王 震，王舒揚(yáng)，宋新然，張芷源，鹿志創(chuàng)，李應(yīng)東，田甲申*

（1.遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院大連市瀕危海洋哺乳動物保護(hù)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連 116023；2.大連圣亞旅游控股股份有限公司，遼寧 大連 116023；3.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)重要家畜疫病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 沈陽 110866）

斑海豹（Phoca largha）是唯一一種能夠在中國海域繁殖的鰭腳類海洋哺乳動物，一般在冬季繁殖，屬冰上產(chǎn)仔類型[1]。渤海遼東灣結(jié)冰區(qū)是世界上斑海豹8個繁殖區(qū)中最南端的一個，因而受到國內(nèi)外學(xué)者的普遍重視[2-3]。20世紀(jì)以來，中國海域野生斑海豹種群數(shù)量下降較大，由1940年的8 000余頭下降至1990年的不足2 000頭[4]，環(huán)境惡化是目前制約斑海豹種群增長的主要因素之一[5]。2021年新調(diào)整的《國家重點(diǎn)保護(hù)野生動物名錄》將斑海豹升級為國家一級保護(hù)野生動物，對斑海豹的保護(hù)力度提升到新的高度。對瀕危動物進(jìn)行遷地保護(hù)的最終目的是重建或復(fù)壯野生自然種群，而非采用人工種群取代野生種群，是對就地保護(hù)方式的一種補(bǔ)充[6]。目前，國內(nèi)水族館豢養(yǎng)斑海豹的數(shù)量約為1 000頭，約占野生斑海豹種群數(shù)量的50%[7]。對野外斑海豹幼崽進(jìn)行救助或?qū)⑷斯し庇齻€體放歸入海在一定程度上有利于瀕危物種的保護(hù)。

斑海豹每年1月—2月在渤海遼東灣北部冰區(qū)進(jìn)行繁殖和育幼[3]。受海風(fēng)、海流、氣溫等多種因素影響，母獸捕食期間易造成棲息在浮冰上的斑海豹幼崽與母獸分離，并隨海流漂浮或落入水中，數(shù)日后擱淺在岸灘上被發(fā)現(xiàn)。遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院是全國海洋珍稀瀕危野生動物救護(hù)網(wǎng)絡(luò)成員單位，也是遼寧省水生野生動物救助基地。在救助過程中，有3頭斑海豹幼崽死亡。本文通過對3頭斑海豹幼崽開展積極救助、死亡后進(jìn)行解剖和死因分析，積累了較多的救助經(jīng)驗(yàn)和病理資料，對后續(xù)開展斑海豹幼崽的救助和疾病治療提供參考。

1 救助情況

2020年3月至2021年3月，在遼東灣海域發(fā)現(xiàn)3頭斑海豹幼崽。接到漁業(yè)主管部門通知后，救助人員立即趕到現(xiàn)場，將3頭斑海豹幼崽轉(zhuǎn)運(yùn)至遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院進(jìn)行救助。

整理3頭斑海豹幼崽的信息并編號，3頭斑海豹幼崽的基本信息及死亡時基本信息分別見表1、表2。

表1 遼東灣海域3頭斑海豹幼崽基本信息Tab.1 Basic information of three Phocalargha pupsin Liaodong Bay Seaarea

表2 遼東灣海域3頭斑海豹幼崽死亡時基本信息Tab.2 Basic information on death of three Phocalargha pupsin Liaodong Bay Sea area

1號斑海豹幼崽：發(fā)現(xiàn)時身披白色胎毛，身體瘦小、極為虛弱、無外傷。根據(jù)體重和胎毛情況推測該斑海豹幼崽出生時間約10 d。救助過程中，采取人工配置奶粉和填喂魚泥、魚塊的方式進(jìn)行飼養(yǎng)，期間排便未見異常。4 d后開始褪毛。3月9日早晨能夠自主攝食；10：40發(fā)現(xiàn)其呼吸不暢后立刻轉(zhuǎn)移至救助室檢查，結(jié)果為心跳正常、體表無外傷；12：00情況有所好轉(zhuǎn)，可自由活動、呼吸均勻；13：00轉(zhuǎn)入救助池，觀察發(fā)現(xiàn)其情況良好、狀態(tài)穩(wěn)定；3月10日7：30發(fā)現(xiàn)該個體死亡。

2號斑海豹幼崽：發(fā)現(xiàn)時已開始褪毛，身體瘦小、無外傷。采用人工下胃管方式灌入魚泥填喂。3 d后該海豹狀態(tài)恢復(fù)較好，且可自主攝食魚塊。2月22日下午，在進(jìn)食完魚塊后出現(xiàn)反吐現(xiàn)象，并持續(xù)至25日仍未緩解，并伴有呼吸減弱癥狀，于2月25日12：53失去自主呼吸死亡。

3號斑海豹幼崽：發(fā)現(xiàn)時身披白色胎毛，身體極度虛弱，立即轉(zhuǎn)移至遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院進(jìn)行救治，于2月24日7：30死亡。

2 檢查結(jié)果

2.1 血液指標(biāo)檢查結(jié)果（見表3、表4）

救助斑海豹轉(zhuǎn)運(yùn)至救助場館后，采用HF-3800血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢測，HF-240全自動生化分析儀進(jìn)行血液生化檢測（均購自濟(jì)南漢方醫(yī)療器械有限公司）。

由表3可知，3頭斑海豹幼崽的白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、血紅蛋白含量平均紅細(xì)胞體積、平均血紅蛋白濃度均低于正常范圍；紅細(xì)胞數(shù)和平均血紅蛋白含量高于正常范圍；其他血常規(guī)指標(biāo)基本處于正常范圍。

表3 3頭斑海豹幼崽血常規(guī)檢查結(jié)果Tab.3 Blood routineindex test result of three Phoca largha pups

由表4可知，3頭斑海豹幼崽的總蛋白和白蛋白含量低于正常范圍；谷氨?；D(zhuǎn)移酶高于正常范圍；其他血生化指標(biāo)基本處于正常范圍。

2.2 解剖結(jié)果與死因分析

解剖內(nèi)容包括呼吸循環(huán)系統(tǒng)（氣管、肺、心臟）、泌尿生殖系統(tǒng)（膀胱和腎）及消化系統(tǒng)（口腔、食道、胃、腸）等主要組織器官狀態(tài)。通過外觀觀測，3頭斑海豹幼崽的口腔、眼結(jié)膜及其他可視黏膜均未見異常，天然腔孔無污物。

脂肪層和肌肉解剖發(fā)現(xiàn)：3頭斑海豹幼崽皮下均有出血，但肌肉顏色正常。1號和2號斑海豹幼崽脂肪層厚度僅為0.1 cm，3號皮下脂肪厚度1.5 cm，均屬于正常范圍。 2號斑海豹幼崽皮下組織與肌肉組織見圖1。

圖1 2號斑海豹幼崽皮下組織與肌肉組織Fig.1 Subcutaneoustissueand muscle tissueof Phoca largha pup No.2

由表5可知，3頭斑海豹幼崽均存在不同程度的組織出血現(xiàn)象。1號斑海豹幼崽食道、胃、肺、肝臟均有出血情況，2號斑海豹幼崽肺、肝臟、腸道、腎有出血情況，3號斑海豹幼崽胃、肺呈出血狀態(tài)。

表5 3頭斑海豹幼崽內(nèi)臟組織狀態(tài)Tab.5 Splanchnic tissues statusof three Phocalargha pups

由圖2可知，1號斑海豹幼崽食道堵塞，內(nèi)含3塊魚塊；胃內(nèi)有塑料和草棍等異物，并伴有肺部和肝臟出血；腸道和心臟外觀、質(zhì)地均無明顯異常；膽囊充盈；腎臟、脾臟及其他臟器均未見異常。因此，推測1號斑海豹幼崽的死亡原因?yàn)槲竸恿Σ蛔愫臀竷?nèi)異物引起胃炎，進(jìn)而導(dǎo)致食物堵塞食道。

圖2 1號斑海豹幼崽解剖結(jié)果Fig.2 Dissection result of Phocalargha pup No.1

由圖3可知，2號斑海豹幼崽食道和胃黏膜正常，食道內(nèi)含2塊魚塊，胃內(nèi)無食糜；部分腸道黏膜出血；肺部呈暗紅色并伴有出血；肝臟邊緣銳利，切面可見大量暗紅色液體流出；腎臟周圍及心肌血管充盈、怒張，下腔靜脈擴(kuò)張。其他組織器官未見明顯肉眼可見病變。因此，推測2號斑海豹幼崽的死亡原因?yàn)榉窝撞橛袛⊙Y。

圖3 2號斑海豹幼崽解剖結(jié)果Fig.3 Dissection result of Phocalargha pup No.2

由圖4可知，3號斑海豹幼崽喉和氣管存在少量白色黏稠分泌物；雙肺呈暗紅色，切面可見少量血液流出；食道黏膜完整未見異常；胃內(nèi)未見食糜，存在少量黃褐色黏液及細(xì)沙，胃黏膜局部出血；其他組織器官未見明顯肉眼可見病變。因此，推測3號斑海豹幼崽的死亡原因?yàn)榉尾垦装Y。

圖4 3號斑海豹幼崽解剖結(jié)果Fig.4 Dissection result of Phocalargha pup No.3

3 討論

2019年至2021年，遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院累計救助斑海豹幼崽23頭。救助過程中，發(fā)現(xiàn)被救助的大部分斑海豹幼崽處于未褪毛階段，基本未攝食過母乳或攝食幾日母乳后即與母獸分散，導(dǎo)致體形消瘦或狀態(tài)虛弱，極個別斑海豹幼崽膘情較好。本研究的3頭斑海豹幼崽中，除3號斑海豹幼崽身體膘情較好外，1號和2號斑海豹幼崽個體均體形消瘦，狀態(tài)虛弱。通過斑海豹幼崽的發(fā)育階段和狀態(tài)，可為救助人員早期制定救助方案提供參考。

血液對于維持動物機(jī)體的正常生命活動具有極其重要的意義，血液指標(biāo)能夠客觀地反映動物機(jī)體的生理功能與代謝狀況[9]。宋新然等[8]研究了豢養(yǎng)斑海豹血液學(xué)及血液生化指標(biāo)，給出了斑海豹幼崽和成體血常規(guī)和血液生化健康個體的指標(biāo)范圍。本研究將3頭斑海豹幼崽個體的血常規(guī)和血生化檢測結(jié)果與之比較發(fā)現(xiàn)，血常規(guī)指標(biāo)中，3頭斑海豹幼崽的白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比、單核細(xì)胞百分比、血紅蛋白含量均低于正常水平；紅細(xì)胞數(shù)和平均血紅蛋白含量高于正常水平。白細(xì)胞升高是判斷細(xì)菌感染的常用指標(biāo)，本研究中的斑海豹血液白細(xì)胞數(shù)低于正常范圍水平，病毒感染、傷寒或藥物可造成白細(xì)胞水平降低，主要表現(xiàn)為食欲減退、疲乏等，并伴有中性粒細(xì)胞百分比、淋巴細(xì)胞百分比和單核細(xì)胞百分比隨之降低[10]。斑海豹幼崽紅細(xì)胞數(shù)升高往往是由嚴(yán)重的心肺疾患引起，與本研究推測的死亡原因基本一致。

血液生化指標(biāo)中，3頭斑海豹幼崽的總蛋白和白蛋白含量低于正常水平。腎病綜合征、慢性胃腸道疾病、潰瘍性結(jié)腸炎、肝硬化、肝功能受損等可導(dǎo)致總蛋白和白蛋白降低，與患心肌炎的亞洲象（Elephasmaximus）和急性胰腺炎的川金絲猴（Rhinopithecusroxellana）的總蛋白和白蛋白變化相似[11-12]。本研究發(fā)現(xiàn)，3頭斑海豹幼崽的谷氨?；D(zhuǎn)移酶均顯著上升。谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶主要由肝臟和膽道排泄，血清中谷氨?；D(zhuǎn)移酶的升高與各種死亡原因有關(guān)，包括腫瘤、肝膽疾患、心血管病、缺血性心臟病、腦血管病等[13]。研究表明，谷氨?；D(zhuǎn)移酶在斷奶仔豬血清中活性很低，但當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)應(yīng)激后血清中活性迅速升高[14]。本研究中，3頭斑海豹幼崽血液谷氨?；D(zhuǎn)移酶的升高可能與體內(nèi)氧化應(yīng)激和多種細(xì)胞損傷有關(guān)。

由于救助時間較短，斑海豹幼崽病情復(fù)雜且突然，有些疾病無法通過常規(guī)的診斷技術(shù)進(jìn)行預(yù)防。解剖結(jié)果表明，3頭斑海豹幼崽的組織器官均存在不同程度的炎癥，其中1號斑海豹幼崽胃部發(fā)炎，2號和3號斑海豹幼崽均為肺部發(fā)炎并伴有敗血癥。肺炎是導(dǎo)致動物幼體死亡的常見原因[15-16]。野生動物的營養(yǎng)水平是引起肺炎的重要原因之一，有研究表明，營養(yǎng)不均衡、抵抗力降低會導(dǎo)致牦牛肺炎[17]，母乳喂養(yǎng)能夠有效降低幼體肺炎的發(fā)病率[18]。綜合病理解剖分析結(jié)果可知，3頭斑海豹幼崽肺部出血明顯，具有典型的肺炎癥狀，可能與斑海豹幼崽出生后較長時間未攝食過母乳，營養(yǎng)缺失，病原微生物入侵引起肺炎和敗血癥，最終導(dǎo)致心肺功能衰竭而死。

4 結(jié)論

日后開展斑海豹救助時，特別是對于身體狀況較差的個體，提高斑海豹幼崽的營養(yǎng)水平和免疫力是提高救助成活率的重要技術(shù)手段之一。同時應(yīng)盡早開展血液學(xué)檢測，對斑海豹的健康評估和疾病診斷以及治療具有重要的價值和意義。