妊娠期高血壓患者血清miR-15b、Zeste 同源物增強(qiáng)子-2 表達(dá)水平及臨床意義

王小鈺， 陳麗平， 湯衛(wèi)春， 陸奕玲， 王 瑩

南通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(南通市第一人民醫(yī)院) 婦產(chǎn)科，江蘇 南通 226001

妊娠期高血壓以高血壓、蛋白尿、水腫為主要癥狀，隨著病情發(fā)展，可誘發(fā)子癇，威脅母嬰生命安全[1-5]。 近年來，妊娠期高血壓的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢(shì)，其已成為孕產(chǎn)婦、圍生兒病死率升高的主要原因之一[6]。 因此，早期預(yù)測和診斷妊娠期高血壓是婦產(chǎn)科的工作重點(diǎn)。 臨床上判定妊娠期高血壓多通過生化指標(biāo)、臨床癥狀等，遺傳學(xué)及分子生物學(xué)等新技術(shù)也被逐漸應(yīng)用[7-8]。 miR-15b 作為miRNA 家族的主要成員之一，其水平升高可反映機(jī)體的缺血缺氧狀態(tài)[9-13]，而胎盤缺血缺氧是妊娠期高血壓的發(fā)病原因之一。在多種疾病中，miRNA 可靶向調(diào)控Zeste 同源物增強(qiáng)子-2(enhancer of Zeste homolog-2，EZH2)[14-16]。 本研究旨在檢測妊娠期高血壓患者血清miR-15b、EZH2 的表達(dá)水平，并分析其臨床意義。 現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取南通大學(xué)第二附屬醫(yī)院自2020 年1 月至2021 年6 月收治的120 例孕婦為研究對(duì)象。 納入標(biāo)準(zhǔn):年齡22 ~34 歲；分娩時(shí)孕周37 ~42 周；妊娠次數(shù)≤3 次；單胎足月分娩；妊娠前3 個(gè)月月經(jīng)無異常；文化程度在小學(xué)以上。 排除標(biāo)準(zhǔn):存在糖尿病、死胎或死產(chǎn)史；合并慢性血管性疾?。粺o法按時(shí)完成產(chǎn)檢；分娩后3 個(gè)月無法完成隨訪。妊娠期高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn):參考?婦產(chǎn)科學(xué)(8 版)?[17]，妊娠≥20 周首次出現(xiàn)高血壓，收縮壓≥140 mmHg(1 mmHg ＝0.133 kPa)和(或)舒張壓≥90 mmHg，產(chǎn)后12 周內(nèi)恢復(fù)正常，尿蛋白檢測呈陰性。 輕度子癇:妊娠20 周后收縮壓≥140 mmHg 和(或)舒張壓≥90 mmHg，尿蛋白≥0.3 g/24 h，或尿蛋白/肌酐比值≥0.3，或隨機(jī)尿蛋白≥( ＋)。 重度子癇:子癇前期孕婦出現(xiàn)血壓和(或)尿蛋白水平持續(xù)升高，發(fā)生母體器官功能受損或胎盤-胎兒并發(fā)癥。 根據(jù)妊娠期情況，將孕婦分入A 組(妊娠期高血壓孕婦)、B 組(輕度子癇孕婦)、C 組(重度子癇孕婦)及D 組(健康孕婦)，每組各30 例。A 組平均年齡(28.48 ± 3.17)歲；初產(chǎn)17 例，經(jīng)產(chǎn)13 例；孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(23.02 ±1.56)kg/m2。 B 組平均年齡(28.69 ±3.21)歲；初產(chǎn)19 例，經(jīng)產(chǎn)11 例；孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(23.18 ±1.62)kg/m2。 C 組平均年齡(28.62 ±3.12)歲；初產(chǎn)20 例，經(jīng)產(chǎn)10 例；孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(23.11 ±1.51)kg/m2。 D 組平均年齡(28.53 ±3.16)歲；初產(chǎn)16 例，經(jīng)產(chǎn)14 例；孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(23.06 ±1.48)kg/m2。4 組研究對(duì)象一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。 研究對(duì)象及其家屬均簽署知情同意書。 本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法 4 組孕婦均正常生產(chǎn)。 胎盤娩出后，將胎盤組織在液氮中研磨至粉末，提取胎盤總RNA。 留取孕婦血液標(biāo)本，提取血漿總RNA。 采用紫外分光光度法測定RNA 濃度，采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)檢測miR-15b、EZH2 在血漿和胎盤中的表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)。 采用Spearman 法進(jìn)行相關(guān)性分析。 以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

D 組、A 組、B 組、C 組血漿miR-15b 分別為(1.42 ±0.35)、(1.68 ±0.41)、(2.59 ±0.58)、(3.82 ±0.67)，胎盤miR-15b 分別為(1.56 ± 0.37)、(1.74 ± 0.46)、(2.66 ±0.59)、(3.96 ±0.71)；D 組、A 組、B 組、C 組血漿EZH2 分別為(105.25 ± 16.87) Mr/103、 (95.33 ± 13.28) Mr/103、(82.69 ±12.74)Mr/103、(75.45 ±10.58)Mr/103，胎盤EZH2分別為(102.11 ±15.84)Mr/103、(90.65 ±13.19)Mr/103、(81.02 ±12.05)Mr/103、(73.15 ±10.08)Mr/103。 與D 組比較，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平更高(P<0.05)，EZH2 水平更低(P < 0.05)；隨著病情加重，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平呈逐漸升高趨勢(shì)(P <0.05)，EZH2 水平呈逐漸降低趨勢(shì)(P <0.05)。miR-15b 水平與妊娠期高血壓、輕度子癇、重度子癇呈正相關(guān)(r ＝0.385、0.428、0.518，P <0.05)，EZH2 水平與妊娠期高血壓、輕度子癇、重度子癇呈負(fù)相關(guān)(r ＝ － 0.316、－0.512、－0.568，P<0.05)。

3 討論

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病，會(huì)引起血管痙攣、動(dòng)脈血壓升高，導(dǎo)致臟器灌注不足，誘發(fā)相應(yīng)病理生理改變，給孕婦和胎兒的生命安全構(gòu)成極大威脅[18-19]。 妊娠期高血壓孕婦胎盤多伴有動(dòng)脈硬化或梗死，使胎盤出現(xiàn)缺血缺氧癥狀，這主要與滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤、螺旋動(dòng)脈生理改變密切相關(guān)，過程受基因調(diào)控[20-21]。

子癇前期的發(fā)生與胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞氧化應(yīng)激異常、炎癥免疫亢進(jìn)、侵襲異常等密切相關(guān)，miRNA 在妊娠期高血壓前期可能通過作用于細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激及內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙分子通路相關(guān)蛋白來干預(yù)子癇的發(fā)生發(fā)展[9-10]。 miRNA 主要在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核中合成，其在轉(zhuǎn)錄后基因的調(diào)控、表達(dá)中扮演重要角色[11]。 miR-15b 作為miRNA 家族的主要成員之一，在機(jī)體缺氧缺血時(shí)水平會(huì)明顯升高，并在血漿、胎盤組織中大量表達(dá)[9-13]。 這提示，miR-15b 水平升高可反映缺血缺氧狀態(tài)，而胎盤缺血缺氧是妊娠期高血壓的發(fā)病原因之一，因此，miR-15b 與妊娠期高血壓存在一定關(guān)系。 EZH2 是一種轉(zhuǎn)錄阻遏因子，參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的形成基因表達(dá)調(diào)節(jié)及生長控制[22]，其與細(xì)胞過度增殖、腫瘤發(fā)生等密切相關(guān)。陳芳等[23]認(rèn)為，EZH2 在宮頸癌患者病灶組織中的表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、長期預(yù)后明顯相關(guān)。 在腫瘤性疾病中，miR-15b 可能為抑癌基因，其通過靶向作用調(diào)控EZH2 基因表達(dá)[24]；對(duì)于孕婦，miR-15b 通過作用于EZH2 來促進(jìn)妊娠期高血壓的發(fā)生發(fā)展。

本研究結(jié)果顯示:與D 組比較，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平更高(P <0.05)，EZH2 水平更低(P<0.05)；隨著病情加重，A 組、B 組、C 組血漿和胎盤中的miR-15b 水平呈逐漸升高趨勢(shì)(P<0.05)，EZH2 水平呈逐漸降低趨勢(shì)(P <0.05)。 這表明，與健康孕婦比較，妊娠期高血壓孕婦的miR-15b、EZH2 表達(dá)異常，且隨著病情加重，表達(dá)異常愈發(fā)明顯。 本研究結(jié)果還顯示:miR-15b 水平與妊娠期高血壓病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(P <0.05)，EZH2 水平與妊娠期高血壓病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

綜上所述，妊娠期高血壓孕婦血清miR-15b 處于高表達(dá)狀態(tài)，EZH2 處于低表達(dá)狀態(tài)，血清miR-15b、EZH2 可作為妊娠期高血壓早期預(yù)測的新型標(biāo)志物。 但本研究樣本量較小，數(shù)據(jù)存在一定局限性，后續(xù)需加大樣本量對(duì)結(jié)論予以驗(yàn)證。