馬守葉，趙晶，劉會玲，魏振宏

子宮內(nèi)膜癌（endometrial carcinoma）是常見的女性生殖道三大腫瘤之一，2010—2015 年其死亡率每年約上升2%[1]，但目前該病的病因和預后因素仍未完全明確，因此，深入了解子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制，有利于為患者制定更有效的診斷和治療策略。按臨床特征子宮內(nèi)膜癌可分為Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型屬于雌激素依賴型，危險因素包括雌激素過多和肥胖，預后良好；Ⅱ型為非雌激素依賴型，預后較差。而根據(jù)組織病理學子宮內(nèi)膜癌可分為子宮內(nèi)膜樣腺癌、漿液性癌、黏液性癌、透明細胞腺癌或癌肉瘤[2]。對于早期子宮內(nèi)膜癌，標準治療方案為手術干預或附加輔助全盆腔放療，而以孕激素為基礎的內(nèi)分泌治療主要限于晚期或復發(fā)性患者，目前尚無標準的靶向治療。近年研究發(fā)現(xiàn)多種微小RNA（microRNA，miRNA）與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展有關[3]。子宮內(nèi)膜癌細胞和正常細胞的miRNA 分布不同[4]?，F(xiàn)對miRNA 在子宮內(nèi)膜癌致病過程中的基因調(diào)控、表達異常等方面的作用進行綜述。

1 miRNA 與子宮內(nèi)膜癌致病過程的關系

miRNA 是一類參與調(diào)控基因表達的高度保守的非編碼RNA（包含18～25 個核苷酸），通過與互補信使RNA 的3'非翻譯區(qū)（3'-untranslated region，3'-UTR）堿基配對誘導RNA 干擾，導致細胞質(zhì)中的轉錄后基因沉默和翻譯激活等。miRNA 在卵子成熟、卵泡發(fā)育、黃體形成、胚胎植入和早期胚胎發(fā)育等生殖領域以及細胞發(fā)育、干細胞分裂、衰老和細胞凋亡等細胞生命周期中均具有調(diào)控作用[5]。在人類癌癥中，不同的miRNA 存在于不同類型的腫瘤中，研究表明，婦科惡性腫瘤（如子宮內(nèi)膜癌）的特征通常為表觀遺傳學異常，包括DNA 異常甲基化、非典型組蛋白修飾和多種miRNA 的異常表達，導致基因表達模式改變，有利于腫瘤細胞的存活和增殖[6]。一些miRNA可通過多種途徑影響子宮內(nèi)膜癌的增殖、遷移和侵襲等發(fā)展過程。

1.1 miR-200 家族miR-200 家族是目前研究最廣泛的miRNA 之一，主要在與啟動子相互作用和修飾過程中起到調(diào)控作用，包括miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-429 和miR-141 共5 個家族成員。研究發(fā)現(xiàn)雌激素在子宮內(nèi)膜樣子宮內(nèi)膜癌（endometrioid endometrial carcinoma）的發(fā)病機制中起重要作用，誘導人第10 號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因（phosphates and tensin homologue deleted on chromosome ten gene，PTEN）的缺失[7]。然而，雌激素如何影響PTEN 的表達目前尚不清楚。Chen 等[8]證實17β-雌二醇可以提高miR-200c 表達，而miR-200c與PTEN 直接結合可降低PTEN 水平，導致磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol-3-kinases/protein kinase B，PI3K/AKT）途徑磷酸化，促進腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲，這可能為子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展提供了新的機制和潛在的治療靶點。miR-200 家族是上皮-間質(zhì)轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相關因子（如多梳組蛋白和E-鈣黏蛋白）的調(diào)節(jié)劑，最終控制癌細胞的上皮表型[9]。另有研究表明，miR-200c 可以靶向子宮內(nèi)膜癌中參與遷移的纖維連接蛋白1、膜突蛋白以及賦予失巢凋亡抗性的2型神經(jīng)營養(yǎng)性酪氨酸受體激酶[10]。Kozak 等[11]發(fā)現(xiàn)誘導蛋白sestrin3 是miR-200b、miR-200c 和miR-429的直接靶標，而該類蛋白影響人類子宮內(nèi)膜癌細胞抵抗失巢凋亡。轉化生長因子β 是誘導EMT 的關鍵信號轉導途徑，主要通過啟動子甲基化下調(diào)miR-200家族成員，形成自分泌轉化生長因子β/miR-200b 反饋環(huán)，并相互作用誘導EMT，促進腫瘤細胞侵襲、遷移和轉移等過程[12]。一項薈萃分析認為miR-200 家族成員，特別是miR-200b 和miR-429，可作為檢測子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌的生物標志物，但未來研究需要設計校正混雜因素（如種族和標本匹配等）以進一步證明miR-200 家族的研究價值[13]。

1.2 miR-137miR-137 是位于染色體1p22 上的非蛋白質(zhì)編碼RNA 基因，可抑制細胞增殖，誘導G1 細胞周期阻滯和凋亡，抑制細胞遷移和侵襲，影響腦腫瘤干細胞分化[14]。研究發(fā)現(xiàn)，Zeste 同源基因2（enhancer of zeste homolog 2，EZH2）的過表達與子宮內(nèi)膜癌的高級別或終末期、子宮肌層浸潤和較差的總生存期有關，賴氨酸特異性去甲基化酶1（lysinespecific histone demethylase 1，LSD1）屬于黃素單胺氧化酶家族，可通過藥理學或遺傳手段減少LSD1，抑制癌細胞增殖、遷移和侵襲[15]。Zhang 等[16]發(fā)現(xiàn)miR-137 在子宮內(nèi)膜癌中高甲基化，導致miR-137表達缺失，使EZH2 和LSD1 在子宮內(nèi)膜癌中過表達，導致腫瘤細胞增殖、集落形成及體內(nèi)轉移瘤生長。miR-137 的DNA 高甲基化已在多種癌癥中有報道，例如，miR-137 的高甲基化具有作為直腸癌的腸灌洗液、頭頸部鱗狀細胞癌的口腔沖洗液和膀胱癌的尿液中的預后標志物的潛力，miR-137 的啟動子甲基化與女性患者胃癌和頭頸癌較差的總生存期相關[17]?？傊琺iR-137 的過表達可抑制癌細胞增殖和集落形成以及體內(nèi)轉移性腫瘤的生長，未來的研究有望確定該miRNA 的其他靶標并探索其對相關腫瘤的治療潛力。

1.3 miR-646在子宮內(nèi)膜癌中，miR-646 抑制細胞的增殖、遷移和侵襲，并且可吸附環(huán)狀RNAWHSC1 靶向核仁磷蛋白1（nucleophosmin1，NPM1）負性調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜癌的進展。環(huán)狀RNA（circular RNA，circRNA）可作為miRNA 海綿參與癌癥的發(fā)展，廣泛存在于真核細胞轉錄本，由反向剪切和其他機制產(chǎn)生的外顯子或內(nèi)含子組成，其沒有5’帽或多聚A 尾結構，結構穩(wěn)定。circRNA 通過吸附相應miRNA、增強下游靶蛋白表達和參與各種生物過程而發(fā)揮作用[18]。NPM1 是核仁顆粒中高水平的核仁磷蛋白，是一種多功能蛋白，參與多種細胞活動，包括前核糖體顆粒的運輸和核糖體的生物合成，在細胞復制、應激反應、DNA 轉錄調(diào)控、基因組穩(wěn)定性維持和腫瘤發(fā)生中起著重要作用[19]。NPM1 在子宮內(nèi)膜癌中高表達，并與子宮內(nèi)膜癌的臨床分期和組織學分級呈正相關，過度表達的circRNA-WHSC1 促進NPM1的表達[20]，而下調(diào)的circRNA-WHSC1 抑制NPM1 的表達，同時miR-646 過表達可逆轉circRNA-WHSC1促進NPM1 表達的作用。這些研究均提示miR-646通過靶向NPM1 可能對子宮內(nèi)膜癌的臨床分期和組織學分級具有重要意義。

1.4 miR-652Sun 等[21]發(fā)現(xiàn)miR-652 表達與子宮內(nèi)膜癌組織分化、疾病總生存期呈負相關，miR-652過表達促進子宮內(nèi)膜癌細胞增殖、遷移和侵襲。在子宮內(nèi)膜癌組織中miR-652 的表達上調(diào)具有癌癥特異性，會導致核受體成員RAR 相關受體A（RAR related orphan receptor A，RORA）抑制和β 連環(huán)蛋白（β-catenin）上調(diào)，β-catenin 是Wnt/β-catenin 信號通路中的關鍵分子，參與組織增殖和分化[22]。因此，高miR-652 表達水平可以提高子宮內(nèi)膜癌細胞的遷移和侵襲能力，還與子宮內(nèi)膜癌患者的不良預后相關，可用于評估子宮內(nèi)膜癌復發(fā)的風險。

1.5 miR-497-5p在結直腸癌中，miR-497-5p 通過靶向影響多種信號通路中胰島素受體底物基因1來抑制腫瘤生長[23]。有研究還提出miR-497-5p 通過參與子宮內(nèi)膜癌中的絲裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase，MAPK）信號傳導調(diào)控細胞生長和增殖，miR-497-5p 表達水平與腫瘤的期別呈負相關，即miR-497-5p 表達水平較高的腫瘤患者淋巴轉移發(fā)生率較低，總生存率較高[24]。在腎癌中，miR-497-5p 通過靶向程序性死亡配體1（programmed death ligand-1，PD-L1）基因抑制細胞增殖，這有助于促進細胞凋亡[25]。miR-497-5p 在子宮內(nèi)膜樣腺癌和漿液性腺癌中均下調(diào)（與子宮漿液性腺癌相比，子宮內(nèi)膜樣腺癌中下調(diào)更顯著），該基因表達水平的顯著差異有助于區(qū)分這2 種亞型[26]，但也需結合多種相關miRNA 綜合考慮，有待進一步的研究明確該類差異相關性。

1.6 其他miRNAmiR-499 通過作用于Vav 鳥苷酸交換因子3 基因（Vav guanylate exchange factor 3，VAV3）的3'-UTR 序列，在體外顯著抑制子宮內(nèi)膜癌細胞的增殖和內(nèi)皮細胞的形成，在體內(nèi)抑制腫瘤的生長和血管生成[27]。門穎超等[28]證明過表達miR-145-5p 能夠抑制子宮內(nèi)膜癌的增殖、遷移和侵襲，并促進癌細胞凋亡，且主要抑制雙特異性磷酸酶6（dual specificity protein phosphatase 6，DUSP6）的表達，二者在表達量上呈負相關。DUSP6 通過特異性滅活ERK家族成員，負調(diào)控MAPK/ERK 通路，發(fā)揮抑制凋亡且促進腫瘤增殖的作用。因此，推測過表達miR-145-5p 可能通過抑制DUSP6，發(fā)揮促凋亡并抑制增殖、侵襲和遷移的作用。然而，miR-145-5p 對DUSP6的具體機制在該研究中并未闡述。Wang 等[29]通過一系列細胞實驗發(fā)現(xiàn)，過表達的miR-135a 增加了順鉑治療后子宮內(nèi)膜癌細胞的存活率，由此推測miR-135a可能影響子宮內(nèi)膜癌細胞對順鉑治療的化學敏感性，但需進一步的研究來證實該結論。另有研究發(fā)現(xiàn)，miR-34b 的過表達可誘導子宮內(nèi)膜癌細胞G1 期阻滯，降低S 期細胞數(shù)量[30]，這種細胞周期的重新分布可能建立一種化學敏感狀態(tài)，有利于增加化學治療的療效。miR-107 是位于第10 染色體上的miR-15/107 超家族成員，細胞模型發(fā)現(xiàn)miR-107 的下調(diào)表達與非小細胞肺癌的紫杉醇耐藥有關，可能機制為miR-107 中有一段特定的Bcl-w 逆向結合序列（Bcl-w 是Bcl-2 抗凋亡蛋白家族成員），miR-107 直接結合Bcl-w 的3'-UTR，使Bcl-w 的表達下調(diào)，導致Bcl-w 與促凋亡成員相互作用以促進細胞凋亡；同時，抑制PI3K/AKT 通路的激活（已知PI3K/AKT信號轉導通路抑制細胞凋亡），這可能進一步增加癌細胞對紫杉醇的敏感性[31]。Bao 等[32]發(fā)現(xiàn)miR-107 可直接結合子宮內(nèi)膜癌細胞中雌激素受體mRNA 的3'-UTR，在mRNA 和蛋白質(zhì)水平上抑制雌激素受體的表達，從而促進子宮內(nèi)膜癌細胞的增殖和侵襲，該研究結果為進一步了解miR-107 在子宮內(nèi)膜癌中的細胞增殖機制提供新思路。

2 miRNA 在子宮內(nèi)膜癌臨床診治中的應用進展

研究認為miRNA 是一種有潛力的診斷子宮內(nèi)膜癌的生物標志物，具有較高的診斷準確性[33]。因為大量體液中可檢測到miRNA，例如尿液中miRNA處于穩(wěn)定狀態(tài)且易被檢測，故尿液可能是子宮內(nèi)膜癌的一種有前景的非侵入性檢測方法[34]。但目前用尿液檢測子宮內(nèi)膜癌中miRNA 的研究仍較少。Lai等[35]認為血漿來源miRNA 的敏感度和特異度高于外泌體miRNA，然而由于試驗中的技術存在差異以及提取檢測miRNA 缺乏標準化，因此不同研究的結果不一致，對子宮內(nèi)膜癌相關miRNA 作為癌癥檢測生物標志物的可靠性仍存在爭議。Liu 等[36]揭示了miR-129-5p 對植物源性天冬素A（Sparanin A，AA）誘導的腎癌細胞轉移有抑制作用。還有研究表明其可顯著增加子宮內(nèi)膜癌細胞凋亡蛋白裂解和自噬蛋白表達，說明AA 不僅誘導細胞凋亡，還通過雌激素受體應激和DNA 損傷相關途徑觸發(fā)自噬[37]。目前研究仍在探索子宮內(nèi)膜癌中miRNA 的表達模式，有望發(fā)現(xiàn)并確定子宮內(nèi)膜癌新的生物標志物和治療靶點，并用于對子宮內(nèi)膜癌患者進行更為精準的臨床管理。

3 結語與展望

子宮內(nèi)膜癌治療通常包括切除子宮、卵巢、輸卵管以及盆腔和主動脈旁淋巴結的手術，并且輔以規(guī)范化學治療、放射治療或激素治療等，但治療選擇和管理方案與子宮內(nèi)膜癌的類型、分期和分級密切相關，該疾病的高度異質(zhì)性使得子宮內(nèi)膜癌患者的治療和管理并未足夠個體化。研究證明miRNA 通過多種途徑參與細胞癌變的正性或負性表觀遺傳調(diào)控，進而揭示子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展過程。目前，越來越多的臨床試驗正在研究基于血液或尿液中關于miRNA 的新型生物標志物和新型靶向藥物，以探索miRNA 在參與子宮內(nèi)膜癌診斷和治療中的潛力，最終改善該類疾病患者的臨床管理，這可能為未來婦科腫瘤更精準的診斷和治療帶來廣闊的空間。