◎ 焦春霞,王國(guó)昌
(1.河南科技學(xué)院,河南 新鄉(xiāng) 453003;2.漯河食品職業(yè)學(xué)院,河南 漯河 462300)
艾(Artemisia argyiLevl.et Vant.)是菊科植物蒿屬草本植物,在我國(guó)分布廣泛[1]。艾葉是艾的干燥葉,藥用歷史悠久,性溫,味辛、苦,富有香氣[2]。艾葉中含有多種功效成分,主要有精油、多糖、黃酮和有機(jī)酸等[3-5]。近年來(lái),精油、多糖和黃酮是學(xué)者研究的熱點(diǎn)[6-9]。艾葉精油是主要活性成分,具有防蟲(chóng)、抗菌、防過(guò)敏、祛痰和鎮(zhèn)咳等功效[10],其主要化學(xué)成分有桉油精、萜品烯醇、石竹烯、蒿醇、樟腦、冰片、樟腦萜、d-水芹烯和新臭根子草醇等,在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用[11-13]。鑒于此,本文采用水蒸氣蒸餾法提取艾葉精油,并優(yōu)化其工藝,為其開(kāi)發(fā)利用提供一種新途徑。
艾葉采收于新鄉(xiāng)周邊地區(qū),經(jīng)陰干備用;無(wú)水硫酸鈉購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
DFY-500粉碎機(jī),溫州頂力醫(yī)療器械有限公司;SXKW調(diào)溫型電熱套,東莞市科恒儀器設(shè)備有限公司;BCD-272WDPD冰箱,青島海爾集團(tuán)有限公司; ZA-100電子天平,上海贊維衡器有限公司;Clevenger- type apparatus提取裝置為實(shí)驗(yàn)室組裝。
1.3.1 艾葉預(yù)處理
將陰干的艾葉進(jìn)行粉碎,過(guò)20目篩,得到艾葉粉,備用。
1.3.2 艾葉精油的提取方法
稱取一定質(zhì)量的艾葉粉,放入蒸餾瓶中,加入600 mL蒸餾水,浸泡,利用Clevenger-type apparatus裝置提取精油,提取完成后,將上層油相轉(zhuǎn)入棕色玻璃瓶中,加入適量無(wú)水硫酸鈉去除水分,得到艾葉精油,然后放入4 ℃冰箱,避光保存,備用。
1.3.3 艾葉精油產(chǎn)油率的計(jì)算
艾葉精油產(chǎn)油率的計(jì)算公式為:艾葉精油產(chǎn)油 率=(提取艾葉精油質(zhì)量/艾葉粉末質(zhì)量)×100%。
1.3.4 艾葉精油的提取試驗(yàn)設(shè)計(jì)
(1)單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)。準(zhǔn)確稱取10 g經(jīng)預(yù)處理的艾葉粉末,根據(jù)預(yù)試驗(yàn)預(yù)設(shè)浸泡時(shí)間12 h,液料比10∶1(mL·g-1)和提取時(shí)間4 h為單因素試驗(yàn)中的常規(guī)量。以浸泡時(shí)間(3 h、6 h、9 h、12 h和15 h)、液料比(4∶1、6∶1、8∶1、10∶1和12∶1)、提取時(shí)間(1 h、2 h、3 h、4 h和5 h)3個(gè)因素變量替換試驗(yàn)中的常規(guī)量。按照1.3.2方法進(jìn)行艾葉精油提取,計(jì)算產(chǎn)油率,研究其對(duì)產(chǎn)油率的影響,每組重復(fù)3次。
(2)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)。在上述單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以浸泡時(shí)間(A)、液料比(B)、提取時(shí)間(C)3個(gè)因素為自變量,以艾葉精油產(chǎn)油率(Y)為響應(yīng)值,進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)。試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1。
表1 試驗(yàn)因素與水平表
每組試驗(yàn),重復(fù)3次,取平均值;用Excel和Design-Expert 8.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析及作圖。
2.1.1 浸泡時(shí)間的影響
由圖1可知,艾葉精油產(chǎn)油率隨著浸泡時(shí)間的增加先增大后減小,當(dāng)浸泡12 h時(shí),產(chǎn)油率達(dá)到最大。這是因?yàn)榻輹r(shí)間增加,水不斷向艾葉內(nèi)部滲透,艾葉組織細(xì)胞溶脹,浸泡時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞溶脹破裂的數(shù)量和程度越大,加速了精油擴(kuò)散溶出,產(chǎn)油率升高;但浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞內(nèi)部的精油部分發(fā)生揮發(fā),產(chǎn)油率降低。因此,浸泡時(shí)間取12 h為宜。
2.1.2 液料比的影響
由圖2可知,艾葉精油產(chǎn)油率隨著液料比的增大先升高后降低。這可能是由于溶劑量增多,物料浸潤(rùn)程度增大,易于精油擴(kuò)散溶出,產(chǎn)油率升高。液料比過(guò)小,溶劑無(wú)法充分浸潤(rùn)物料,影響提取效果,產(chǎn)油率不高;液料比過(guò)大,易導(dǎo)致溶液暴沸,精油溢出,產(chǎn)油率下降。因此,液料比選10∶1為宜。
2.1.3 提取時(shí)間的影響
由圖3可知,艾葉精油產(chǎn)油率隨著提取時(shí)間的增加,先升高后降低。這可能是由于提取時(shí)間增加,細(xì)胞中的精油溶出增加,產(chǎn)油率升高;當(dāng)提取時(shí)間超過(guò)4 h時(shí),精油已溶出徹底,再增加提取時(shí)間,反而會(huì)導(dǎo)致精油部分揮發(fā),造成產(chǎn)油率下降。因此,提取時(shí)間取4 h為宜。
2.2.1 回歸模型的建立
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以浸泡時(shí)間、液料比和提取時(shí)間為影響因素,艾葉精油產(chǎn)油率(Y)為響應(yīng)值,試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果表
利用Design-Expert 8.0軟件,對(duì)數(shù)據(jù)回歸擬合,結(jié)果 為:Y=0.90-6.375×10-3A-0.039B-0.017C+0.01AB+ 0.013AC+0.016BC-0.098A2-0.15B2-0.13C2。
2.2.2 方差分析
對(duì)上述模型進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表3。
由表3分析可知,回歸模型P<0.01,該模型極顯著;失擬項(xiàng)P=0.459 8>0.1,不顯著,說(shuō)明該模型成立;R2為0.999 8,表明模型擬合較好,適用于分析和預(yù)測(cè)艾葉精油的提取工藝。根據(jù)F值可知,各因素的影響排序?yàn)锽>C>A。
表3 方差分析結(jié)果表
2.2.3 最佳條件的確定及驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
通過(guò)回歸模型預(yù)測(cè),艾葉精油的提取工藝的理論最佳參數(shù)為浸泡時(shí)間11.87 h,液料比9.72∶1.00,提取時(shí)間3.92 h,艾葉精油理論產(chǎn)油率為0.902%。為便于實(shí)際操作,將工藝條件調(diào)整為浸泡時(shí)間12 h,液料比10∶1,提取時(shí)間4 h,在此條件下,進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),經(jīng)3次驗(yàn)證試驗(yàn),得到實(shí)際艾葉精油產(chǎn)油率平均值為0.899%,與預(yù)測(cè)值相對(duì)誤差0.33%,表明該模型 可靠。
采用水蒸氣蒸餾法提取艾葉精油,并利用響應(yīng)面對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。得到最佳工藝條件為浸泡時(shí)間12 h,液料比10∶1,提取時(shí)間4 h,在此條件下,艾葉精油產(chǎn)油率為0.899%,本試驗(yàn)結(jié)論可為艾葉精油的開(kāi)發(fā)、推廣及應(yīng)用提供一定的參考。