基于IBR模型研究磷化工區(qū)溪流水體對(duì)斑馬魚的毒性效應(yīng)

代恒美，郭子毓，徐玉艷，張華，潘莎

貴州醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與健康學(xué)院，環(huán)境污染與疾病監(jiān)控教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴陽 550025

近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們對(duì)磷化工產(chǎn)品的需求日益增加，磷化工已成為我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的重要支柱產(chǎn)業(yè)。然而，磷化工在生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的磷（P）、氟（F）、砷（As）和鎘（Cd）等污染物易經(jīng)大氣沉降、廢水排放及地表徑流等途徑進(jìn)入周邊水環(huán)境，致使區(qū)域水環(huán)境質(zhì)量惡化，并對(duì)水生生物構(gòu)成潛在威脅[1-2]。因此，開展磷化工區(qū)水環(huán)境的生物毒性效應(yīng)評(píng)估對(duì)正確認(rèn)識(shí)磷化工污染的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義。

斑馬魚（Daniorerio）屬于輻鰭亞綱（Actinopterygii）、鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、短擔(dān)尼魚屬（Danio），是一種小型熱帶淡水硬骨魚類。具有產(chǎn)卵量大、易飼養(yǎng)、對(duì)毒物刺激較敏感、基因與人類高度同源等特點(diǎn)，是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（International Organization for Standardization, ISO）推薦的生態(tài)環(huán)境測(cè)試模式生物，廣泛應(yīng)用于環(huán)境毒性評(píng)價(jià)研究中[3]。

當(dāng)生物受到環(huán)境污染物脅迫時(shí)，體內(nèi)自由基產(chǎn)生增多，進(jìn)而引起氧化應(yīng)激和氧化損傷。因此，可將生物體內(nèi)抗氧化酶、抗氧化小分子和脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物等作為反映生物氧化應(yīng)激的標(biāo)志物，有效預(yù)測(cè)環(huán)境中污染物的生物效應(yīng)及毒理學(xué)特征[4]。但由于不同生物標(biāo)志物對(duì)環(huán)境污染物的敏感程度存在差異，且對(duì)污染物脅迫的響應(yīng)并不同步，因此，采用單一生物標(biāo)志物評(píng)價(jià)污染物毒性效應(yīng)存在一定局限性[5]。整合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)（integrated biomarker response, IBR）可將不同生物標(biāo)志物進(jìn)行綜合分析，能更有效地評(píng)價(jià)水環(huán)境的毒性作用[6]，已被廣泛應(yīng)用于工業(yè)污染對(duì)魚類毒性效應(yīng)評(píng)估的研究[7-9]，但關(guān)于采用IBR綜合評(píng)估磷化工區(qū)水環(huán)境污染對(duì)魚類毒性影響的研究未見報(bào)道。

基于此，本研究以某磷化工廠周邊溪流水體為研究對(duì)象，以斑馬魚為受試生物，探討在該溪流水體不同暴露時(shí)間下斑馬魚肝臟、鰓組織中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、過氧化氫酶（catalase, CAT）、過氧化物酶（peroxidase, POD）活性及丙二醛（malondialdehyde, MDA）、谷胱甘肽（glutathione, GSH）含量變化情況，并運(yùn)用IBR模型綜合評(píng)價(jià)該溪流水體對(duì)斑馬魚的毒性效應(yīng)，以期為區(qū)域水環(huán)境污染及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供理論依據(jù)。

1 材料與方法（Materials and methods）

1.1 材料與儀器

1.1.1 實(shí)驗(yàn)生物及其馴養(yǎng)

斑馬魚購于貴陽某花鳥市場(chǎng)，體長(zhǎng)為（2±1） cm，體質(zhì)量為（0.3±0.1） g。將斑馬魚置于玻璃水族箱中馴養(yǎng)14 d，馴養(yǎng)期間斑馬魚死亡率低于5%。馴養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)條件保持一致，用水均為充分曝氣的自來水，pH值7±0.5，溫度（23±1） ℃，溶解氧（DO）≥4 mg·L-1；光暗周期為t（光）∶t（暗）=12 h∶12 h；每天早晚喂食2次，及時(shí)清除糞便及食物殘?jiān)?。馴養(yǎng)結(jié)束后隨機(jī)挑選身體健壯、反應(yīng)靈敏、大小基本一致且無明顯疾病和畸形的斑馬魚用于實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 儀器與試劑

多功能酶標(biāo)儀（Multiskan GO，美國(guó)Thermo Scientific公司）；微量高速冷凍型離心機(jī)（Z216MK，德國(guó)HERMLE Labortechnik GmbH公司）；超聲細(xì)胞破碎儀（JXFSTPRP-64，上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司，中國(guó)）考馬斯亮藍(lán)總蛋白（TP）試劑盒、超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒、過氧化氫酶（CAT）試劑盒、過氧化物酶（POD）試劑盒、丙二醛（MDA）試劑盒和谷胱甘肽（GSH）試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 水樣暴露實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組（充分曝氣的自來水）和處理組（4 ℃保存的磷化工區(qū)溪流原水樣），每組隨機(jī)放入馴養(yǎng)后斑馬魚60尾，每組設(shè)3個(gè)平行。選用體積為10 L的玻璃魚缸，每個(gè)魚缸溶液總體積為8 L。試驗(yàn)期間24 h連續(xù)曝氣，水溫為22～24 ℃。每24 h更換試驗(yàn)液1次，每天早晚喂食2次。

1.2.2 樣品的制備

實(shí)驗(yàn)開始后，分別于7、14、21和28 d在每組隨機(jī)選取數(shù)尾魚冷凍麻醉后進(jìn)行解剖，迅速取出肝臟和鰓并去除表面附帶的結(jié)締組織，在4 ℃生理鹽水中漂洗干凈，用濾紙拭干表面水分，稱取約0.1 g組織樣品，按1∶9質(zhì)量體積比（m∶V）加入預(yù)冷生理鹽水作為勻漿介質(zhì)，在冰水浴條件下，用勻漿器制成10%組織勻漿液。在4 ℃、2 500 r·min-1下離心10 min，取上清液用于酶活性測(cè)定。

1.2.3 生化指標(biāo)的測(cè)定

SOD通過黃嚷吟及黃嚷吟氧化酶反應(yīng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基，后者與胺鹽可形成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈現(xiàn)紫紅色，在450 nm處可測(cè)定其吸光度值。SOD酶活性單位為U·mg-1protein。

CAT分解H2O2的反應(yīng)可通過鉬酸銨而中止，剩余的H2O2與鉬酸銨作用產(chǎn)生淡黃色的絡(luò)合物，可在405 nm處測(cè)定其生成量，由此計(jì)算H2O2的反應(yīng)量，計(jì)算CAT活性。CAT酶活性單位為U·mg-1protein。

POD通過催化H2O2的反應(yīng)，測(cè)定420 nm處吸光度的變化得出其酶活性。POD酶活性單位為U·mg-1protein。

MDA與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色產(chǎn)物，在532 nm處有最大吸收峰，可測(cè)定此波長(zhǎng)處吸光度值，計(jì)算得出MDA含量。MDA含量單位為nmol·mg-1protein。

GSH利用二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應(yīng)時(shí)能產(chǎn)生一種黃色化合物，在420 nm處通過比色定量測(cè)定其吸光度值，計(jì)算得出GSH含量。GSH含量單位為mg·g-1protein。

測(cè)試步驟嚴(yán)格按照各試劑盒說明書進(jìn)行。試驗(yàn)中每組每個(gè)指標(biāo)測(cè)定設(shè)3個(gè)重復(fù)。

1.3 IBR指數(shù)評(píng)價(jià)

根據(jù)污染脅迫后該標(biāo)志物的生物活性是否被激活，若是，令Z=Y，反之，令Z=-Y。|Xmin|表示每個(gè)時(shí)間點(diǎn)中該標(biāo)志物均一化數(shù)據(jù)最小值的絕對(duì)值。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的生物標(biāo)志物得分（S）計(jì)算公式為S=Z+|Xmin|。

繪制星狀圖，計(jì)算其面積：星狀圖中各輻射線的長(zhǎng)度即為每個(gè)指標(biāo)的Si值，每一組別的IBR為所構(gòu)成星狀圖面積（即圖中由相鄰指標(biāo)的輻射線所構(gòu)成的三角形面積（Ai）之和），計(jì)算見式（1）～（3）：

（1）

（2）

（3）

式中：n為所選用的生物標(biāo)志物總數(shù)，?為相鄰兩輻射線的夾角，?=2π/n，Sn+1=S1。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

應(yīng)用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。若數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布，采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)對(duì)處理組和對(duì)照組進(jìn)行差異分析，反之，采用非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P<0.05、P<0.01表明差異顯著。采用Origin 8.0軟件進(jìn)行圖形繪制。

2 結(jié)果（Results）

2.1 溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟、鰓SOD活性的影響

如圖1所示，斑馬魚暴露7 d時(shí)，與對(duì)照組相比，處理組肝臟SOD活性顯著升高（P<0.01），此時(shí)肝臟SOD活性達(dá)最大，是對(duì)照組的1.26倍，隨著暴露時(shí)間的持續(xù)，肝臟SOD活性的上調(diào)作用有所緩解。鰓SOD活性變化趨勢(shì)與肝臟相似，與對(duì)照組相比，在第7天時(shí)處理組鰓SOD活性顯著升高（P<0.01），是對(duì)照組的1.72倍，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，鰓SOD活性的上調(diào)作用有所緩解。

2.2 溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟、鰓CAT活性的影響

如圖2所示，斑馬魚暴露7 d時(shí)，與對(duì)照組相比，處理組肝臟CAT活性顯著升高（P<0.01），此時(shí)肝臟CAT活性達(dá)最大，是對(duì)照組的1.82倍，隨著暴露時(shí)間的持續(xù)，肝臟CAT活性的促進(jìn)效應(yīng)有所降低，但仍高于對(duì)照組水平（P<0.01）。鰓CAT活性變化趨勢(shì)與肝臟較為相似，與對(duì)照組相比，在第7天時(shí)處理組鰓CAT活性顯著升高（P<0.01），是對(duì)照組的2.67倍，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，鰓CAT活性的促進(jìn)效應(yīng)有所降低，但仍高于對(duì)照組水平（P<0.05）。

2.3 溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟、鰓POD活性的影響

如圖3所示，斑馬魚暴露7 d后，與對(duì)照組相比，處理組肝臟POD活性升高，但差異不顯著（P>0.05）；隨著暴露時(shí)間的持續(xù)，肝臟POD活性的促進(jìn)效應(yīng)有所降低，在第28天時(shí)處理組肝臟POD活性較對(duì)照組顯著性降低（P<0.05），此時(shí)，POD活性水平下降至對(duì)照組的26.92%。鰓POD活性變化趨勢(shì)與肝臟較為相似，與對(duì)照組相比，在第7天時(shí)處理組鰓POD活性顯著升高（P<0.01），是對(duì)照組的2.17倍，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，鰓POD活性的促進(jìn)效應(yīng)有所降低，但仍高于對(duì)照組水平（P<0.01）。

圖1 斑馬魚肝臟（a）、鰓（b）超氧化物歧化酶（SOD）活性變化情況注：與對(duì)照組相比（*P<0.05，**P<0.01）。Fig. 1 Changes of superoxide dismutase （SOD） activity in liver （a） and gill （b） of zebrafishNote: Compare with the control （*P<0.05, **P<0.01）.

圖2 斑馬魚肝臟（a）、鰓（b）過氧化氫酶（CAT）活性變化情況注：與對(duì)照組相比（*P<0.05，**P<0.01）。Fig. 2 Changes of catalase （CAT） activity in liver （a） and gill （b） of zebrafishNote: Compare with the control （*P<0.05, **P<0.01）.

2.4 溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟、鰓MDA含量的影響

如圖4所示，暴露7 d后，與對(duì)照組相比，處理組肝臟MDA含量出現(xiàn)顯著性降低（P<0.05），此時(shí)，MDA含量水平下降至對(duì)照組的16.43%，隨著暴露時(shí)間的持續(xù)，肝臟MDA含量逐漸恢復(fù)到對(duì)照組水平。暴露7 d后，與對(duì)照組相比，處理組鰓MDA含量顯著升高（P<0.05），此時(shí)鰓中MDA含量達(dá)最大，是對(duì)照組的1.26倍，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，鰓中MDA含量逐漸呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。

2.5 溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟、鰓GSH含量的影響

如圖5所示，暴露7 d后，與對(duì)照組相比，處理組肝臟GSH含量無顯著變化（P>0.05），隨著暴露時(shí)間的持續(xù)，GSH含量出現(xiàn)一定降低，直到第28天有所回升，但仍低于對(duì)照組水平（P<0.05）。暴露7 d后，與對(duì)照組相比，處理組鰓GSH含量顯著升高（P<0.01），是對(duì)照組的1.93倍，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，GSH含量逐漸下降，直到第28天時(shí)顯著低于對(duì)照組水平（P<0.05），此時(shí)，GSH含量水平下降至對(duì)照組的23.62%。

圖3 斑馬魚肝臟（a）、鰓（b）過氧化物酶（POD）活性的變化注：與對(duì)照組相比（*P<0.05，**P<0.01）。Fig. 3 Changes of peroxidase （POD） activity in liver （a） and gill （b） of zebrafishNote: Compare with the control （*P<0.05, **P<0.01）.

圖4 斑馬魚肝臟（a）、鰓（b）丙二醛（MDA）含量的變化注：與對(duì)照組相比（*P<0.05，**P<0.01）。Fig. 4 Changes of malondialdehyde （MDA） content in liver （a） and gill （b） of zebrafishNote: Compare with the control （*P<0.05, **P<0.01）.

2.6 IBR指數(shù)

在溪流水體脅迫下，不同暴露時(shí)間點(diǎn)的斑馬魚肝臟、鰓的IBR分析結(jié)果如圖6和圖7所示。星狀圖中5個(gè)方向軸分別代表5種生物標(biāo)志物（SOD、CAT、POD、MDA和GSH），該5種生物標(biāo)志物的響應(yīng)所構(gòu)成的星狀圖面積即為IBR值。星狀圖面積越大，表明污染物對(duì)生物體的毒性效應(yīng)越大。在不同暴露時(shí)間，處理組肝臟、鰓組織中5種生物標(biāo)志物受到誘導(dǎo)或抑制。結(jié)合IBR模型分析可見：與對(duì)照組相比，處理組肝臟組織在7 d和14 d時(shí)星狀圖覆蓋面積更大，鰓組織在7 d和28 d時(shí)星狀圖覆蓋面積更大，提示溪流水體不同時(shí)間脅迫對(duì)肝臟、鰓組織產(chǎn)生的毒性存在差異，表明在磷化工區(qū)溪流水體脅迫下，不同時(shí)間點(diǎn)斑馬魚肝臟、鰓對(duì)外界刺激產(chǎn)生防御應(yīng)激的敏感性不同。

圖5 斑馬魚肝臟（a）、鰓（b）谷胱甘肽（GSH）含量的變化注：與對(duì)照組相比（*P<0.05，**P<0.01）。Fig. 5 Changes of glutathione （GSH） content in liver （a） and gill （b） of zebrafishNote: Compare with the control （*P<0.05, **P<0.01）.

圖6 溪流水體脅迫下斑馬魚肝臟整合生物標(biāo)志物響應(yīng)指數(shù)（IBR）星狀圖Fig. 6 Integrated biomarker response （IBR） index of zebrafish liver under stream water stress

圖7 溪流水體脅迫下斑馬魚鰓IBR星狀圖Fig. 7 IBR of zebrafish gill under stream water stress

從時(shí)間-效應(yīng)分析（圖8）可知，與對(duì)照組相比，處理組斑馬魚肝臟組織IBR值總體呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)，在7 d時(shí)達(dá)到峰值，為14.76；處理組鰓組織IBR值總體呈現(xiàn)先降低后升高的變化趨勢(shì)，在7 d時(shí)達(dá)到峰值，為13.82，表明當(dāng)磷化工區(qū)溪流水體脅迫至7 d時(shí)，對(duì)斑馬魚肝臟、鰓組織的毒性作用最強(qiáng)。就不同組織來看（圖9），磷化工區(qū)溪流水體對(duì)5種生物標(biāo)志物的影響具有組織器官特異性，處理組肝臟IBR值為33.98，鰓IBR值為30.6，表現(xiàn)為肝臟>鰓，表明磷化工區(qū)溪流水體對(duì)斑馬魚肝臟產(chǎn)生的影響大于鰓。

3 討論（Discussion）

圖8 溪流水體脅迫下斑馬魚肝臟（a）和鰓（b）的IBR隨時(shí)間的變化Fig. 8 Changes of IBR with time in the liver （a） and gill （b） of zebrafish under stream water stress

圖9 溪流水體不同脅迫時(shí)間下處理組斑馬魚肝臟和鰓的IBRFig. 9 The IBR value in the liver and gill of zebrafish under stream water stress after different time

CAT可促使SOD歧化產(chǎn)生的H2O2進(jìn)一步分解為O2和H2O，阻止·OH的生成，是使生物體內(nèi)細(xì)胞免受H2O2毒害的一類抗氧化酶[18]。本研究中，處理組斑馬魚肝臟、鰓組織CAT活性呈現(xiàn)先顯著性升高后降低的趨勢(shì)，符合Stebbing[19]提出的“毒物興奮效應(yīng)”，即短暫的溪流水體脅迫后，刺激了機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)，使其發(fā)揮功能從而清除體內(nèi)的H2O2，但隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，生物體內(nèi)蓄積污染物增多，抗氧化系統(tǒng)受到損傷，CAT活性的促進(jìn)效應(yīng)有所降低[20-21]。

POD通常以同功酶的形式參與機(jī)體的抗氧化防御作用，其能催化H2O2與氫供給體之間的氧化反應(yīng)，從而分解有毒物質(zhì)H2O2，具有比CAT更高的H2O2親和力，是提高機(jī)體免疫解毒能力的重要因子[22]。本研究結(jié)果顯示，肝臟、鰓組織中POD活性整體呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì)，與王慶偉[23]研究重金屬及三苯基錫（TPT）、五氯酚（PCP）對(duì)斑馬魚POD活性影響趨勢(shì)一致。有研究表明，在生物體受到輕度污染脅迫時(shí)，會(huì)誘導(dǎo)POD活性升高來抵御外界刺激，但在污染脅迫超過生物體抵御能力，POD活性會(huì)受到抑制[24]。本研究中，斑馬魚體內(nèi)污染物的蓄積量隨著在磷化工區(qū)溪流水中暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。因此，隨著斑馬魚體內(nèi)污染物含量的增加，POD活性表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢(shì)。

MDA是脂質(zhì)過氧化作用最終代謝產(chǎn)物之一，可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡甚至損害器官功能。生物體內(nèi)MDA含量可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，是細(xì)胞膜系統(tǒng)受損傷的指標(biāo)之一[25]。本研究結(jié)果顯示，在磷化工區(qū)溪流水體暴露早期，與對(duì)照組相比，斑馬魚鰓中MDA含量顯著升高，而肝臟MDA含量顯著降低，其可能是由于肝臟作為解毒器官，響應(yīng)更加迅速，在暴露早期，抗氧化系統(tǒng)其他組分增強(qiáng)對(duì)ROS的清除能力，未明顯造成肝臟組織脂質(zhì)過氧化程度加深[26-27]。

GSH是生物體內(nèi)廣泛存在的一種過氧化物分解酶，是重要的ROS清除劑，其含量變化與酶類抗氧化劑的活性緊密相關(guān)。在生物體受到污染物脅迫時(shí)，GSH活性與抗氧化酶一樣，可呈現(xiàn)出誘導(dǎo)或抑制現(xiàn)象[28]。本研究中，肝臟、鰓組織中GSH變化趨勢(shì)與MDA類似，這可能除與肝臟的解毒作用有關(guān)外，另一方面可能因?yàn)镚SH可同時(shí)與谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶（GST）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）等其他抗氧化酶相互協(xié)調(diào)共同調(diào)控機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)[29-30]，當(dāng)鰓組織中利用GSH作為還原性底物來清除H2O2的抗氧化活性被顯著抑制時(shí)，GSH消耗量減少。這與余曉玲[31]的研究結(jié)果一致。

外源污染物脅迫對(duì)各種酶活性抑制或誘導(dǎo)效應(yīng)表現(xiàn)不一，且不同酶對(duì)污染物刺激的敏感程度存在差異，時(shí)間響應(yīng)不同步。若僅考慮單一酶活性，尚不能很好地定量評(píng)價(jià)其毒性效應(yīng)。IBR模型可將不同生物指標(biāo)的聯(lián)合生物效應(yīng)進(jìn)行量化，通過將各種酶以及其他生物標(biāo)志物結(jié)合分析，能較準(zhǔn)確客觀地評(píng)估水環(huán)境的毒性作用[17]，從而彌補(bǔ)單一酶活性不能定量直觀評(píng)價(jià)等缺點(diǎn)[5,15]，已被廣泛應(yīng)用于定量評(píng)價(jià)污染脅迫對(duì)生物的綜合影響研究中[7, 32]。本研究采用IBR模型評(píng)價(jià)方法對(duì)斑馬魚肝臟和鰓組織中SOD、CAT、POD、MDA和GSH 5個(gè)指標(biāo)進(jìn)行整合分析，發(fā)現(xiàn)在磷化工區(qū)溪流水體脅迫下，斑馬魚肝臟、鰓組織產(chǎn)生了明顯的應(yīng)激響應(yīng)，且斑馬魚不同組織在不同暴露時(shí)間對(duì)該水體的毒性響應(yīng)存在差異。就整體的時(shí)間效應(yīng)來看，肝臟組織、鰓組織IBR指數(shù)峰值均出現(xiàn)在第7天，說明抗氧化系統(tǒng)相關(guān)酶類和小分子是較為敏感的生物標(biāo)志物，后期大部分生物標(biāo)志物活性逐漸恢復(fù)或接近對(duì)照水平，IBR指數(shù)出現(xiàn)一定幅度的下降。這一趨勢(shì)與蔣玫等[4]利用IBR模型評(píng)價(jià)0號(hào)柴油對(duì)黑鯛的毒性效應(yīng)中IBR值變化規(guī)律一致。就不同組織來看，總體上IBR值表現(xiàn)為肝臟大于鰓，說明磷化工區(qū)溪流水體對(duì)肝臟的影響更大，這可能是由于與鰓組織相比，肝臟組織是生物體受到污染時(shí)的主要解毒和代謝器官，也是有毒有害物質(zhì)的首要靶器官[33]。綜上可見，斑馬魚體內(nèi)SOD、CAT、POD、MDA和GSH等氧化應(yīng)激生物標(biāo)志物在磷化工區(qū)溪流水體脅迫下出現(xiàn)應(yīng)答，表明磷化工區(qū)溪流水體具有一定生物毒性，磷化工污染的水生生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)受到關(guān)注。