楊美蘭，繆祥虎，鄭廣云，賈柱元

1.云南省曲靖市獸藥飼料監(jiān)察所，云南曲靖 655000；2.云南省曲靖市畜禽改良工作站，云南曲靖 655000

隨著生活水平的不斷提高，飼養(yǎng)寵物的人群也越來越多。犬的傳染性疾病個(gè)體發(fā)病率也隨之增多，而傳染性肝炎較為常見和多發(fā)，給養(yǎng)犬業(yè)造成了極大的危害。因此，對犬傳染性肝炎作出診斷并進(jìn)行綜合治療，對于控制病情的發(fā)展、減小養(yǎng)犬業(yè)損失有重要的意義。

1 病原與流行病學(xué)

犬傳染性肝炎（infectious canine hepatitis，ICH）是犬的一種急性、高度接觸性敗血性傳染病，由感染犬傳染肝炎病毒（ICHV）引起。犬傳染性肝炎病毒又稱犬腺病毒（canine adenovirus，CAV），屬腺病毒科、乳腺病毒腺病毒屬，呈球形，無囊膜，根據(jù)血清學(xué)可分為犬腺病毒I 型和腺病毒II 型[1]。其中，CAV1 引起多器官出血，以肝臟出血病變最明顯，而CAV2 主要引起呼吸道發(fā)生病變。犬腺病毒易在犬腎和睪丸細(xì)胞內(nèi)增殖，也可在豬、豚鼠和水貂等的肺和腎細(xì)胞中有不同程度增殖，出現(xiàn)細(xì)胞膿腫變圓、聚集成葡萄串樣典型細(xì)胞病變，也可產(chǎn)生蝕斑。感染細(xì)胞內(nèi)常有核包涵體，核內(nèi)病毒粒子呈晶格狀排列[2]。

該病毒在低溫條件下抵抗力較強(qiáng)，能長時(shí)間存活，對熱不耐受，60 ℃3～5 min 即可滅活；對乙醚、氯仿有耐受性，在室溫下能抵抗95%乙醇達(dá)24 h；苯酚、碘酊、氫氧化鈉和甲醛能有效殺滅該病毒。犬傳染性肝炎對犬、狐（銀狐、紅狐）和浣熊易感性較強(qiáng)，可發(fā)生于任何季節(jié)，但春初、秋末、冬季發(fā)病率相對較高。任何種類、性別和年齡階段的犬都能發(fā)生該病，1 歲以內(nèi)的幼犬病死率最高。病犬及帶毒犬是主要傳染源。在感染的急性型階段，病毒分布于犬的全身各組織，通過分泌物和排泄物排出體外污染周圍環(huán)境。病愈犬雖有終身免疫力，但6 個(gè)月后仍能從其尿液中檢測到犬腺病毒[3]。

2 臨床癥狀與病理變化

患傳染性肝炎的病犬，按其癥狀發(fā)生的程度分為最急性、急性、慢性和無典型癥狀型4 種，按其臨床癥狀表現(xiàn)分為肝炎型和呼吸型2 種[4]。

肝炎型主要由犬腺病毒I 型病毒引起。病犬多表現(xiàn)出精神沉郁，食欲下降，飲欲增強(qiáng)，腹痛、腹瀉、嘔吐，糞便中帶血，黏膜蒼白或者輕度黃染，偶爾可見齒齦發(fā)生出血。肝臟損傷嚴(yán)重時(shí)會(huì)出現(xiàn)黃疸，黏膜可見大面積黃染。急性病犬體溫升高達(dá)40 ℃以上，體溫呈馬鞍型變化曲線，出現(xiàn)畏寒，結(jié)膜發(fā)炎，眼、鼻可見漿性黏性分泌物。犬傳染性肝炎病毒進(jìn)入眼房后，能在角膜表面的內(nèi)皮細(xì)胞中生長，產(chǎn)生包涵體并擴(kuò)散到內(nèi)皮細(xì)胞中，從而導(dǎo)致病犬或康復(fù)犬單眼或雙眼出現(xiàn)暫時(shí)性角膜渾濁，引起“藍(lán)眼病”的臨床癥狀。肝炎型病犬多出現(xiàn)蛋白尿或膽紅素尿，呈現(xiàn)呼吸變快、心搏動(dòng)增強(qiáng)等癥狀。較輕的病例無典型臨床癥狀，只見食欲下降、畏寒、體溫稍高，持續(xù)時(shí)間一般2～3 d。肝炎型病犬最突出的病理特征是病犬出現(xiàn)不同程度的皮下水腫，多器官出現(xiàn)充血、出血，其中，消化道和膽囊出血明顯。肝臟明顯腫大，切面外翻，淤血，呈紫黑色，表面許多暗紅色斑點(diǎn)；膽囊腫大，膽汁變黏稠，膽囊壁水腫、增厚、出血。經(jīng)組織學(xué)觀察，肝臟出現(xiàn)壞死病灶，肝細(xì)胞變性腫大，明顯可見包涵體，肝竇發(fā)生萎縮；膽囊上皮細(xì)胞發(fā)生變性、壞死和脫落，固有層出現(xiàn)水腫，黏膜肌層發(fā)生萎縮變形；大腦血管周圍出血，內(nèi)皮細(xì)胞大量增生，核內(nèi)可見包涵體[5]。

呼吸型主要由犬腺病毒II 型病毒引起。病犬常出現(xiàn)明顯的呼吸道癥狀，體溫多高達(dá)41 ℃左右，咳嗽，呼吸加速，流漿液性或膿性鼻液。隨著病程的發(fā)展，淋巴結(jié)和扁桃體發(fā)生腫大，心率明顯加快，多伴有咽喉炎癥狀。在體溫上升期，血檢可見白細(xì)胞減少，血細(xì)胞沉降率加快，血凝時(shí)間延長等變化。最突出的病理變化是體溫升高明顯，可視黏膜出現(xiàn)潮紅，扁桃體和淋巴結(jié)腫脹、充血，唾液腺、支氣管、肺臟等器官腫大、出血。

3 診斷技術(shù)及要點(diǎn)

3.1 臨床癥狀診斷

病犬在發(fā)病早期可檢測出蛋白尿或膽紅素尿，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、白蛋白、乳酸脫氫酶和肌酸激酶均明顯高于參考范圍，隨著病程的發(fā)展出現(xiàn)“藍(lán)眼”病或在組織內(nèi)皮細(xì)胞觀察到包涵體[6]。依據(jù)出現(xiàn)的這些典型臨床癥狀和剖檢病理變化對該病的確診有一定的診斷意義。

3.2 病毒分離鑒定

犬傳染性肝炎病毒多存在于病犬扁桃體、肝臟、脾臟等組織器官中，無菌采集這些器官用無血清DMEM 制成組織懸液，離心后取上清液接種于MDCK 細(xì)胞，37 ℃恒溫培養(yǎng)3～5 d，出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變即可確診。

3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

采集分離被檢犬血清，用犬傳染性肝炎病毒免疫犬獲得的血清為標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，無犬傳染性肝炎病毒的犬血清為標(biāo)準(zhǔn)陰性血清，按照酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的操作步驟進(jìn)行檢測。該方法不僅可用于未接種犬傳染性肝炎疫苗病犬的診斷，還可以檢測免疫接種疫苗犬的抗體保護(hù)水平。

3.4 免疫酶組織化學(xué)法

采集病犬肝臟、扁桃體等新鮮組織，按常規(guī)方法制作成冰凍石蠟切片，過氧化氫-甲醇溶液37 ℃20 min 去內(nèi)源酶，用胰蛋白酶溶液消化處理2 min以暴露抗原，漂洗、封閉，加標(biāo)準(zhǔn)血清，漂洗后再加酶標(biāo)記物，漂洗后蘇木精襯染，脫水、封片，觀察到被檢組織細(xì)胞胞漿、偶見細(xì)胞核呈黃色至棕褐色著染，即可判定犬傳染性肝炎病毒抗原陽性。

3.5 犬傳染性肝炎快速檢測卡檢測

犬傳染性肝炎快速檢測卡是對犬傳染性肝炎方便快捷的一種診斷方法，分為抗原檢測試紙和抗體檢測試紙，在臨床運(yùn)用中較多用抗原檢測試紙來進(jìn)行檢測診斷。傳染性肝炎檢測方法：用棉簽涂抹眼、鼻，口腔流液或伸入肛門內(nèi)直腸進(jìn)行采樣，插入裝有緩沖液的樣品管內(nèi)，混勻成待檢液，用傳染性肝炎檢測卡做樣品檢測，T 線和C 線同時(shí)出現(xiàn)則為陽性，只出現(xiàn)C 線為陰性。該方法是臨床上快速檢測犬傳染性肝炎的重要檢測方法。

4 防治措施

1）主要遵循抗病毒、消炎、保肝、補(bǔ)液、解毒的原則進(jìn)行對癥治療。該病無特效藥，主要采取對癥治療的方法。發(fā)病初期，給病犬注射犬傳染性肝炎特異性高免血清抑制病毒擴(kuò)散，每天注射葡萄糖鹽水，配合使用抗生素、消炎藥抗感染治療，輔助使用三磷酸腺苷、輔酶A、肌苷、干擾素等增強(qiáng)機(jī)體的抵抗力，出現(xiàn)出血癥狀可使用安絡(luò)血或止血敏對癥治療，高熱病犬肌注板藍(lán)根注射液或安乃近注射液，使用肝復(fù)肽等藥物進(jìn)行保肝治療。

2）大量的研究報(bào)道也表明，中西醫(yī)結(jié)合治療法有較好的療效。在中藥方劑中，防風(fēng)、荊芥、車前子、白菊花、蔓荊子能消風(fēng)明目，清熱解毒為主，川芎、當(dāng)歸尾、紅花活血散瘀消腫為輔，龍膽草、黃芩能瀉肝火為佐、白芷、厚樸除熱濕散腫為使，以上諸藥合用，共同起到散風(fēng)清熱、消腫明目的作用。吳登堃等[7]運(yùn)用中成藥明目地黃丸灌服治療犬傳染性肝炎，經(jīng)過4年的臨床試驗(yàn)，該療法療效明顯、確切，安全，操作方便。

3）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，增強(qiáng)犬的抗病機(jī)能。犬傳染性肝炎的傳播途徑主要是直接接觸傳染，病犬及治愈犬要單獨(dú)飼養(yǎng)隔離半年以上。定期對犬舍及周圍環(huán)境進(jìn)行消毒，按時(shí)進(jìn)行相關(guān)疫（菌）苗免疫接種。

4）免疫預(yù)防接種。該病沒有特效藥，及時(shí)進(jìn)行預(yù)防接種能取到較好的保護(hù)作用。一般推薦對6 周齡或6 周齡以上的幼犬進(jìn)行首次免疫，連續(xù)接種3次，每次間隔3 周，可獲得較好的免疫保護(hù)效果。