宋麗瑩，宋 洋，劉翠英*

活性炭對土壤中多環(huán)芳烴生物有效性的影響①

宋麗瑩1，宋 洋2，劉翠英1*

(1 南京信息工程大學(xué)應(yīng)用氣象學(xué)院，南京 210044；2 中國科學(xué)院南京土壤研究所，南京 210008)

在某場地采集不同土層土壤，通過室內(nèi)培養(yǎng)試驗(yàn)，研究添加5%(/)活性炭對土壤中PAHs殘留的影響，并利用羥丙基-β-環(huán)糊精提取方法評價(jià)土壤中PAHs生物有效性的動態(tài)變化。結(jié)果表明：在8個月內(nèi)，添加活性炭處理土壤中菲、芘的殘留量顯著高于對照處理，苯并[b]熒蒽的殘留量顯著低于對照處理，苯并[g,h,i]芘殘留量在兩處理之間無顯著差異。在第1個月時，活性炭處理土壤中菲、芘、苯并[b]熒蒽生物有效性較對照處理分別降低了35.06%、37.73%、39.60%，苯并[g,h,i]芘生物有效性僅降低了1.37%；隨著時間延長活性炭對土壤中PAHs生物有效性的阻控效果呈減弱趨勢。因此，土壤添加5% 活性炭能夠有效降低PAHs生物有效性，減少其環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)，并且在添加活性炭1個月內(nèi)阻控效果最佳。

土壤；活性炭；多環(huán)芳烴；殘留量；生物有效性

多環(huán)芳烴(polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs)是一類由天然來源和人為活動產(chǎn)生的具有兩個或兩個以上苯環(huán)結(jié)構(gòu)的持久性有機(jī)污染物[1]。其中，石油泄露是一種常見的石油源性PAHs的來源[2]。研究表明，石油工業(yè)污染土壤占總污染源比例的7%，而加油站也是最常見的服務(wù)行業(yè)污染源(15%)[3]。PAHs及其衍生物具有生物富集性、遷移性以及遺傳毒性[4]，對人體健康可產(chǎn)生嚴(yán)重危害。因此，PAHs污染土壤的風(fēng)險(xiǎn)管控與修復(fù)技術(shù)研究至關(guān)重要。

污染物的生物有效性是指其被生物體吸收的能力和可能的毒性[5]。隨著人們對污染物生物有效性及污染物老化過程的深入認(rèn)知，意識到傳統(tǒng)總量表征方法并不能準(zhǔn)確表征污染物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)[6]，逐步建立了基于溫和溶劑提取等方法來表征土壤中有機(jī)污染物的生物有效性[7]。環(huán)糊精大分子是一種具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)，腔內(nèi)疏水、腔外親水的分子。有機(jī)污染物與環(huán)糊精大分子結(jié)合形成絡(luò)合物，增強(qiáng)了有機(jī)污染物的水溶性[8]。羥丙基-β-環(huán)糊精(HPCD)是一種環(huán)糊精外部增加了羥基官能團(tuán)的改性β-環(huán)糊精[9]。研究報(bào)道，采用HPCD提取方法可以很好地評價(jià)土壤中PAHs的生物有效性[7]。張亞楠等[10]研究表明，HPCD提取的PAHs濃度與蚯蚓體內(nèi)富集的PAHs濃度顯著相關(guān)。Yu等[6]將索氏提取法、正丁醇法、HPCD法提取的多氯聯(lián)苯(PCBs)生物有效性與蚯蚓體內(nèi)PCBs的生物累積量進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)HPCD法是預(yù)測土壤中實(shí)際PCBs生物累積的最佳方法。

近年來，基于生物有效性調(diào)控的土壤污染阻控技術(shù)受到廣泛關(guān)注。通過向土壤中添加高效吸附材料，可降低土壤中污染物的生物有效性進(jìn)而降低其環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)[11]。活性炭價(jià)格低廉、比表面積大、孔隙結(jié)構(gòu)發(fā)達(dá)，可高效吸附有機(jī)污染物，降低其在土壤中的生物有效性[12]。已有研究表明，活性炭吸附的PCBs在蛤蜊腸道內(nèi)的生物吸收率僅1% ～ 2%[13]，活性炭也可大大降低滴滴涕、二噁英和呋喃的平衡孔隙水濃度，阻控持久性有機(jī)污染物進(jìn)入生物體[14]。但是在針對土壤污染應(yīng)急管理過程中，如石油泄露等突發(fā)事件產(chǎn)生的環(huán)境PAHs污染[15]，活性炭對污染物的阻控效果能持續(xù)多久還不明確；且大部分研究工作關(guān)注表層土壤，對不同深度和性質(zhì)土壤中活性炭的阻控效果也還有待進(jìn)一步研究。

由此，本研究以菲、芘、苯并[b]熒蒽、苯并[g,h,i]芘為不同環(huán)數(shù)PAHs模式污染物，模擬場地突發(fā)事件造成的PAHs污染土壤，采用加速溶劑萃取技術(shù)和HPCD提取方法，探究活性炭對不同類型土壤中PAHs生物有效性的動態(tài)影響，以期為活性炭在污染土壤修復(fù)與環(huán)境應(yīng)急管理中的應(yīng)用提供理論依據(jù)與技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試土壤采自某污染場地。采樣時，根據(jù)場地情況，隨機(jī)選取3處樣點(diǎn)利用鉆探設(shè)備進(jìn)行采樣，分別采集6、9、13.5 m土柱共計(jì)16個土壤樣品，即S1 ～ S16。采集的土壤經(jīng)自然風(fēng)干，剔除砂石后粉碎，過10目篩備用。土壤基本理化性質(zhì)如表1所示，測定參考《土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法》[16]。

表1 供試土壤基本理化性質(zhì)

供試粉狀活性炭購自上海九億化學(xué)試劑有限公司，其基本理化性質(zhì)見表2。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

16份土壤樣品，每份取樣400 g，然后從中再分別取20 g過100目篩后與20 ml 40 mg/L PAHs丙酮溶液混合，在通風(fēng)櫥中攪拌均勻，待丙酮揮發(fā)后，將其與原剩余380 g土樣充分混勻，制備得到每份400 g含PAHs 2 mg/kg的污染土壤。污染土壤老化7 d后，將各土樣均分為兩份，每份200 g，用于培養(yǎng)試驗(yàn)，一份不加活性炭作為對照處理，另一份添加10 g活性炭并充分混勻作為5%(/)活性炭處理。所有待培養(yǎng)的土樣置于500 ml棕色磨口玻璃瓶中，去離子水調(diào)節(jié)土壤含水率為25%，放置于25 ℃避光條件下培養(yǎng)，在1、2、4、8個月時分別取樣測定土壤中PAHs的殘留量和生物有效態(tài)含量。

表2 供試活性炭基本理化性質(zhì)

1.3 樣品采集

取樣時用小土鉆取出5 ～ 6 g土樣，用鋁箔包好并將其置于–80 ℃的冰箱中冷凍24 h以上，之后取出冷凍后的土壤樣品，放置于冷凍干燥箱中，在–60 ℃條件下，抽真空干燥24 h，將抽真空后的樣品研磨成粉末狀保存待測。

1.4 PAHs提取與測定

1.4.1 PAHs殘留量提取 取1.0 g土樣與硅藻土充分混勻后裝入ASE萃取柱中進(jìn)行萃取，萃取溫度為100 ℃，萃取壓力為10 MPa，萃取溶劑為正己烷∶丙酮(4∶1，/)；萃取結(jié)束，將萃取液倒入梨形瓶中，加入5 ml正己烷∶丙酮(1∶1，/)潤洗兩次，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，水浴溫度為50 ℃，泵氣壓為350 mbar；萃取液濃縮至2 ml以下，過已用10 ml正己烷∶二氯甲烷(9∶1，/)活化的SPE柱(依次填入0.5 g無水硫酸鈉、0.5 g硅膠、0.5 g弗羅里硅土、1.0 g無水硫酸鈉)進(jìn)行凈化，再用5 ml正己烷∶二氯甲烷(9∶1，/)潤洗梨形瓶兩次，潤洗液同樣過SPE柱；將凈化過的萃取液再次進(jìn)行濃縮至1 ml以下，再用正己烷(色譜純)定容至1 ml，轉(zhuǎn)移至棕色進(jìn)樣瓶中待測。

1.4.2 PAHs有效態(tài)含量提取 參照Reid等[7]和張亞楠等[10]的方法，土壤中生物有效態(tài)PAHs采用溫和溶劑HPCD進(jìn)行提取。具體為：取1.0 g土樣于50 ml玻璃離心管中，加入20 ml 50 mmol/L的HPCD溶液；放置在振蕩條件為25 ℃、振速為200 r/min的恒溫空氣搖床中振蕩提取20 h；取出靜置30 min，再放置在轉(zhuǎn)速為2 000 r/min的離心機(jī)中離心10 min；倒出上清液，再向底部土壤中加入20 ml去離子水進(jìn)行渦旋，使離心后的土壤與去離子水充分混合，靜置30 min后，再次進(jìn)行2 000 r/min離心10 min；倒出上清液，加入硅藻土與離心瓶底部土壤攪拌均勻，裝入ASE萃取柱中；再使用與1.4.1小節(jié)中殘留量提取相同的步驟將樣品進(jìn)行凈化、濃縮和測定。最終利用差減法計(jì)算HPCD提取的PAHs有效態(tài)含量。

1.4.3 測定條件 PAHs采用安捷倫7890B- 5977B氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)測定。色譜條件：進(jìn)樣口溫度300 ℃，進(jìn)樣體積1 μl，柱流量1 ml/min。升溫程序：45 ℃保持2 min，以20 ℃/min升溫至265 ℃，以5 ℃/min升溫至285 ℃，以10 ℃/min升溫至320 ℃，保持4 min。質(zhì)譜條件：全掃描SCAN，掃描范圍35 ～ 450 u，離子源溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃，離子化能量70 eV，傳輸線溫度280 ℃，溶劑延遲3.9 min。色譜柱(DB-5MS)：30 m×0.25 mm×0.25 μm，固定相為5% 苯基–甲基聚硅氧烷。

1.5 數(shù)據(jù)處理

本文數(shù)據(jù)采用Excel 2019、SPSS 19.0、Origin 2022軟件進(jìn)行處理和繪圖，采用Duncan法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)(<0.05)，采用多元線性回歸分析進(jìn)行相關(guān)分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 土壤中PAHs殘留量動態(tài)變化

土壤中菲(3環(huán))、芘(4環(huán))、苯并[b]熒蒽(5環(huán))、苯并[g,h,i]芘(6環(huán))的殘留量隨培養(yǎng)時間變化如圖1所示。培養(yǎng)開始時各處理土壤中PAHs含量為2 mg/kg，培養(yǎng)1個月后，各處理土壤中PAHs殘留量降低較快，對照處理土壤中菲、芘、苯并[b]熒蒽、苯并[g,h,i]芘分別降低了77.90%、81.32%、44.29%、82.04%，5% 活性炭處理土壤中分別降低了38.92%、45.89、79.31%、85.33%。此后，除對照處理土壤中苯并[g,h,i]芘殘留量未降低外，其他處理中菲、芘、苯并[b]熒蒽、苯并[g,h,i]芘殘留量均呈降低趨勢。由圖1可見，培養(yǎng)到第8個月結(jié)束時，對照處理土壤中菲、芘、苯并[b]熒蒽殘留量均值分別降低了58.07%、24.82%、18.08%，5% 活性炭處理土壤中菲、芘、苯并[b]熒蒽、苯并[g,h,i]芘殘留量均值分別降低了39.30%、28.71%、36.43%、61.30%。整體而言，各處理土壤中PAHs含量在培養(yǎng)4個月后不再有明顯變化，土壤中PAHs殘留量逐漸穩(wěn)定。

在同一取樣時間下，5% 活性炭處理與對照處理土壤中PAHs的殘留量具有顯著差異，表現(xiàn)為5% 活性炭處理菲、芘等低環(huán)PAHs殘留量顯著高于對照處理(<0.05)，而5環(huán)PAHs苯并[b]熒蒽的殘留量則顯著低于對照處理(<0.05)，6環(huán)PAHs苯并[g,h,i]芘殘留量在兩處理組之間無顯著差異。該結(jié)果說明添加5% 活性炭對土壤中低環(huán)PAHs具有固定作用，增加了低環(huán)PAHs在土壤中的固持。這可能是由于低環(huán)PAHs具有較高的蒸汽壓和揮發(fā)性，容易從土壤中揮發(fā)[1]，活性炭可有效吸附低環(huán)PAHs，減少其揮發(fā)損失[17]。而高環(huán)PAHs具有較低的蒸氣壓和水溶性，本身不易揮發(fā)[18]，在添加活性炭的處理中其殘留量更低，這可能是因?yàn)榛钚蕴康奶砑哟碳ち送寥牢⑸锘钚裕黾恿烁攮h(huán)PAHs的微生物降解[19]。Meynet等[20]研究發(fā)現(xiàn)，活性炭添加至土壤中可保留微生物降解PAHs的潛力。Beesley等[21]研究表明，土壤與生物炭混合培養(yǎng)60 d后能夠降低土壤中超過50% 高環(huán)PAHs的殘留量。Li等[22]研究結(jié)果顯示，向污染土壤中添加1% 的玉米秸稈生物炭可抑制2、3環(huán)PAHs降解，促進(jìn)4 ～ 6環(huán)PAHs降解，與本研究結(jié)果基本一致。

圖1 土壤中PAHs殘留量隨時間的變化

2.2 土壤中PAHs生物有效性動態(tài)變化

土壤中PAHs生物有效性隨時間動態(tài)變化如圖2所示。培養(yǎng)1個月后，在對照和5% 活性炭處理之間菲、芘、苯并[b]熒蒽生物有效性具有顯著差異(<0.05)，而苯并[g,h,i]芘生物有效性無顯著變化。此時，對照處理菲、芘、苯并[b]熒蒽生物有效性均值分別為54.06%、54.13%、70.70%，顯著高于5% 活性炭處理(菲19.00%、芘16.40%、苯并[b]熒蒽31.10%)，盡管在1個月后兩個處理組中苯并[g,h,i]芘生物有效性無著差異，但在培養(yǎng)至2個月后，5% 活性炭處理土壤中苯并[g,h,i]芘生物有效性均值較對照處理降低了21.29%。該結(jié)果說明向土壤中加入5% 活性炭可降低PAHs的生物有效性，在1個月內(nèi)對3、4、5環(huán)PAHs生物有效性即具有顯著降低效果(<0.05)，2個月后對6環(huán)PAHs生物有效性具有明顯降低效果。本研究將PAHs生物有效性和土壤理化性質(zhì)進(jìn)行多元線性回歸分析，結(jié)果表明，PAHs生物有效性與有機(jī)碳含量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(<0.05)，說明增加碳含量能夠降低PAHs生物有效性。Br?ndli等[12]發(fā)現(xiàn)，向城市土壤中添加活性炭能夠降低64% 自由溶解的PAHs。Oleszczuk等[23]指出，添加5% 活性炭到污泥中能夠降低95% 以上溶解態(tài)PAHs。也有研究證實(shí)，土壤中添加生物炭56 d后顯著降低蚯蚓體內(nèi)PAHs濃度[24]。

圖2 土壤中PAHs生物有效性隨時間變化

隨著培養(yǎng)時間的延長，在對照處理土壤中PAHs有效性在培養(yǎng)開始前4個月內(nèi)呈降低趨勢，培養(yǎng)至第8個月時，土壤中菲、苯并[g,h,i]芘生物有效性逐漸趨于穩(wěn)定，這主要?dú)w因于PAHs在土壤中的老化過程。研究表明，隨著老化時間延長，土壤中PAHs與土壤有機(jī)質(zhì)等組分結(jié)合更加密切，導(dǎo)致生物有效性降低[25]。而芘、苯并[b]熒蒽生物有效性略有升高，這也可能是由于隨著老化時間的延長有部分PAHs解吸出來。在活性炭處理土壤中菲、芘、苯并[b]熒蒽隨培養(yǎng)時間的延長生物有效性呈上升趨勢，苯并[g,h,i]芘生物有效性隨培養(yǎng)時間延長則趨于穩(wěn)定。這是因?yàn)樵谂囵B(yǎng)開始階段，活性炭可高效吸附PAHs，大幅度降低其生物有效性，但隨時間延長這種吸附效果減弱，PAHs可進(jìn)一步解吸出來進(jìn)入土壤溶液，導(dǎo)致其生物有效性升高。該結(jié)果說明向土壤中添加活性炭來阻控PAHs降低其生物有效性并不是一勞永逸的?；钚蕴繉AHs的阻控效果會逐漸降低，在實(shí)際場地應(yīng)用過程中應(yīng)注意跟蹤。圖3進(jìn)一步證實(shí)了在1個月內(nèi)活性炭對土壤中PAHs生物有效性的降低率是最高的，隨著時間延長活性炭阻控效果減弱。

圖3 添加5% 活性炭土壤中PAHs生物有效性降低率隨時間變化

2.3 不同質(zhì)地土壤中PAHs殘留量和生物有效性

土壤中PAHs殘留量和生物有效性隨不同質(zhì)地土壤變化見圖4。從圖4中可以看出，在對照處理土壤中PAHs殘留量表現(xiàn)為砂土>粉砂壤土>砂質(zhì)壤土。研究表明，PAHs含量與土壤中砂粒含量呈顯著正相關(guān)，傾向于在粗砂含量高的土壤中積累[26]，這與本研究結(jié)果基本一致(表1)。添加5% 活性炭的粉砂壤土、砂質(zhì)壤土中PAHs的殘留量顯著高于對照處理(<0.05)，砂土中添加5% 活性炭對PAHs殘留量無顯著影響。

圖4 不同質(zhì)地土壤中PAHs殘留量和生物有效性

在砂土、粉砂壤土中添加5% 活性炭可顯著降低PAHs的生物有效性(<0.05)，但在砂質(zhì)壤土中PAHs的生物有效性在對照和5% 活性炭處理之間無顯著差異?？梢?，添加活性炭對砂土中PAHs生物有效性降低效果最好?？赡苡捎谏巴劣袡C(jī)碳含量低，對PAHs吸附作用較弱[27]，因此砂土本身PAHs生物有效性較高，添加活性炭在該類型土壤中阻控PAHs效果最好。如圖4所示，在砂土中添加活性炭后生物有效性降低了45%。同時亦證明，土壤中有機(jī)碳含量是調(diào)控PAHs生物有效性的重要因子。

3 結(jié)論

土壤中添加5% 活性炭處理能夠有效降低不同類型PAHs生物有效性和高環(huán)PAHs殘留量；對3、4、5環(huán)PAHs，在添加活性炭后的1個月內(nèi)PAHs生物有效性降低效果最好，隨著時間的延長，活性炭對PAHs的阻控效果呈減弱趨勢；添加5% 活性炭可顯著降低砂土、粉砂壤土中PAHs的生物有效性，而對砂質(zhì)壤土中PAHs的生物有效性影響較小。

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Effect of Activated Carbon on Bioavailability of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Soil

SONG Liying1, SONG Yang2, LIU Cuiying1*

(1 School of Applied Meteorology, Nanjing University of Information Science and Technology, Nanjing 210044, China; 2 Institute of Soil Science, Chinese Academy of Sciences, Nanjing 210008, China)

Soils in different depths were collected in a site, the effect of adding 5%(/)activated carbon on polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) residues in soils was studied by an incubation experiment, and the changes of bioavailability of PAHs in soils was evaluated using the hydroxypropyl-β-cyclodextrin extraction method. The results show that the residues of phenanthrene, pyrene and benzo[b]fluoranthene in the soils treated with activated carbon are significantly higher than in the control treatment, but there is no significant difference in the residues of benzo[g,h,i]pyrene in soils between the two treatments within eight months. During the first month, the bioavailability of phenanthrene, pyrene and benzo[b]fluoranthene in activated carbon treatment are decreased by 35.06%, 37.73% and 39.60%, respectively compared with the control treatment, and the bioavailability of benzo[ghi]pyrene is decreased by only 1.37%. With the extension of incubation time, the inhibition effect of activated carbon on PAHs bioavailability in soil is decreased. Therefore, this study shows that amending 5% activated carbon can effectively reduce the bioavailability and environmental risk of PAHs in contaminated soil, especially during the first month of treatment.

Soil; Activated carbon; PAHs; Residues; Bioavailability

X53

A

10.13758/j.cnki.tr.2022.05.023

宋麗瑩，宋洋，劉翠英. 活性炭對土壤中多環(huán)芳烴生物有效性的影響. 土壤, 2022, 54(5): 1051–1057.

國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2020YFC1807003)資助。

(002263@nuist.edu.cn)

宋麗瑩(1996—)，女，內(nèi)蒙古突泉人，碩士研究生，主要研究方向?yàn)檗r(nóng)業(yè)水土工程。E-mail：a2425066568@163.com