時攝入大量乳汁也會增加哺乳其反芻動物的患病風險。新生犢牛的梭菌性皺胃炎和腸炎與日常護理模式或環(huán)境變化有關(guān)，不良的牛乳衛(wèi)生、間接性喂食大量牛乳以及含有較高水平碳水化合物或蛋白質(zhì)濃度的代乳品是梭菌性腸胃炎的促成因素。

此外，有許多因素可降低腸道蠕動而增加梭菌性腸胃炎的患病概率。哺乳期的動物真胃排空可受單次喂養(yǎng)中大量飼喂、用食管喂食、高熱量和高滲透壓等因素影響而導(dǎo)致排空時間延長。腸道病原可改變動物腸道的蠕動運動方式，如輪狀病毒、冠狀病毒、隱孢子蟲和球蟲。產(chǎn)氣莢膜梭菌常和球蟲并發(fā)。其他因素如皺胃潰瘍、粗飼料過多、異物和礦物缺乏均可能與皺胃鼓氣有關(guān)病增加產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長。

2 臨床病理學

由于該疾病的發(fā)病機制主要是腸毒血癥，因此通常不會觀察到全身炎癥的跡象。CBC 可能顯示無左移和正常纖維蛋白原的中性粒細胞增多，提示生理反應(yīng)或應(yīng)激反應(yīng)。血清化學的大多數(shù)參數(shù)是正常的。如果全身性休克導(dǎo)致腎灌注減少，則肌酐和/或血尿素氮水平可能會升高?；加?D 型腸毒血癥的綿羊和山羊可能會出現(xiàn)高血糖和糖尿?？偟鞍姿酵ǔ２粫黾樱驗樵诔毙曰蚣毙圆±型ǔ２淮嬖谌硇悦撍?。由于腸梗阻和皺胃排空延遲，血清氯化物可能降低，早期病例可能存在代謝性堿中毒。代謝性酸中毒和乳酸水平升高在疾病后期很常見。

3 診斷

產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的皺胃炎或腸炎在明確診斷中具有挑戰(zhàn)性，必須依靠臨床體征、大體和微觀病理學以及微生物檢測試驗來證實產(chǎn)氣莢膜梭菌的存在。多重PCR 方法目前用于將產(chǎn)氣莢膜梭菌分為不同的毒素型或基因型，常檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌的編碼外毒素的毒力基因。毒素基因存在反映了產(chǎn)生該毒素的潛力。重要的是，應(yīng)注意致死毒素的表達在特定基因型內(nèi)的臨床分離株之間可存在差異。因此，應(yīng)注意每個基因型內(nèi)分離株的潛在致病性可能是可變的。反芻動物腸腔內(nèi)產(chǎn)氣莢膜梭菌培養(yǎng)結(jié)果為陽性結(jié)果的解釋過程是一件復(fù)雜的事情。C 型產(chǎn)氣莢膜梭菌可在正常動物腸道內(nèi)生存，而在動物死亡后產(chǎn)氣莢膜梭菌可在腸腔內(nèi)過度生長。因此根據(jù)病史、臨床癥狀和新鮮樣品中分離出產(chǎn)氣莢膜梭菌才具有意義。產(chǎn)氣莢膜梭菌很容易在體外培養(yǎng)，C 型產(chǎn)氣莢膜梭菌在厭氧培養(yǎng)基中可快速生長，并可使其他潛在的病原體過度生長。盡管產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定培養(yǎng)有助于區(qū)分正常菌群和過度生長菌群，但近期對犢牛的一項研究表明，正常的犢牛和患梭菌性腸炎的犢牛之間細菌計數(shù)幾乎無明顯差異。因此，梭菌性皺胃炎或腸炎的診斷需要綜合觀察，包括動物的臨床癥狀、剖檢是否存在出血性皺胃炎或腸炎、皺胃和腸內(nèi)容物糞便或組織黏膜表面是否有大量革蘭氏陽性桿菌、從真胃或腸道內(nèi)容物糞便或組織樣品中培養(yǎng)出大量產(chǎn)氣莢膜梭菌、通過小鼠或ELISA 證明外毒素存在。上述檢測的樣品包括用于細菌學評估的真胃或腸內(nèi)容物或糞便，受感染的胃腸道黏膜表面用于細菌學檢測包括革蘭氏染色，用于厭氧培養(yǎng)和基因型PCR 鑒定的腸道內(nèi)容物、組織或糞便（應(yīng)在動物死亡前和/或死亡后立即收集樣品，以免正常的死亡后的梭菌過度生長），真胃、小腸和結(jié)腸浸泡于10%福爾馬林用于組織病理學檢測，如果觀察到神經(jīng)系統(tǒng)體征并且懷疑為產(chǎn)氣莢膜梭菌D型則用10%福爾馬林浸泡腦組織進行組織病理學檢查，用于毒素檢測的冷藏或冷凍的腸內(nèi)容物。

4 治療

關(guān)于產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的皺胃炎和腸炎的治療方法有效性的信息十分有限。皺胃或腸道梭菌病的治療應(yīng)側(cè)重于6 個目標：（1）緩解腹脹，尤其是由于橫膈膜上的腹部壓力而影響到動物呼吸；（2）對重度腹瀉脫水的動物使用靜脈注射的方式進行補液以維持全身營養(yǎng)支持；（3）防止病原菌的持續(xù)增殖；（4）減少或防止梭菌外毒素產(chǎn)生并中和外毒素；（5）恢復(fù)動物正常胃腸道菌群；（6）根據(jù)動物臨床表現(xiàn)進行止痛。

梭菌性皺胃炎和腸炎的腹脹是由真胃和/或小腸的氣體和液體膨脹引起的。氣體膨脹是腸梗阻和細菌產(chǎn)氣相結(jié)合的結(jié)果。在大多數(shù)情況下，通過口胃管并不能提供顯著的緩解。如果膨脹嚴重到影響呼吸，則可以進行真胃經(jīng)皮減壓。這種減壓最好在動物背部或左側(cè)臥位時進行?？梢允占瘡尼橆^排出的液體，用于厭氧培養(yǎng)、PCR 分型或毒素檢測。在取下針頭之前，可以將抗菌劑和C 型產(chǎn)氣莢膜C 和 D 型抗毒素直接注入真胃。

全身營養(yǎng)支持通常包括靜脈輸液。因為動物通常有腸梗阻和腹脹，所以在腹脹消退之前(通常12～24h)，不需要口服液體，包括牛奶。靜脈輸液為治療這些患者中經(jīng)常觀察到的血容量不足或分布不均的休克提供全身支持。一些患有梭菌性腸炎的動物沒有表現(xiàn)出明顯的臨床脫水，很可能是因為毒素的快速作用。許多患有梭菌性腸炎的動物表現(xiàn)出由腸梗阻和皺胃排空延遲引起的輕度至中度低氯性代謝性堿中毒。因此，等滲氯化鈉是解決低氯性堿中毒(如果存在)的合適初始液體類型。處于疾病晚期的動物可能會出現(xiàn)代謝性酸中毒，需要在體液中加入碳酸氫鈉。可在休克后或最初12h 內(nèi)將靜脈輸液改為平衡電解質(zhì)溶液。

抗微生物劑用于減緩或阻止胃腸道中梭菌的增殖。困難在于細菌存在于管腔內(nèi)，因此必須選擇有效的抗微生物治療，以便將合適的抗微生物劑遞送至真胃和小腸的管腔。許多抗菌劑對產(chǎn)氣莢膜梭菌有效。青霉素是殺死產(chǎn)氣莢膜梭菌最有效的抗生素之一;然而，青霉素不會立即殺死細菌。在初始階段，細菌可能會繼續(xù)產(chǎn)生和釋放致命的外毒素。此外，全身給藥的青霉素通過腎臟系統(tǒng)排泄，并且極少地排泄或分泌到胃腸道中。因此，可推薦口服普魯卡因青霉素 G(22，000 IU/kg，口服，每24h 一次，持續(xù)3～5d)進行治療。大多數(shù)產(chǎn)氣莢膜梭菌分離株對土霉素敏感。土霉素是一種抑制蛋白質(zhì)合成的抑菌劑。土霉素在體外減少產(chǎn)氣莢膜梭菌毒素的產(chǎn)生比青霉素更快。全身給藥的土霉素部分通過肝臟和膽道系統(tǒng)排泄，并通過膽總管進入胃腸道腔。

除了給予適當?shù)目刮⑸锼幬锿?，還可以通過暫停母乳喂養(yǎng)12～24h 來減少細菌增殖。在藥物治療成功的情況下，犢牛一般可在12～24h 內(nèi)哺乳。至關(guān)重要的是，在此之后，以更頻繁的間隔(每4～6h)以小量緩慢地重新開始母乳喂養(yǎng)。過度喂養(yǎng)會導(dǎo)致產(chǎn)氣莢膜梭菌過度生長的復(fù)發(fā)。一旦恢復(fù)口服攝入，嘗試恢復(fù)正常的菌群也可能是有益的?？诜迈r瘤胃液可能有助于恢復(fù)受影響動物的正常胃腸道菌群?；蛘?，可以使用市售的益生菌。留置鼻胃管的放置極大地方便了不能迅速恢復(fù)護理活動的患者頻繁使用口服藥物和異物移植。

5 疫苗接種

疫苗接種被認為是家畜梭菌疾病預(yù)防計劃的基石。傳統(tǒng)的商業(yè)產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌C 和 D 或類毒素疫苗在預(yù)防低日齡動物中由產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌B、C 和 D 型引起的疾病方面非常有效。在綿羊和山羊方面，三聯(lián)四防疫苗接種率在我國較高，但牛梭菌性疫苗接種情況不容樂觀，尤其是在散養(yǎng)戶或小規(guī)模養(yǎng)殖場該現(xiàn)象更為普遍。應(yīng)根據(jù)當?shù)厮缶〉牧餍星闆r制定合理的疫苗接種方案以減少由梭菌病造成的經(jīng)濟損失。此外，應(yīng)加強對養(yǎng)殖人員和獸醫(yī)工作者的培訓(xùn)，使得針對性的使用疫苗防控梭菌病。