滴眼液使用過(guò)程中的微生物檢測(cè)分析

謝美娜，于丹丹，吳真祎

滴眼液是一種眼科最常使用的直接作用于眼表并發(fā)揮治療效果的眼科制劑，其療效及安全性一直受到公眾及臨床關(guān)注[1-4]。滴眼液若主藥本身不具備較強(qiáng)抗菌活性，存在較高污染風(fēng)險(xiǎn)，需要添加適宜防腐劑，預(yù)防使用過(guò)程中的微生物污染，繼而損害眼部健康。但長(zhǎng)期應(yīng)用含防腐劑的滴眼液也會(huì)對(duì)眼表造成一定程度的損傷，此外除了滴眼液本身成分外，滴眼液還會(huì)受到環(huán)境保存、操作者等因素的影響，出現(xiàn)微生物污染風(fēng)險(xiǎn)極高。因此，臨床認(rèn)為需要加強(qiáng)滴眼液微生物污染控制，確保眼病患者可以獲得更好效果[5-6]。而實(shí)施微生物檢測(cè)有利于篩查微生物感染的滴眼液患者，及時(shí)更換滴眼液，降低患者感染風(fēng)險(xiǎn)。但目前臨床對(duì)滴眼液使用過(guò)程中的污染因素研究較多，而對(duì)于使用過(guò)程中的微生物檢測(cè)研究報(bào)道相對(duì)較少[7-8]。本研究對(duì)滴眼液使用過(guò)程中的微生物檢測(cè)進(jìn)行研究分析，旨在為滴眼液合理使用期限提供參考數(shù)據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2018年9月至2020年12月中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)海警總隊(duì)醫(yī)院收治的應(yīng)用滴眼液治療的80例患者，將其使用的80 瓶滴眼液納入研究，并根據(jù)滴眼液種類分為兩組，A 組（左氧氟沙星滴眼液）42例，B組（玻璃酸鈉滴眼液）38例。A 組男29例，女13例；年齡20 ～64歲，平均（42.4±5.7）歲；原發(fā)疾?。喊變?nèi)障32例，青光眼10例。B組男27例，女11例；年齡21 ～65歲，平均（42.4±5.2）歲；原發(fā)疾?。喊變?nèi)障30例，青光眼8例。兩組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。

A 組使用左氧氟沙星滴眼液[參天制藥（中國(guó)）有限公司，規(guī)格：5 ml，國(guó)藥準(zhǔn)字：J20150106]，1 滴/次，3 次/d。B 組使用玻璃酸鈉滴眼液[生產(chǎn)廠家：參天制藥（中國(guó)）有限公司，規(guī)格：5 ml，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20173249]，1 滴/次，3 次/d。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）滴眼液距離有效期時(shí)間均≥21 d；（2）每種滴眼液均為同一廠商且外包裝完整；（3）患者簽署治療知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）眼周原發(fā)性感染性病灶及影響滴眼液污染因素者；（2）長(zhǎng)期服用免疫抑制劑及其他影響眼部菌群分布的藥物。

1.2 方法 兩組患者的滴眼時(shí)間和次數(shù)相同，完成之后蓋緊瓶蓋，使用后的滴眼液均常溫放置在患者床頭保存，患者用藥3 ～7 d后出院帶藥回家繼續(xù)用藥。樣本采集方法：參照《感染性眼病細(xì)菌學(xué)檢查操作專家共識(shí)》進(jìn)行相關(guān)操作。每組均在滴眼液開啟后第1、7、21天，于每天下午3 點(diǎn)進(jìn)行采樣，均由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的護(hù)士采樣操作并記錄，并且將標(biāo)本送檢。瓶口取樣：采用棉簽蘸取少量0.9%氯化鈉注射液，對(duì)滴眼液瓶口全周進(jìn)行輕輕擦拭，完成操作后將棉簽放置于血平板中進(jìn)行涂抹操作，并放置于恒溫培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)置37 ℃）進(jìn)行微生物培養(yǎng)。瓶?jī)?nèi)取樣：采集1 滴滴眼液放置于培養(yǎng)皿中，應(yīng)用定量環(huán)進(jìn)行涂抹，并放置于恒溫培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)置37 ℃）進(jìn)行微生物培養(yǎng)。滴眼液質(zhì)量要求：開啟時(shí)瓶口及瓶?jī)?nèi)滴眼液微生物檢測(cè)均為陰性。若呈現(xiàn)陽(yáng)性者需要繼續(xù)微生物菌種鑒定，并為患者提供新滴眼液，而新滴眼液不納入本研究。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組治療后各時(shí)間點(diǎn)瓶口污染及瓶?jī)?nèi)污染情況，鑒定微生物菌種情況。（1）瓶口污染及瓶?jī)?nèi)污染情況：記錄治療后第1、7、21天瓶口污染率及瓶?jī)?nèi)污染率。采集好的樣本進(jìn)行24 h培養(yǎng)（血平板內(nèi)），并用肉眼觀察，若出現(xiàn)顏色灰白且半透明或不透明，形狀為凸起或扁平的菌落生長(zhǎng)則呈陽(yáng)性，記為污染；培養(yǎng)48 h 后仍未見(jiàn)任何細(xì)菌生長(zhǎng)則呈陰性，記為無(wú)污染。統(tǒng)計(jì)瓶口污染及瓶?jī)?nèi)污染數(shù)及其占比。（2）污染微生物的種類：將瓶口及瓶?jī)?nèi)呈現(xiàn)陽(yáng)性的滴眼液篩選出來(lái)，對(duì)其血平板上細(xì)菌進(jìn)行微生物培養(yǎng)，對(duì)單個(gè)菌落進(jìn)行分純涂片及革蘭染色操作，并根據(jù)染色結(jié)果，應(yīng)用鑒定卡對(duì)菌種類型進(jìn)行分辨、記錄。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)（理想頻數(shù)＜5 采用連續(xù)性校正2檢驗(yàn)）。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后各時(shí)間點(diǎn)瓶口污染情況比較 兩組治療后第1天瓶口均無(wú)污染，A組治療后第7、21天瓶口污染率均低于B 組（均P ＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組治療后各時(shí)間點(diǎn)瓶口污染情況比較 例（%）

2.2 兩組治療后各時(shí)間點(diǎn)瓶?jī)?nèi)污染情況比較 兩組治療后第1、7天瓶?jī)?nèi)均無(wú)污染，治療后第21天B 組出現(xiàn)污染5例，A組瓶?jī)?nèi)無(wú)污染，A組瓶?jī)?nèi)污染率低于B 組（13.16%）（2=3.863，P ＜0.05）。

2.3 治療后各時(shí)間點(diǎn)菌種分布情況 按照瓶口微生物菌種分布數(shù)量由高到低依次為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性的葡萄球菌、毛霉菌、芽孢桿菌，瓶口污染微生物最常見(jiàn)均為金黃色葡萄球菌；瓶?jī)?nèi)主要為毛霉菌。且A 組金黃色葡萄球菌發(fā)生率低于B 組（P ＜0.05）。見(jiàn)表2 ～3。

表2 兩組瓶口污染微生物菌種分布情況 例（%）

3 討論

滴眼液包裝主要為多劑量包裝，開啟后始終處于不封口狀態(tài)，經(jīng)空氣與外界接觸，出現(xiàn)瓶口或瓶?jī)?nèi)感染風(fēng)險(xiǎn)較高。一旦出現(xiàn)瓶?jī)?nèi)或瓶口微生物污染，將會(huì)增加眼病患者眼部感染或眼內(nèi)感染的風(fēng)險(xiǎn)，繼而損傷到眼部組織。而加強(qiáng)滴眼液使用過(guò)程中的微生物檢測(cè)工作是保障患者治療安全的關(guān)鍵，也是醫(yī)院感染預(yù)防的重要管理環(huán)節(jié)[9-10]。

本研究結(jié)果顯示治療后第7、21天兩組均出現(xiàn)瓶口污染，且A 組瓶口污染率均低于B 組（均P ＜0.05）。其原因在于瓶口可能與眼瞼皮膚、睫毛、結(jié)膜、手部組織進(jìn)行接觸，繼而增加瓶口污染風(fēng)險(xiǎn)[11]。筆者認(rèn)為有必要加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員及患者的感染意識(shí)，嚴(yán)格按照消毒隔離、手衛(wèi)生及操作方法進(jìn)行治療，尤其是對(duì)于做好手部組織消毒工作，避免直接眼瞼皮膚、睫毛、結(jié)膜觸碰；同時(shí)加強(qiáng)對(duì)患者消毒隔離的安全意識(shí)，對(duì)其操作行為進(jìn)行培訓(xùn)。B 組治療后第21天出現(xiàn)污染，且A 組瓶?jī)?nèi)污染率低于B 組（P ＜0.05）。其原因在于瓶?jī)?nèi)感染主要與滴眼液成分、環(huán)境等因素有關(guān)。因此，臨床需要定時(shí)開窗通風(fēng)及空氣消毒，尤其是在冬季病區(qū)內(nèi)中央空調(diào)集中供暖時(shí)期，更需要定時(shí)通風(fēng)及消毒。而不同滴眼液種類出現(xiàn)瓶口、瓶?jī)?nèi)污染風(fēng)險(xiǎn)存在一定差異，可能與左氧氟沙星滴眼液為抗菌素類滴眼液代表，0.3%玻璃酸鈉滴眼液為非抗菌素類滴眼液代表，左氧氟沙星滴眼液具有抗菌作用，且抑菌功能較強(qiáng)，繼而降低微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。而瓶口污染風(fēng)險(xiǎn)更高可能與滴眼液包裝瓶設(shè)計(jì)有關(guān)，能預(yù)防滴出滴眼液逆流進(jìn)入瓶?jī)?nèi)[12-13]。因此，臨床選擇滴眼液品種時(shí)，在患者對(duì)用藥耐受情況下，需盡量選擇可預(yù)防逆流的包裝瓶設(shè)計(jì)及具有較強(qiáng)抗菌作用的滴眼液。

表3 治療后各時(shí)間點(diǎn)菌種分布情況 例（%）

按照瓶口微生物菌種分布數(shù)量由高到低依次為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性的葡萄球菌、毛霉菌、芽孢桿菌，瓶口污染微生物最常見(jiàn)的均為金黃色葡萄球菌；瓶?jī)?nèi)主要為毛霉菌。且A 組金黃色葡萄球菌發(fā)生率低于B 組（P ＜0.05）。金黃色葡萄球菌屬于革蘭陽(yáng)性菌代表，主要分布于人體皮膚、鼻腔、咽喉、空氣等環(huán)境中，37 ℃環(huán)境下生長(zhǎng)良好，有很強(qiáng)的感染能力，也是醫(yī)院內(nèi)交叉感染的重要傳染源。毛霉菌屬于腐生性真菌，主要分布于土壤、糞便或腐爛食物、環(huán)境中，在高溫、高濕度或通風(fēng)不良環(huán)境下更有利于生長(zhǎng)；該類型檢出率主要集中于冬季，可能與季節(jié)環(huán)境有著密切關(guān)聯(lián)性，冬季室內(nèi)通風(fēng)不良且空氣質(zhì)量不佳，促進(jìn)毛霉菌增長(zhǎng)[14-15]。因此，要根據(jù)滴眼液常見(jiàn)微生物發(fā)生原因加強(qiáng)管理，包括定時(shí)開窗通風(fēng)、定時(shí)消毒，保持室內(nèi)溫度適宜等；同時(shí)對(duì)于已感染患者可根據(jù)微生物菌種檢測(cè)結(jié)果實(shí)施對(duì)癥治療。

綜上所述，非抗菌素滴眼液瓶口更易發(fā)生污染，且隨著使用時(shí)間的延長(zhǎng)污染率升高。滴眼液使用過(guò)程中發(fā)生瓶口污染率較高，而瓶?jī)?nèi)污染率較低；且瓶口感染微生物主要為革蘭陽(yáng)性球菌，瓶?jī)?nèi)污染微生物主要為真菌。