董曉微，郭 媛，劉 璐，張 靜，王 偉

（寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)診斷中心，西北民族大學(xué)第一附屬醫(yī)院，銀川 750002）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種典型的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，患者免疫炎性反應(yīng)出現(xiàn)異常，患者體液或細(xì)胞免疫功能出現(xiàn)失調(diào)，血液中有多種具有免疫活性的抗體以及免疫復(fù)合物存在，最終損傷多個(gè)系統(tǒng)器官[1]。SLE患者病情嚴(yán)重，且病情變化較為復(fù)雜，臨床需要對患者病情進(jìn)行有效監(jiān)測。在患者體征、臨床癥狀出現(xiàn)前檢測免疫活性抗體，可以有效監(jiān)測患者的病情變化，從而有效調(diào)整臨床治療方案。抗ds-DNA抗體、抗史密斯抗體（smith antibody，Sm）、抗核小核抗體（antinuclear small nucleus antibody，AnuA）、以及抗核糖體P蛋白抗體（antibody against ribosomal P protein，ARPA）、抗磷脂抗體（antiphospholipid antibody，APA）等作為檢測指標(biāo)，隨著研究的深入，ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞逐漸被認(rèn)知，但目前國內(nèi)研究還尚少[2]。本次研究針對抗ds-DNA抗體及抗ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞在SLE病情監(jiān)測中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行調(diào)查和研究，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析寧夏回族自治區(qū)人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科2019年1月至2020年10月的臨床資料，其中40例SLE患者為SLE組，男性患者10例，女性患者30例，平均年齡（39.26±2.11）歲；同期收治40例非SLE患者為非SLE組，其中男性患者12例，女性患者28例，平均年齡（40.21±1.82）歲；40例體檢結(jié)果健康者為健康對照組，男性患者15例，女性患者25例，平均年齡（38.26±2.57）歲；各組研究對象基礎(chǔ)資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），具有可比性。所有研究對象同意參與本研究前均接受面談，并簽署知情同意書。

1.2 SLE組納入、排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1）符合臨床SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；2）患者無其他嚴(yán)重器官疾?。?）非合并惡性腫瘤；4）參與研究前未接受抗體藥物治療；5）自愿參與研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）其他免疫性疾?。?）嚴(yán)重皮膚??；3）其他器官衰竭；4）傳染性疾?。?）依從性較差；6）無法全程參與研究；7）同時(shí)參與其他同類型的研究。

1.3 研究方法

采集所有研究對象清晨空腹靜脈血3.5 mL，轉(zhuǎn)速3 500 r·min-1離心處理，分離血清待檢測。1）抗體檢測：采用歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司生產(chǎn)的抗雙鏈DNA抗體IgG檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）檢測ds-DNA抗體；采用歐盟醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司生產(chǎn)的試劑盒（免疫印跡法）檢測抗Sm抗體、AnuA、ARPA，嚴(yán)格根據(jù)試劑說明書進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)操作。2）淋巴細(xì)胞檢測：采用上海英駿生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)人外周血淋巴細(xì)胞分離液、Cellix901細(xì)胞培養(yǎng)液。提取足夠的淋巴細(xì)胞，并采用流式細(xì)胞分選法純化分離B細(xì)胞，確保B細(xì)胞濃度≥95%，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，收集細(xì)胞，應(yīng)用BD FACSAriaTMⅡCell Sorter流式細(xì)胞分析儀檢測抗ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞。并對最后檢測結(jié)果進(jìn)行記錄[4]。對各組研究對象陽性率、三項(xiàng)指標(biāo)以及聯(lián)合指標(biāo)檢測結(jié)果進(jìn)行對比和分析[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.2統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；ROC曲線繪制對不同抗體檢測結(jié)果進(jìn)行計(jì)算。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對象各項(xiàng)抗體陽性檢出率對比

SLE組研究對象的ds-DNA抗體、ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞檢測陽性率均高于非SLE組、健康對照組（P均＜0.05）；同時(shí)SLE組抗Sm、AnuA、ARPA三項(xiàng)抗體陽性率也均高于非SLE組、健康對照組（P均＜0.05），其中ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞檢測陽性率最高（72.5%），見表1。

表1 三組各項(xiàng)抗體陽性檢出率比較[例（%）］

2.2 SLE患者各項(xiàng)抗體檢測結(jié)果

ds-DNA抗體、ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的敏感性、陽性預(yù)報(bào)價(jià)值、陰性預(yù)報(bào)價(jià)值均高于其他幾項(xiàng)抗體（P均＜0.05），見表2。

表2 SLE患者各項(xiàng)抗體檢測究結(jié)果情況比較（%）

2.3 SLE患者各項(xiàng)抗體聯(lián)合檢測結(jié)果對比

ds-DNA抗體聯(lián)合ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的檢測特異性、敏感性均優(yōu)于其他指標(biāo)聯(lián)合檢測的特異性、敏感性（P均＜0.05），見表3。

表3 SLE患者各項(xiàng)抗體聯(lián)合檢測結(jié)果比較（%）

3 討論

SLE是一種累及多系統(tǒng)、多器官的自身免疫性疾病，目前SLE的發(fā)病機(jī)制尚不明確，其發(fā)病多集中在女性患者。近幾年我國臨床上SLE患者的人數(shù)明顯增加，輕型、早期患者臨床癥狀表現(xiàn)并不明顯，因此臨床上SLE的診斷工作難度也更高[6-7]。

自身抗體屬于免疫球蛋白的一種，SLE患者存在的自身抗體，會(huì)對其機(jī)體免疫功能造成影響，導(dǎo)致組織病變出現(xiàn)，且對自身組織成分產(chǎn)生免疫反應(yīng)，最終造成患者自身免疫性損傷出現(xiàn)[8]。隨著臨床各種檢測方式的改進(jìn)，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法、免疫印跡法等可以提升自身抗體檢測的效果[9]。ds-DNA抗體、ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞、抗Sm抗體等抗體，均是目前臨床上對SLE患者病情監(jiān)測的主要指標(biāo)，但隨著研究的深入，單項(xiàng)自身抗體指標(biāo)的檢測效果并不理想，因此臨床開始嘗試對自身抗體檢測指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測[10]。SLE組患者的ds-DNA抗體、ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞等檢測陽性率均高于非SLE組、健康對照組；SLE患者的各項(xiàng)自身抗體指標(biāo)檢測陽性率高于其他非免疫性疾病患者以及健康人群，說明了在SLE患者的血清學(xué)免疫指標(biāo)檢測中，各項(xiàng)自身抗體指標(biāo)均具有價(jià)值，尤其是針對患者病情發(fā)展進(jìn)度的監(jiān)測，效果更為明顯[11]。進(jìn)一步檢測結(jié)果顯示，ds-DNA抗體、ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的診斷價(jià)值高于其他幾項(xiàng)抗體診斷價(jià)值；ds-DNA抗體聯(lián)合ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的檢測特異性、敏感性優(yōu)于其他指標(biāo)聯(lián)合檢測特異性、敏感性。無論是單項(xiàng)自身抗體檢測，還是聯(lián)合使用自身抗體檢測，在SLE患者的診斷中，ds-DNA抗體及ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的作用均較為明顯，其中ds-DNA抗體主要分為IgG、IgM這兩種，與SLE患者病情變化存在相關(guān)的主要是IgG，隨著患者病情的發(fā)展，IgG水平值也增加，患者血清中所含ds-DNA抗體濃度出現(xiàn)提升，導(dǎo)致患者器官以及各系統(tǒng)受到的損傷較重，并降低患者生存概率[12]；ds-DNA抗體的發(fā)病機(jī)制，與患者受損器官、受損組織以及自身特征存在一定的相關(guān)性，ds-DNA抗體的變化，與患者最終病情發(fā)展的相關(guān)性也極高。大部分研究中均發(fā)現(xiàn)，ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的變化，直接預(yù)示著SLE患者病情變化，結(jié)合所得研究數(shù)據(jù)可以確定，血液中不存在ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞的患者就不會(huì)出現(xiàn)病情變化[13]。ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞會(huì)隨著患者病情變化而變化，原因是患者病情變化期間，患者血液中的相關(guān)抗原不斷刺激機(jī)體，導(dǎo)致ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞增多。目前臨床上部分的研究中有針對ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞為靶點(diǎn)進(jìn)行生物制劑的研究，希望可以借此對SLE患者的病情進(jìn)行有效控制[14-15]。

綜述以上，SLE患者隨著病情發(fā)展，ds-DNA抗體及ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞陽性檢出率提高，在臨床診斷中，ds-DNA抗體及ds-DNA抗體分泌型B淋巴細(xì)胞具有一定的診斷特異性、敏感度，聯(lián)合檢測所獲得檢測價(jià)值更優(yōu)于其他指標(biāo)，臨床指導(dǎo)價(jià)值明顯。