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      蟲草真菌多糖的生產(chǎn)工藝研究進展

      2022-03-14 05:55:48韓鵬飛黃貴強
      關(guān)鍵詞:蟲草液態(tài)固態(tài)

      韓鵬飛 黃貴強

      (1大連大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,遼寧 大連 116622;2六盤水師范學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,貴州 六盤水 553004)

      蟲草菌是廣義蟲草屬(Cordyceps s.l.)真菌的統(tǒng)稱,其種類繁多且分布廣泛,主要寄生于昆蟲、少數(shù)植物和真菌中[1]。世界上已報道約1 000余種蟲草菌,國內(nèi)報道的蟲草菌約100種,蟲草真菌能產(chǎn)生多糖、蟲草素、蟲草酸、超氧化物歧化酶和氨基酸等多種生物活性物質(zhì),其中多糖具備抗腫瘤、抗炎、降血脂和清除自由基等功能,在抗氧化方面功能尤為顯著,被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、飼料、食品等領(lǐng)域[2-6]。

      蟲草多糖具有較強的抗氧化能力,蟲草多糖的抗氧化活性主要是通過清除細胞產(chǎn)生的氧自由基來實現(xiàn)的。對于細胞來說,長期的氧化應(yīng)激會造成細胞衰老。正常情況下,人的機體會刺激體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)來應(yīng)對細胞的氧化,如肝臟中含有超氧化物歧化酶和過氧化氫酶,能夠消除體內(nèi)過多的自由基,維持細胞的平衡[7]。測定其抗氧化能力的方法包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率測定、羥基自由基清除率測定、總還原力測定、2,2'-聯(lián)氮-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率測定等[8]。研究較多的菌株是冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)、蛹蟲草(Cordyceps militaris)、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、布 氏 白 僵 菌(Beauveria brongniartii)等[1][6]。

      蟲草多糖由于其突出的活性能力,工業(yè)化生產(chǎn)蟲草多糖就變得尤為重要,而生產(chǎn)的關(guān)鍵不僅在于產(chǎn)量提高,還包括提高蟲草多糖的提取率[9-10]。

      蟲草多糖的提取方法比較多,有熱水浸提法、超聲波提取法等,通過優(yōu)化提取工藝,可以提高蟲草多糖提取率[11]。目前關(guān)于蟲草多糖的生產(chǎn)主要通過液態(tài)發(fā)酵和固態(tài)發(fā)酵的方式進行[12]。要將蟲草多糖應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域,還應(yīng)將提取出的蟲草多糖進行純化和制成藥劑等。純化蟲草多糖的方法有蛋白脫除法、大孔吸附樹脂法、柱層析法等[13-15];蟲草多糖的制劑類型有菌粉狀、顆粒狀等[16-17]。

      本文將基于已有的研究報道,對蟲草多糖的發(fā)酵研究、提取工藝、抗氧化活性測定、純化和制劑類型等方面進行梳理,為以后工業(yè)化生產(chǎn)蟲草多糖的最適發(fā)酵條件和提取工藝提供參考。

      1 蟲草多糖的發(fā)酵研究

      目前野生蟲草真菌產(chǎn)生的多糖含量較低,為了提高蟲草真菌多糖的表達量,研究人員采用固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵方法來提高多糖產(chǎn)量。液態(tài)發(fā)酵中的液體深層雙向發(fā)酵是目前能夠用于工業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)酵手段,能夠較大產(chǎn)量地發(fā)酵生產(chǎn)多糖;蟲草真菌的固態(tài)發(fā)酵研究相對較多,固態(tài)發(fā)酵的培養(yǎng)基以小麥、大米、玉米等為主,具備成本低廉和低能耗等特點[18]。研究表明,固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵方法各有優(yōu)缺點,其發(fā)酵方式對比如表1所示。

      表1 蟲草真菌多糖的發(fā)酵方式對比

      對不同的蟲草真菌采用適合的方法能夠進一步減少生產(chǎn)成本,提高生產(chǎn)效率。

      1.1 蟲草多糖的固態(tài)發(fā)酵

      以固態(tài)培養(yǎng)基代替蟲、蛹進行蟲草真菌培養(yǎng),能進一步縮短蟲草真菌的生長周期,獲得較多的蟲草子實體,從而提高活性物質(zhì)的產(chǎn)量,增大經(jīng)濟效益。關(guān)于蟲草真菌在固態(tài)發(fā)酵條件下產(chǎn)蟲草多糖的研究相對較少,較難實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化,但其發(fā)展前景較廣闊。根據(jù)目前蟲草真菌在固態(tài)發(fā)酵條件下生產(chǎn)多糖的研究表明:以玉米、小麥、大米等產(chǎn)量較高的農(nóng)作物作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基進行蟲草真菌發(fā)酵培養(yǎng),蟲草真菌產(chǎn)多糖的含量相對較高。如王明瑞等[20]利用玉米粉和麩皮為原料制作的固體培養(yǎng)基(玉米粉:麩皮=18 g:2 g)生產(chǎn)蟲草多糖,結(jié)果表明胞外浸提液中蟲草多糖的含量為3.23 mg/mL;懷美玉等[21]以野黑麥培養(yǎng)蛹蟲草,得到子實體中多糖含量為15.41%;何雯雯等[22]在小麥培養(yǎng)基上發(fā)酵蛹蟲草,多糖含量高達5.45%;徐玲等[23]以大米為培養(yǎng)基主要成分培養(yǎng)蛹蟲草,蟲草多糖產(chǎn)量最高為68.3 mg/g干基質(zhì)。

      在蟲草真菌生長的過程中,其產(chǎn)生的多糖一部分儲存在蟲草的子實體中,另外一部分則通過代謝釋放到培養(yǎng)基中,因此蟲草多糖可分為胞內(nèi)多糖和胞外多糖[24]。由于固態(tài)發(fā)酵的菌絲體與培養(yǎng)基成分無法完全進行分離,因此目前固態(tài)發(fā)酵研究中測定的蟲草多糖含量是胞內(nèi)多糖和胞外多糖的總含量[20]。

      固態(tài)發(fā)酵方法的培養(yǎng)基質(zhì)主要是農(nóng)作物和廢渣廢料,成本相對較低,而且不易污染,下游處理簡易,產(chǎn)物含量高,操作簡便;固態(tài)發(fā)酵也在某種程度上保留了蟲草真菌的自然生長狀態(tài),使蟲草多糖的產(chǎn)量有所提高,可以給予蟲草真菌生產(chǎn)多糖提供研究參考。

      1.2 蟲草多糖的液態(tài)發(fā)酵

      目前,關(guān)于蟲草真菌的發(fā)酵主要是以液態(tài)發(fā)酵為主,液態(tài)發(fā)酵又分為淺層發(fā)酵和深層發(fā)酵,使用最廣泛的是液態(tài)深層發(fā)酵技術(shù)。液態(tài)發(fā)酵的目的是提高初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物[19],同時也更容易大批量發(fā)酵而應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),液態(tài)深層發(fā)酵能夠完成一次性收集料液,具有縮短生產(chǎn)周期、提高生產(chǎn)效率等特點。

      液態(tài)發(fā)酵能大幅度提高蟲草真菌代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量,是研究人員普遍使用的方法之一。樊金華等[25]以工業(yè)化生產(chǎn)為目的對布氏白僵菌發(fā)酵進行單因素優(yōu)化,得到以氮源為黃豆粉或者玉米粉、碳源為可溶性淀粉、pH值為5.0的培養(yǎng)基進行液態(tài)發(fā)酵13 d,產(chǎn)生的孢子數(shù)量最多,根據(jù)布氏白僵菌產(chǎn)生芽生孢子不耐儲藏的特性,得到一種最適的產(chǎn)生孢子的方法,為接下來工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。Ke BJ等[26]用蟬花進行固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵,以腺苷和多糖含量作為指標,得出把0.2%的酵母提取物加入到馬鈴薯液體培養(yǎng)基中,在100 r/min,24℃條件下培養(yǎng)10 d產(chǎn)生的蟬花腺苷和蟬花多糖含量均高于固態(tài)發(fā)酵,0.2%的酵母提取物能夠提高蟬花的活性物質(zhì)產(chǎn)量,為蟬花的活性物質(zhì)工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。胡永樂等[27]以中藥厚樸作為培養(yǎng)基成分,利用響應(yīng)面法優(yōu)化蛹蟲草液態(tài)發(fā)酵條件生產(chǎn)菌絲體和胞外多糖,在發(fā)酵過程中,發(fā)現(xiàn)胞外多糖含量受接種量的影響,菌絲體生物量受溫度的影響,經(jīng)過測定胞外多糖和菌絲體含量,最終得到在厚樸添加量3.3%、接種量10.3%、25℃的條件下培養(yǎng)9 d,胞外多糖含量為3.11 mg/mL,菌絲體量為18.81 mg/mL。

      蟲草真菌的液態(tài)發(fā)酵研究伴隨其代謝產(chǎn)物功能的研究而不斷探索,為了進一步提高蟲草真菌代謝產(chǎn)物含量,液態(tài)深層發(fā)酵技術(shù)被提出,并應(yīng)用于實驗室和工業(yè)化生產(chǎn)當中。對于液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)蟲草多糖的研究成果相對較多,部分成果已實現(xiàn)了量級生產(chǎn)[28]。

      液態(tài)發(fā)酵更容易控制發(fā)酵條件,是目前產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的主流研究方向,能夠?qū)⒕w和發(fā)酵基質(zhì)分離,能為發(fā)酵中的蟲草真菌精準提供所需化合物,能夠定向合成蟲草真菌多糖,最大化地利用原料。

      2 蟲草多糖的提取工藝

      蟲草多糖在蟲草真菌細胞內(nèi)產(chǎn)生,通過蟲草真菌體內(nèi)的關(guān)鍵酶(半乳糖激酶和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶)的基因調(diào)控[29],產(chǎn)生蟲草多糖,因此需要對胞內(nèi)和胞外多糖進行提取,才能獲得最終的蟲草多糖產(chǎn)量。液態(tài)發(fā)酵條件下的胞外多糖的提取相對簡便,即通過發(fā)酵液濃縮,Sevage法除蛋白和乙醇沉降,再利用透析法除去小分子糖類(如葡萄糖),即可得到胞外多糖。胞內(nèi)多糖相對不易獲?。?7],目前關(guān)于胞內(nèi)多糖的提取方法主要有:熱水浸提法、微波輔助提取法、酶提取法、超聲提取法和亞臨界水浸提法等,具體如表2所示。

      表2 蟲草胞內(nèi)多糖的提取工藝對比

      2.1 熱水浸提法

      熱水浸提法[30]是傳統(tǒng)的多糖提取方法,利用高溫破壞真菌的細胞壁和細胞膜,使細胞內(nèi)容物釋放到胞外,其次利用醇沉等方法得到胞內(nèi)多糖。熱水浸提法具有操作簡便、適用范圍廣、廉價等優(yōu)點;但也存在提取時間長、提取不充分的缺點。不過,這種方法依舊是使用較廣泛的多糖提取方法之一。

      師景雙等[31]用熱水浸提法對獲取蟲草多糖進行了研究,最終得到蛹蟲草多糖的最適提取工藝,即在菌粉粉碎至80目、料液比為1:20、水浴提取溫度為65℃、提取時長2 h、提取次數(shù)為3次的條件下,蟲草多糖的獲得率最高,為10.42%。王小愛等[32]通過對蟲草多糖的料液比、提取溫度、提取時間、浸提次數(shù)的研究,獲取了最佳的提取工藝參數(shù),即在料液比為1:40、提取溫度為80℃、提取時間為1.5 h、提取2次的條件下,蟲草多糖的獲得率最高,為74.65 mg/g,比優(yōu)化提取條件前的蟲草多糖提取含量提高了14.96%。黃振峰等[33]通過正交試驗對蟲草多糖提取工藝的研究,得到熱水浸提法的最優(yōu)參數(shù)為:料液比為1:40、提取時間為150 min、提取溫度為75℃、提取次數(shù)為2次,多糖得率達到14.74%,同時若以冷水和熱水交替浸提多糖,多糖得率將再次提高,按照上述的參數(shù)進行熱水浸提150 min,冷水浸提48 h,多糖得率提高了8%。

      2.2 微波輔助提取法

      微波輔助提取法[34]是指利用樣品或者溶劑中的偶極分子在微波能的作用下,短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的熱量,加速了溶劑對樣品的滲透,使目的產(chǎn)物溶解于溶劑中,便于提取目的產(chǎn)物。該方法的穿透能力較強,節(jié)約溶劑、工藝簡單,也可聯(lián)合其他方法一起使用,被提取物的提取效率較高,后處理也相對方便。

      何雯雯等[21]將蛹蟲草接種在小麥培養(yǎng)基中發(fā)酵生產(chǎn)蟲草多糖,然后利用微波提取法提取蛹蟲草多糖,首先將蛹蟲草子實體進行干燥粉碎,按照料液比為1:50、微波功率為400 W、提取時間為2 h,最終多糖得率為5.45%。郭璐等[35]將忍冬桑黃和蛹蟲草共同發(fā)酵產(chǎn)出多糖,通過微波提取法提取多糖,提取參數(shù)如下:料液比為1:40、溫度為70℃、微波功率為600 W、提取時間為1.5 h,多糖提取率為29.18±1.53 mg/g。

      2.3 酶提取法

      酶提取法[36]指的是利用酶水解真菌細胞壁(主要成分為幾丁質(zhì)和纖維素等),從而使細胞內(nèi)容物流出,獲取目標物質(zhì)的方法。酶具有高效性、專一性、催化能力強等特性,能夠快速地消除細胞壁,使提取時間大幅縮減,但是需要選擇合適類型的酶,保證細胞壁能被最大程度地破壞,同時又不損失目標物質(zhì)。酶提取法還需要嚴格控制反應(yīng)條件,進一步提高酶的催化效率。酶提取法比較省時省力,節(jié)約時間,但成本相對較高,無法用于大規(guī)模的生產(chǎn),反應(yīng)條件不易控制。

      汪振炯等[37]利用纖維素酶協(xié)同微波法研究了蛹蟲草多糖的提取工藝,通過多因素優(yōu)化,最終得出在料液比1:30、溫度55℃、pH 5.5、纖維素酶量為1 650 U/g、處理樣品44 min的條件下進行微波提取,提取參數(shù)為微波功率480 W、提取時間為3.5 min,蛹蟲草多糖得率為18.45%。葛靜波等[38]通過復(fù)合酶對蛹蟲草多糖的提取進行了研究,得到的最優(yōu)提取參數(shù)為:料液比為1:20、堿性蛋白酶加入量為3%、淀粉酶加入量為1%、纖維素酶加入量為3%、溫度為50℃、酶處理4 h,最終蛹蟲草多糖的提取率為18.42%。李慧等[39]采用酶提取法聯(lián)合超聲波提取法進行了蟲草花多糖提取工藝的研究,結(jié)論為:在料液比為1:50、纖維素酶0.18%、超聲溫度為53℃、超聲功率為175 W、超聲31 min的條件下,多糖得率最高,為6.441%。楊(Yang)等[40]通過酶輔助法研究蟲草多糖的提取工藝,在料液比為1:20、纖維素酶添加量為2.0%、pH為4.0、酶解溫度40℃時,蟲草多糖提取率達到5.99%。

      2.4 超聲提取法

      超聲提取法[41]指的是在超聲波的作用下使細胞壁能夠快速破裂,內(nèi)容物溶解于溶劑中,聲波能量轉(zhuǎn)化為熱能,能加快內(nèi)容物溶解,內(nèi)容物吸收聲波能量引起的升溫是瞬時的,不會破壞細胞內(nèi)的提取物。超聲波提取法不需加熱、提取效率高、節(jié)約成本、不會破壞大多數(shù)物質(zhì)的生理活性,具備高效、綠色、經(jīng)濟等優(yōu)點,能夠?qū)崿F(xiàn)協(xié)同萃取,但是會對一些熱敏性物質(zhì)造成損傷。

      呂偲丞等[42]通過響應(yīng)面法來確定超聲提取法提取多糖的最優(yōu)參數(shù),通過多糖含量測定,在超聲波功率為1800 W、溫度為65℃、超聲提取180 min的條件下,蟲草多糖提取含量達到31.56%。王振吉等[43]通過研究蟲草花多糖的提取工藝,發(fā)現(xiàn)在料液比為1:30、超聲波功率為300 W、溫度為45℃、超聲30 min的條件下,蟲草多糖的平均提取含量達到3.88%。賈有青等[44]通過對超聲時間、超聲溫度和料液比進行了多糖提取工藝的研究,得出在料液比為1:40、超聲溫度為50℃的條件下處理30 min,蟲草多糖的提取率達到4.85%。

      2.5 亞臨界水浸提法

      亞臨界水浸提法[45]指在一定的壓力下,使水的沸點升高,由于水是極性化合物,隨著溫度和壓力的升高,水會從極性逐漸變?yōu)榉菢O性,隨之將非極性的物質(zhì)溶出,使有效成分得以提取。

      楊文雅等[46]利用亞臨界水浸提法對蟲草多糖提取進行了單因素和多因素研究,結(jié)果為:在料液比為1:21、溫度為180℃、pH為8.0、萃取13 min的條件下,蟲草多糖的提取含量達到7.13%。

      3 蟲草多糖的抗氧化活性測定

      目前測定抗氧化活性的方法主要是化學(xué)方法,如DPPH法、ABTS法和亞鐵離子還原法等。劉城移等[23]以H2O2誘導(dǎo)人正常肝細胞(L-O2)氧化損傷為模型,對比禪蟲草的胞內(nèi)多糖和胞外多糖的抗氧化能力,胞外多糖相比胞內(nèi)多糖不僅能極大提高細胞存活率,同時顯著提高細胞內(nèi)超氧化物歧化酶和過氧化氫酶(CAT)的活力,降低細胞活性氧(ROS)水平,使細胞的抗氧化能力加強,氧化損傷降低。

      3.1 ABTS自由基清除能力測定

      ABTS法測定自由基是一種使用較廣泛的方法,主要是通過ABTS與過硫酸鉀反應(yīng)生成穩(wěn)定存在的且呈現(xiàn)為藍綠色的ABTS自由基,在734 nm下具有較大的吸收能力,通過測定物質(zhì)的加入,若ABTS自由基的吸光度值降低,則表明該物質(zhì)具備抗氧化能力,吸光度值降低得越大,抗氧化能力就越強[47]。

      3.2 DPPH自由基清除能力測定

      DPPH是一種比較穩(wěn)定的物質(zhì),用乙醇配置成溶液以后,溶液呈現(xiàn)為紫色,若加入抗氧化活性物質(zhì),DPPH會捕捉一個電子與游離電子進行配對,使得溶液由紫色轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色,在517 nm處的吸收較強,而DPPH轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色的量與抗氧化物質(zhì)的量呈線性關(guān)系,能夠較容易地判斷該物質(zhì)的抗氧化能力強弱[48]。

      3.3 羥基自由基(·OH)清除能力測定

      羥基自由基清除能力測定是通過芬頓(Fenton)反應(yīng)中二價鐵離子與過氧化氫反應(yīng)生成羥基自由基,羥基自由基會與水楊酸溶液反應(yīng)生成2,3-二羥基苯甲酸,在510 nm下有特殊吸收值,通過抗氧化物質(zhì)對羥基自由基的消除,能夠減少2,3-二羥基苯甲酸的生成,從而測定出該物質(zhì)的抗氧化能力[49]。此實驗中需注意:過氧化氫或者水楊酸應(yīng)最后加入,以減少實驗誤差。

      3.4 超氧自由基(O2-·)清除能力測定

      超氧自由基清除測定包括鄰苯三酚自氧化法和核黃素-氮藍四唑(NBT)光還原法。核黃素-NBT光還原法[50]原理是黃嘌呤在有氧條件下,被黃嘌呤氧化酶催化產(chǎn)生超氧自由基,超氧自由基會與NBT結(jié)合使溶液呈現(xiàn)為藍色,在560 nm下具有較大吸收值,抗氧化物質(zhì)的清除能力與溶液的顏色成反比。

      鄰苯三酚自氧化法[51]的原理是在堿性條件下,鄰苯三酚能夠自我氧化,生成有色產(chǎn)物和超氧自由基,通過加入抗氧化物質(zhì),鄰苯三酚自氧化速率降低,產(chǎn)生的有色產(chǎn)物減少,在325 nm下有較大吸收值,進而測定出該物質(zhì)的抗氧化能力。該方法對溫度和pH較為敏感,而pH與溫度的相關(guān)性較大,因此在實驗過程中需要嚴格控制溫度。

      4 蟲草多糖純化方法和制劑類型

      4.1 蟲草多糖純化方法

      4.1.1 蛋白脫除法

      蛋白脫除純化法是指除去蟲草粗多糖中的蛋白質(zhì)雜質(zhì),達到蟲草多糖純化的一種方法。目前蛋白脫除純化法主要利用是Sevage試劑(由氯仿和正丁醇組成)進行蛋白脫除,Sevage試劑會使蟲草多糖中的蛋白質(zhì)變性,形成不溶于醇和水的沉淀,但是此方法對蟲草多糖的損耗率較大,且試劑具有一定的危險性[14]。

      4.1.2 大孔吸附樹脂法

      大孔吸附樹脂是一類有機高聚物吸附劑,具備吸附和分子篩分離等功能,具有較好的吸附分離性能,不會影響物質(zhì)活性,分離效果較好,是目前常用的分離純化的方法之一[15]。

      4.1.3 柱層析法

      柱層析法是根據(jù)樣品中成分與硅膠物質(zhì)的吸附力不同或者樣品中成分大小不同進行分離純化的方法,如DEAE-52柱層析和交聯(lián)葡聚糖(Sephdex)-100葡聚糖凝膠柱層析等。此方法具備操作簡便、可重復(fù)使用和分離效果較好等特點,也是目前分離純化常用的方法[16]。

      4.2 蟲草多糖制劑類型

      由于蟲草多糖具有較廣泛的活性功能,能被應(yīng)用于醫(yī)療行業(yè)。但蟲草多糖產(chǎn)量較少,因此為了最大化利用蟲草多糖,可根據(jù)不同目的將蟲草多糖制備成不同的制劑類型,如液體狀、菌粉狀和顆粒狀等[17-18]。合理化地將蟲草多糖制備成各種試劑類型,不僅能實現(xiàn)資源最大化利用,還能降低成本。

      5 總結(jié)與展望

      綜上可知,目前關(guān)于蟲草多糖發(fā)酵生產(chǎn)的研究大多只應(yīng)用于實驗室階段,而要滿足工業(yè)化生產(chǎn)條件、大批量獲取蟲草多糖的研究報道相對較少,且以天然產(chǎn)物作為主要的發(fā)酵培養(yǎng)基成分的比例不高,進一步提高了發(fā)酵的成本,也是無法進行工業(yè)化生產(chǎn)的限制條件之一。蟲草真菌的固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵對于不同的菌株會得到不同的發(fā)酵產(chǎn)物和產(chǎn)量。根據(jù)目前的研究報道,液態(tài)發(fā)酵的多糖含量高于固態(tài)發(fā)酵,但是固體發(fā)酵的成本要低于液態(tài)發(fā)酵。由于菌株的不同,所得到的結(jié)果也不相同,因此結(jié)合液態(tài)發(fā)酵和固態(tài)發(fā)酵的手段來提高蟲草多糖的產(chǎn)量,也將是未來研究蟲草真菌生產(chǎn)蟲草多糖的方式方法。

      固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵都可以提高蟲草真菌多糖的產(chǎn)量,但還須要對蟲草多糖的提取工藝進行優(yōu)化,獲得最佳的提取工藝。提取工藝的選擇和應(yīng)用不能破壞多糖結(jié)構(gòu)、影響多糖活性,提高多糖的抗氧化、抗腫瘤等生物活性。蟲草多糖的純化應(yīng)該盡可能地去除雜質(zhì),同時減少多糖損失,提高蟲草多糖純化率,因此對于純化方法應(yīng)該不斷地去探究,可結(jié)合多種純化方法,以期達到最大化純化效率,如結(jié)合蛋白脫出法和大孔樹脂吸附法來純化蟲草多糖。蟲草多糖的制劑類型由使用目的決定,能提高多糖利用率,降低制劑成本。

      隨著新型技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用,蟲草多糖的提取率大幅提升,加快了蟲草真菌產(chǎn)生的活性物質(zhì)的研究,也為中藥工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。但工業(yè)化生產(chǎn)仍需考慮成本、操作難度、使用條件等問題,因此發(fā)酵生產(chǎn)方法的融合將是未來進一步研究蟲草多糖生產(chǎn)的方向。

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