連翹提取物對小鼠酒精肝的保護(hù)作用

李振坤，劉詩語，李朝一，白艷雄，李麗娟

（晉中信息學(xué)院，山西 太谷 030800）

酒精肝為長時(shí)間過量飲酒或短時(shí)間內(nèi)大量飲酒，導(dǎo)致肝臟細(xì)胞壞死，肝組織及功能受損的肝臟損傷性疾病，大多數(shù)可以治愈。在中醫(yī)中認(rèn)為是大量飲酒導(dǎo)致的氣滯肝郁，治療時(shí)可采用清濕熱、健脾疏肝的藥物和方法?，F(xiàn)如今治療酒精肝的常用藥物為美他多辛片、糖皮質(zhì)激素等。這些藥物均具有一定的副作用，如出現(xiàn)神經(jīng)損害、頭暈、惡心等病理癥狀。連翹有疏散風(fēng)熱、清熱解毒、消腫散結(jié)的功效。其中含有的苯乙醇苷類物質(zhì)和齊墩果酸，這些物質(zhì)具有肝保護(hù)作用。

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 連翹提取 使用水萃法提取連翹的有效物質(zhì)，將20g連翹放入200g蒸餾水中加熱煮沸1h，將連翹取出再次加200g蒸餾水煮沸1h。將兩次連翹溶液混合過濾，將濾液分為4份裝入燒杯中。濾液放入烘干機(jī)中設(shè)定溫度100℃，直到濾液濃縮為膏狀時(shí)停止烘干，取出膏狀提取物，配成50mg/mL的溶液備用。

1.2 藥物處理 取15只體重為18～22g的ICR小鼠隨機(jī)平均分為3組，分別為對照組（A組）、生理鹽水+酒精組（B組）、酒精+連翹組（C組）。A組處理：7d定時(shí)灌胃生理鹽水0.2mL；B組處理：前6d灌胃0.2mL生理鹽水，第7d灌胃60%酒精溶液0.2mL；C組處理：前6d灌胃連翹提取物溶液0.2mL第7d灌胃60%酒精溶液0.2mL。（見表1）。

1.3 標(biāo)本采集 第7天灌胃結(jié)束后16h，稱量小鼠體重并將全部小鼠頸椎脫臼處死，并將小鼠肝臟取出經(jīng)不同濃度酒精脫水、石蠟包埋、切片、HE染色后封片。

表1 小鼠水平處理

2 結(jié)果

2.1 切片觀察 小鼠肝臟切片經(jīng)HE染色后，在顯微鏡下觀察肝細(xì)胞。A組小鼠肝臟切片可見肝細(xì)胞呈放射性圍繞在肝門靜脈并緊密排列，肝細(xì)胞正常無變性。B組小鼠肝臟切片肝細(xì)胞排列松散無序、變性腫大或緊縮，形成結(jié)構(gòu)雜亂的肝細(xì)胞團(tuán)塊，出現(xiàn)炎癥浸潤現(xiàn)象。C組小鼠肝臟切片與B組相比無雜亂細(xì)胞團(tuán)塊和明顯變性，但細(xì)胞排列與A組相比較為松散無序。C組肝細(xì)胞損傷與B組損傷相比較小，說明連翹提取物對小鼠酒精肝損傷具有明顯保護(hù)作用。（見圖1）。

圖1 顯微鏡觀察

2.2 連翹提取物對體重及肝指數(shù)影響 在飼養(yǎng)期間小鼠飲食、飲水均正常，B、C組注射60%酒精后出現(xiàn)呆滯、步態(tài)不穩(wěn)等現(xiàn)象。B組和C組肝指數(shù)與A組相比有所增加，B組增大較C組明顯，說明連翹提取物對肝臟炎癥保護(hù)有一定效果，（見表3）。使用軟件IBM SPSS Statistics對小鼠體重進(jìn)行單因素方差分析得出p=0.194＞0.05，無組間差異性，體重（見表2）。

表2 處理前后體重變化

3 討論

小鼠體重?zé)o差異性的原因可能是急性酒精肝造模時(shí)間較短，對體重和肝臟的影響不明顯。酒精主要在肝臟中代謝，酒精及其代謝產(chǎn)物阻礙肝臟的解毒能力導(dǎo)致肝細(xì)胞造成損傷，還能激活庫弗氏細(xì)胞產(chǎn)生自由基和TNF、IL-6等細(xì)胞炎性分子，都能對細(xì)胞和組織造成損害。通過多種途徑對肝臟造成損傷。連翹的功效有清熱解毒、消腫散結(jié)。其中主要含有苯乙醇苷類物質(zhì)和齊墩果酸，能夠抗炎、抗菌，具有降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶的作用。C組和B組的切片觀察對比與肝指數(shù)說明，連翹提取物對肝臟炎癥浸潤和腫大都具有治療保護(hù)作用。連翹提取物對酒精肝損傷具有保護(hù)作用。

表3 處理后肝指數(shù)

4 結(jié)束語

本次實(shí)驗(yàn)采用水萃法提取連翹中的有效物質(zhì)，對小鼠進(jìn)行不同藥物的灌胃處理。結(jié)束后稱量比較3組小鼠的體重及肝指數(shù)的變化，顯微鏡觀察肝臟切片。C組小鼠的肝細(xì)胞狀況明顯好于B組小鼠肝臟細(xì)胞，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出結(jié)論連翹提取物對酒精肝具有保護(hù)作用。希望本次研究能對酒精肝的臨床治療提供參考，但不同程度的酒精肝損傷所需的計(jì)量任然需要進(jìn)一步的研究。