柴秀偉，孔 蕊，李寶軍，朱亞同，畢 陽*，Dov Prusky

(1 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院，蘭州 730070；2 Department of Postharvest Science of Fresh Produce, Agricultural Research Organization, Rishon LeZion 7505101, Israel)

蘋果是最重要的溫帶水果，但其在采收及采后處理期間極易遭受機械損傷[1]。表面形成的傷口不僅會加劇水分蒸騰，而且會為病原物的侵染提供通道，加劇腐爛的發(fā)生[2]。蘋果果實具備愈傷的能力[3]，但自然愈傷所需時間較長，因此，需要采取措施加速果實愈傷。作為植物體內(nèi)的信號分子，一氧化氮(nitric oxide，NO)在介導(dǎo)植物生長發(fā)育、成熟衰老和防御反應(yīng)等諸多生物學(xué)過程中發(fā)揮著重要作用[4]。有報道表明，采用NO供體SNP浸泡甘薯塊根，可以有效促進(jìn)傷口處的木質(zhì)化，增加傷口處木質(zhì)化細(xì)胞層厚度，促進(jìn)甘薯愈傷[5]。SNP處理還可通過加速傷口處聚酚軟木酯及木質(zhì)素的沉積來降低馬鈴薯塊莖愈傷期間的失重率和病情指數(shù)[6]。果實發(fā)育期多次噴灑SNP還可促進(jìn)采后厚皮甜瓜傷口處聚酚軟木酯及木質(zhì)素的沉積，有效降低愈傷期間損傷果實的病情指數(shù)[7]。進(jìn)一步研究表明，NO處理可提高厚皮甜瓜和馬鈴薯傷口處的苯丙氨酸解氨酶活性，增加總酚、類黃酮和木質(zhì)素的含量；NO還可使厚皮甜瓜和馬鈴薯傷口處的H2O2含量和過氧化物酶活性顯著提高[6-7]。此外，NO處理激活了損傷甘薯塊根的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(APX)，提高塊根抗壞血酸(ASA)的含量及抗氧化能力[5]。雖然已有SNP促進(jìn)甘薯、馬鈴薯及甜瓜等一年生地下根莖和果實采后愈傷的報道，但SNP是否影響蘋果果實采后愈傷尚鮮見報道。因此，本研究以“紅星”蘋果為試材，采用SNP浸泡處理人工模擬損傷的果實，評價處理對愈傷期間果實失重率和病情指數(shù)的影響，分析傷口處苯丙烷代謝關(guān)鍵酶活性和產(chǎn)物含量，以及H2O2含量和過氧化物酶活性，為蘋果果實采后快速愈傷提供方法及理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材 料

供試‘紅星’蘋果(MalusdomesticaBorkh. cv. Starkrimson)于2019年10月采自甘肅省景泰縣條山農(nóng)場，選擇大小均勻、未受機械和病蟲害影響的果實，并將單個果實套網(wǎng)后裝箱，于次日運至本實驗室，常溫(20～25 ℃；相對濕度 80%～85%)下貯藏待用。SNP(純度98.5%)購自Sigma公司。供試病原菌擴展青霉PenicilliumexpansumLink.(T01)由中國科學(xué)院植物研究所提供，于PDA培養(yǎng)基上保存待用。

1.2 方 法

1.2.1 蘋果果實人工損傷、SNP處理及愈傷果實人工損傷參照Zhang等[3]的方法并適當(dāng)修改。蘋果清洗后用1%次氯酸鈉浸泡2 min，蒸餾水沖洗，待自然晾干后，用滅菌刀片在果實赤道周圍切出3個人工傷口(15 mm×1 mm)。30 min后將損傷的果實分別用蒸餾水(對照)和0.5 mmol/L SNP溶液(前期預(yù)實驗篩選)浸泡5 min。處理果實在常溫[(20±5) ℃，相對濕度(80%～85%)]黑暗條件下愈傷。

1.2.2 失重率及病情指數(shù)的測定失重率的測定采用重量法，在果實愈傷的第0、0.5、1、3、5、7天分別稱取果實的重量，每個處理重復(fù)3次，每處理用果實6個。病情指數(shù)的測定參照Zhang等[3]的方法。在果實愈傷的第0、0.5、1、3、5、7天，分別將20 μL濃度為1×106spores/mL的P.expansum孢子懸浮液均勻涂于果實傷口處，晾干后常溫[(20±5) ℃，相對濕度(80%～85%)]黑暗培養(yǎng)5 d后統(tǒng)計發(fā)病級別。每個處理用果實9個，重復(fù)3次。

式中,發(fā)病級別標(biāo)準(zhǔn)：果面全部發(fā)病為4級，四分之三發(fā)病為3級，一半發(fā)病為2級，四分之一發(fā)病為1級，不發(fā)病為0級。

1.2.3 生化指標(biāo)取樣測定參照Zhang等[3]的方法并作適當(dāng)修改。分別于愈傷的第0、0.5、1、3、5和7天時用不銹鋼刀切取果實傷口下2～3 mm厚的組織，液氮速凍后，用研磨機(A11 basic S025型，IKA艾卡(廣州)儀器設(shè)備有限公司，中國)磨成粉后裝入離心管，于-80 ℃的超低溫冰箱(DW-86L828型，北京盛科信德科技有限公司，中國)中保存待用。每個蘋果取樣3個傷口，每個傷口取樣0.2 g，共用150個蘋果。

1.2.4 酶活性的測定苯丙氨酸解氨酶(phenylalnine ammonia-lyase，PAL)活性的測定參照Koukol等[8]的比色法，以每小時290 nm處吸光值變化0.01為1個酶活力單位(U)，PAL活性以U/g表示。肉桂酸氫化酶(cinnamate-4-hydroxylase，C4H)活性的測定參照Lamb等[9]的比色法，以每分鐘340 nm處吸光度值變化0.01為1個酶活力單位(U)，C4H活性以U·g-1表示。肉桂醇脫氫酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase，CAD)活性的測定參照Goffner等[10]的比色法，以每分鐘400 nm處吸光值變化0.01為1個酶活力單位(U)，CAD活性以U·g-1表示。過氧化物酶(peroxidase，POD)活性的測定參照Venisse等[11]的比色法，以每分鐘470 nm處吸光值變化增加1為一個酶活性單位(U)，POD活性以ΔOD470·min-1·g-1表示。

1.2.5 酚酸及木質(zhì)素單體含量的測定酚酸及木質(zhì)素單體含量的測定參照Ayaz等[12]的方法。(1)樣品制備：取1.0 g冷凍粉末，加入3 mL 70%的甲醇在40 kHz常溫超聲提取30 min，在8 000×g下離心20 min，收集上清液并用濃縮儀濃縮后，用復(fù)溶液(甲醇∶水∶冰醋酸=70∶30∶1)溶至1 mL，過0.22 μm微孔濾膜，將濾液轉(zhuǎn)移至2 mL自動進(jìn)樣瓶中。采用Waters Symmetry?C18柱(4.6×250 mm，5 μm)進(jìn)行四元梯度超快速液相色譜儀(ACQUITY Arc，Waters，USA)分析。(2)HPLC條件：以100%甲醇(A)和1%乙酸(B)為流動相，進(jìn)樣量5 μL，流速0.8 mL/min，柱溫35 ℃，檢測波長325 nm。在相同條件下分別用肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸、p-香豆醇、芥子醇和松柏醇標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算樣品含量，4種酚酸及3種木質(zhì)素單體含量以μg·g-1表示。

1.2.6 總酚、類黃酮和木質(zhì)素含量的測定總酚和類黃酮含量的測定參照Scalbert等[13]的比色法并作適當(dāng)修改。總酚于760 nm處測定吸光度(OD)值，并以沒食子酸(GAE)為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制定標(biāo)準(zhǔn)曲線來評估總酚含量，單位以mg·(100 g)-1表示。類黃酮于510 nm處測定OD值，并以兒茶素(CE)為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線評估類黃酮含量，單位以mg·(100 g)-1表示。木質(zhì)素含量的測定參照Hamerschmidt等[14]的比色法，于280 nm處測定OD值，單位以O(shè)D280·g-1表示。

1.2.7 H2O2含量的測定H2O2含量的測定參考Prochazkova等[15]的比色法，于410 nm處測定OD值，單位以μmol·g-1表示。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

上述各項指標(biāo)的測定至少重復(fù)3次，用Excel 2010計算平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤，用SPSS 19.0進(jìn)行Duncan’s差異顯著性分析(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 SNP處理對愈傷期間損傷果實失重率和病情指數(shù)的影響

失重率和病情指數(shù)是用來評價果實愈傷效果的常用指標(biāo)。圖1顯示，在愈傷期間，SNP處理組和對照組蘋果果實的失重率均逐漸提高，但不同時間點存在明顯差異。其中，SNP處理組果實的失重率在第0和0.5天無顯著差異，在第1～7天迅速上升，且不同時間點之間均存在顯著差異(P<0.05)；對照組果實失重率的變化趨勢與SNP處理組果實基本一致；SNP處理組果實的失重率在愈傷期間顯著低于對照，如處理第5天時顯著低于對照40.2%(圖1，Ⅰ)。同時，在果實愈傷期間，SNP處理組和對照組果實的病情指數(shù)逐漸下降，但不同時間點之間存在差異。其中，SNP處理組果實的病情指數(shù)在第0～0.5天無顯著差異，在第1～5天迅速下降，且各時間點間均差異顯著(P<0.05)；對照組果實的病情指數(shù)除第0.5～1天外，其余時間點之間均差異顯著(P<0.05)；SNP處理組果實的病情指數(shù)在第0和0.5天與對照組果實無顯著性差異，對照組病情指數(shù)在第5天低于50%，而處理組病情指數(shù)在第3天時已低于50%，且處理組果實的病情指數(shù)在第1～7天顯著低于對照，第3天時顯著低于對照31.4%(圖1，Ⅱ)。以上結(jié)果表明，SNP處理有效促進(jìn)了蘋果果實的愈傷。

不同大寫和小寫字母分別代表處理間和處理內(nèi)在0.05水平存在顯著性差異(P<0.05)。下同圖1 SNP處理對愈傷期間損傷果實失重率(A)和損傷接種果實病情指數(shù)(B)的影響Different capital and normal letters indicate significant differences between and within treatments at 0.05 level, respectively (P<0.05). The same as belowFig.1 Effect of SNP treatment on weight loss (A) of wounded fruit and disease index (B) of inoculated fruit during healing

2.2 SNP處理對愈傷期間果實傷口處PAL、C4H和CAD活性的影響

PAL、C4H和CAD的活性與酚類物質(zhì)的合成水平呈正相關(guān)。在蘋果果實愈傷期間，SNP處理組和對照組果實傷口處的PAL、C4H和CAD活性均呈單峰型變化，三者的峰值依次出現(xiàn)在第1天、第5天和第3天，且各酶活性在不同時間點之間均存在差異(圖2，Ⅰ-Ⅲ)。其中，SNP處理組果實的PAL活性在第0～1天迅速上升，之后迅速顯著降低(P<0.05)；對照組果實的PAL活性在第0～1天無顯著差異，之后迅速顯著降低；處理組果實傷口處的PAL活性在愈傷期間均顯著高于相應(yīng)對照，其峰值時的活性顯著高出對照26.1%(圖2，Ⅰ)。同時，處理組果實的C4H活性在第0～3天迅速上升，在第5～7天迅速顯著降低(P<0.05)；對照組果實的C4H活性在第0～0.5天迅速上升，之后緩慢增加，在第3～5天再迅速上升后又迅速降低(P<0.05)；處理組果實傷口處的C4H活性在愈傷期間顯著高于相應(yīng)對照(圖2，Ⅱ)。另外，SNP處理組果實的CAD活性在第0～0.5天迅速上升，之后緩慢增加后下降，在第5～7天迅速顯著降低(P<0.05)；對照組果實的CAD活性在第0～5天無顯著差異，之后迅速顯著降低(P<0.05)；SNP處理組果實傷口處的CAD活性在愈傷期間均顯著高于相應(yīng)對照(圖2，Ⅲ)。上述結(jié)果表明SNP處理激活了蘋果果實傷口處的PAL、C4H和CAD活性。

圖2 SNP處理對愈傷期間果實傷口處PAL、C4H和CAD活性的影響Fig.2 Effect of SNP treatment on PAL, C4H and CAD activities at wounded sites of fruit during healing

2.3 SNP處理對愈傷期間果實傷口處4種酚酸及總酚和類黃酮含量的影響

酚酸不僅參與愈傷封閉層的形成，而且具有抗菌和抗氧化活性。SNP處理組和對照組果實傷口處的肉桂酸、咖啡酸和芥子酸含量在愈傷期間均呈單峰型變化，峰值依次出現(xiàn)在第3天、第1天和第1天，且不同時間點的含量存在差異；處理組果實的肉桂酸、咖啡酸和芥子酸含量水平在愈傷期間始終顯著高于同期對照(圖3，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ)。其中，處理組果實的肉桂酸含量在第0～0.5天迅速顯著上升后緩慢增加，在第1～3天又迅速顯著增加，之后迅速顯著降低(P<0.05)；對照組果實的肉桂酸含量在第0～0.5天無顯著差異，之后迅速顯著上升，在第3～5天又迅速顯著下降(圖3，Ⅰ)。SNP處理組果實的咖啡酸含量先迅速上升后迅速顯著下降(P<0.05)；對照組果實的咖啡酸含量在第0～0.5天迅速上升后基本穩(wěn)定，1 d后迅速顯著下降(P<0.05)(圖3，Ⅱ)。SNP處理組果實的芥子酸含量在第0～1天迅速顯著上升，之后迅速顯著降低(P<0.05)；對照組果實芥子酸含量的變化趨勢與處理果實基本一致(圖3，Ⅳ)。

圖3 SNP處理對愈傷期間果實傷口處肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸、總酚和類黃酮含量的影響Fig.3 Effect of SNP treatment on the contents of cinnamic acid, coffeic acid, ferulic acid, sinapic acid,total phenolic and flavonoids at wound sites of fruit during healing

同時，SNP處理組果實傷口處的阿魏酸含量在愈傷期間先上升后趨于平穩(wěn)，相應(yīng)的對照組果實的含量則逐漸上升；處理組果實的阿魏酸含量在第0～0.5天無顯著差異，之后迅速顯著增加(P<0.05)；對照組果實傷口處的阿魏酸含量在愈傷期間持續(xù)增加，但不同時間點無顯著性差異；除了第0.5天和第7天外，處理組果實阿魏酸的含量在愈傷期間均顯著高于同期對照(圖3，Ⅲ)。

另外，在愈傷期間，SNP處理組和對照組果實傷口處的總酚和類黃酮含量均先上升后降低，峰值分別出現(xiàn)在第5天和第3天，且不同時間點的含量存在差異(圖3，Ⅴ、Ⅵ)。其中，SNP處理組果實的總酚含量先迅速顯著上升，在第0.5～1天基本穩(wěn)定，在第1～5天又迅速顯著上升，之后迅速顯著下降(P<0.05)；對照組果實的總酚含量在愈傷期間雖有變化但不同時間點無顯著差異；處理果實的總酚含量在愈傷期間始終顯著高于同期對照(圖3，Ⅴ)。SNP處理組和對照組果實的類黃酮含量均呈先迅速顯著上升后迅速顯著下降的變化趨勢；處理組果實的類黃酮含量在愈傷期間大多顯著高于同期對照，在峰值時顯著高出對照28.5%(圖3，Ⅵ)?？梢?，SNP處理有效促進(jìn)了蘋果果實傷口處4種酚酸及總酚和類黃酮的合成。

2.4 SNP處理對愈傷期間果實傷口處3種木質(zhì)素單體及木質(zhì)素水平的影響

木質(zhì)素由p-香豆醇、松柏醇和芥子醇3種單體構(gòu)成。SNP處理組和對照組蘋果果實的p-香豆醇含量在愈傷期間呈單峰型變化，峰值出現(xiàn)在第5天，且不同時間點的含量存在差異(圖4，Ⅰ)。其中，SNP處理組果實的p-香豆醇含量在第0～0.5天無顯著差異，在第0.5～1天和第3～5天都迅速顯著上升，之后迅速顯著下降(P<0.05)；對照組果實的p-香豆醇含量在第0～1天迅速顯著增加，之后基本穩(wěn)定，第5天后迅速顯著下降(P<0.05)；處理組果實的p-香豆醇含量在愈傷的中后期顯著高于同期對照(圖4，Ⅰ)。同時，SNP處理組和對照組果實傷口處的松柏醇和芥子醇含量均隨愈傷時間的延長逐漸上升，且在不同時間點之間存在差異；處理組果實傷口處的松柏醇和芥子醇含量在愈傷的中后期均顯著高于同期對照，在第5天時分別顯著高出相應(yīng)對照19.8%和26.9%(圖4，Ⅱ、Ⅲ)。其中，SNP處理組和對照組果實的松柏醇含量在第0～1天均無顯著性變化，之后均迅速顯著上升(圖4，Ⅱ)；SNP處理果實的芥子醇含量在第0～0.5天無顯著變化，之后迅速顯著上升(P<0.05)，而對照組果實的芥子醇含量在第3～7天迅速顯著上升(圖4，Ⅲ)。另外，SNP處理組和對照組果實傷口處的木質(zhì)素含量在愈傷期間均逐漸上升，且不同時間點的含量存在差異(圖4，Ⅳ)。其中，處理組果實的木質(zhì)素含量在第0～3天迅速顯著上升，之后基本穩(wěn)定，在第5～7天又迅速顯著上升(P<0.05)；對照組果實的木質(zhì)素含量在第0～0.5天和第1～3天均迅速顯著上升(P<0.05)；處理組果實的木質(zhì)素含量在愈傷的中后期均顯著高于同期對照(P<0.05)，在第7天時顯著高出對照38.2%。以上結(jié)果表明，SNP處理明顯提高了蘋果傷口處p-香豆醇、松柏醇、芥子醇和木質(zhì)素含量。

圖4 SNP處理對愈傷期間果實傷口處p-香豆醇、松柏醇、芥子醇和木質(zhì)素含量的影響Fig.4 Effects of SNP treatment on contents of p-coumaroyl alcohol, coniferyl alcohol, sinapyl alcohol and lignin at wound sites of fruit during healing

2.5 SNP處理對愈傷期間果實傷口處的H2O2含量及POD活性的影響

H2O2含量和POD活性在一定程度上反映了果實傷口處木質(zhì)素單體的聚合水平。在蘋果果實愈傷期間，SNP處理組和對照組果實的H2O2含量均呈雙峰型變化，峰值分別出現(xiàn)在第0.5天和第3天；處理組果實的H2O2含量在不同時間點均存在顯著性差異，對照組果實的H2O2含量除第5～7天外的時間點也均存在顯著性差異(P<0.05)；處理組果實傷口處的H2O2含量在愈傷期間始終顯著高于同期對照組，第3天時顯著高出對照45.1%(圖5，Ⅰ)。同時，SNP處理組和對照組果實傷口處的POD活性在愈傷期間均呈單峰型變化，峰值出現(xiàn)在第1天，且不同時間點的活性存在差異；處理組果實傷口處的POD活性在第0～1天先迅速顯著上升，之后迅速顯著下降(P<0.05)；對照組果實的POD活性的變化趨勢與處理組果實基本一致；除第0.5天外，處理組果實的POD活性在愈傷期間顯著高于同期對照(P<0.05)，在第1天時顯著高出對照34.4%(圖5，Ⅱ)。因此，SNP處理有效提高了蘋果果實傷口處H2O2含量及POD活性。

圖5 SNP處理對愈傷期間果實傷口處H2O2含量和POD活性的影響Fig.5 Effects of SNP treatment on H2O2 content and POD activity at wound sites of fruit during healing

3 討 論

亞硝基鐵氰化鈉(SNP)作為外源NO供體進(jìn)入植物體后在半胱氨酸、谷胱甘肽或其他2SH類化合物、細(xì)胞色素P2450/NADPH系統(tǒng)的催化下會逐步分解，釋放出NO[16]。外源NO會促進(jìn)內(nèi)源NO的產(chǎn)生，而內(nèi)源NO作為信號分子參與了植物對生物和非生物脅迫的應(yīng)答[17]。

苯丙烷代謝既可提供愈傷封閉層形成所需的底物，又可合成具有抗菌和抗氧化活性的酚類和黃酮類物質(zhì)[18]。PAL作為苯丙烷代謝的關(guān)鍵酶和限速酶，催化L-苯丙氨酸脫氨基生成反式肉桂酸[19-20]。反式肉桂酸在C4H的作用下羥基化生成p-香豆酸，p-香豆酸在香豆酸-3-羥基化酶作用下經(jīng)過羥基化和酯化生成咖啡酸，咖啡酸經(jīng)兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶生成阿魏酸，阿魏酸首先羥化生成5-羥基阿魏酸，接著在5-羥基阿魏酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶作用下催化生成芥子酸[21]。本研究觀察到，SNP處理提高了蘋果果實傷口處的PAL和C4H活性，促進(jìn)了4種酚酸以及總酚和類黃酮的合成。該結(jié)果與SNP處理及NO氣體熏蒸處理提高蘋果及甜瓜果實的PAL與C4H活性，促進(jìn)總酚、類黃酮合成的結(jié)果類似[22-23]。據(jù)報道，NO作為信號分子可以激活PAL，促進(jìn)甜瓜果實中總酚、類黃酮的合成[23-24]；NO還可促進(jìn)桃果實中茉莉酸(JA)和水楊酸(SA)以及馬鈴薯塊莖中H2O2的合成，而JA、SA和H2O2可作為信號分子激活苯丙烷代謝[25-28]。JA可上調(diào)鹽芥中芥子油苷生物合成轉(zhuǎn)錄因子MYB28和MYB51的表達(dá)，從而啟動鹽芥對損傷及非生物脅迫的響應(yīng)[22]；SA可誘導(dǎo)瞿麥DsMYB的表達(dá)，增強瞿麥對鹽脅迫的抗性[22]。此外，SNP處理還可誘導(dǎo)蘋果果實的莽草酸途徑，促進(jìn)L-苯丙氨酸的合成，從而為苯丙烷代謝提供所需底物[22]。據(jù)此，我們認(rèn)為NO可能通過誘導(dǎo)JA、SA等信號分子合成，激活莽草酸途徑來促進(jìn)苯丙烷代謝，從而提高酚酸和類黃酮的合成水平。

SNP處理有效降低了愈傷期間蘋果果實的失重率和病情指數(shù)，該結(jié)果與SNP降低馬鈴薯塊莖愈傷期間失重率和病情指數(shù)的結(jié)果一致[6]。由于NO促進(jìn)了聚酚軟木酯及木質(zhì)素在傷口處的沉積，通過形成物理屏障進(jìn)而抑制了水分經(jīng)由傷口蒸騰，有效抵御了病原物的侵染和擴展[6]。NO還可以促進(jìn)煙草和番茄SA和JA的合成，而SA和JA可調(diào)控植物氣孔關(guān)閉，從而減少水分經(jīng)由氣孔蒸騰[38,16]。另外，NO還可抑制番木瓜的呼吸速率，通過降低呼吸強度來減少呼吸底物的消耗，進(jìn)而減輕失重[39]。因此，我們認(rèn)為SNP處理減少蘋果愈傷期間失重率的原因除了促進(jìn)傷口處物理屏障的形成外，還與誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉，減少呼吸底物消耗有關(guān)。此外，苯丙烷代謝形成的酚類和類黃酮物質(zhì)還能直接抑制病原菌的生長發(fā)育[40,22]，NO還可促進(jìn)病程相關(guān)蛋白PR1的積累，從而破壞病原菌的結(jié)構(gòu)[41]。因此，我們認(rèn)為SNP處理減少蘋果愈傷期間病情指數(shù)的原因除了促進(jìn)傷口處物理屏障的形成外，還與提高總酚和類黃酮含量，增加病程相關(guān)蛋白有關(guān)。

4 結(jié) 論

SNP處理激活了蘋果果實傷口處PAL、C4H和CAD的活性，促進(jìn)了肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸、總酚和類黃酮以及p-香豆醇、松柏醇、芥子醇及木質(zhì)素的合成；SNP處理還提高了果實傷口處的H2O2含量和POD活性。上述苯丙烷代謝產(chǎn)物在H2O2和POD共同作用下氧化聚合形成木質(zhì)素在傷口表面沉積，木質(zhì)素作為物理屏障有效降低了果實愈傷期間的失重率和病情指數(shù)，促進(jìn)了蘋果愈傷。