蔣權(quán) 附青容 劉曉龍

（1.四川省什邡市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局禾豐畜牧獸醫(yī)站，四川德陽 618400；2.四川省什邡市德福獸藥有限公司，四川德陽 618400；3.四川省什邡市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川德陽 618400）

坦布蘇病毒是引發(fā)鴨坦布蘇病毒病的主要原因，具有傳染性強(qiáng)、發(fā)病急且發(fā)病率高等特點(diǎn)，可導(dǎo)致蛋鴨產(chǎn)蛋量降低甚至停產(chǎn)，病程為1～2 個(gè)月，耐過鴨群逐漸恢復(fù)產(chǎn)蛋，一般淘汰率為12%～31%，對(duì)養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展造成嚴(yán)重不利影響。有相關(guān)報(bào)道表明，自2011 年后，該病發(fā)病率有所下降，但仍存在傳播途徑及暴發(fā)原因不明確的情況。在此背景下，應(yīng)提出有效防控及治療策略，以減少該病的發(fā)生，提升鴨養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，進(jìn)一步促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1 流行病學(xué)特征

鴨坦布蘇病毒屬于黃病毒屬恩塔亞病毒群中的一種病毒，大部分歸屬于黃病毒科的病毒能夠引發(fā)脊髓炎、腦炎、全身性感染以及神經(jīng)癥狀較為明顯的自然疫源性疾病，常見的如腦炎病毒、黃熱病毒及登革熱病毒等。鴨坦布蘇病毒也歸于此，當(dāng)鴨只感染該病毒后，會(huì)出現(xiàn)難以站立甚至臥地不起等一系列神經(jīng)癥狀，但與其他病毒具有不同特點(diǎn)，該病毒能夠使蛋鴨的卵巢發(fā)生病變，進(jìn)而降低蛋鴨產(chǎn)蛋量。幾乎所有品種的鴨均可被病毒所感染，多以產(chǎn)蛋鴨為感染群，對(duì)麻鴨具有較強(qiáng)的致病力。有相關(guān)研究表明，在野鴨、鵝及雞體內(nèi)也分離出坦布蘇病毒。由此可見，坦布蘇病毒具有較廣的致病范圍。目前尚無確切的關(guān)于鴨坦布蘇病毒病的流行病學(xué)報(bào)道。從臨床角度來看，若鴨飼養(yǎng)基地有1 欄鴨發(fā)病，在1～2d 內(nèi)即可擴(kuò)散至整個(gè)飼養(yǎng)基地，在7d 之內(nèi)可蔓延至該地區(qū)的其他鴨養(yǎng)殖場(chǎng)。動(dòng)物試驗(yàn)顯示，與感染鴨坦布蘇病毒病的病鴨共同居住的其他動(dòng)物也能感染該病，故而能推斷鴨坦布蘇病毒以水平傳播為主要傳播方式，如呼吸道傳播、飲食及飲水傳播等。黃病毒中部分病毒能夠通過蚊蟲傳播，因此也不排除鴨坦布蘇病毒以蚊蟲為媒介進(jìn)行傳播。但亦有報(bào)道表明，在較為寒冷的北方地區(qū)秋冬季節(jié)少有蚊蟲，但仍會(huì)出現(xiàn)鴨坦布蘇病毒病大面積流行的情況。白蛉與蚊蟲因能飛行的距離有限，不會(huì)造成過大的病毒傳播范圍，與短期內(nèi)大范圍病情暴發(fā)有不符之處。當(dāng)前暫無動(dòng)物回歸試驗(yàn)相關(guān)報(bào)道，此外，病毒傳播期間環(huán)境溫度的變化及其他節(jié)肢動(dòng)物發(fā)生黃病毒傳播的時(shí)間不同，因此，坦布蘇病毒的主要傳播媒介也無法確定是節(jié)肢動(dòng)物，部分鳥類也可能對(duì)該病毒進(jìn)行傳播。另有研究發(fā)現(xiàn)，該病毒能在種鵝中以鵝胚的形式傳播至下一代，進(jìn)一步說明坦布蘇病毒能垂直傳播。

2 診斷方法

2.1 病理學(xué)診斷

鴨在感染病毒后，其病變主要表現(xiàn)為卵巢感染、卵泡膜出血，卵泡膜充血，卵泡出現(xiàn)變形、破裂甚至液化，感染較為嚴(yán)重的鴨可發(fā)生卵黃性腹膜炎，輸卵管內(nèi)有干酪或者膠凍樣物；公鴨睪丸縮小且重量降低，輸精管出現(xiàn)萎縮。病死于該病毒病的感染鴨，其肝脾腫大，顏色呈黃色；脾臟呈現(xiàn)出大理石樣，嚴(yán)重可出現(xiàn)異常腫大或破裂；卵泡液化、壞死或充血；心肌呈蒼白色，且可能出現(xiàn)外壁出血的情況；腦組織出現(xiàn)水腫或出血、腦膜出血；肺、腎、腸道及胰腺也呈現(xiàn)出差異性病變。感染鴨病理化學(xué)組織主要變化表現(xiàn)為：脾臟部位局部呈現(xiàn)淋巴細(xì)胞減少；血管周呈現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、肝脂肪出現(xiàn)嚴(yán)重變形且充滿膽色素；心肌纖維壞死且存有大量炎性細(xì)胞；輸卵管水腫；大腦中皮質(zhì)部壞死；腦膜呈炎性浸潤(rùn)；腎小管細(xì)胞腫脹；胃黏膜細(xì)胞脫落、變性；腺腔內(nèi)出現(xiàn)炎性細(xì)胞。

2.2 臨床診斷

鴨感染鴨坦布蘇病毒病后，其采食量會(huì)明顯下降，產(chǎn)蛋鴨產(chǎn)蛋量下降，其產(chǎn)蛋量在短時(shí)間內(nèi)可由92%～95%下降至10%以下，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)完全停止產(chǎn)蛋，死淘率約為12%，若出現(xiàn)繼發(fā)感染，死淘率可上升至30%左右。在該病毒流行初期，感染鴨會(huì)出現(xiàn)體溫升高的癥狀，排出黃綠色稀便，喜趴臥，對(duì)其進(jìn)行驅(qū)趕會(huì)出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)的情況，多數(shù)感染鴨最終會(huì)因難以進(jìn)食進(jìn)水而衰竭死亡；在鴨坦布蘇病毒感染后期，感染鴨會(huì)出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀，主要體現(xiàn)在走路搖擺、頭頸抽搐，雙腿向后伸而出現(xiàn)倒地癱瘓等癥狀，甚至死亡。鴨坦布蘇病毒病的病程約為30d，一般能自行恢復(fù)，針對(duì)體質(zhì)較好的鴨群，其產(chǎn)蛋水平可以恢復(fù)至感染前水平。在感染蛋鴨恢復(fù)的后期會(huì)出現(xiàn)換羽過程，該過程較為明顯。育成期種鴨及商品肉鴨多發(fā)病于22～39d，多以神經(jīng)癥狀為主要表現(xiàn)，如站立行走困難、臥地不起等，死淘率約為25%。

2.3 電鏡診斷法

采用電鏡法對(duì)病毒進(jìn)行診斷，易于直接對(duì)病毒結(jié)構(gòu)形態(tài)及病毒大小的觀察，并做出判斷，對(duì)病毒樣本進(jìn)行觀察可見直徑為45nm 的球形粒子，且其中含有囊膜，該檢查方法具有較強(qiáng)的直觀性，并且精準(zhǔn)度較高，但此診斷方法對(duì)儀器以及操作的要求較高，在臨床所需的快速檢測(cè)中應(yīng)用受限。

2.4 實(shí)驗(yàn)室診斷

關(guān)于鴨坦布蘇病毒病的實(shí)驗(yàn)室診斷方式主要包含分子生物學(xué)方法、血清學(xué)及病毒分離鑒定等。血清學(xué)方法是一種較為常用的方法，其中有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、間接免疫熒光法以及瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)等。其中較為簡(jiǎn)單便捷且操作簡(jiǎn)單的為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，該試驗(yàn)方法適合于大規(guī)模檢測(cè)。近年來，已有相關(guān)學(xué)者建立出鴨坦布蘇病毒的檢測(cè)方法，但由于病毒純化以及陰性血清制備存在一定難度，因此，尚未進(jìn)行廣泛應(yīng)用。隨著鴨坦布蘇病毒病基因組序列被公布，已成功建立了多項(xiàng)檢測(cè)抗原分子生物學(xué)方法，如套式反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、核酸探針、熒光定量及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法等。其中反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)具有簡(jiǎn)便快捷等優(yōu)點(diǎn)，并且具有較高的特異性與敏感性，是當(dāng)前常用于實(shí)驗(yàn)室的分子生物學(xué)診斷技術(shù)，亦是對(duì)該病毒病進(jìn)行快速有效診斷的一種方法[1]。病毒分離鑒定是一種經(jīng)典的對(duì)鴨坦布蘇病毒病進(jìn)行診斷的方式，其診斷結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確率，較為可靠。從感染鴨的輸卵管、卵泡膜、脾臟、肝臟以及腦中等相關(guān)病變組織中均能分離出該病毒。

2.5 免疫組化法

免疫組化法依據(jù)抗原抗體中特異性相結(jié)合的原理，能夠?qū)M織切片中或細(xì)胞樣本中的某類化學(xué)成分進(jìn)行定位、定性以及定量的研究，將其應(yīng)用于鴨坦布蘇病毒的鑒定中，則是對(duì)該病毒抗原進(jìn)行鑒定，憑借其具有的特異性、敏感性及精準(zhǔn)的定位性，還可對(duì)同一細(xì)胞或者同一組織中的不用抗原進(jìn)行功能與形態(tài)的相關(guān)研究，此檢測(cè)方式對(duì)病理學(xué)研究的發(fā)展意義重大。

3 鴨坦布蘇病毒潛在威脅

針對(duì)蚊媒病毒而言，其生活存儲(chǔ)宿主主要為鳥類，當(dāng)鳥被感染后，可導(dǎo)致高病毒血癥的發(fā)生，在感染鴨坦布蘇病毒的感染鴨體內(nèi)也可檢測(cè)出水平較高的病毒血癥，進(jìn)一步說明病毒的存儲(chǔ)宿主可能是鳥類，但該推論仍需進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行證實(shí)。有相關(guān)報(bào)道表明，在北京鴨、雞、麻雀、櫻桃谷亞、鴿子、鵝以及番鴨體內(nèi)均能分離出該病毒。上述家禽在市場(chǎng)中的銷售流通以及野鳥的生活遷徙也可導(dǎo)致病毒出現(xiàn)遠(yuǎn)距離的傳播，進(jìn)而加大了疾病安全隱患，增加疾病防控難度。在黃病毒科中，超過70 個(gè)成員可對(duì)人類致病，目前雖尚無鴨坦布蘇病毒對(duì)人類造成感染的相關(guān)報(bào)道，但有學(xué)者研究表明，能夠在Hepal-6 細(xì)胞中連續(xù)進(jìn)行傳代[2]。還有相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，小鼠在感染鴨坦布蘇病毒后會(huì)出現(xiàn)一系列神經(jīng)癥狀。由此提示，鴨坦布蘇病毒適應(yīng)于哺乳動(dòng)物，并且可使哺乳動(dòng)物發(fā)生相關(guān)反應(yīng)及臨床癥狀。此外，由于其傳播途徑較為復(fù)雜以及鳥類能夠進(jìn)行遠(yuǎn)距離遷徙，說明該病毒對(duì)人類衛(wèi)生安全所造成的潛在威脅應(yīng)予以充分重視，故而加強(qiáng)對(duì)鴨坦布蘇病毒病的科學(xué)防控具有公共衛(wèi)生意義。

4 科學(xué)防控

針對(duì)鴨坦布蘇病毒病目前尚無特效藥對(duì)其進(jìn)行治療，故應(yīng)做好充分、科學(xué)的預(yù)防工作。為了能有效進(jìn)行防控，鴨養(yǎng)殖業(yè)相關(guān)人員應(yīng)從疫苗免疫、生物安全及飼養(yǎng)管理等方面展開工作[3]。

4.1 疫苗防控

疫苗免疫是最為有效的預(yù)防與控制方式之一，并且該防控策略具有較好的經(jīng)濟(jì)性。當(dāng)前我國(guó)相關(guān)研究人員已經(jīng)研究出多種關(guān)于鴨坦布蘇病毒病的疫苗，包括DNA 疫苗、弱毒疫苗及滅活疫苗等。有試驗(yàn)將鴨坦布蘇病毒病弱毒疫苗接種于蛋鴨中，證實(shí)該疫苗對(duì)蛋鴨的生產(chǎn)具有較強(qiáng)的保護(hù)效果，能有效降低蛋鴨在感染病毒后對(duì)產(chǎn)蛋性能的影響。另外有相關(guān)研究證實(shí)，滅活疫苗在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用過程中不僅具有較好的應(yīng)用效果，同時(shí)具有較強(qiáng)的安全性。上述兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均證實(shí)在蛋鴨開產(chǎn)前對(duì)其進(jìn)行弱毒疫苗或滅活疫苗接種，可有效減少鴨群的應(yīng)激反應(yīng)，使鴨坦布蘇病毒病對(duì)鴨群生產(chǎn)性能造成的影響最小[4]。有學(xué)者在研究分析鴨坦布蘇病毒病滅活疫苗時(shí)發(fā)現(xiàn)，疫苗中含有的母源抗體能夠?qū)Σ怀^10 日齡的雛鴨進(jìn)行保護(hù)，并且提出于雛鴨7～10 日齡時(shí)首次進(jìn)行鴨坦布蘇病毒病疫苗接種，能夠達(dá)到最佳的免疫效果，因疫苗具有較好的保護(hù)性，可誘導(dǎo)被接種的鴨只產(chǎn)生細(xì)胞免疫與體液免疫。

4.2 完善生物安全制度

應(yīng)將飼養(yǎng)模式設(shè)定為全進(jìn)全出，并且保證每一批鴨養(yǎng)殖結(jié)束后均應(yīng)有相應(yīng)的空舍期，在此期間對(duì)鴨養(yǎng)殖環(huán)境與相關(guān)用具進(jìn)行充分、嚴(yán)格的消毒及清洗。在日常養(yǎng)殖過程中，應(yīng)注意消毒工作，對(duì)鴨舍內(nèi)外進(jìn)行消毒，同時(shí)對(duì)養(yǎng)殖人員及相關(guān)車輛進(jìn)行消毒。對(duì)車輛與人員的進(jìn)出進(jìn)行嚴(yán)格控制，最大程度的降低疫病傳播風(fēng)險(xiǎn)。針對(duì)病鴨所生產(chǎn)出的種蛋，應(yīng)該予以分開存儲(chǔ)，以降低垂直傳播的風(fēng)險(xiǎn)。鴨舍與鴨舍之間應(yīng)保證一定間距，有效降低水平傳播的概率；鴨養(yǎng)殖人員應(yīng)定時(shí)巡視，若發(fā)現(xiàn)疑似病例應(yīng)及時(shí)予以隔離觀察；針對(duì)病死鴨需進(jìn)行無害化處理，切斷病毒的傳播途徑，嚴(yán)格控制傳染源，進(jìn)一步避免疫病的傳播擴(kuò)散。

5 小結(jié)

目前鴨坦布蘇病毒病依然存續(xù)于我國(guó)，并對(duì)養(yǎng)鴨業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，阻礙養(yǎng)鴨業(yè)的持續(xù)發(fā)展。當(dāng)下關(guān)于鴨坦布蘇病毒病的相關(guān)研究雖取得一定進(jìn)展，但仍然存有諸多問題尚待明確，如該病毒致病機(jī)理。關(guān)于鴨坦布蘇病毒病已建立出反向遺傳操作系統(tǒng)，基于此，通過親本毒株與傳代致弱毒株，利用定點(diǎn)突變與節(jié)點(diǎn)替換可對(duì)鴨坦布蘇病毒病致病關(guān)鍵位點(diǎn)進(jìn)行鑒定，從而利于闡明該病毒的致病機(jī)理，以進(jìn)行相關(guān)疫苗有效研發(fā)工作。除此之外，還應(yīng)對(duì)鴨坦布蘇病毒的傳播途徑進(jìn)行研究，進(jìn)而有利于對(duì)該病進(jìn)行科學(xué)有效地防控。