兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤病理分子機(jī)制及靶向藥物研究進(jìn)展

鄧后亮，李亞冰，楊金連，魏媛怡，梁倩瑩，何艷玲

(1.廣州市婦女兒童醫(yī)療中心藥學(xué)部，廣州 510623； 2.廣東省婦幼保健院藥學(xué)部，廣州 510010)

膠質(zhì)瘤是兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，也是兒童最常見的腫瘤相關(guān)致死性疾病，根據(jù)病理組織學(xué)特征及惡性程度可將其分為低級別(世界衛(wèi)生組織Ⅰ～Ⅱ級)和高級別(世界衛(wèi)生組織Ⅲ～Ⅳ級)兩大類。兒童低級別膠質(zhì)瘤大多進(jìn)展緩慢，而高級別膠質(zhì)瘤惡性程度極高，患兒大多預(yù)后不良，5年生存率低于1%[1]。兒童與成人膠質(zhì)瘤的病理機(jī)制截然不同，導(dǎo)致其對目前的標(biāo)準(zhǔn)治療不敏感，這是兒童膠質(zhì)瘤預(yù)后差的關(guān)鍵原因。然而，2012年該領(lǐng)域獲得了一個(gè)突破性發(fā)現(xiàn)，即大部分兒童高級別膠質(zhì)瘤患者攜帶的組蛋白H3第27位賴氨酸被甲硫氨酸替代(histone H3 lysine to methionine substitution on position 27，H3K27M)，其主要特征為編碼組蛋白H3的基因H3F3A或HIST1H3B發(fā)生突變[2-3]。H3K27M突變是兒童高級別膠質(zhì)瘤重要的分子生物學(xué)基礎(chǔ)。雖然在研究早期已經(jīng)明確了H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展與多梳蛋白抑制復(fù)合體2(polycomb repressive complex 2，PRC2)活性被抑制而導(dǎo)致細(xì)胞H3K27三甲基化(H3K27 trimethylation，H3K27me3)修飾等表觀遺傳調(diào)控異常密切相關(guān)，但目前對H3K27M突變影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)過程以及基因表達(dá)的研究仍處于快速發(fā)展時(shí)期。此外，近年來鑒定出多種在實(shí)驗(yàn)室水平具有潛在靶向治療H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的藥物。現(xiàn)就兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤病理分子機(jī)制及靶向藥物研究進(jìn)展予以綜述，以為后續(xù)深入研究提供基礎(chǔ)。

1 兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤概述

組蛋白是核小體的重要組成部分，與維持染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和調(diào)控基因表達(dá)相關(guān)。在哺乳細(xì)胞中，組蛋白H3存在多種變異體，包括H3.1、H3.2、H3.3、CENPA、H3.4、H3.5、H3.X和H3.Y等[4]。兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的主要亞型為H3.3K27M和H3.1K27M，該發(fā)現(xiàn)于2012年被首次報(bào)道[2-3]。其中，Wu等[2]報(bào)道高達(dá)78%的彌漫性內(nèi)生型腦橋膠質(zhì)瘤以及22%的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的患兒攜帶H3K27M突變。與此同時(shí)，Schwartzentruber等[3]研究發(fā)現(xiàn)大約36%的兒童膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中存在H3K27M突變。后續(xù)國內(nèi)外眾多研究進(jìn)一步證實(shí)了兒童高級別膠質(zhì)瘤中存在高頻度的H3K27M突變[5-7]。H3K27M突變型膠質(zhì)瘤發(fā)生部位具有較強(qiáng)的特異性，主要發(fā)生于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的腦干、丘腦及脊髓等部位[8]。除了兒童，近年來研究發(fā)現(xiàn)少部分年輕的成年膠質(zhì)瘤患者同樣攜帶H3K27M突變[9]。與非突變患兒相比，H3K27M突變型膠質(zhì)瘤患兒的預(yù)后往往更差[10]。由于H3K27M突變型膠質(zhì)瘤表現(xiàn)出不同的分子機(jī)制以及預(yù)后的差異，2016年世界衛(wèi)生組織的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類第四版修訂將H3K27M突變型彌漫性中線膠質(zhì)瘤單獨(dú)歸為一類[11]。

2 兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤病理分子機(jī)制

2.1H3K27M突變導(dǎo)致細(xì)胞表觀遺傳調(diào)控異常 組蛋白可接受甲基化、乙?；⒘姿峄榷喾N翻譯后修飾，這些修飾與基因表達(dá)關(guān)系密切，是表觀遺傳調(diào)控的一種重要方式[12]。H3K27既可被甲基化也可以被乙酰化，其中H3K27me3介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄抑制是基因沉默的標(biāo)志；而H3K27乙?；?H3K27 acetylation，H3K27ac)則與基因激活密切相關(guān)[13]。目前鑒定出多種表觀遺傳調(diào)控因子催化或去除H3K27me3修飾，其中PRC2負(fù)責(zé)催化H3K27me3[14]。PRC2由多梳家族蛋白構(gòu)成，在哺乳細(xì)胞中該復(fù)合體由Zeste基因增強(qiáng)子同源物(enhancer of Zeste homolog，EZH)1/2、胚胎外胚層發(fā)育蛋白、Zeste 12同源物1抑制因子2三種核心蛋白構(gòu)成，其中EZH1/2具有甲基轉(zhuǎn)移酶活性。PRC2抑制基因表達(dá)與H3K27me3修飾密切相關(guān)，目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為是胚胎外胚層發(fā)育蛋白與染色質(zhì)上已存在的H3K27me3修飾結(jié)合，繼而EZH1/2三甲基化鄰近核小體的H3K27修飾，最終促使H3K27me3修飾在染色質(zhì)上的延伸而沉默基因[14]。研究表明，PRC2表達(dá)異常及其介導(dǎo)的H3K27me3修飾紊亂引起的細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變與膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[15]。

H3K27M突變發(fā)生在可被修飾的位點(diǎn)，大量證據(jù)表明H3K27M突變降低細(xì)胞H3K27me3修飾整體水平，繼而改變細(xì)胞基因表達(dá)譜[16-18]。Lewis等[16]報(bào)道，H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞中H3K27M含量只占細(xì)胞H3的3%～17%，然而H3K27me3修飾整體水平卻顯著低于非突變型，且在不同細(xì)胞中表達(dá)的H3K27M均會引起H3K27me3修飾水平的顯著下降。體外酶促反應(yīng)顯示，H3K27M多肽可以顯著降低PRC2活性及其介導(dǎo)的H3K27me3修飾水平[16]。該研究還發(fā)現(xiàn)，H3K27M可以與EZH2的SET結(jié)構(gòu)域結(jié)合，而該結(jié)構(gòu)域是EZH2發(fā)揮甲基轉(zhuǎn)移酶活性所必需的。以上結(jié)果表明，H3K27me3修飾水平降低不僅由于該位點(diǎn)不能被修飾，更有可能是該突變體具有“dominant-negative”功能，通過與EZH2的SET結(jié)構(gòu)域結(jié)合抑制PRC2活性，從而導(dǎo)致細(xì)胞中具有活性的PRC2減少。此外，有學(xué)者成功解析了PRC2的空間立體結(jié)構(gòu)，并進(jìn)一步明確H3K27M突變抑制PRC2活性，他們發(fā)現(xiàn)與野生型相比，H3K27M突變與PRC2的結(jié)合能力更強(qiáng)，而且突變型和野生型與PRC2結(jié)合的平衡解離常數(shù)相差10倍之多[19]。值得注意的是，雖然H3K27M突變顯著降低細(xì)胞H3K27me3修飾的整體水平，但它會增加染色質(zhì)局部區(qū)域H3K27me3修飾水平[20]?；谝陨献C據(jù)，H3K27M突變改變H3K27me3修飾可能由于其與EZH2結(jié)合使PRC2富集在染色質(zhì)特定區(qū)域，繼而PRC2在染色質(zhì)上的延伸受到抑制，導(dǎo)致細(xì)胞H3K27me3修飾整體水平下降以及染色質(zhì)局部區(qū)域H3K27me3修飾水平的升高。

已知H3K27既可以被甲基化，同時(shí)也可以接受乙酰化，而且這兩種修飾在調(diào)節(jié)基因表達(dá)上存在相互拮抗作用。研究發(fā)現(xiàn)，H3K27M突變會引起細(xì)胞H3K27ac修飾水平整體升高，導(dǎo)致靶基因激活[16,21]。然而，目前尚不清楚H3K27ac修飾增加是由于H2K27位點(diǎn)的甲基化水平下降還是H3K27M突變影響了相關(guān)的乙?；负?或)去乙?；?。除了影響H3K27位點(diǎn)的修飾外，H3K27M突變同樣可導(dǎo)致DNA低甲基化[18]。DNA低甲基化可影響染色質(zhì)的穩(wěn)定性而驅(qū)動腫瘤的發(fā)生發(fā)展，這或許也是H3K27M突變造成基因表達(dá)紊亂繼而促進(jìn)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制之一。

綜上所述，H3K27M突變發(fā)揮原癌作用與其擾亂H3K27me3和H3K27ac修飾以及DNA甲基化等表觀遺傳調(diào)控密切相關(guān)。

2.2H3K27M突變對膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)過程的影響 由于H3K27M突變對多種表觀遺傳調(diào)控有全局性的影響，該突變可能對多種細(xì)胞生物學(xué)過程有重要影響。截至目前，學(xué)者從多層次、多角度證實(shí)了H3K27M突變可調(diào)控多個(gè)與腫瘤密切相關(guān)的生物學(xué)過程。

2.2.1H3K27M突變對細(xì)胞增殖的影響 細(xì)胞異常增殖是膠質(zhì)瘤發(fā)生最為突出的特征之一。H3K27M突變在體外能夠促進(jìn)人來源的神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖[22]。H3K27M突變促進(jìn)細(xì)胞增殖可能與其沉默細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白p16INK4A密切相關(guān)[23]。研究發(fā)現(xiàn)，H3K27M突變通過調(diào)控p16INK4A啟動子區(qū)H3K27me3修飾和DNA甲基化水平沉默其表達(dá)。然而，有研究顯示H3K27M突變對兒童膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期和增殖并沒有影響[24]。這可能由于研究過程中使用的細(xì)胞種類不同造成H3K27M突變對細(xì)胞增殖的影響結(jié)果不一致。

2.2.2H3K27M突變對細(xì)胞代謝的影響 代謝改變是癌癥的普遍標(biāo)志特征之一，腫瘤細(xì)胞更傾向于吸收和代謝葡萄糖和谷氨酰胺以此維持其關(guān)鍵的生物合成過程。Chung等[25]報(bào)道，H3K27M突變可能會引起細(xì)胞能量代謝紊亂。該研究的體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示，H3K27M突變增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞糖酵解、谷氨酰胺代謝和三羧酸循環(huán)等代謝水平以及伴隨α-酮戊二酸產(chǎn)生的增加，而將H3K27M突變細(xì)胞中能量代謝相關(guān)的關(guān)鍵酶，如谷氨酸脫氫酶、己糖激酶 2、異檸檬酸脫氫酶1敲降或抑制后，細(xì)胞增殖被顯著抑制。基于上述研究結(jié)果，靶向能量代謝酶可能是有效的治療策略。

2.2.3H3K27M突變對膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的影響 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞是膠質(zhì)瘤中具有自我更新能力并能產(chǎn)生異質(zhì)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞，對膠質(zhì)瘤的存活、增殖、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)有重要作用。B細(xì)胞特異性莫洛尼鼠白血病病毒插入位點(diǎn)1(B-cell specific Moloney murine leukemia virus integration site 1，BMI1)是膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的標(biāo)志蛋白之一，對維持膠質(zhì)瘤干細(xì)胞自我更新不可或缺。Balakrishnan等[26]發(fā)現(xiàn)，BMI1表達(dá)水平及其催化的組蛋白H2A第119位賴氨酸單泛素化修飾水平在H3K27M突變型膠質(zhì)瘤中上調(diào)；體外實(shí)驗(yàn)顯示，H3K27M突變通過降低BMI1啟動子區(qū)組蛋白H3K27me3修飾水平而激活其表達(dá)，而敲降或抑制BMI1可降低H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞自我更新能力。

2.2.4H3K27M突變對上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)的影響 EMT是由上皮細(xì)胞表型向間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的生物學(xué)過程，其異常往往導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)無法正常發(fā)育。Sanders等[27]利用生物信息學(xué)系統(tǒng)性分析已公開發(fā)表的相關(guān)數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤表達(dá)異?；蚋患贓MT過程；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，H3K27M突變可上調(diào)EMT關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子蝸牛家族轉(zhuǎn)錄抑制因子1以及下調(diào)Twist相關(guān)蛋白1的表達(dá)。蝸牛家族轉(zhuǎn)錄抑制因子1和Twist相關(guān)蛋白1分別是EMT啟動和完成的標(biāo)志蛋白，上述研究結(jié)果提示，H3K27M突變可能會阻滯細(xì)胞停留在EMT的初始階段，造成細(xì)胞無法順利完成EMT，這使得細(xì)胞分化受阻，細(xì)胞處于一種可增殖的干細(xì)胞狀態(tài)，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

2.2.5H3K27M突變與其他基因突變的相互作用 研究發(fā)現(xiàn)，兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤患者中同時(shí)存在其他基因的突變[3,28]。雖然目前普遍認(rèn)為，H3K27M突變是兒童高級別膠質(zhì)瘤發(fā)生的初始啟動突變，然而該突變可能與其他基因的改變協(xié)同促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。p53是細(xì)胞中重要的抑癌基因，它的突變或缺失均可促進(jìn)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展，而大部分兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤中存在p53基因的突變[3]。α地中海貧血伴智力低下綜合征X連鎖(alpha thalassemia retardation syndrome X-linked，ATRX)基因編碼染色體重塑蛋白，其表達(dá)缺失可影響H3.3與著絲粒區(qū)和端粒區(qū)異染色質(zhì)的結(jié)合，導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)損害、基因組不穩(wěn)定以及發(fā)生端粒延長替代機(jī)制，造成端粒的異常延長，使腫瘤細(xì)胞獲得無限增殖的能力，最終引發(fā)癌變。研究發(fā)現(xiàn)，ATRX基因突變與H3K27M突變存在重疊[3]。此外，酪氨酸激酶信號通路的關(guān)鍵蛋白往往在H3K27M突變型患者中被激活，如血小板源性生長因子受體α[3]。另外，轉(zhuǎn)化生長因子(轉(zhuǎn)化生長因子-β)超家族受體激活素A受體1蛋白，可激活骨形態(tài)發(fā)生蛋白/轉(zhuǎn)化生長因子-β信號通路，而在兒童膠質(zhì)瘤患者中H3K27M突變與激活素A受體1基因突變存在較高的關(guān)聯(lián)性[28]。上述這些基因突變或表達(dá)異常往往與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，提示它們或許與H3K27M突變有一定程度的交互作用。

目前有研究初步探討了上述設(shè)想。如Pajovic等[29]發(fā)現(xiàn)，H3K27M突變型轉(zhuǎn)基因小鼠形成血液腫瘤和癌癥的概率大幅增加，但是并未發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤的形成，然而聯(lián)合p53缺失，小鼠即可自發(fā)形成膠質(zhì)瘤。有研究表明，單獨(dú)H3K27M突變可促進(jìn)細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移侵襲能力，但是對細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化并沒有明顯影響，而進(jìn)一步敲降p53并激活血小板源性生長因子受體α表達(dá)，能更大程度地促進(jìn)細(xì)胞增殖，并使細(xì)胞獲得腫瘤表型[22]。另有研究發(fā)現(xiàn)，將H3K27M突變以及p53和ATRX基因敲降的小鼠神經(jīng)祖細(xì)胞移植到小鼠顱內(nèi)，即可形成腫瘤，而在此基礎(chǔ)上再過表達(dá)血小板源性生長因子受體α則可縮短腫瘤形成所需要的時(shí)間[30]。上述研究表明，H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的發(fā)生可能不是H3K27M單一突變造成，而是該突變與其他基因突變或改變共同作用的結(jié)果。

3 兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤靶向藥物

目前，臨床治療兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的標(biāo)準(zhǔn)方案仍是參照成人的治療方案，主要包括手術(shù)、放療和化療，但最終的結(jié)局仍不理想。在研究人員不懈的努力下，近年來發(fā)現(xiàn)多種藥物在實(shí)驗(yàn)室顯示出良好的抗H3K27M突變型膠質(zhì)瘤效果，這為將來有效治療H3K27M突變型膠質(zhì)瘤提供了可能性。

3.1表觀遺傳藥物 H3K27me3修飾異常是H3K27M突變促進(jìn)膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)，研究發(fā)現(xiàn)逆向改變H3K27me3修飾是一個(gè)很有潛力的治療策略[20,31]。Hashizume等[31]報(bào)道，H3K27去甲基化酶家族成員含十字形結(jié)構(gòu)域蛋白3抑制劑GSKJ4可以恢復(fù)H3K27M突變腫瘤細(xì)胞H3K27me3修飾水平，并能特異性抑制H3K27M突變腫瘤細(xì)胞增殖和克隆形成，且抑制腫瘤細(xì)胞在小鼠體內(nèi)成瘤的能力。另有研究發(fā)現(xiàn)，EZH2抑制劑(GSK343和EPZ6438)通過調(diào)控p16INK4A抑制H3K27M突變膠質(zhì)瘤細(xì)胞在體外和體內(nèi)的生長[20]。

研究表明，參與調(diào)控組蛋白H3K27ac修飾的蛋白也是一類很有前景的藥物靶點(diǎn)[32-33]。JQ1是BET(Bromodomain and Extra Terminal domain)的抑制劑，它能降低膠質(zhì)瘤細(xì)胞H3K27ac修飾水平，并抑制H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖以及促進(jìn)細(xì)胞分化，且上調(diào)細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白p21和細(xì)胞分化標(biāo)志蛋白(微管蛋白β3和微管相關(guān)蛋白2等)的表達(dá)[32]。Grasso等[33]的研究顯示，多種組蛋白去乙?；敢种苿w外和體內(nèi)均顯示出較好的抗兒童膠質(zhì)瘤活性。其中，美國食品藥品管理局已批準(zhǔn)上市的用于治療多發(fā)性骨髓瘤的藥物帕比司他抗H3K27M突變型膠質(zhì)瘤活性最強(qiáng)，可增加腫瘤細(xì)胞死亡以及減少細(xì)胞增殖，而且還發(fā)現(xiàn)帕比司他可下調(diào)與腫瘤細(xì)胞增殖密切相關(guān)基因MKI67 和CCND1的表達(dá)。目前該藥物正在兒童膠質(zhì)瘤患者中進(jìn)行Ⅰ期臨床試驗(yàn)(NCT02717455)。

3.2細(xì)胞周期抑制劑 p16INK4通過抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4和6阻止細(xì)胞進(jìn)入S期，而p16INK4是H3K27M突變促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的關(guān)鍵下游基因。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4和6特異性抑制劑帕博西尼能夠有效阻止H3K27M突變細(xì)胞進(jìn)入S期，而且不影響非突變細(xì)胞周期[23]。另有研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶7抑制劑THZ1可以減少H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和增加細(xì)胞凋亡[34]。THZ1具有良好的血腦屏障透過性，通過靜脈注射時(shí)腦實(shí)質(zhì)可達(dá)到的濃度遠(yuǎn)高于其抗癌所需濃度。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，尾靜脈注射THZ1可顯著抑制膠質(zhì)瘤原位移植小鼠腫瘤的生長，并明顯延長模型小鼠的中位生存期[34]。而且，THZ1與其他潛在的治療藥物具有良好的抗H3K27M突變型膠質(zhì)瘤協(xié)同作用，如JQ1和帕比司他。

3.3腫瘤免疫治療藥物 免疫治療藥物主要包括免疫檢查點(diǎn)抑制劑、嵌合抗原受體T細(xì)胞(chimeric antigen receptor T cell，CAR-T)和腫瘤疫苗等。有研究發(fā)現(xiàn)，雙唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂2(disialoganglioside 2，GD2)在H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞中高表達(dá)，而GD2特異性CAR-T細(xì)胞可獨(dú)立產(chǎn)生γ干擾素和白細(xì)胞介素-2，并能在體外特異性殺傷腫瘤細(xì)胞；H3K27M突變型膠質(zhì)瘤原位移植小鼠尾靜脈注射抗GD2 CAR-T細(xì)胞后，小鼠顱內(nèi)僅殘留極少數(shù)不表達(dá) GD2 的腫瘤細(xì)胞，表明CAR-T細(xì)胞在H3K27M突變型膠質(zhì)瘤中有潛在的治療效果[35]。除了CAR-T細(xì)胞，腫瘤疫苗也可能是一種有價(jià)值的治療藥物。Ochs等[36]設(shè)計(jì)了抗H3K27M突變的多肽疫苗，結(jié)果顯示該疫苗可激活小鼠細(xì)胞免疫而發(fā)揮抗膠質(zhì)瘤活性。然而，該研究結(jié)果是基于皮下腫瘤模型，該多肽疫苗在顱內(nèi)抗腫瘤的效果還需要進(jìn)一步明確。另一類可作為免疫治療的理想靶點(diǎn)為腫瘤/睪丸抗原，它們通常只在睪丸組織中表達(dá)，但是往往在腫瘤中高表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，H3K27M突變可以激活兒童膠質(zhì)瘤細(xì)胞中多種腫瘤/睪丸抗原，如VCX3A(variable charge X-linked 3A)和白細(xì)胞介素-13受體α2等[24]。利用干擾小RNA敲降VCX3A能夠特異性減少H3K27M突變型膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖。由于抗白細(xì)胞介素13受體α2 CAR-T細(xì)胞治療方案在成人膠質(zhì)瘤中顯示出良好的抗癌活性[37]，因此探究其抗兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤活性具有重要意義。

4 小 結(jié)

兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤病理機(jī)制與成人膠質(zhì)瘤截然不同，這解釋了基于成人臨床數(shù)據(jù)的分子靶向治療策略對兒童患者效果不佳的原因。由于攜帶H3K27M突變基因膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后更差，臨床通常會利用免疫組織化學(xué)、熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)、Sanger測序等技術(shù)明確其基因型[38]。近年來，對H3K27M突變型膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制以及靶向治療藥物等研究取得了很大進(jìn)展，但是尚需對以下幾個(gè)方面進(jìn)行更深入的研究：①H3K27M突變增加染色質(zhì)局部特定區(qū)域H3K27me3修飾水平的機(jī)制；②H3K27M突變上調(diào)H3K27ac修飾以及引起DNA低甲基化的分子機(jī)制；③H3K27M突變型膠質(zhì)瘤中通常伴隨其他基因突變，它們是否與H3K27M突變存在相互交聯(lián)及其交聯(lián)的分子機(jī)制；④在實(shí)驗(yàn)室水平多種藥物顯示出對H3K27M突變型膠質(zhì)瘤有靶向治療效果，但是這些藥物的生物利用度、血-腦屏障和血-腫瘤屏障穿透程度、藥動學(xué)、腫瘤組織藥物濃度等需要明確。因此，未來尚需進(jìn)行更多研究以深入探索兒童H3K27M突變型膠質(zhì)瘤的分子機(jī)制以及有效的靶向治療策略。