侯 庚
(遼寧省楊樹研究所,遼寧 蓋州 115213)
目前,土壤重金屬污染治理技術(shù)主要有物理治理技術(shù)、化學(xué)治理技術(shù)、生物治理技術(shù)(包括植物修復(fù)法、微生物修復(fù)法、農(nóng)業(yè)生態(tài)修復(fù)法)等。植物修復(fù)法是一種新興的重金屬污染土壤修復(fù)技術(shù),具有經(jīng)濟(jì)和環(huán)境友好等特點(diǎn)[1]。
楊樹作為我國(guó)平原地區(qū)重要的造林樹種,分布范圍廣泛,具有易于繁殖、生長(zhǎng)快、根系發(fā)達(dá)、生物量大等特點(diǎn),為重金屬的富集及轉(zhuǎn)運(yùn)提供了可能。楊樹品種豐富,尤其近年來(lái),楊樹育種成果頗豐[2],選育出了大量具有抗寒、抗病蟲、耐鹽堿和耐重金屬脅迫的優(yōu)良品種,為修復(fù)土壤重金屬污染提供了豐富的楊樹品種。楊樹作為綠化和用材樹種,其生物產(chǎn)品不會(huì)進(jìn)入食物鏈,從而不會(huì)進(jìn)入人體而造成人體重金屬中毒。關(guān)于楊樹在修復(fù)土壤重金屬污染的應(yīng)用,許多學(xué)者做了相關(guān)研究,并取得了較好的修復(fù)效果[3-5]。上述優(yōu)良特性為楊樹應(yīng)用于修復(fù)土壤重金屬污染提供了可能。
在利用楊樹進(jìn)行土壤重金屬修復(fù)時(shí),需進(jìn)行品種篩選。關(guān)于楊樹品種修復(fù)能力的比較,研究者們采用了水培培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、土壤培養(yǎng)等方法做了大量實(shí)驗(yàn)。吳鳳霞[6]采用水培的試驗(yàn)方法研究了3個(gè)砷(As)脅迫水平下9個(gè)楊樹品種的光合參數(shù)以及不同楊樹材料吸收、富集砷的特征,篩選出砷耐型楊樹中林2025楊和砷敏感型楊樹1-45/51楊。胡亞瓊[7]采用離體培養(yǎng)的方法,研究了不同二價(jià)鎘離子(Cd2+)濃度脅迫對(duì)銀灰楊和84K楊試管苗生長(zhǎng)和抗氧化酶活性的影響,通過(guò)比較二者的生長(zhǎng)指標(biāo)、不同Cd2+濃度脅迫抗氧化酶,表明銀灰楊和84K楊都有一定抗重金屬Cd污染的能力,但銀灰楊的抗鎘污染能力更強(qiáng)。張春燕等[8]采用土培的方法研究了3種重金屬?gòu)?fù)合污染下14個(gè)楊、柳樹品種的生物量、重金屬含量和總吸收量、富集系數(shù)和轉(zhuǎn)運(yùn)系數(shù),研究結(jié)果表明,綜合考慮上述指標(biāo),61-1和南林95具有較強(qiáng)的富集能力,是理想的修復(fù)材料。魯凡[9]以榆陽(yáng)煤礦和榆樹灣煤礦的復(fù)墾區(qū)為研究對(duì)象,通過(guò)比較沙蒿、沙柳、楊樹、柳樹和松樹對(duì)重金屬的富集能力,對(duì)修復(fù)重金屬污染的優(yōu)勢(shì)樹種進(jìn)行了篩選,發(fā)現(xiàn)楊樹對(duì)Cd具有較強(qiáng)的富集能力,可以用于土壤Cd污染修復(fù)的首選植物。這些研究表明,楊樹對(duì)土壤重金屬污染的修復(fù)能力存在品種差異,可以針對(duì)污染源篩選修復(fù)能力強(qiáng)的楊樹品種應(yīng)用于實(shí)踐。
很多學(xué)者都做過(guò)重金屬對(duì)楊樹生理生化及生長(zhǎng)影響的研究。2011年余洋[10]通過(guò)對(duì)鉛(Pb)脅迫下楊樹生理生化和根尖細(xì)胞骨架變化的研究發(fā)現(xiàn),鉛導(dǎo)致了葉片抗氧化酶系統(tǒng)活性及根尖細(xì)胞微管骨架排布的變化;并增加了根尖細(xì)胞胼胝質(zhì)的沉積。張凱等[11]研究銅(Cu)、鎘(Cd)脅迫對(duì)楊樹葉片中防御蛋白活性的影響發(fā)現(xiàn):其變化規(guī)律性與重金屬質(zhì)量分?jǐn)?shù)和時(shí)間有關(guān),高質(zhì)量濃度Cd、Cu處理下試驗(yàn)葉片中的防御蛋白的活性在脅迫30~40 d后顯著高于對(duì)照,并在第40 d時(shí)最大,之后隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)其活性顯著低于對(duì)照;低質(zhì)量分?jǐn)?shù)Cd、Cu處理與對(duì)照相比差異不顯著,在第60 d的時(shí)降到最小。譚靈杰[12]研究了鹽鎘復(fù)合脅迫下美洲黑楊多方面的性狀差異,發(fā)現(xiàn)雄株對(duì)Cd具有更高的吸收能力,但在其它方面與雌株的差異未達(dá)到顯著水平。楊葉[13]研究了3種楊樹幼苗在鍶(Sr)與柴油脅迫下的差異,結(jié)果表明,在鍶脅迫下,低濃度鍶對(duì)幼苗的株高等有促進(jìn)作用,但隨著處理濃度的升高則會(huì)表現(xiàn)出抑制作用;在復(fù)合脅迫下,則均表現(xiàn)為抑制作用,且與白楊相比,青楊與俄羅斯楊的降幅更大。
關(guān)于重金屬在楊樹體內(nèi)的富集,很多研究人員做過(guò)相關(guān)工作。劉乃聞[14]研究了礦區(qū)3種重金屬在楊樹中富集發(fā)現(xiàn),鎘在楊樹體內(nèi)的分布規(guī)律是葉>根>枝>干,樹干中的含量則以靠近樹根部分為最高,越往上其含量越低。李舒琦[15]采用雙因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),研究器官、樹齡對(duì)楊樹吸收重金屬的影響,研究發(fā)現(xiàn)凋落葉中Cu和Pb的含量是隨著樹齡的增加而顯著增加的,與生長(zhǎng)期葉片中含量相比達(dá)到了顯著水平。齊洪濤等[16]研究了堆肥污泥對(duì)5種重金屬在楊樹幼苗中分布情況的影響,Cu、Zn和As在幼苗中的分布基本一致,表現(xiàn)為根>葉>莖,Cd主要富集在葉片中,Hg除富集在根部外還依次富集在莖和葉片中。鄭慧芳[17]研究發(fā)現(xiàn)不同施氮量也會(huì)影響重金屬在體內(nèi)的富集,當(dāng)施氮量較低時(shí),楊樹葉、根的細(xì)胞結(jié)構(gòu)會(huì)產(chǎn)生變化,Cd更多地富集在根系中;當(dāng)施氮量達(dá)到正常水平時(shí),Cd在莖中含量增大,說(shuō)明施氮量可影響楊樹對(duì)鎘污染的修復(fù)效率。
目前,關(guān)于強(qiáng)化修復(fù)技術(shù)的研究主要集中在微生物聯(lián)合修復(fù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)和螯合劑的使用3個(gè)方面。
近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),楊樹可通過(guò)菌根(真)菌侵染獲得更加豐富的水養(yǎng)物質(zhì),微生物在楊樹修復(fù)土壤重金屬污染的過(guò)程中也起到非常重要作用。豆青[18]研究發(fā)現(xiàn),與不接種外生菌根真菌的青楊相比,在相同的鉛脅迫濃度下,接種外生菌根真菌的青楊的株高和生物量均明顯提高,且在高濃度鉛脅迫下這種現(xiàn)象更加顯著。同時(shí)發(fā)現(xiàn),不同的外生菌根菌對(duì)青楊的侵染率不同,草地大馬勃對(duì)青楊有更高的侵染率,可更好的提高鉛脅迫的耐受性。
隨著分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的成熟,轉(zhuǎn)基因技術(shù)越來(lái)越多的應(yīng)用于各種研究。在研究楊樹對(duì)重金屬鎘脅迫的分子生理響應(yīng)機(jī)制時(shí),何佳麗[19]發(fā)現(xiàn)相比于野生型楊樹,過(guò)表達(dá)γ-glutamylcysteine synthetase基因楊樹在地上部分富集了更為豐富較多的鎘,除ROS外,總硫醇、GSH、GSSG以及可溶性酚和游離脯氨酸均是轉(zhuǎn)基因楊樹中含量較高,說(shuō)明轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型楊樹具有更高的鎘耐受性。趙思雯[20]從小黑楊葉片中克隆得到PsneIF5A2和PsneIF5A4基因,研究發(fā)現(xiàn)其在多個(gè)部位均有表達(dá),在成熟葉片中轉(zhuǎn)錄水平最高。在重金屬脅迫、鹽脅迫和干旱脅迫時(shí),熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),上述脅迫條件均誘導(dǎo)了該基因的表達(dá),且以重金屬脅迫和鹽脅迫下表達(dá)量較多。
近年來(lái),研究學(xué)者開展了螯合劑添加對(duì)土壤中重金屬生物有效性影響的研究,發(fā)現(xiàn)其可提高重金屬在土壤中的有效性,因此常常采用投加螯合劑的方法來(lái)提高修復(fù)效率。李舒琦[15]研究表明,試驗(yàn)中的3種螯合劑均能顯著促進(jìn)土壤中Cu和Pb有效態(tài)的含量,但是活化能力略有不同。EDTA即可提高根和葉中Cu的含量又可提高葉片中Pb的含量,EGTA僅能增加根和葉中Cu的含量。金誠(chéng)等[21]研究了干旱區(qū)農(nóng)田土壤中Pb在投加3種螯合劑后吸收和富集特征。研究表明,EDTA、EGTA和CA均可顯著提高土壤中水提態(tài)Pb的含量,活化強(qiáng)度從強(qiáng)到弱為EDTA>EGTA>CA。
近年來(lái),重金屬污染問(wèn)題凸顯,植物修復(fù)土壤重金屬污染應(yīng)注重其對(duì)重金屬的耐受性及修復(fù)效率。楊樹作為一種優(yōu)良的修復(fù)樹種,首先應(yīng)開展品種選育研究,針對(duì)不同區(qū)域選育出修復(fù)能力強(qiáng)的品種;其次應(yīng)拓展楊樹修復(fù)土壤重金屬污染的強(qiáng)化措施;最后應(yīng)從機(jī)理機(jī)制角度開展研究,挖掘楊樹修復(fù)重金屬污染的關(guān)鍵基因,利用基因表達(dá)調(diào)控來(lái)提高楊樹對(duì)重金屬的耐性等。