王闊鵬 晏琦 程志強(qiáng) 吉慧敏 魏元浩 林淼

摘要： 本研究旨在研究2種白腐真菌及其組合預(yù)處理花生秧的效果。選取單菌株糙皮側(cè)耳 （Pleurotus ostreatus ） （Po）、黃孢原毛平革菌 （Phanerochaete chrysosporium） （Pc）和組合菌株（PoPc）處理花生秧，并設(shè)置對照組花生秧（CK1）、滅菌花生秧（CK2）測定發(fā)酵后10 d、20 d和30 d養(yǎng)分含量變化。利用尼龍袋法評定其粗蛋白質(zhì)（ CP）、干物質(zhì)（DM）、中性洗滌纖維（NDF） 和酸性洗滌纖維（ADF）的 72 h瘤胃動態(tài)降解率和有效降解率。結(jié)果表明，（1）Po處理花生秧30 d時(shí)CP含量顯著增加（ P < 0.05）。Pc和PoPc處理30 d花生秧的粗蛋白含量、粗灰分含量差異不顯著（ P > 0.05），2種真菌的組合存在拮抗作用，降解木質(zhì)素效果小于單一菌株。（2）Po處理NDF、ADF瘤胃有效降解率顯著高于Pc處理和PoPc處理（ P < 0.05），DM瘤胃有效降解率顯著低于Pc處理和PoPc處理（ P < 0.05）。3種真菌預(yù)處理方式同CK1相比未顯著改變CP有效降解率。 綜上，與Pc處理和PoPc處理相比，Po處理花生秧提高了CP含量，減少了其他可利用碳水化合物在發(fā)酵過程中的損失;Po具有提高花生秧營養(yǎng)價(jià)值的潛力。

關(guān)鍵詞： 花生秧; 糙皮側(cè)耳; 黃孢原毛平革菌; 瘤胃降解率; 養(yǎng)分含量

中圖分類號： S816.6?? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A?? 文章編號： 1000-4440（2022）03-0756-09

Effects of fermentation treatment of peanut vine with ?Pleurotus ostreatus ?and ?Phanerochaete chrysosporium ?on nutrient content and rumen degradation characteristics of dairy cows

WANG Kuo-peng， YAN Qi， CHENG Zhi-qiang， JI Hui-min， WEI Yuan-hao， LIN Miao

（College of Animal Science and Technology， Yangzhou University， Yangzhou 225009， China）

Abstract： This experiment was conducted to investigate the effects of two white rot fungi and their combination on the pretreatment of peanut vine. A single strain of ?Pleurotus ostreatus ?（Po）， ?Phanerochaete chrysosporium ?（PC） and a combination strain （PoPC） were selected to treat peanut vine， and control peanut vine （CK1） and sterilized peanut vine （CK2） were set to determine the changes of nutrient contents at 10 d， 20 d and 30 d after fermentation. The dynamic degradation rates and effective degradation rates of dry matter （DM）， crude protein （CP）， neutral detergent fiber （NDF） and acid detergent fiber （ADF） at 72 h were evaluated by nylon bag method. The results showed that the crude protein content of peanut vine pretreated with Po for 30 d increased significant （ P < 0.05）. The crude protein content and crude ash content of peanut vine pretreated by Pc and PoPc for 30 days had no significant difference （ P > 0.05）. The combination of the two fungi had antagonistic effect， and the lignin degradation effect was less than that of single strain. The rumen effective degradation rate of NDF and ADF in Po treatment was significantly higher than that in Pc and PoPc treatments （ P < 0.05）， and the rumen effective degradation rate of DM in Po treatment was significantly lower than that in Pc and PoPc treatments （ P < 0.05）. The three fungal pretreatment methods did not significantly change the effective degradation rate of CP compared with CK1. In conclusion， compared with Pc and PoPc， Po pretreatment of peanut vine increased CP content and reduced the loss of other available carbohydrates during fermentation. Po has the potential to improve the nutritional value of peanut vine.

Key words： peanut vine; ?Pleurotus ostreatus ; ?Phanerochaete chrysosporium ; rumen degradation rate; nutrient content

中國農(nóng)作物秸稈每年的理論產(chǎn)量約為9.0× 10 8 ?t，秸稈綜合利用率達(dá)到80.1%，其中飼料化利用占比僅為 18.8% [1] ?。秸稈中細(xì)胞壁的主要成分為半纖維素、纖維素和木質(zhì)素 [2] ，瘤胃不降解木質(zhì)素，半纖維素、纖維素與木質(zhì)素通過共價(jià)鍵、醚鍵和酯鍵等方式結(jié)合，阻礙纖維素酶的水解及瘤胃中的微生物利用 [3-4] 。采用預(yù)處理方式破壞秸稈木質(zhì)素結(jié)構(gòu)，使瘤胃微生物及消化酶能夠更加容易接觸到纖維素，達(dá)到提高秸稈的飼料利用率的目的 [5] 。目前生物法是預(yù)處理秸稈的主要方式之一，利用微生物發(fā)酵或酶解等方式使秸稈中的營養(yǎng)物質(zhì)被吸收轉(zhuǎn)化，進(jìn)而生產(chǎn)出富含菌體蛋白、維生素等成分的生物飼料，解決了難消化的粗纖維轉(zhuǎn)化為可消化養(yǎng)分的難題，但其缺點(diǎn)是作用效果往往會受到工藝條件的影響 [6] 。芽孢桿菌屬細(xì)菌、木霉屬真菌 [7-8] 及白腐真菌 [9-10] 是常用的可降解木質(zhì)纖維素的菌種，可用于生產(chǎn)高品質(zhì)的發(fā)酵粗飼料。降解木質(zhì)素的真菌主要有白腐菌、褐腐菌、軟腐菌 3 類，其中只有白腐菌能獨(dú)立降解木質(zhì)素 [11] 。

花生在中國油料生產(chǎn)中種植面積僅次于油菜，居第二位，2019年中國花生種植面積為4.633× 10 6 ?hm2 [12] ?；ㄉN植面積的擴(kuò)大產(chǎn)生了大量花生秧。隨著中國奶牛規(guī)模化養(yǎng)殖的發(fā)展，對優(yōu)質(zhì)粗飼料的需求量也迅猛增加，深入研究花生秧預(yù)處理方法，用以代替苜蓿等牧草，成為亟待解決的問題。本研究以白腐真菌發(fā)酵花生秧為研究對象，通過測定花生秧在發(fā)酵過程中養(yǎng)分含量的變化，評價(jià)其降解木質(zhì)素的特點(diǎn)和能力，通過尼龍袋法評價(jià)不同白腐真菌預(yù)處理花生秧在奶牛瘤胃中的降解率的差異，為提高花生秧的降解率及飼喂價(jià)值提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌種及接種載體制備

本研究所用菌種為糙皮側(cè)耳（ Pleurotus ostreatus ）和黃孢原毛平革菌（ Phanerochaete chrysosporium ），由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)徐春城課題組贈予。2種真菌活化后接種到麥芽提取物培養(yǎng)基上，24 ℃恒溫培養(yǎng)至菌絲鋪滿培養(yǎng)皿。稱取粟米200 g，加熱調(diào)制到水分含量為60%左右，105 ℃烘干米粒表面水分使其分散不黏連，裝入聚丙烯發(fā)酵袋滅菌（121 ℃，20 min）。在超凈臺中分別接種上述2種白腐真菌至粟米中，24 ℃培養(yǎng)14 d，菌絲布滿米粒表面后，置于4 ℃冰箱中保存，備用。

1.2 花生秧來源及處理

花生秧風(fēng)干樣于2020年10月取自河南省許昌市，使用前用鍘刀切碎至2～ 3 cm，自來水浸泡過夜，最后將水分含量調(diào)制成78.2%。每袋200 g分裝至聚丙烯菌袋（長37 cm×寬20 cm）中， 滅菌（121 ℃，20 min），超凈臺冷卻備用。

1.3 接種及發(fā)酵

發(fā)酵試驗(yàn)共3個(gè)處理組，糙皮側(cè)耳發(fā)酵處理花生秧（Po）、黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理花生秧（Pc）及糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌復(fù)合發(fā)酵處理花生秧（PoPc），同時(shí)設(shè)置原料花生秧對照組（CK1）和花生秧滅菌對照組（CK2）。用無菌鑷子向滅菌后花生秧中接種入2%（質(zhì)量比）的長滿菌絲的粟米粒，復(fù)合處理組糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌各接入1%的粟米粒 。將菌包放在溫度為 24 ℃、相對濕度為 75%的培養(yǎng)箱中發(fā)酵。各組在發(fā)酵的第 0 d、10 d、20 d和30 d進(jìn)行取樣，每個(gè)處理每次隨機(jī)取樣 3個(gè)菌包，烘箱中65 ℃烘48 h，然后粉碎至可通過 2 mm的篩網(wǎng)，用于瘤胃尼龍袋試驗(yàn)。剩余部分用于相關(guān)指標(biāo)測定，所有試驗(yàn)測定均設(shè)置3個(gè)重復(fù)?；ㄉ眇B(yǎng)分含量見表1。

1.4 測定項(xiàng)目與方法

1.4.1 花生秧養(yǎng)分含量 干物質(zhì)（DM）含量、粗蛋白（CP）含量、粗灰分（ASH）含量的測定參考張麗英 [13] 的方法測 定 ;CP 含 量 使 用FOSS 半自動 凱 氏 定 氮 儀測 定; 中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、木質(zhì)素（ADL）含 量根據(jù) Van Soest等 [14] 的方法使 用 ANKOM-2000I 全自動纖維分析儀測定。

1.4.2 養(yǎng)分含量損失率計(jì)算 養(yǎng)分含量損失率計(jì)算參考牛東澤 [15] 的方法：

DM 1 = （m 2 -m 1 ）×DM 0 -（m 3 -m 1 ）（m 2 -m 1 ）×DM 0? ×100%

式中， DM 1 為樣品發(fā)酵后干物質(zhì)的損失率; m 1 培養(yǎng)袋質(zhì)量; DM 0 為原樣品的干物質(zhì)含量; ?m 2 為培養(yǎng)袋和未發(fā)酵樣品鮮質(zhì)量; m 3 培養(yǎng)袋和發(fā)酵樣品干質(zhì)量。

1.4.3 瘤胃降解率指標(biāo) 本試驗(yàn)在揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)牧場進(jìn)行，選用3頭體質(zhì)狀況良好、體質(zhì)量（625± 25） kg、安裝永久性瘤胃瘺管的荷斯坦奶牛，試驗(yàn)?zāi)膛；A(chǔ)飼糧組成及飼喂方式參考王敬林等 [16] ?的研究。稱取被測樣品3 g左右放入處理好的尼龍袋中，5個(gè)組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)置2 個(gè)平行，3 次重復(fù)。尼龍袋固定于塑膠管，按同時(shí)放入、依次取出原則 [17] ，分別在6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h后取出，沖洗干凈，65 °C烘干，稱質(zhì)量并保存。

某時(shí)間點(diǎn)瘤胃降解率=（降解前養(yǎng)分含量-該時(shí)間點(diǎn)降解后養(yǎng)分含量）/降解前袋內(nèi)養(yǎng)分含量×100%。

瘤胃動力學(xué)數(shù)學(xué)模型和有效降解率（ ED ）參照Orskov 等 [18] 的計(jì)算方法。某飼料營養(yǎng)成分實(shí)時(shí)瘤胃降解率（ P ）符合指數(shù)曲線：

P ?= a + b ?（ 1-e ?-? ?ct? ）

ED ?= a + bc /（ k + c ）

式中， t 為瘤胃中飼料停留的時(shí)間（h）; a 為快速降解部分（%）; b 為慢速降解部分（%）; c 為 b 的降解速率（%）; ?ED 為飼料營養(yǎng)物質(zhì)的有效降解率（%）; k 為瘤胃食糜外流速率，參考鄭向麗等 [19] 的研究， k 取值為0.023 5 。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2016和SPSS21.0對試驗(yàn)數(shù)據(jù)整理并進(jìn)行雙因素方差分析，采用單因素方法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理花生秧的養(yǎng)分含量變化

由表2可知，白腐真菌菌種和發(fā)酵時(shí)間的互作效應(yīng)對花生秧的 NDF和 ADF含量均有極顯著影響（ P < 0.01），對木質(zhì)素與灰分含量無顯著影響（ P > 0.05）。發(fā)酵時(shí)間的延長有利于提高發(fā)酵處理花生秧的粗蛋白含量，最大值出現(xiàn)在發(fā)酵30 d的Po組。另外，Po組發(fā)酵時(shí)間對發(fā)酵處理花生秧的NDF 和 ADF 含量無影響，但Pc、PoPc兩組發(fā)酵時(shí)間與發(fā)酵處理花生秧 NDF 和 ADF 含量呈負(fù)相關(guān)（ P < 0.01）;Pc組對花生秧ADL降解效果最好，與發(fā)酵時(shí)間呈負(fù)相關(guān)（ P < 0.05）。在發(fā)酵10 d、20 d和30 d時(shí)，這3個(gè)時(shí)間點(diǎn)Po組與Pc組、PoPc 2組粗灰分含量差異顯著（ P < 0.05），粗灰分含量隨發(fā)酵時(shí)間的延長而增大（ P < 0.05）。

2.2 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理花生秧的養(yǎng)分含量損失率

由表3 可知，白腐真菌菌種和發(fā)酵時(shí)間的互作效應(yīng)對花生秧 DM、ADL和纖維素降解量均有極顯著影響（ P < 0.01）。Pc組和PoPc組的各養(yǎng)分損失率均與發(fā)酵時(shí)間呈正相關(guān)關(guān)系（ P < 0.05）。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長，3個(gè)處理組的DM、ADL和NDF損失率均差異顯著（ P < 0.05）。Po組與Pc組和PoPc組DM損失率在各時(shí)間段均差異極顯著（ P < 0.01）。Po組的ADL在各時(shí)間段的損失率差異不顯著（ P > 0.05），但在發(fā)酵30 d時(shí)ADL損失率顯著小于Pc組與PoPc組（ P < 0.05）; PoPc組30 d時(shí)NDF損失率顯著高于其他2個(gè)處理組（ P < 0.05）;Pc組和PoPc組在發(fā)酵30 d 時(shí)花生秧纖維素和半纖維素?fù)p失率差異不顯著（ P > 0.05），但2個(gè)組纖維素和半纖維素?fù)p失率顯著大于Po組（ P < 0.05）。

2.3 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧DM降解特性

由表4可知，CK1 72 h DM降解率高于其他各組（ P < 0.05）。Pc組和PoPc組在6 h時(shí)DM降解率均高于其他組（ P < 0.05），快速降解部分Pc組和PoPc組顯著高于其他各組（ P < 0.05）;Po組在各時(shí)間點(diǎn)均低于其他各組（ P < 0.05），CK2在各時(shí)間點(diǎn)（除12 h外）DM降解率顯著低于CK1（ P < 0.05）;CK1與Pc組DM有效降解率高于PoPc組、CK2和Po組（ P < 0.05）。

2.4 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧NDF降解特性

由表5可知， CK1、CK2與Po組12 h NDF降解率差異不顯著 （ P > 0.05）;Pc組在6 h和12 h時(shí)NDF降解率顯著高于PoPc 組（ P < 0.05），12 h后這2組NDF降解率相似，且顯著低于其他3組（ P < 0.05）;在24 h、36 h 時(shí)Po與 CK2兩組NDF的降解率顯著低于CK1（ P < 0.05），且出現(xiàn)降解延滯期。CK1 NDF降解率在72 h時(shí)間點(diǎn)最高，但與Po、CK2兩組差異不顯著（ P > 0.05）。Pc組的快速降解部分顯著高于其他各組（ P < 0.05）;Pc組與PoPc兩組的有效降解率低于Po組、CK1和CK2（ P < 0.05）。

2.5 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧ADF降解特性

由表6可知，36 h時(shí)CK1的ADF降解率顯著高于CK2（ P < 0.05），在其他時(shí)間點(diǎn)兩者差異不顯著，除6 h外，這兩組在不同時(shí)間段均高于其他3組（ P < 0.05）。Pc組和PoPc組各時(shí)間點(diǎn)ADF降解率相近，兩組在72 h的ADF降解率極顯著低于其他3組（ P < 0.01）。Po組的潛在降解部分與CK1差異不顯著（ P >0.05）;CK1與CK2兩組在慢速降解部分均顯著高于其他組（ P < 0.05）。

2.6 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧CP降解特性

由表7可知，在6 h和12 h時(shí)Pc組與PoPc組CP降解率無顯著差異，均高于其他3組（ P < 0.05），兩組均在6 h后降解率平緩上升;各時(shí)間點(diǎn)Po組和CK1 CP降解率差異不顯著（ P > 0.05）;CK2 CP降解率最低（ P < 0.05）;在12 h后，除CK2外，其他4組CP降解率相近。Pc組與PoPc組快速降解部分CP降解率高于其他各組（ P < 0.05），兩者無差異。Po組與CK1慢速降解部分CP降解率顯著高于其他組（ P < 0.05）。

3 討 論

3.1 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧養(yǎng)分變化

花生秧是一種優(yōu)質(zhì)的粗飼料，本研究中花生秧養(yǎng)分含量與前人報(bào)道結(jié)果相符 [19-20] 。白腐真菌對木質(zhì)纖維素的降解程度取決于發(fā)酵底物的特性，其通過促進(jìn)纖維素和半纖維素釋放而改善瘤胃發(fā)酵能力來提高秸稈的營養(yǎng)價(jià)值 [21] 。在白腐真菌發(fā)酵過程中，秸稈中木質(zhì)素的降解同時(shí)伴隨著纖維素和半纖維素的降解，導(dǎo)致有機(jī)物損失嚴(yán)重 [22] 。本試驗(yàn)中，Pc組處理花生秧30 d后DM和ADL損失率分別為43.9%和63.6%，PoPc組處理花生秧30 d 后DM和ADL損失率（42.9%、61.9%）稍低于Pc組，表明2種真菌對花生秧的發(fā)酵無協(xié)同作用，與前人研究混合真菌發(fā)酵其他農(nóng)作物秸稈的研究結(jié)果不同 [23-25] 。白腐真菌菌種和發(fā)酵天數(shù)的交互作用對花生秧ADL的含量變化影響不顯著，與牛東澤 [15] 研究真菌發(fā)酵小麥秸稈的結(jié)論一致。白腐真菌在生長過程中能夠產(chǎn)生菌體細(xì)胞蛋白質(zhì)，本研究中花生秧發(fā)酵隨著時(shí)間的增加CP含量增加。通常情況下，隨著碳水化合物被降解為 CO2 和 H2 O，基質(zhì)中 NDF 和 ADF 的含量出現(xiàn)下降 [26] ，本研究中Po處理花生秧后出現(xiàn)了NDF 和 ADF 的含量稍上升的結(jié)果，這一現(xiàn)象可能是由于其他組分（ADL）的損失造成NDF 與 ADF表觀值升高，試驗(yàn)結(jié)果與Niu等 [3] 利用白腐真菌處理小麥秸稈后ADF含量變化的研究結(jié)果相同。本研究中Pc處理花生秧出現(xiàn)了較高的DM、纖維素和半纖維素?fù)p失率，說明該菌生長特點(diǎn)為非選擇性降解纖維素、半纖維素和木質(zhì)素 [21] 。因此，在本研究的試驗(yàn)條件下，該菌不是發(fā)酵飼用花生秧的最佳菌種。

3.2 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧DM降解特性

DM 瘤胃降解率反映了有機(jī)物質(zhì)在秸稈內(nèi)的累積量 [27] 。DM 降解率受飼料原料品種、飼料粒度、日糧精粗比、奶牛所處泌乳階段等因素影響 [28] ?。農(nóng)作物秸稈等粗飼料木質(zhì)素含量高，秸稈在真菌發(fā)酵培養(yǎng)中，菌絲能夠分泌纖維素酶及木質(zhì)素降解酶，使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)松散，木質(zhì)素中的苯環(huán)被解鏈，使其松軟，秸稈相對接觸面積增大，有助瘤胃內(nèi)微生物對底物的附著及消化，加快降解速率 [29] 。本研究中在瘤胃發(fā)酵前期Pc組12 h時(shí)DM 降解率為40.91%，而Po處理花生秧后干物質(zhì)含量無大變化，DM有效降解率僅為25.1%。Po組有效降解率顯著低于Pc組，原因可能為不同菌種發(fā)酵秸稈后產(chǎn)物不同，阻礙了瘤胃微生物對其消化利用，文江南等 [30] 利用平菇處理水稻秸稈，抑制了水稻秸稈的瘤胃纖維降解、揮發(fā)性脂肪酸生成。本研究中花生秧干物質(zhì)的有效降解率為45.8%左右，稍低于前人研究結(jié)果 [31] 。

3.3 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧NDF和ADF降解特性

纖維在瘤胃中的消化主要受木質(zhì)素的影響，纖維素、半纖維素和木質(zhì)素間形成的酯鍵、醚鍵等阻礙了微生物的附著，影響瘤胃對粗飼料的消化利用 [32] 。本研究中Pc和PoPc兩組NDF與ADF有效降解率最低，且Po組顯著高于這2個(gè)組。上述結(jié)果與干物質(zhì)降解率恰好相反，原因可能是Pc處理后花生秧可溶性碳水化合物含量較高，并且Pc組和PoPc組預(yù)處理花生秧時(shí)消耗了過多的纖維性養(yǎng)分。本研究中5種花生秧NDF與ADF降解率在前12 h變化較小，12 h后降解率明顯提高，至48 h后趨于平緩，結(jié)果與前人研究結(jié)果 [33] 基本一致。本研究中花生秧 NDF與ADF 的有效降解率為 23.36%和25.38%，與蔡阿敏等 [20] 報(bào)道的夏季花生秧NDF和ADF的有效降解率31.48%、30.64%，馮豆等 [34] 報(bào)道的花生秧NDF和ADF的有效降解率36.52%、34.07%以及劉艷芳等 [32] 報(bào)道的花生秧NDF和ADF的有效降解率27.01%、27.43%相比較低。王加啟等 [35] 發(fā)現(xiàn)隨著日糧精粗比的增加，NDF 與 ADF 的降解率均有不同程度的降低。

3.4 糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌發(fā)酵處理的花生秧CP降解特性

微生物處理秸稈，可利用秸稈將非蛋白質(zhì)氮轉(zhuǎn)化為自身菌體蛋白質(zhì)，提高秸稈發(fā)酵物的蛋白質(zhì)含量及消化率，將秸稈中粗纖維等降解為反芻動物容易消化吸收的單糖、雙糖、氨基酸等小分子物質(zhì) [29] 。本研究中花生秧的CP有效降解率低于蔡阿敏等 [20] 、劉艷芳等 [32] 及馮豆等 [34] 研究的花生秧有效降解率，可能是由于奶牛個(gè)體與飼喂的全混合日糧（TMR）不同，使得瘤胃消化環(huán)境不同 [36] 。試驗(yàn)中Pc 組和PoPc組的CP的快速降解部分顯著高于其他3組，苜蓿作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)來源，其降解率高且降解速率快，而本研究中Pc和PoPc處理花生秧CP的瘤胃快速降解部分為29.4%和29.9%，一級苜蓿的快速降解部分為31.7% [32] ，這說明花生秧經(jīng)過真菌發(fā)酵后，其中的蛋白質(zhì)更易消化。Po 組CP有效降解率與CK1、Pc 組和PoPc組差異不顯著，但Po處理后的花生秧自身蛋白質(zhì)含量提高，同未處理的花生秧相比，Po處理后瘤胃內(nèi)降解蛋白質(zhì)的當(dāng)量也增加。CK2的CP有效降解率顯著低于其他4組，其機(jī)制需要進(jìn)一步研究。同種粗飼料用不同真菌處理， CP 含量高的在瘤胃中的降解率不一定高，只通過化學(xué)分析方法判斷其營養(yǎng)價(jià)值具有單一性 [32] ，需要結(jié)合動物粗飼料采食量及瘤胃體外產(chǎn)氣培養(yǎng)判斷其可利用性。

4 結(jié) 論

3種發(fā)酵預(yù)處理方式中，Po預(yù)處理花生秧效果最好，可降低ADL含量并增加CP含量;干物質(zhì)損失率最低（4.4%）。

通過瘤胃尼龍袋試驗(yàn)，糙皮側(cè)耳和黃孢原毛平革菌單獨(dú)及混合預(yù)處理花生秧的瘤胃CP有效降解率與花生秧原料相近。但從總體營養(yǎng)成分上看，白腐真菌預(yù)處理提高了蛋白質(zhì)價(jià)值，Po處理的花生秧NDF、ADF有效降解率顯著高于Pc 和PoPc 處理。

參考文獻(xiàn)：

[1] 柴如山，王擎運(yùn)，葉新新，等.我國主要糧食作物秸稈還田替代化學(xué)氮肥潛力[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2019，38（11）：2583-2593.

[2] 馮仰廉.反芻動物營養(yǎng)學(xué)[M]. 北京： 科學(xué)出版社，2004： 314.

[3] NIU D Z，ZHAO S， YANG S H，et al.Lignin plays a negative role in the biochemical process for producing lingo cellulosic biofuels[J].Current Opinion in Biotechnology，2014，27： 38-45.

[4] RAFFRENATO E，F(xiàn)IEVISOHN R，COTANCH K W， et al. Effect of lignin linkages with other plant cell w all components on ?in vitro ?and ?in vivo ?neutral detergent fiber digestibility and rate of digestion of grass forages[J].Journal of Dairy Science，2017，100（ 10） ： 8119-8131.

[5] 左颯颯. 白腐真菌降解玉米秸稈機(jī)理及其應(yīng)用研究 [D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2019.

[6] NIU D Z，ZUO S， JIANG D， et al. Treatment using white rot fungi changed the chemical composition of wheat straw and enhanced digestion by rumen microbiota in vitro [J].Animal Feed Science and Technology， 2018， 237： 46-54.

[7] 刁其玉，國春艷.提高粗飼料利用率的途徑[J].糧食與飼料工業(yè)，2005（10）：34-36.

[8] SNCHEZ C. Lignocellulosic residues： biodegradation and bioconversion by fungi [J].Biotechnology Advances， 2009，27（2）：185-194.

[9] BEIKAI V，JOKHA I ，KACHLI E，et al.The comparison of white rot basidiomycetes lignocellulolytic potential in wheat straw solidstate fermentation[J].Ecological Engineering and Environment Protection，2014（1）：69-74.

[10] SHAMA K，AOA D S. Fungal degradation of lignocellulosic residues： an aspect of improved nutritive quality [J]. Criticals Views in Microbiology，2015，41（1）：52-60.

[11] 李志蘭，杜孟浩.木質(zhì)素的生物合成及降解研究現(xiàn)狀[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（4）：914-918

[12] 中華人民共和國國家統(tǒng)計(jì)局.中國統(tǒng)計(jì)年鑒 2020[M].北京： 中國統(tǒng)計(jì)出版社，2020.

[13]? 張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)[M].北京： 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2003.

[14] VAN SOEST P J，OBE TSON J B，LEWIS B A.Methods for dietary fiber，neutral detergent fiber，and nonstarch polysaccharides in relation to animal nutrition[J]. Journal of Dairy Science，1991，74 （10）：3583-3597.

[15] 牛東澤. 白腐菌發(fā)酵對小麥秸稈營養(yǎng)價(jià)值及微生物多樣性的影響 [D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2018.

[16] 王敬林，魏源浩，武小嬌，等. 大蒜不同部位副產(chǎn)物與奶牛常規(guī)粗飼料瘤胃降解特性對比研究[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2021，33（10）：5708-5716.

[17] 王加啟.反芻動物營養(yǎng)學(xué)研究方法[M].北京： 現(xiàn)代教育出版社，2011.

[18] ORSKOV E，MCDONALD I.The estimation of protein degradability in the rumen from incubation measurements weighted according to rate of passage[J].Journal of Agricultural Science，1979，92（2）：499-503.

[19] 鄭向麗，王俊宏，徐國忠，等. 4種花生秸稈在奶牛瘤胃中的降解特性[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)， 2016， 25（5）： 149-155.

[20] 蔡阿敏，薛 宵，趙佳浩，等. 春花生秧與夏花生秧的營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)及瘤胃降解率比較[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2019， 31（4）： 1823-1832.

[21] 李 洋，竇秀靜，張幸怡，等. 非常規(guī)粗飼料分級指數(shù)和相對價(jià)值比較研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2016， 47（2）： 54-60.

[22] SHARMA R， ARORA D. Changes in biochemical constituents of paddy straw during degradation by white rot fungi and its impact on ?in vitro ?digestibility [J]. Journal of Applied Microbiology， 2010， 109： 679-686.

[23] 王 志，陳 雄，王實(shí)玉，等.擬康氏木霉和白腐菌混菌發(fā)酵處理稻草秸稈的研究[J].可再生能源，2009，27（2）：36-39.

[24] 張仲卿，張愛忠，姜 寧. 混合真菌發(fā)酵對玉米秸稈纖維素與木質(zhì)素降解率的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2019， 31（3）： 1385-1395.

[25] 張立霞. 纖維降解菌組合的篩選、優(yōu)化及對玉米秸稈的降解效果 [D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院， 2014.

[26] 趙雪莉. 白腐真菌發(fā)酵對玉米秸稈纖維降解和綿羊飼喂價(jià)值的影響 [D]. 重慶：西南大學(xué)， 2020.

[27] 高月娥，蔡 明，黃必志，等.桑葉在肉牛瘤胃中的降解特性研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)， 2017，36（4）：80-84.

[28] 王立明.奶牛常用飼料瘤胃降解規(guī)律和小腸消化率的研究 [D]. 呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[29] 張立霞，屠 焰，李艷玲，等. 不同微生物菌株及其組合處理對玉米秸稈瘤胃降解率的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2014，26（8）：2433-2444.

[30] 文江南，張秀敏，王 敏，等. 平菇處理小麥和水稻秸稈對纖維成分和體外瘤胃發(fā)酵特征的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2019， 31（2）： 892-899.

[31] 秦雯霄，廉紅霞，付 彤，等.玉米青貯與花生秧配比對奶牛瘤胃中花生秧降解特性的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2015，27（6）：1928-1935.

[32] 劉艷芳，馬 健，都 文，等. 常規(guī)與非常規(guī)粗飼料在奶牛瘤胃中的降解特性[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2018， 30（4）： 1592-1602.

[33] 鄭向麗，王俊宏，徐國忠，等. 4種花生秸稈在奶牛瘤胃中的降解特性[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào)， 2016， 25（5）： 149-155.

[34] 馮 豆. 花生秧營養(yǎng)價(jià)值的評定及其對奶牛瘤胃細(xì)菌多樣性的影響[D]. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2018.

[35] 王加啟，馮仰廉.不同粗飼料日糧發(fā)酵規(guī)律及合成瘤胃微生物蛋白質(zhì)效率研究[J].黃牛雜志， 1994（S2）：82-85，77.

[36] OCAK N. Rumen degradability of dry matter and crude protein of fresh or dry lucerne and grass forages[J]. Journal of Animal and Veterinary Advances，2005，4（2）：324-328.

（責(zé)任編輯：陳海霞）

收稿日期：2021-09-14

基金項(xiàng)目：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目（CARS-36）; 江蘇省高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項(xiàng)目

作者簡介：王闊鵬（1997-），男，河南許昌人，碩士研究生，從事反芻動物營養(yǎng)研究。（E-mail）1285385717@qq.com

通訊作者：林 淼， （E-mail ） linmiao@yzu.edu.cn