劉敏　王啟芝　劉雨　柏正平

〔摘要〕 目的 探討復(fù)方葶藶子湯對(duì)慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease， COPD）相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓（pulmonary arterial hypertension， PAH）大鼠肺血管重塑的影響及機(jī)制。方法 將90只SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和西藥組。正常組大鼠正常喂養(yǎng)，其余組大鼠均采用煙熏加氣管滴注脂多糖構(gòu)建COPD-PAH大鼠模型。低劑量組、中劑量組、高劑量組予復(fù)方葶藶子湯（生藥量分別為2.56、5.13、10.26 g/kg），西藥組予辛伐他汀2.5 mg/kg，模型組予以等量0.9%生理鹽水，給與相應(yīng)藥液（10 mL/kg），在實(shí)驗(yàn)第60天開(kāi)始，每天灌胃1次，連續(xù)14 d。HE染色觀察肺組織病理變化，Masson染色觀察肺小動(dòng)脈膠原沉積，免疫組化觀察肺組織增殖指標(biāo)增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen， PCNA）的變化，Western blot檢測(cè)細(xì)胞焦亡通路NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平。結(jié)果 與正常組相比，模型組出現(xiàn)典型的COPD-PAH病理變化，肺小動(dòng)脈膠原沉積面積、PCNA表達(dá)及肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白水平均增加（P<0.05）;與模型組相比，中劑量組、高劑量組和西藥組肺組織病理變化明顯改善，肺小動(dòng)脈膠原沉積面積、PCNA表達(dá)及肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白水平均減少（P<0.05）;與低劑量組相比，中劑量組、高劑量組和西藥組肺組織病理變化明顯改善，肺小動(dòng)脈膠原沉積面積、PCNA表達(dá)均及肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白水平均減少（P<0.05）;與中劑量組相比，高劑量組肺組織病理變化明顯改善，肺小動(dòng)脈膠原沉積面積、PCNA表達(dá)及肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白水平均減少（P<0.05）。結(jié)論 復(fù)方葶藶子湯可通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡，改善COPD-PAH大鼠的肺血管重塑，且隨著復(fù)方葶藶子湯劑量的增加，COPD-PAH大鼠的肺血管重塑改善效果越明顯。

〔關(guān)鍵詞〕 復(fù)方葶藶子湯;NLRP3;細(xì)胞焦亡;肺血管重塑;慢性阻塞性肺疾病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓

〔中圖分類(lèi)號(hào)〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.03.006

〔Abstract〕 Objective To investigate the effects and mechanisms of Compound Tinglizi Decoction on pulmonary vascular remodeling in rats with chronic obstructive pulmonary disease （COPD）-pulmonary arterial hypertension （PAH）. Methods Ninety SD rats were randomly divided into normal group， model group， low-dose group， middle-dose group， high-dose group and western medicine group. The rats in the normal group were fed normally， and the rats in the other groups were all used to construct the COPD-PAH rat model by smoke plus tracheal drip of lipopolysaccharide. The low-dose group， middle-dose group， and high-dose group were given Compound Tinglizi Decoction （the crude drug doses were 2.56， 5.13， and 10.26 g/kg， respectively）， the western medicinegroup was given simvastatin 2.5 mg/kg， and the model group was given the same amount of 0.9% physiological saline administered， with the corresponding drug solution （10 mL/kg）， and from the 60th day of the experiment， the rats were given intragastrical once a day for 14 consecutive days. Histopathological changes in the lungs of rats in each group were observed by HE staining. Collagen deposition in small pulmonary arteries was observed by Masson staining. Changes in proliferation indicators proliferating cell nuclear antigen （PCNA） in lung tissue were observed by immunohistochemistry. Protein levels of NLRP3， Caspase-1， GSDMD， IL-1β， IL-18 in pyroapoptotic pathways were measured by Western blot. Results Compared with the normal group， the model group had typical pathological changes of COPD-PAH， and the collagen deposition area of pulmonary arterioles， the expression of PCNA and the protein levels of NLRP3， Caspase-1， GSDMD， IL-1β and IL-18 in the lung tissue were increased （P<0.05）. Compared with the model group， the pathological changes of lung tissue in the middle-dose group， high-dose group and western medicine group were significantly improved， the collagen deposition area of pulmonary arterioles， the expression of PCNA， and the protein levels of NLRP3， Caspase-1， GSDMD， IL-1β， and IL-18 in lung tissue were reduced （P<0.05）. Compared with the low-dose group， the pathological changes of lung tissue in the middle-dose group， high-dose group and western medicine group were significantly improved， the collagen deposition area of pulmonary arterioles， the expression of PCNA and the protein levels of NLRP3， Caspase-1， GSDMD， IL-1β， IL-18 were reduced （P<0.05）. Compared with the middle-dose group， the pathological changes of lung tissue in the high-dose group were significantly improved， and the collagen deposition area of pulmonary arterioles， the expression of PCNA and the protein levels of NLRP3， Caspase-1， GSDMD， IL-1β and IL-18 in the lung tissue were all decreased （P<0.05）. Conclusion Compound Tinglizi Decoction can improve pulmonary vascular remodeling in rats with COPD-PAH through inhibiting NLRP3 inflammatory vesicle-mediated pyroptosis， and with the increase of the dose of Compound Tinglizi Decoction， the improvement effect of pulmonary vascular remodeling in COPD-PAH rats is more obvious.

〔Keywords〕 Compound Tinglizi Decoction; NLRP3; pyroptosis; pulmonary vascular remodeling; chronic obstructive pulmonary disease-associated pulmonary hypertension

肺動(dòng)脈高壓（pulmonary arterial hypertension， PAH）是慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease， COPD）的一種常見(jiàn)和重要的并發(fā)癥[1]，肺血管重塑是PAH的重要標(biāo)志[2]。研究認(rèn)為，慢性炎癥在COPD的氣道重塑、氣流阻塞和PAH過(guò)程中起著重要作用[3]。激活的Caspase-1可以誘發(fā)一種炎癥形式的程序性細(xì)胞壞死，即細(xì)胞焦亡，其特征是大量促炎癥因子釋放和炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[4]。NLRP3炎癥小體是目前研究最深入的一種炎癥小體，它可通過(guò)活化Caspase-1介導(dǎo)細(xì)胞焦亡[5]。且研究證實(shí)，NLRP3炎癥小體參與了COPD及PAH氣道和血管的慢性炎癥[6-7]。因此，推測(cè)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡可能參與了COPD-PAH的肺血管重塑。

目前，許多中藥復(fù)方用于治療COPD，如豐白散[8]、參芪補(bǔ)肺散[9]、桑梅止咳顆粒[10]等，均具有一定療效。研究發(fā)現(xiàn)，活血化瘀中藥有效成分通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體通路參與多種疾病治療[11-13]。本課題組長(zhǎng)期從事采用中藥復(fù)方治療呼吸系統(tǒng)疾病的臨床工作，如本課題前期研究發(fā)現(xiàn)，麻葶舒喘湯可通過(guò)緩解哮喘氣道黏液高分泌癥狀，有效治療哮喘[14]。本課題柏正平教授根據(jù)多年臨床經(jīng)驗(yàn)及COPD-PAH中醫(yī)病機(jī)原理，根據(jù)“飲瘀同治”的治則創(chuàng)立了復(fù)方葶藶子湯。研究顯示復(fù)方葶藶子湯可明顯改善COPD-PAH患者臨床癥狀及減少急性發(fā)病次數(shù)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)可降低PAH，改善肺血管重塑[15-17]。由此，推測(cè)復(fù)方葶藶子湯可能通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡改善COPD-PAH肺血管重塑。

本次研究通過(guò)構(gòu)建COPD-PAH大鼠模型，觀察COPD-PAH大鼠肺組織中細(xì)胞焦亡的情況，探究復(fù)方葶藶子湯改善COPD-PAH肺血管重塑的作用機(jī)制，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料

1.1? 動(dòng)物

清潔級(jí)健康雄性SD大鼠90只，鼠齡10～12周，體質(zhì)量（200±20） g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證號(hào)：SYXK（湘）2019-0017。實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：湖南中醫(yī)藥研究所，本實(shí)驗(yàn)經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（備案編號(hào)：2020-0092），符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利與倫理原則。

1.2? 藥物制備

復(fù)方葶藶子湯組成：葶藶子15 g，黃芩10 g，桃仁10 g，紅花10 g，水蛭6 g，川芎15 g，茯苓15 g，桂枝15 g，白術(shù)15 g，矮地茶15 g，甘草6 g。中藥材購(gòu)自湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院中藥房，經(jīng)湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院藥劑科田其學(xué)教授鑒定為道地藥材。按生藥量加入10倍水，煎煮1 h保存藥液;藥渣再加入8倍量水，煎煮1 h，過(guò)濾去沉淀，合并濾液蒸干，制備成浸膏干粉，臨用前用蒸餾水配成所需濃度。

1.3? 主要試劑和儀器

辛伐他?。ㄉ虾Ｐ耪x萬(wàn)象藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：H19980174）;黃果樹(shù)牌香煙（貴州中煙工業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)：6901028102353）;Masson染色試劑盒（美國(guó)Wellbio公司，批號(hào)：WB00231A）;增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA，批號(hào)：ab92552）、IgG（批號(hào)：pv9000）、NLRP3（批號(hào)：ab263899）、GSDMD（批號(hào)ab219800）、IL-1β（批號(hào)：ab205924）、IL-18（批號(hào)：ab191860）均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司;Caspase-1（批號(hào)：22915-1-AP）、β-actin（批號(hào)：60008-1-Ig）均購(gòu)自美國(guó)Proteintech公司;總 RNA 提取 TRIZOL 試劑盒（美國(guó)Thermo公司，批號(hào)：15596026）?；瘜W(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（廣州勤翔光電科技有限公司，型號(hào)：Chemiscope6100）;顯微鏡（型號(hào)：BA210T）、光學(xué)顯微鏡（型號(hào)：BA410T）均購(gòu)自德國(guó)Motic公司。

2 方法

2.1? 分組

將90只SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組和西藥組，每組15只。

2.2? 模型制備與干預(yù)

除正常組外，其余組別均參照舒家澤等[18]采用煙熏加氣管滴注脂多糖方法建立COPD-PAH大鼠模型，通過(guò)肺功能檢測(cè)、超聲心動(dòng)圖及肺組織病理切片判定建模是否成功。肺功能殘氣量、吸氣阻力、右心室平均壓及右心室肥厚指數(shù)增加，肺組織病理切片可觀察到炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，氣管壁和肺細(xì)小血管壁平滑肌增厚等，則表明建模成功[18]。于第1、30天大鼠麻醉后氣管內(nèi)滴脂多糖;然后將大鼠放入自制熏煙箱內(nèi)經(jīng)大鼠口鼻吸入，第2～29天、第31～59天香煙煙熏，1 h/次，2次/d。參考人和動(dòng)物體表面積折算的等效劑量比率表，大鼠的等效劑量相當(dāng)于人的6.3 倍。每只動(dòng)物每千克體質(zhì)量給藥量按臨床人（70 kg）的等效量為中劑量，0.5倍等效量為低劑量，2倍等效量為高劑量，故低劑量組、中劑量組、高劑量組生藥量分別為2.56、5.13、10.26 g/kg，西藥組辛伐他汀予2.5 mg/kg，在實(shí)驗(yàn)第60天開(kāi)始，每天灌胃1次，給與相應(yīng)藥液（10 mL/kg），正常組不予以任何處理，模型組予以等量0.9%生理鹽水，連續(xù)14 d。各組于末次給藥后禁食8 h，次日處死大鼠，取血及肺組織進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。

2.3? 標(biāo)本制備

用10%水合氯醛（0.4 mL/100 g）麻醉大鼠，處死后，取右肺，浸入10%中性福爾馬林固定液中固定，石蠟包埋，切片行HE染色、Masson染色、免疫組化檢測(cè)，余肺組織迅速放入液氮罐中速凍用于Western blot檢測(cè)。

2.4? 指標(biāo)檢測(cè)

2.4.1? HE染色觀察肺組織病理變化? 先將肺組織切片脫蠟至水，然后按照HE染色試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，在顯微鏡下觀察拍照。選擇視野主要觀察非毛細(xì)血管、細(xì)支氣管、肺泡等結(jié)構(gòu)的形態(tài)，有無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等。

2.4.2? Masson染色觀察肺小動(dòng)脈膠原沉積? 先將肺組織切片脫蠟至水，然后按照Masson染色試劑盒使用說(shuō)明書(shū)依次加染液操作（蘇木素染細(xì)胞核-麗春紅染色-磷鉬酸處理-苯胺藍(lán)染色），然后用1%冰醋酸處理1 min，脫水、封片、顯微鏡下觀察拍照。染色結(jié)果判讀：肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，用ImageJ軟件對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行分析。

2.4.3? 免疫組化檢測(cè)肺組織PCNA的表達(dá)? 肺組織切片脫蠟至水，然后進(jìn)行滅活，暴露抗原結(jié)合位點(diǎn)，蒸餾水沖洗3次。滴加稀釋好的一抗（PCNA，1∶100），4 ℃過(guò)夜。PBS沖洗5 min×3次。滴加50～100 μL二抗，37 ℃，孵育30 min，PBS沖洗5 min×3次。滴加DAB顯色，復(fù)染、脫水、透明、中性樹(shù)膠封片。陽(yáng)性染色為黃色或棕黃色或褐色，用ImageJ軟件對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行分析。

2.4.4? Western blot檢測(cè)肺組織NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白的表達(dá)&nbsp; 提取各組肺組織蛋白，根據(jù)BCA法蛋白含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定蛋白濃度。10%、15%分離膠，4.8%的濃縮膠，每個(gè)泳道加入10 μL蛋白樣品，SDS-PAGE恒壓電泳、轉(zhuǎn)膜，脫脂牛奶封閉，不同稀釋比例的一抗（NLRP3為1∶1000;Caspase-1為1∶1000;GSDMD為1∶1000;IL-1β為1∶1000;IL-18為1∶2000），4 ℃，孵育過(guò)夜;稀釋好的二抗與膜共同室溫孵育90 min。ECL顯色曝光，用ImageJ分析目標(biāo)條帶的灰度值。

2.5? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料采用“x±s”描述，計(jì)量資料符合正態(tài)分布且方差齊時(shí)，兩組間的比較采用t檢驗(yàn)，兩組以上的比較采用方差分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1? 各組肺組織病理變化

正常組的肺組織內(nèi)氣道、肺泡壁及周?chē)鼙诮Y(jié)構(gòu)基本正常，血管壁光滑，管腔通暢，僅有少數(shù)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。模型組可見(jiàn)氣道結(jié)構(gòu)完整性遭到破壞，血管壁增厚，管腔縮小，肺泡內(nèi)大量炎性細(xì)胞彌散性浸潤(rùn)。采用藥物處理后，隨著復(fù)方葶藶子湯藥物濃度的增加，大鼠肺組織中血管壁變薄，炎性浸潤(rùn)減少。西藥組采用辛伐他汀處理后，大鼠肺組織出現(xiàn)了與中劑量組、高劑量組肺組織相似的病理變化，即血管壁變薄，炎性浸潤(rùn)減少。見(jiàn)圖1。

3.2? 各組肺組織中肺小動(dòng)脈膠原沉積面積的比較

與正常組相比，模型組陽(yáng)性面積顯著增加（P<0.05）。與模型組相比，低劑量組、中劑量組和高劑量組陽(yáng)性面積均減少，除低劑量組與模型組陽(yáng)性面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外（P>0.05），其余兩組與模型組組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;西藥組陽(yáng)性面積較模型組減少（P<0.05）。與低劑量組相比，中劑量組、高劑量組及西藥組陽(yáng)性面積均減少（P<0.05）。與中劑量組相比，高劑量組陽(yáng)性面積減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)圖2-3。

3.3? 各組肺組織PCNA表達(dá)水平的比較

與正常組相比，模型組PCNA表達(dá)明顯增多（P<0.05）。與模型組相比，低劑量組、中劑量組、高劑量組及西藥組PCNA表達(dá)均減少（P<0.05）。與低劑量組相比，中劑量組、高劑量組及西藥組PCNA表達(dá)均減少（P<0.05）。與中劑量組相比，高劑量組和西藥組PCNA表達(dá)均減少（P<0.05）。見(jiàn)圖4-5。

3.4? 各組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平的比較

與正常組相比，模型組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平均升高（P<0.05）。與模型組相比，低劑量組、中劑量組、高劑量組及西藥組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平均下降，除低劑量組中Caspase-1、IL-1β、IL-18和中劑量組中Caspase-1下降與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外（P>0.05），其余組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與低劑量組相比，中劑量組、高劑量組及西藥組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平均下降，其中，高劑量組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白下降與低劑量組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與中劑量組相比，高劑量組和西藥組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平均下降，其中高劑量組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白下降與中劑量組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與高劑量組相比，西藥組肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白水平均上升（P<0.05）。見(jiàn)圖6-7。

4 討論

COPD會(huì)出現(xiàn)血管結(jié)構(gòu)（血管重塑）的改變，這種改變可能會(huì)發(fā)展并導(dǎo)致PAH，這種并發(fā)癥可能會(huì)在50%以上的晚期患者中出現(xiàn)[19]。PAH的發(fā)生，增加了疾病的惡化頻率，縮短了患者的生存期[20-21]。因此，探究COPD-PAH中肺血管重塑的機(jī)制，有利于尋找有效的治療靶點(diǎn)，為臨床患者帶去福音。

本研究結(jié)果首次證實(shí)NLRP3炎癥小體介導(dǎo)細(xì)胞焦亡參與COPD-PAH的血管重塑。最新研究發(fā)現(xiàn)，依賴(lài)于Cspase-1激活的細(xì)胞焦亡存在于PAH大鼠模型和缺氧的人類(lèi)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中，且該研究指出，抑制Caspase-1的激活，可改善PAH[22]。NLRP3/Caspase-1/GSDMD信號(hào)通路是細(xì)胞焦亡關(guān)鍵機(jī)制之一[23]。NLRP3炎癥小體與COPD、PAH的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[6-7]。在本研究中，HE染色、Masson染色和免疫組化的結(jié)果充分證實(shí)COPD-PAH大鼠肺血管出現(xiàn)了血管重塑的病理表現(xiàn)。Western blot的結(jié)果顯示，相比正常組，COPD-PAH大鼠肺組織中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的表達(dá)顯著上調(diào)。綜上所述，NLRP3炎癥小體介導(dǎo)細(xì)胞焦亡存在于COPD-PAH大鼠中，與肺血管重塑密切相關(guān)。

痰飲、血瘀貫穿COPD-PAH疾病始終且影響預(yù)后。臨床上，以“飲瘀同治”為治法的復(fù)方葶藶子湯可有效緩解和改善COPD-PAH患者癥狀[16-17]。復(fù)方葶藶子湯中葶藶子瀉肺逐水、止咳平喘，為君藥;黃芩清肺化痰，水蛭活血化瘀，矮地茶化痰止咳，共助君藥宣通肺部壅滯，為臣藥;桃仁、紅花、川芎活血逐瘀，茯苓、桂枝、白術(shù)溫脾化飲，以絕生痰之源，為佐藥;甘草健脾和中，調(diào)和諸藥，為使藥。諸藥合用，共奏瀉肺逐瘀、溫肺化痰、止咳平喘之效。

本研究結(jié)果顯示，與模型組相比，中藥組大鼠的肺血管重塑病理表現(xiàn)明顯改善，肺組織中PCNA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的表達(dá)均下調(diào);且本研究通過(guò)設(shè)置低、中、高劑量組，明確復(fù)方葶藶子湯改善COPD-PAH的肺血管重塑是否存在劑量依賴(lài)，結(jié)果表明，隨著復(fù)方葶藶子湯藥物濃度的增加，肺血管重塑病理表現(xiàn)改善越明顯，肺組織中PCNA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18下調(diào)越多。此外，本研究設(shè)置了西藥組，采用辛伐他汀處理。文獻(xiàn)研究已表明，辛伐他汀治療COPD-PAH能有效改善肺功能，降低血清炎性因子，提高血管內(nèi)皮功能等[24-25]。本研究結(jié)果顯示，中、高劑量組改善COPD-PAH的血管重塑效果與西藥組辛伐他汀改善效果相當(dāng);Masson染色結(jié)果顯示，西藥組陽(yáng)性面積和中劑量組相當(dāng)，而高劑量組陽(yáng)性面積少于西藥組;肺組織中PCNA免疫組化結(jié)果顯示，西藥組PCNA表達(dá)水平和高劑量組相當(dāng);Western blot結(jié)果顯示，高劑量組的肺組織中PCNA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的表達(dá)較西藥組均顯著下調(diào)。本研究結(jié)果提示，復(fù)方葶藶子湯高劑量組治療COPD-PAH療效與西藥組辛伐他汀療效相似。

綜上所述，本研究首次表明，復(fù)方葶藶子湯通過(guò)抑制NLRP3炎癥小體介導(dǎo)細(xì)胞焦亡能改善COPD-PAH的血管重塑，為臨床上復(fù)方葶藶子湯能有效治療COPD-PAH患者提供機(jī)制支持。

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