珠勒根-其木格化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展

寶 鋼， 圖諾木拉， 希古日干， 哈力嘎， 其日格爾， 敖敦格日樂， 拉喜那木吉拉

[內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，國家藥監(jiān)局中藥(蒙藥)質(zhì)量控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，內(nèi)蒙古 通遼 028000]

龍膽科植物約有80屬700種，廣泛分布于世界各洲，但主要分布在北半球溫帶和寒溫帶。我國龍膽科植物有22屬427種左右，大多數(shù)的屬和種分布于西南山岳地區(qū)，其中以龍膽屬、肋柱花屬、獐牙菜屬種類為最多[1]。蒙醫(yī)常用的大多屬于珠勒根-其木格類、地格達(dá)類和吉勒澤類。本文只對珠勒根-其木格類中白花龍膽、達(dá)烏里龍膽、藍(lán)玉簪龍膽的化學(xué)成分與藥理作用進(jìn)行綜述，以期為龍膽屬植物的深入研究提供依據(jù)。白花龍膽GentianaalgidaPall.為多年生草本，高15～25 cm，葉條狀披針形或矩圓狀披針形，莖生葉對生，花2～5朵著生枝頂端，黃白色，帶斑點(diǎn)，蒴果長圓錐形；達(dá)烏里龍膽GentianadahuricaFisch.為多年生草本，高15～25 cm，基部為殘葉纖維所包圍，根長圓錐形，黃褐色，莖常斜升，葉對生，披針形，聚傘花序，頂生或腋生，花1～3朵，蒴果矩圓形，種子橢圓形；藍(lán)玉簪龍膽GentianaveitchiorumHemsl.為多年生草本，高10～15 cm，莖生葉對生，花單生枝端，無花梗，蒴果長圓錐形，種子多數(shù)[1]。這3種藥材均為龍膽科龍膽屬植物，在蒙藥中藥用部位相同均采用干燥花，且功效相同,但白花龍膽的療效在蒙醫(yī)中為最佳。

1 本草考證

《蒙藥正典》[2]記載“珠勒根-其木格分三種，其中白色(查干)者為上品，生于高原地區(qū)草甸，秋末大地封凍之時，葉似秦艽小而綠，無莖，從地面開出四到五朵白花，有紅色光澤，簇生；藍(lán)色(呼和)者初秋生長于潮濕的沼澤草甸，形狀如上所述，葉小，花淡藍(lán)色，很明顯；黑色(哈日)者生于仲秋，狀如上述藍(lán)色者，略大，顏色鮮艷，且藍(lán)?！薄墩J(rèn)藥白晶鑒》[3]《認(rèn)藥學(xué)》[4]等蒙藥本草著作所描述內(nèi)容基本一致。目前，蒙醫(yī)所認(rèn)用的龍膽科植物白花龍膽即查干-珠勒根-其木格，亦稱查干-邦占；達(dá)烏里龍膽即呼和-珠勒根-其木格，亦稱呼和-邦占；藍(lán)玉簪龍膽即哈日-珠勒根-其木格，亦稱哈日-邦占。這3種藥材的形態(tài)特征基本符合上述本草描述，故認(rèn)定其為正品，藥用其干燥花[5]。白花龍膽分布于吉林、甘肅、新疆、四川、西藏等地[6]；達(dá)烏里龍膽分布于內(nèi)蒙古、青海、甘肅、四川、河北、山西、陜西、寧夏等地；藍(lán)玉簪龍膽分布于西藏、青海、云南西北部、四川及甘肅等地。臨床上主要用白花龍膽(查干-珠勒根-其木格)，這與文獻(xiàn)記載“白色者為上品”[3-4,7]相符。查干-珠勒根-其木格味澀、苦，性寒，效柔、軟、稀，具有清熱、解毒、止咳、利喉咽的功效，主治咽喉腫痛、喑啞、肺熱、毒熱，臨床上查干-珠勒根-其木格與三涼藥、訶子、黃連等配伍制成的白花龍膽十味散，用于因巴達(dá)干熱而咽塞喑啞[8]；與丁香、木香、竹黃、甘草、訶子配伍制成的丁香六味散，用于咽喉腫痛；與三子、肉豆蔻、廣棗、苦參、北沙參等配伍制成的白花龍膽花十六味散，用于黏熱浸喉，肺熱引起的咳嗽[9]。

2 化學(xué)成分

2.1 萜類 萜類成分是龍膽屬植物的主要有效成分之一，是該屬植物的特征性成分。該類成分多數(shù)以糖苷形式存在，極少數(shù)以苷元形式存在，其中龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、β-谷甾醇等在植物中分布比較廣泛。藥理研究表明，龍膽類植物的抗炎作用與其中的環(huán)烯醚萜苷類成分有關(guān)[10]。楊倩等[11]以龍膽苦苷為對照品，采用紫外分光光度法測定10批小秦艽花樣品中總環(huán)烯醚萜的含量，測得其含量范圍為67.95～155.16 mg/g。熊子增等[12]以齊墩果酸為對照品，采用紫外分光光度法測定10批小秦艽花樣品中總?cè)坪浚瑴y得其含量范圍為24.98～92.77 mg/g。劉圓等[13]采用RP-HPLC法測定白花龍膽和藍(lán)玉簪龍膽中的龍膽苦苷含量，測得龍膽苦苷在藍(lán)玉簪龍膽中的含量為183.783 mg/g，在白花龍膽中的含量為109.382 mg/g。白雪等[14]首次建立區(qū)帶毛細(xì)管電泳測定白花龍膽中龍膽苦苷、齊墩果酸、熊果酸含量的方法，與高效液相色譜法相比，此方法具有操作方便、進(jìn)樣量少、分析時間較短等優(yōu)點(diǎn)。白雪等[15]還通過膠束毛細(xì)管電泳法同時測定白花龍膽和達(dá)烏里龍膽中的獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷、馬錢苷酸含量。雷瓊等[16]采用膠束毛細(xì)管電泳法同時測定白花龍膽、達(dá)烏里龍膽和藍(lán)玉簪龍膽中的龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷、落干酸這4種環(huán)烯醚萜類成分的含量，發(fā)現(xiàn)此方法穩(wěn)定可行。王文驪[17]采用高效液相色譜法對藍(lán)玉簪龍膽中龍膽苦苷的含量進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)龍膽苦苷與其他組分分離效果良好。盧永昌等[18]采用反相高效液相色譜法同時測定藍(lán)玉簪龍膽花中落干酸、獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷的含量，發(fā)現(xiàn)該方法簡便，結(jié)果準(zhǔn)確且可靠。李姍等[19]采用HPLC測定方法比較高原地區(qū)多基源藏藥蒂達(dá)的4種龍膽科植物藍(lán)玉簪龍膽、肋柱花、鋪散肋柱花和橢圓葉花錨中的3種環(huán)烯醚萜苷類化合物獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龍膽苦苷的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)龍膽苦苷只存在于藍(lán)玉簪龍膽中，而獐牙菜苦苷、獐牙菜苷在藍(lán)玉簪龍膽中的含量小于肋柱花和鋪散肋柱花中的含量，由此可知，環(huán)烯醚萜苷類成分可以作為區(qū)分龍膽科不同屬植物的標(biāo)志性成分。珠勒根-其木格中萜類化合物見圖1、表1。

圖1 珠勒根-其木格中萜類化合物結(jié)構(gòu)

表1 珠勒根-其木格中萜類化合物

2.2 黃酮類 龍膽中含有多種黃酮類成分,主要有異葒草苷、異牡荊苷、獐牙菜素等。張秀艷等[26]從小秦艽Gentianadahurica干燥花中分離得到12種黃酮類成分，其中8種成分是從該植物中首次分離得到，包括山柰酚(49)、柚皮素(50)、木犀草素(52)、(2S)-5,4′-二羥基-7-O-β-D-葡萄糖-2,3-二氫黃酮(53)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(54)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(55)、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(56)、木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(57)。白雪等[14]首次建立區(qū)帶毛細(xì)管電泳測定白花龍膽中異葒草苷含量的方法，同時也建立了膠束毛細(xì)管電泳法測定龍膽科藥材白花龍膽和達(dá)烏里龍膽中異葒草苷含量的方法。丁艷霞等[30]采用HPLC法同時測定達(dá)烏里龍膽花中異葒草苷、異牡荊苷的含量，測得其含量范圍分別為1.11～7.46、0.59～1.70 mg/g。珠勒根-其木格中黃酮類化合物見圖2、表2。

圖2 珠勒根-其木格中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)

表2 珠勒根-其木格中黃酮類化合物

圖3 珠勒根-其木格中山酮類化合物結(jié)構(gòu)

2.4 有機(jī)酸類 Yang等[25]從白花龍膽中首次分離得到5個有機(jī)酸類化合物，分別為油酸(71)、亞油酸(72)、二十九烷酸(73)、2,3-二羥基苯甲酸乙酯(74)、鄰苯二甲酸正丁異丁酯(75)，見圖4、表4。

圖4 珠勒根-其木格中有機(jī)酸類化合物結(jié)構(gòu)

表3 珠勒根-其木格中山酮類化合物

表4 珠勒根-其木格中有機(jī)酸類化合物

2.5 生物堿類 秦艽本身不含生物堿，但在提取分離過程中使用氨液，使得化學(xué)很不穩(wěn)定的龍膽苦苷(裂環(huán)烯醚萜類)與氨水產(chǎn)生反應(yīng)，形成矯作物，得到秦艽堿甲素(76)、秦艽堿丙素(77)等。目前，生物堿仍然是秦艽主要質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制成分之一。珠勒根-其木格中生物堿類化合物見圖5、表5。

2.6 甾體類 甾體類化合物在自然界中廣泛存在，是一種以環(huán)戊烷駢多氫菲的甾體母核的成分。目前，從達(dá)烏里龍膽的根部分離得到3個甾體類化合物，分別為ajugasterone C(79)、20-hydroxyecdysone(80)、20-hydroxyecdysone 3-acetate(81)[10]，見圖6、表6。

圖5 珠勒根-其木格中生物堿類化合物結(jié)構(gòu)

表5 珠勒根-其木格中生物堿類化合物

圖6 珠勒根-其木格中甾體類化合物結(jié)構(gòu)

表6 珠勒根-其木格中甾體類化合物

2.7 木脂素類 木脂素類化合物屬于植物雌激素，具有清除體內(nèi)自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌等作用。目前，從達(dá)烏里龍膽的根部分離得到1個新的木脂素類化合物，為7S,8R,8R-(-)-lariciresinol-4,4′-bis-O-β-D-glucopyranoside(87)[10]，見圖7、表7。

2.8 香豆素類 Wang等[10]從達(dá)烏里龍膽的根部分離得到coniferin(88)，白花龍膽中分離得到5,8-二羥基呋喃香豆素(89)[19]，見圖8，表8。

圖7 珠勒根-其木格中木脂素類化合物結(jié)構(gòu)

表7 珠勒根-其木格中木脂素類化合物

圖8 珠勒根-其木格中香豆素類化合物結(jié)構(gòu)

表8 珠勒根-其木格中香豆素類化合物

2.9 微量元素 田靜等[36]采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測定達(dá)烏里龍膽中的Fe、Ni、Cu、Zn、As、Ag、Cd、Pb、Cr、Mn等10種金屬元素的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)e、Zn、Mn等元素在達(dá)烏里龍膽中的含量較高，As、Ag、Cd等元素的含量較低。

3 藥理作用

3.1 抗炎 楊芳等[37]研究發(fā)現(xiàn)，白花龍膽花水提取物和乙醇提取物中、高劑量組對于二甲苯所致的小鼠急性耳腫脹和小鼠腹部毛細(xì)管通透性都有抑制作用，提示白花龍膽花具有抗炎活性。劉紅等[38]通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，白花龍膽提取物對氨水導(dǎo)致的大鼠急性咽炎模型有改善作用，其作用機(jī)制可能與降低腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平有關(guān)。嘎魯?shù)萚39]通過小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)和肉芽腫實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，白花龍膽醇提物在一定濃度下具有抗炎作用。

3.2 抗氧化 鄔衛(wèi)東等[40]研究發(fā)現(xiàn)，小秦艽花總黃酮有較強(qiáng)的清除DPPH自由基的能力，且具有較好的抗氧化活性；隨后，鄔衛(wèi)東等[41]對小秦艽花乙醇提取物依次進(jìn)行石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，結(jié)果不同極性部位均具有一定的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有清除DPPH自由基和羥基自由基的能力。Dou等[42]研究發(fā)現(xiàn)，從藍(lán)玉簪龍膽花中提取分離出來的芹菜素是黃酮類化合物，它具有抗氧化活性，不僅能減少活性氧的產(chǎn)生，而且能調(diào)節(jié)膽固醇新陳代謝。

3.3 抗病毒 衛(wèi)飛鵬等[43]研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)玉簪龍膽水煎液相比正丁醇、氯仿、乙酸乙酯提取液，在抑制病毒進(jìn)入細(xì)胞方面效果顯著，同時用藍(lán)玉簪龍膽水煎液灌胃治療感染呼吸道合胞病毒(RSV)的小鼠，病理切片顯示，與對照組比較，藥物組小鼠炎性滲出明顯減輕；免疫熒光實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)藥物處理的切片熒光亮度及顆粒數(shù)均減少，提示藍(lán)玉簪龍膽在抗RSV增殖和抗RSV引起的炎癥2個方面都表現(xiàn)出一定效果。

3.4 抗菌 劉菁菁等[44]將藍(lán)玉簪龍膽分別以乙醇、氯仿、正丁醇、蒸餾水提取，得到不同極性部分的產(chǎn)物，且各極性組分對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株均有不同程度的抑菌作用，其中正丁醇組分的抑菌作用最強(qiáng)，其次為乙醇、水層組分。耿曉玲等[45]研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)花龍膽提取物對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有抑制作用。耿曉玲等[46]還采用固液浸提法來提取藍(lán)玉簪龍膽花中的有效成分，并通過體外抑菌試驗(yàn)評價其抑菌作用，結(jié)果表明，藍(lán)玉簪龍膽花提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最為明顯，MIC值為99.3 mg/L，對大腸桿菌(MIC值為225.5 mg/L)和白色念珠菌(MIC值為126.8 mg/L)的抑制作用其次，對沙門氏菌和志賀氏痢疾桿菌的抑菌作用不明顯(MIC值均大于250 mg/L)。

3.5 保肝 Cao等[47]研究發(fā)現(xiàn)，達(dá)烏里龍膽乙醇提取物可以減輕小鼠的肝臟損傷及脂肪變性，其作用可能與調(diào)節(jié)甘油三酯和膽固醇的過程有關(guān)。Zhang等[48]研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)玉簪龍膽甲醇提取物對四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠肝臟損傷有保護(hù)作用，其部分作用是由于它通過清除四氯化碳相關(guān)的自由基的能力。李鵬等[49]將大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組和藍(lán)玉簪龍膽組，除正常組外均注射二甲基亞硝胺來建立大鼠肝纖維化模型，同時給予相應(yīng)藥物治療，檢測各組大鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和透明質(zhì)酸，肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)等指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，藍(lán)玉簪龍膽組大鼠肝組織中的MAO、MDA水平降低，SOD、GSH水平升高，HE和Masson染色觀察到肝纖維化程度改善。

3.6 抗腫瘤 樊慧等[50]研究表明，從小秦艽提取分離得到的2個三萜類化合物具有一定的抗MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖作用。

3.7 其他 耿錚等[51]將藍(lán)玉簪龍膽乙醇提取液濃縮并經(jīng)正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚萃取，得到不同極性部分產(chǎn)物，除正常組外將其余各組小鼠誘導(dǎo)成慢性支氣管炎模型，造模成功后給藥治療，檢測各組小鼠肺組織總抗氧化能力(T-AOC)、SOD活性，血清中TNF-α、IL-10水平變化，HE染色觀察各組小鼠肺組織病理學(xué)變化，結(jié)果顯示，與模型組比較，正丁醇組、水層組小鼠肺組織T-AOC活性升高，乙酸乙酯組、正丁醇組小鼠肺組織SOD活性升高，乙酸乙酯組、正丁醇組小鼠血清中TNF-α、IL-10水平降低(P<0.05，P<0.01)，HE染色病理切片表明，經(jīng)藍(lán)玉簪龍膽乙醇提取液各極性組分治療后，乙酸乙酯組、正丁醇提取物組小鼠慢性支氣管炎氣道損傷顯著改善。

4 小結(jié)及展望