CLNM的危險(xiǎn)因素 原發(fā)腫瘤大小在CLNM陰性和CLNM陽性組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。根據(jù)單因素Logistic回歸分析，腫瘤大小與CLNM顯著相關(guān)。此外，男性、年齡<55歲、濾泡型乳頭狀癌、多灶性和ETE(包膜侵犯、微小侵犯和大體侵犯)也與CLNM顯著相關(guān)。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移未見與CLNM相關(guān)。在多因素Logistic回歸分析中，除了遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移外，以上因素均與CLNM有關(guān)(表3)。

新《條例》下的化妝品原料安全與功效評價(jià)

作為世界第二化妝品大國，中國的化妝品消費(fèi)市場規(guī)模日漸龐大。在巨大的經(jīng)濟(jì)需求下，國際眾多知名品牌大舉進(jìn)入，不僅給我國化妝品行業(yè)帶來了不小的沖擊，也促進(jìn)了國內(nèi)品牌的快速崛起。在我國化妝品市場和行業(yè)高速發(fā)展的當(dāng)下，屢禁不止的禁限用成分的違法添加、假冒偽劣及仿造等現(xiàn)象也非常嚴(yán)重，不僅干擾了我國化妝品行業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展，還對市場環(huán)境、行業(yè)環(huán)境、消費(fèi)者信心和行業(yè)認(rèn)知都造成了不良影響，因此需要利用法規(guī)進(jìn)行有針對性的監(jiān)督和管理。

化妝品原料的安全性直接關(guān)系到產(chǎn)品和使用者的身心安全。世界各國對于化妝品產(chǎn)品安全的監(jiān)管很大程度上是依靠對化妝品原料的嚴(yán)格管理，尤其歐盟、美國、日本等國際主要的化妝品生產(chǎn)和銷售國家，立法系統(tǒng)歷史較久，且管理體系較完整，其對于化妝品原料成分及新原料的管理模式，也成為其他國家和地區(qū)立法監(jiān)管的參考和借鑒對象。我國自1987年頒布首部關(guān)于化妝品及其原料質(zhì)量安全性評價(jià)的技術(shù)依據(jù)《化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》，至2020年發(fā)布《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》（中國人民共和國國務(wù)院第727號令）并于2021年1月1日開始實(shí)施，表明我國對于化妝品原料、生產(chǎn)經(jīng)營、安全及功效管理方面的監(jiān)管日趨嚴(yán)格和規(guī)范。

例如通過自由基清除實(shí)驗(yàn)，即是以氧化物與易氧化物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)形成氧化產(chǎn)物，之后加入某種原料檢測其自由基清除能力從而評價(jià)抗氧化能力。類似的還有氧自由基吸收能力實(shí)驗(yàn)(ORAC 法)、羥自由基清除能力測定、超氧陰離子自由基清除能力測定、還原能力測定、總抗氧化能力測試(ABTS法)等檢測方法。除了檢測自由基外，ROS活性氧、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)、丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT) 等指標(biāo)都可以從不同角度反映待測成分的抗氧化能力。

化妝品原料安全及功效評價(jià)技術(shù)現(xiàn)狀

在體外實(shí)驗(yàn)室條件下，模擬人體生理環(huán)境或特定刺激條件下，對細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和孵育，對比添加藥物或化妝品原料前后的細(xì)胞生長狀態(tài)、生理指標(biāo)及代謝反應(yīng)的差異和變化，從而評價(jià)該原料在安全濃度下是否具備一定的功效。依據(jù)化妝品的使用特點(diǎn)，細(xì)胞生物學(xué)方法多使用人皮膚細(xì)胞系，如表皮角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、上皮細(xì)胞、皮脂腺細(xì)胞、毛囊細(xì)胞以及一些免疫細(xì)胞作為體外細(xì)胞評價(jià)模型的細(xì)胞來源?？梢赃x擇以一種細(xì)胞或兩種細(xì)胞混合培養(yǎng)的方式，如通過H

O

或LPS等刺激物損傷細(xì)胞，建立過氧化或炎癥模型，也可以通過UV對細(xì)胞進(jìn)行輻照，建立光損傷或光老化模型，進(jìn)行相應(yīng)的評價(jià)和測試。

2003年，美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）將斑馬魚列為小鼠和大鼠之后的第三大脊椎類模式生物。美國環(huán)境保護(hù)署（EPA）在2007年啟動化學(xué)品毒性研究項(xiàng)目（ToxCast），將斑馬魚作為首選的脊椎類動物模型，并已公布了相關(guān)研究進(jìn)展和成果。2009年，斑馬魚安全和毒理學(xué)評價(jià)方法通過了美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）和歐洲藥品監(jiān)督管理局（EMA）的GLP認(rèn)證，標(biāo)志著斑馬魚安全性評價(jià)數(shù)據(jù)正式被歐美監(jiān)管部門認(rèn)可。美國FDA自建斑馬魚實(shí)驗(yàn)室，用于進(jìn)行藥品、食品及化妝品的安全性研究和評價(jià)。

目前我國也有多項(xiàng)基于斑馬魚技術(shù)的化妝品評價(jià)方法團(tuán)標(biāo)出臺，包括美白功效的黑素抑制、炎癥、胚胎急性毒性測試、溫和刺激性、抗皺、舒緩及緊致等方法。除了安全及功效數(shù)據(jù)支撐，斑馬魚實(shí)驗(yàn)還可以提供直觀的效果呈現(xiàn)。如圖1所示，斑馬魚用于黑色素形成抑制劑活性測試中，測試組斑馬魚黑色素明顯減少。

01 生物化學(xué)方法

生物化學(xué)以及分析化學(xué)是實(shí)驗(yàn)室最常見也是操作較簡單的方法，通過一些簡單的基本化學(xué)儀器和常用試劑，借助化學(xué)分析、光譜分析等手段，對一些在原料安全性和發(fā)揮功效相關(guān)的特殊指標(biāo)進(jìn)行檢測和分析。此類方法一般多屬于成熟方法，包括經(jīng)典文獻(xiàn)、專業(yè)教材、標(biāo)準(zhǔn)及法規(guī)等所列方法，操作技術(shù)和儀器要求不高，但需要注意精密度、準(zhǔn)確性、線性范圍以及實(shí)驗(yàn)誤差等。

皮膚芯片等生物芯片，可以在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下協(xié)助體外皮膚培養(yǎng)并建模，基于微流控技術(shù)，在芯片內(nèi)進(jìn)行體外皮膚培養(yǎng)。如利用不同的通道模擬血流和皮膚生成，由培養(yǎng)基供給養(yǎng)分。生物芯片在二氧化碳（CO

）含量為5%、溫度為37攝氏度、濕度可控的環(huán)境中孵育。這種芯片可生成具有真皮、表皮等兩個主要皮膚層的三維皮膚細(xì)胞。如大多數(shù)“器官芯片”一樣，這種新型細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)能夠在微觀尺度上模擬活體器官的主要功能，用于開發(fā)新藥，也可作為毒理學(xué)研究和臨床試驗(yàn)中動物試驗(yàn)的低成本替代方案。

通過情景設(shè)置和導(dǎo)入，明確本節(jié)課教學(xué)任務(wù)。教師介紹“魁北克大橋坍塌”例子，提醒學(xué)生設(shè)計(jì)紙橋時(shí)要注意對關(guān)鍵部位進(jìn)行加固處理；且作為設(shè)計(jì)師要有高度責(zé)任感，發(fā)展學(xué)生社會參與方面的核心素養(yǎng)[21]。學(xué)生在探究過程中理解影響結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的因素，并通過小組合作與動手實(shí)踐，制作出外表美觀大方、穩(wěn)定性強(qiáng)、承重效果良好的紙橋。

02 細(xì)胞生物學(xué)方法

化妝品原料及產(chǎn)品的安全和功效是從研發(fā)到上市銷售中間各個環(huán)節(jié)中都非常重要的部分。我國化妝品監(jiān)管日漸嚴(yán)格，尤其是上市產(chǎn)品的功效宣稱都必須有充分的科學(xué)依據(jù)來支持。因此真實(shí)可信的功效評價(jià)數(shù)據(jù)將直接影響到產(chǎn)品的研發(fā)與銷售。

3D皮膚模型經(jīng)過近十年的發(fā)展，也已經(jīng)成為一種較為成熟的體外評價(jià)模型。這種實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下利用組織工程技術(shù)，由人源皮膚細(xì)胞構(gòu)建而成的立體細(xì)胞模型，可以在組織結(jié)構(gòu)等方面一定程度上模擬人體皮膚，實(shí)現(xiàn)一些普通2D細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中無法實(shí)現(xiàn)的操作，還可以通過染色切片等方式，直觀地呈現(xiàn)皮膚結(jié)構(gòu)的差異變化。如化妝品原料合成品的腐蝕性、刺激性、經(jīng)皮吸收及致突變性、光毒性等安全性測試以及功效性測試均可得到良好的應(yīng)用。目前的商業(yè)化的3D皮膚模型，EpiSkin、EpiDerm 和SkinEthic可作為ECVAM( 歐洲替代方法驗(yàn)證中心) 驗(yàn)證的皮膚腐蝕性檢測動物替代方法。此外還有一些其他公司開發(fā)的EpiKutis、EpiOcular、FP-3D、Phenion F 等皮膚模型。3D皮膚模型可以直接測試水不溶性物質(zhì)和配方產(chǎn)品，這是普通2D培養(yǎng)體系無法實(shí)現(xiàn)的。但目前技術(shù)下的各類皮膚模型只是較為單一的細(xì)胞組合，無法重現(xiàn)皮膚器官的血液循環(huán)和物質(zhì)代謝，不能檢測較長時(shí)間處理下的功效水平，并且不能真實(shí)反映皮膚的屏障功能。此外，大部分品牌的皮膚模型還存在一致性較差，無法實(shí)現(xiàn)高通量一致性篩選，因此可以視作為2D細(xì)胞模型的升級版，作為體外測試方法的一種選擇，但并不能真正實(shí)現(xiàn)在體皮膚器官的替代。

皮膚類器官作為一種新型的類器官模型，不僅能高度模擬皮膚組織的生理結(jié)構(gòu)和功能，更好地在不同體外環(huán)境下還原較為真實(shí)的皮膚生態(tài)，還可以應(yīng)用于皮膚發(fā)育研究、皮膚疾病病理研究及藥物篩選等領(lǐng)域。在目前實(shí)驗(yàn)室的條件下，皮膚類器官模型可以在特殊的生態(tài)環(huán)境下對具有特定功能的器官組織進(jìn)行重建和改造，以彌補(bǔ)現(xiàn)有體外皮膚模型在結(jié)構(gòu)、功能等方面的不足，如增加皮膚附屬物器官及功能等。皮膚附屬物的定植，甚至免疫細(xì)胞的加入，都會使皮膚類器官在皮膚再生、組織修復(fù)、藥物篩選及醫(yī)學(xué)美容等方面扮演越來越重要的角色。

2.班主任管理手段應(yīng)全面發(fā)展。班主任應(yīng)及時(shí)對自身的管理方式進(jìn)行更新，傳統(tǒng)的班級管理方式不再適應(yīng)當(dāng)前時(shí)代。因此，班主任可以從多角度多層次入手，對管理手段進(jìn)行全面拓展。例如，在想要通過與學(xué)生交流促進(jìn)師生關(guān)系時(shí)，采用面對面的談話方式未免會讓學(xué)生覺得心理壓力較大，不容易敞開心扉，平時(shí)在互聯(lián)網(wǎng)發(fā)達(dá)的教學(xué)背景下，教師可以采取網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)對學(xué)生進(jìn)行實(shí)時(shí)溝通，可以通過建立微信群或者QQ群的方式與學(xué)生溝通，不但快捷方便還能減輕學(xué)生的心理負(fù)擔(dān)，從而打造良好的師生溝通環(huán)境，有助于管理進(jìn)展。

所謂生態(tài)破壞，即城市水環(huán)境中的生態(tài)結(jié)構(gòu)受到破壞，而水體修復(fù)技術(shù)的應(yīng)用是重新構(gòu)建水生態(tài)環(huán)境，促使其恢復(fù)原有的生態(tài)結(jié)構(gòu)和相關(guān)功能。對于城市水環(huán)境治理工作，其開展方向主要包括源頭治理、水流控制、人工生態(tài)技術(shù)應(yīng)用3個方面，具體闡述如下。

03 斑馬魚替代方法

斑馬魚（Danio rerio，Zebrafsh）是細(xì)胞生物學(xué)研究中常見的經(jīng)典模式生物。斑馬魚與人類基因同源性高達(dá)87%，生理功能、免疫系統(tǒng)及生物信號傳導(dǎo)通路等方面具有與人類高度的相似性。斑馬魚具備模式生物的多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，如生長周期短、體積小、遺傳背景清晰、可實(shí)現(xiàn)高通量篩選等。同時(shí)，5天以內(nèi)的斑馬魚胚胎和幼魚在實(shí)驗(yàn)動物倫理方面符合實(shí)驗(yàn)動物福利保護(hù)的國際“3R”原則，是一種優(yōu)秀的藥物篩選模型。

食品生產(chǎn)過程中，微乳常暴露在不同pH環(huán)境下。因此，考察微乳的pH穩(wěn)定性對于擴(kuò)大其應(yīng)用范圍具有重要意義。本研究分別考察丁香酚微乳和海藻酸鈉修飾微乳的在pH 3.0～7.0穩(wěn)定性。如圖3所示，丁香酚微乳在pH 5.0～7.0時(shí)，呈現(xiàn)為乳白液狀，粒徑均小于200 nm；在pH 3.0～4.5時(shí)，丁香酚微乳出現(xiàn)了明顯的沉淀與分層，可見在該pH條件下丁香微乳十分不穩(wěn)定。結(jié)合表1可知，在pH 3.0～4.5范圍下，丁香酚微乳的粒徑及PDI明顯增大。酪蛋白酸鈉在等電點(diǎn)附近所帶電荷量較少，靜電斥力減弱，導(dǎo)致粒子發(fā)生聚集現(xiàn)象[23]。

傳統(tǒng)的化妝品原料安全與功效評價(jià)往往使用生物化學(xué)方法、動物模型、體外細(xì)胞模型、體外動物替代方法和臨床評價(jià)等方法。此外，感官評價(jià)和消費(fèi)者調(diào)查，也可以對化妝品的功效實(shí)現(xiàn)不同角度的數(shù)據(jù)支撐。

皮膚刺激性所表現(xiàn)出來的皮膚灼熱、紅腫等表觀現(xiàn)象通常伴隨著炎癥細(xì)胞的響應(yīng)和炎癥因子的釋放。通過使用炎癥細(xì)胞發(fā)綠色熒光的轉(zhuǎn)基因斑馬魚，可以實(shí)時(shí)觀察炎癥細(xì)胞的遷移和消退，可以很直觀地看到受試物的舒緩功效，定量計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)也很方便（綠色亮點(diǎn)為炎癥細(xì)胞），如圖2所示。

目前發(fā)展起來的各種體外測試方法，無論是安全性測試，還是功效性評價(jià)，都可以在化妝品原料和產(chǎn)品研發(fā)的前期實(shí)現(xiàn)篩選和初步驗(yàn)證，并為人體臨床測試提供理論支持和數(shù)據(jù)參考。并且，不同維度的體外測試方法，和人體臨床測試、感官評價(jià)、消費(fèi)者調(diào)查等不同的方法有機(jī)結(jié)合，可以共同構(gòu)建起化妝品原料及產(chǎn)品的安全與功效評價(jià)的科學(xué)體系。

高中音樂對于學(xué)生的綜合發(fā)展，以及對學(xué)生情操的培養(yǎng)都具有非常重要的作用，在新課改形式下加強(qiáng)對音樂教學(xué)的創(chuàng)新研究，具有非常重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。并且由于音樂教學(xué)與其他學(xué)科的教學(xué)在教學(xué)方法以及內(nèi)容上都有很大的不同，所以在新課改形勢下，我們可以采取以下措施，來進(jìn)行高中音樂教學(xué)的創(chuàng)新：

新《條例》下化妝品原料安全及功效評價(jià)地位

化妝品原料的安全性直接關(guān)系到產(chǎn)品和使用者的身心安全。我國對于化妝品及原料的監(jiān)管一直較為嚴(yán)格,尤其是2020年新《條例》的頒布和實(shí)施，對化妝品原料、生產(chǎn)經(jīng)營、產(chǎn)品的安全與功效等方面都制定了嚴(yán)格的監(jiān)管要求。

化妝品原料不僅是化妝品整個生命周期的源頭和根基,也是產(chǎn)品的主體構(gòu)成,尤其是以活性原料為代表的功效添加成分,更是賦予了化妝品豐富多樣的功效和特點(diǎn)。隨著化妝品行業(yè)的快速發(fā)展和消費(fèi)者認(rèn)知的提高,化妝品產(chǎn)品的宣稱從概念性逐漸向功效性轉(zhuǎn)變。

關(guān)于新《條例》規(guī)定的原料監(jiān)管及新原料注冊備案制度，我國境內(nèi)新原料申報(bào)提供的毒理學(xué)資料仍以動物試驗(yàn)為主。鑒于現(xiàn)階段的科研水平,體外替代方法并不能完全等同于或取代動物在體試驗(yàn)。但在化妝品原料研發(fā)和申報(bào)過程中,可以針對原料和產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、特定的毒理學(xué)終點(diǎn),選擇合適的整合測試和評估方法(IATA)對新原料的毒性進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估或功效測試。如在試驗(yàn)過程中使用的評估方法尚未收錄于我國現(xiàn)行的《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中,也應(yīng)收錄于國際權(quán)威替代方法驗(yàn)證機(jī)構(gòu)所公布的方法中,同時(shí)還需提交該毒理學(xué)試驗(yàn)方法與我國現(xiàn)行方法所得結(jié)果一致的證明材料,包括申請人的試驗(yàn)資料、科學(xué)文獻(xiàn)、國內(nèi)外政府、國際組織發(fā)布的內(nèi)容等都可作為被認(rèn)可的毒理學(xué)試驗(yàn)資料。但作為申報(bào)資料項(xiàng)目或提供新原料安全評價(jià)資料豁免依據(jù)時(shí)所引用的科學(xué)文獻(xiàn)法規(guī)資料內(nèi)容,應(yīng)與該新原料具有邏輯關(guān)聯(lián)性。如原料來源、使用目的、使用規(guī)格、適用或使用范圍、安全使用等限制條件應(yīng)一致。新《條例》還要求化妝品原料及其應(yīng)用產(chǎn)品的功效宣稱必須具有充分的科學(xué)依據(jù),并在國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門規(guī)定的專門網(wǎng)站向社會公開,包括支撐其功效宣稱的相關(guān)文獻(xiàn)資料、研究數(shù)據(jù)或產(chǎn)品功效評價(jià)資料的摘要,并接受全社會的監(jiān)督。

隨著新《條例》的頒布和實(shí)施，作為第二大化妝品市場，我國化妝品行業(yè)的創(chuàng)新熱情被點(diǎn)燃。但繁榮的盛景之下，還有很多亟待解決的問題是行業(yè)必須面對的。在這場創(chuàng)新的浪潮中，原料創(chuàng)新無疑是重頭戲之一。無論是化妝品原料企業(yè)、制造企業(yè)，還是品牌商，都必須堅(jiān)持科技創(chuàng)新,關(guān)注前沿科學(xué)技術(shù)發(fā)展及其在化妝品行業(yè)的推廣應(yīng)用,為我國化妝品行業(yè)健康、科學(xué)、可持續(xù)發(fā)展提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。