探究在精斑混合檢材中應(yīng)用X-STR檢驗(yàn)方法

馮旭明

關(guān)鍵詞：精斑混合檢材;X-STR;檢驗(yàn)

【中圖分類(lèi)號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2022）10--01

X染色體長(zhǎng)約153Mb，其中的編碼基因約為1100個(gè)，屬于中等大小的亞中著絲粒染色體，在人體內(nèi)的所有基因組中占比約為5%[1]。由于X染色體的遺傳方式較為特殊，所以其STR的基因座又有伴性遺傳的特點(diǎn)。在法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中，針對(duì)親緣關(guān)系的鑒定案件，可以應(yīng)用X-STR檢驗(yàn)法。

1 資料

某強(qiáng)奸案?jìng)善七^(guò)程中，收集物證包括了被害女性的陰道拭子、乳頭拭子、指甲拭子、內(nèi)褲（已剪為前、中、后三段），同時(shí)提供了被害女性和男性嫌疑人甲、乙、丙、丁的血樣，已知乙和丁是堂兄弟，現(xiàn)要求鑒定物證中是否含有甲、乙、丙、丁四人的精斑。

2 材料和方法

選用材料包括了PowerPlex 21試劑盒、GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統(tǒng)27Y試劑盒、SureID? PathFinder擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒、GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統(tǒng)17X試劑盒，采用二步提取法在精斑混合檢材中提取DNA。

3 結(jié)果

通過(guò)對(duì)各個(gè)物證檢材應(yīng)用PSA試劑檢測(cè)，得知乳頭拭子、指甲拭子的結(jié)果為陰性，陰道拭子、內(nèi)褲三段的結(jié)果為陽(yáng)性。同時(shí)，在陰道拭子中并沒(méi)有檢測(cè)到男性個(gè)體的DNA，檢測(cè)結(jié)果提示內(nèi)褲三段均含有多個(gè)男性DNA。其中，內(nèi)褲前段至少含有2名男性DNA，內(nèi)褲中段及后段至少含有3名男性DNA。由于乙和丁在身份鑒定中存在27Y的單倍型一樣的情況，為了能正確區(qū)分乙和丁嫌疑人，對(duì)內(nèi)褲三段分別展開(kāi)進(jìn)一步檢測(cè)。

檢測(cè)得知，在36個(gè)Y-STR分型結(jié)果中，內(nèi)褲前段獲得了相對(duì)完整的單倍型，內(nèi)褲中段和內(nèi)褲后段均獲得了多個(gè)單倍型。在DYS549和DYS527a/b上，乙的單倍型為13和20，24，在DYS549和DYS527a/b上，丁的單倍型為12和20，23，兩者單倍型存在差異，原因可能是DYS549和DYS527a/b的單倍型組合中，含有四個(gè)嫌疑人的單倍型。

檢測(cè)得知，在17個(gè)X-STR的分型結(jié)果中，分別在內(nèi)褲三段中觀(guān)察到至少2個(gè)及其以上的單倍型。其中，GATA172D05和DXS10134上可以觀(guān)察到4個(gè)單倍型，結(jié)果和4個(gè)嫌疑人的單倍型吻合。

4 討論

針對(duì)X-STR方法的使用通常遵循相應(yīng)的規(guī)律，在遺傳學(xué)參數(shù)等研究中十分常見(jiàn)。起初，X-STR檢測(cè)方法是一代測(cè)序，如Argus X-12。由于國(guó)內(nèi)針對(duì)X-STR核心基因座位點(diǎn)還沒(méi)有明確，所以X-STR基因座位點(diǎn)存在一定差異[2]。當(dāng)前，在法醫(yī)學(xué)工作中，X-STR位點(diǎn)逐步被廣泛應(yīng)用，且在特殊的親緣關(guān)系鑒別中發(fā)揮重要價(jià)值。例如，女兒的基因中有來(lái)自父親身體中的X染色體，所以可以用于鑒別父女關(guān)系。又如，孩子父親的染色體會(huì)從祖母身體中隨機(jī)遺傳一條，所以應(yīng)用X-STR檢驗(yàn)法又能明確祖母和孫女之間的關(guān)系。應(yīng)用X-STR檢驗(yàn)法還可以輔助分析姑-侄、姨-外甥、舅-外甥等關(guān)系。

在本次研究中，通過(guò)分別檢測(cè)內(nèi)褲三段，結(jié)果顯示內(nèi)褲上有2名及以上的男性個(gè)體DNA。在檢測(cè)的過(guò)程中，因?yàn)橄右扇艘液投≡谇捌诘恼{(diào)查中已知二者之間是堂兄弟，所以如果單純的采用Y-STR檢驗(yàn)法，單倍型結(jié)果并不能夠準(zhǔn)確的判斷出結(jié)果。通過(guò)近年來(lái)對(duì)Y-STR的研究結(jié)果得知，針對(duì)存在父系親屬關(guān)系的個(gè)體，應(yīng)用高突變Y-STR能夠有效區(qū)分鑒別[3]。所以在本次檢測(cè)中，選用含有高突變的Y-STR基因座，能夠得知乙和丁的DNA僅在DYS527a/b和DYS549的基因座中存在差異。在DYS549和DYS527a/b上，乙的單倍型為13和20，24，在DYS549和DYS527a/b上，丁的單倍型為12和20，23。將內(nèi)褲后段STR基因座的單倍型組合和混合檢測(cè)36個(gè)Y-STR構(gòu)成的單倍型檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，在內(nèi)褲三段中，并不能夠明確排除含有乙和丁的DNA。同時(shí)，DYS527a/b又屬于兩拷貝STR基因座，單純的依據(jù)其結(jié)果并不能夠明確判斷出精斑混合檢材中的個(gè)體數(shù)量。而應(yīng)用高突變Y-STR，就能夠?qū)呋旌蠙z材中的男性DNA進(jìn)行檢測(cè)，輔助獲得較為準(zhǔn)確的個(gè)體數(shù)量。采用X-STR檢驗(yàn)法，判斷不同的單倍型，進(jìn)而輔助檢測(cè)精斑混合檢材中的男性個(gè)體數(shù)量[4]。檢測(cè)結(jié)果顯示，乙和丁的17個(gè)X-STR基因座有11個(gè)等位基因存在差異，再結(jié)合Y-STR的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，推測(cè)出內(nèi)褲三段中至少含有4名男性個(gè)體的DNA。

X染色體由于其具有特殊的遺傳方式，所以在法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中凸顯了X-STR檢驗(yàn)方法的重要價(jià)值，是對(duì)其他遺傳標(biāo)記的補(bǔ)充。雖然國(guó)內(nèi)已有大量學(xué)者在該方面做出了研究成果，但是這方面的數(shù)據(jù)依然存在很大空白，且現(xiàn)有的研究結(jié)果帶有明顯的地域性。同時(shí)，國(guó)內(nèi)還未完善X-STR的使用指導(dǎo)，所以實(shí)際使用過(guò)程中依然存在一定的使用隱患。在未來(lái)的發(fā)展中，需要結(jié)合實(shí)際應(yīng)用情況，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)的使用指導(dǎo)，并在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上明確核心基因座，優(yōu)化其兼容性，以此在保證該方法高靈敏度的同時(shí)，還能快速準(zhǔn)確的得出結(jié)果。

綜上，針對(duì)精斑混合檢材在實(shí)際的檢測(cè)中，可以將Y-STR和X-STR檢驗(yàn)法一起使用，檢測(cè)過(guò)程更快速、檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確。

參考文獻(xiàn)：

[1] 余政梁，張建，尚蕾，等. X染色體遺傳標(biāo)記在法醫(yī)遺傳學(xué)中的研究和應(yīng)用[J].分子影像學(xué)雜志，2018，41（1）：127-129.

[2]林添春，楊幸怡，熊晨，等.19個(gè)X-STR熒光復(fù)合擴(kuò)增體系的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用評(píng)估[J].新醫(yī)學(xué)，2021，52（11）：846-851.

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[4]張璐，丁梅，龐灝，等.四類(lèi)遺傳標(biāo)記的檢測(cè)用于混合精斑的個(gè)人識(shí)別[J].中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志，2017，32（6）：627-630.