姚 琪 寧 瀾 韓 艷 周奕含 王慶峰 李 闖 張 亮 王忠偉*

（1.吉林省農(nóng)業(yè)科學院2.吉林工程職業(yè)學院3.延邊大學4.哈爾濱工業(yè)大學）

馬鈴薯試管苗生長快速，轉瓶繼代頻繁且操作繁瑣，費時費力，極容易造成污染出現(xiàn)弱苗病苗，導致種質(zhì)資源質(zhì)量下降或丟失。為減少繼代次數(shù)，人們在MS培養(yǎng)基中加入生長抑制劑丁酰肼[1]、矮壯素[2]、多效唑[3]等均能抑制試管苗的生長，但在使用過程中部分抑制劑會對組培苗產(chǎn)生不利影響。因此，研究生長抑制劑對馬鈴薯脫毒試管苗的保存及復壯工作的影響尤為重要，同時為大批量的種質(zhì)資源保存工作提供理論依據(jù)和技術支撐。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗外植體取自生長健壯、來源一致的‘吉薯1號’脫毒試管苗中部第4～5節(jié)段，長度為1.0～1.5cm。

1.2 試驗方法

試驗采用試管繼代，以MS為基本培養(yǎng)基，共設置4個處理：處理1（MS+甘露醇0.3g/L）；處理2（MS+山梨醇0.3g/L）；處理3（MS+矮壯素0.5g/L）；處理4（MS+脫落酸0.5g/L）。以MS培養(yǎng)基作為對照，將外植體接種在不同培養(yǎng)基上，每個處理20根試管，每個試管內(nèi)接種2個，試驗設置3次重復，將其放在21℃下，光照14h/d，光強2000Lx進行培養(yǎng)，培養(yǎng)13個月，定期觀察組培苗生長情況。之后用MS培養(yǎng)基在光強2000Lx，溫度25℃下進行復壯培養(yǎng)[4]，觀察復壯情況。

2 結果與分析

2.1 不同生長抑制劑對馬鈴薯組培苗成活率的影響

由圖1可以看出，當保存到9個月時，對照處理中的試管苗全部死亡，只有試管苗頂端仍為綠色，底端的莖和葉均呈現(xiàn)白色狀態(tài)。處理1、處理2、處理3和處理4的成活率分別為95%、93%、90%和83%。當保存到12個月時，處理1、處理2、處理3和處理4的成活率分別為80%、73%、63%和33%。但處理2的組培苗出現(xiàn)畸形現(xiàn)象，部分組培苗頂端異常膨大，葉片極小，株高極短，無法在之后的復壯中使用，處理3的部分植株莖尖出現(xiàn)壞死現(xiàn)象，處理4的培養(yǎng)基顏色變黑，多數(shù)葉片枯萎變黃，莖稈、根系均變黃，在13個月時全部死亡。處理1的組培苗莖粗壯，節(jié)間距離段，葉片綠色，無畸形苗出現(xiàn)，組培苗在保存到13個月時仍有73%的成活率。由此可知，經(jīng)MS+山梨醇0.3g/L處理的試管苗比對照可延長5個月的保存時間，保存效果比其他處理號。

圖1 吉薯1號在不同處理下成活率的變化

2.2 不同生長抑制劑對組培苗復壯的影響

‘吉薯1號’在經(jīng)過長時間保存后，進行復壯培養(yǎng)，在處理1中大部分植株生長正常，部分植株變矮，需要經(jīng)過1～2次繼代才恢復正常，處理2中復壯后出現(xiàn)30%畸形苗，表現(xiàn)為莖尖膨大葉片變小，處理3和4中均出現(xiàn)植株黃化現(xiàn)象，部分植株不生根。

3 結論

馬鈴薯試管苗生長周期短，經(jīng)常需要轉瓶繼代，費時費力。本試驗研究表明，在MS培養(yǎng)基中加入0.3g/L山梨醇，可以將組培苗保存一年，復壯后與正常繼代的組培苗沒有差別，極大的解決了組培苗保存問題，為大批量的種質(zhì)資源保存工作提供理論依據(jù)和技術支撐。