陳 靜 張傳名 茆俊卿 陳永昶 張 蕾

（1.南京中醫(yī)藥大學第一臨床醫(yī)學院，江蘇 南京 210029；2.揚州市中醫(yī)院肺病科，江蘇 揚州 225009）

中醫(yī)藥治療肺癌由來已久，但其機制一直難以被闡述清楚，臨證辨治時往往只能通過由外測內、以藥測證的方法來檢驗和推導藥物對人體整體狀態(tài)的影響，而這些信息難以量化，且存在主觀性和不穩(wěn)定性。系統(tǒng)生物學是一門通過定量推理、計算模型和高通量實驗技術，將單個生物尺度內以及不同尺度（如細胞、組織和器官系統(tǒng)）之間的分子成分與生理功能和生物表型聯(lián)系起來的綜合學科，從整體上將生命的邏輯和調控網絡的秘密展示清晰[1]。技術平臺主要包括：基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學等。系統(tǒng)生物學這種系統(tǒng)性、整體性的宏觀視角與中醫(yī)的整體觀有著“異曲同工”之妙[2]。通過系統(tǒng)生物學的方法來發(fā)現(xiàn)依據中藥治療肺癌的藥效物質基礎，分析中藥單藥、復方的有效藥物成分與機體內生物分子之間的相互作用機制，為科學地闡述中醫(yī)藥治療肺癌的作用機制提供支持，并進一步尋找新的治療藥物，促進其發(fā)展。

1 扶正抗癌治法的概況

1.1 扶正抗癌治法的立論依據 中醫(yī)認為癌病屬于全身性疾病的局部表現(xiàn)，其發(fā)生發(fā)展與正氣不足密切相關，正如《雜病源流犀燭·積聚癥瘕痃癖痞源流》所言：“邪積胸中，阻塞氣道，氣不宣通，為痰，為食，為血，皆得與正相搏，邪既勝，正不得而制之，遂結成形而有塊”。古籍中精辟論述了正氣不足，各種致病因素作用于人體，形成痰、瘀、毒等病理產物。同時，正虛也是肺癌復發(fā)、轉移的關鍵，其一，隨著疾病進展，癌邪耗伐正氣，正氣漸虛以致無力抗衡，癌邪泛溢則致復發(fā)轉移；其二，手術、放化療等有殺傷作用的治療手段，在遏制癌邪之毒的同時也損傷正氣，日積月累，易致癌邪復生、轉移。劉嘉湘教授認為“氣”“陰”兩虛為肺癌發(fā)病“正虛”之代表，日久傷陽；肺脾二臟為病變主要涉及臟腑，日久及腎[3]。國醫(yī)大師周岱翰認為肺癌關鍵病機之一為脾虛釀生痰濕，脾、肺二臟統(tǒng)攝全身之氣的生成及津液輸布、代謝，扶正時尤為注重“培土生金”[4]。因此，扶正抗癌已成為治療肺癌的主體思路。

1.2 扶正抗癌法治療肺癌的有效性 扶正抗癌法治療癌癥的策略不以消減瘤體為首要目標，而在于長期“帶瘤生存”，恢復機體陰陽平穩(wěn)，維持穩(wěn)態(tài)。Wang X Q等[5]采用前瞻性隊列研究接受常規(guī)術后治療的Ⅰ、Ⅱ或ⅢA期非小細胞肺癌（NSCLC）患者共503例，使用扶正類中藥治療，治療組的患者接受中藥連續(xù)治療超過6個月或直至疾病進展，對照組患者接受中藥治療不到1個月，隨訪時間超過3年，結果顯示中藥治療持續(xù)時間較長，可被認為是癌癥復發(fā)和轉移的保護因素，中藥治療與改善NSCLC術后患者的生存預后相關。Jiang Y等[6]辨證使用扶正類中藥（益氣、養(yǎng)陰或益氣養(yǎng)陰）維持治療晚期NSCLC患者，與對照組相比，使用扶正類中藥結合中藥穴位敷貼的中醫(yī)綜合治療1年生存率明顯高于單純化療者。可見，將扶正抗癌法應用于肺癌治療能讓患者生存獲益。

1.3 扶正抗癌法認識上的局限性 雖然依據中醫(yī)理論，辨病加辨證的結合，臨床應用上能取得療效，但是隨著現(xiàn)代科學技術的發(fā)展，人們對于癌癥這類疾病的認識已經精確到分子水平，而中醫(yī)學仍然局限在宏觀層面，對于病機、治法難以深層次地挖掘和創(chuàng)新，如：何為“正虛”，除去主觀因素和依據經驗的辨證，有沒有一套客觀化、標準化的評價體系供臨床準確識證；何為“扶正”，臨床上常用的扶正類中藥單藥、經方對于機體到底存在哪些影響而抗癌。中醫(yī)的研究需要宏觀和微觀的結合，使“理法方藥”更加精準，以期臨床療效有進一步突破，中醫(yī)藥抗癌能走得更加深遠。

2 從系統(tǒng)生物學分析扶正抗癌治療肺癌的科學基礎

2.1 基因組學與肺癌 基因組學技術是研究基因組的表達、基因的多樣性、基因組功能的闡釋的技術。復雜的遺傳因素及后天因素使人群具有個體差異性，但也有群體的同質性，基于同質性以模塊的形式進行基因測序，可以大大提高檢驗效能?？山梃b基因組學的方法和技術，把中醫(yī)學的“氣虛”“陰虛”“肺虛”等代表“正虛”的概念給予客觀的描述。熊紹權等[7]利用基因組學技術對脾虛痰濕型肺癌患者基因篩查，共篩選出885個相關基因，并進一步分析顯示其分子功能包括DNA結合、酶的活性、受體結合等，生物學過程包括細胞代謝、細胞增殖、跨膜物質轉運等，細胞組分包括膠原纖維、細胞外基質、基底膜等，參與調控TNF信號通路、BMP受體信號通路、TRAI信號通路等。劉清華等[8]通過檢測腫瘤組織及瘤旁正常組織，發(fā)現(xiàn)脾虛型肺癌患者差異表達基因涉及癌基因、抗癌基因、細胞信號轉導、能量代謝等基因。李雪梅等[9]分析了幾種肺癌常見證型，其中具有正虛代表的肺脾氣虛、肺陰虛、氣陰兩虛的MGMT啟動子甲基化陽性率分別為85.00%、90.00%、75.00%，而以邪實代表的氣滯血瘀、痰熱阻肺的MGMT啟動子甲基化陽性率分別為15.00%、20.00%，顯示“正虛”和“邪實”在MGMT啟動子甲基化陽性率上有明顯的差異性。通過研究證型與基因組學特征的關系，有助于更客觀地了解所謂“正虛”證的特點，以便精準地靶向治療。

2.2 轉錄組學與肺癌 轉錄組學是研究細胞內所有基因轉錄情況和轉錄調控規(guī)律的科學，比較特定條件或疾病狀態(tài)下的細胞或組織，以確定基因表達的變化[10，11]?？赏ㄟ^差異表達分析評估實驗條件下基因轉錄本豐度的變化，以及通過聚類分析來識別共調控的基因，揭示生物學機制。轉錄組學因此是發(fā)現(xiàn)新診斷或治療靶點的有吸引力的工具。楊文笑[12]運用轉錄組學研究技術，獲得了加入養(yǎng)陰解毒方48 h肺癌A549細胞前后的差異基因，2178個差異基因中上調的基因有1464個（67.2%），下調的基因有714個（32.8%），EGR1為其中差異最顯著的基因。陸俊[13]通過高通量的轉錄組學檢測和生信分析發(fā)現(xiàn)，金復康（黃芪、北沙參、天冬、女貞子、淫羊藿、山萸肉等）聯(lián)合順鉑組轉錄水平大于2倍的基因共有3426個，并與腫瘤基因庫對比，篩選出351個腫瘤相關基因，靶點主要集中在參與凋亡相關的信號通路。

2.3 蛋白質組學與肺癌 蛋白質組學是以平行方式對組織或細胞類型表達的蛋白質進行系統(tǒng)研究，以提供健康和疾病中生物系統(tǒng)的詳細特性[14，15]。蛋白質是生命活動的體現(xiàn)和實施，受遺傳調控和環(huán)境因素的影響而決定。大多數疾病都與蛋白質的變化有關，包括蛋白質的豐度、結構、功能和相互作用。中醫(yī)辨證治療肺癌的本質是對疾病發(fā)生發(fā)展規(guī)律及其癥狀表現(xiàn)的理解。疾病是身體機能的異常表現(xiàn)，或許，這些異常會在蛋白質水平上反映出來。王菊勇等[16]使用具有益氣養(yǎng)精功效的復方—肺巖寧沖劑作用于荷瘤裸鼠，通過蛋白質組學分析發(fā)現(xiàn)有18個差異蛋白質點，其相關功能包括細胞周期相關蛋白、代謝相關蛋白、細胞信號轉導分子、轉錄調控因子等?；舯艿萚17]通過TMT蛋白質組學探討華蓋散對H1688和A549肺癌細胞增殖、凋亡影響的作用機制研究，發(fā)現(xiàn)華蓋散可抑制H1688和A549肺癌細胞增殖，誘導凋亡，UHRF1、CRYAB、ING3和PAWR有可能為其治療肺癌的靶點。中醫(yī)的治法治則多具有多靶點、多中心的調控作用，作用靶點非常復雜，蛋白質組學可以為治法治則、藥物的調控靶點、作用機制研究提供思路借鑒和技術支持。

2.4 代謝組學與肺癌 代謝組學是一門使用先進的分析化學技術對來自細胞、器官、組織或生物體液的代謝物進行高通量分析的科學[18]。代謝組學重點關注基因調控、酶活性改變和代謝變化，把研究對象看作整體，跳過其中具體環(huán)節(jié)，通過評估生物體的整體代謝變化，尋找差異。在癌癥領域中，利用核磁共振、液相色譜-質譜、氣相色譜-質譜等技術，可有助于發(fā)現(xiàn)癌癥早期診斷的生物標志物、研究癌癥的發(fā)展、揭示病理生理過程[19]。周賢梅等[20]利用氣相色譜-質譜技術分析肺癌氣陰兩虛證患者和健康者的呼出氣冷凝液代謝產物，發(fā)現(xiàn)1-（苯基磺酞基）毗咯為氣陰兩虛組特有化合物。隋雨桐等[21]利用代謝組學技術比較了正常組、肺癌荷瘤組和肺癌荷瘤芪杉方治療組小鼠的血清代謝譜，發(fā)現(xiàn)與正常組比較，荷瘤組小鼠有22 種代謝物水平有差異，芪杉方對其中的18 個代謝標記物有回調作用，提示芪杉方可能通過硒同型半胱氨酸等18 類物質代謝發(fā)揮抗腫瘤作用。陳海玲等[22]運用代謝組學技術檢測模型動物腸道菌群變化，發(fā)現(xiàn)益氣養(yǎng)陰方可增加具有腸黏膜保護作用的乳酸桿菌的數量，而對于一些致病菌，如擬桿菌、普氏菌和瘤胃球菌等具有一定的抑制作用。

3 結語

“扶正抗癌”是中醫(yī)治療肺癌的主體思維，基因組學研究可為“因虛致癌”的病因與發(fā)病學說提供客觀的基因組數據，指導如何預防肺癌、判斷治療后的預后轉歸，還為中醫(yī)藥的個體化治療提供依據。轉錄組學技術可助力中醫(yī)肺癌發(fā)病規(guī)律研究、虛證證候本質研究，為不同正虛類型的中醫(yī)證候確定生物標志物，闡明證候演變的調控關系，提供轉錄組依據。蛋白質組學和代謝組學可為中藥治療的靶點等方面提供客觀量化，也為發(fā)現(xiàn)新的中藥療法或治療靶點、闡明如何“抗癌”的作用機制提供支持。多組學結合的策略尤其切合中醫(yī)學整體觀、辨證觀的優(yōu)勢，在中醫(yī)肺癌發(fā)病機制、精準施治、機制探索等各方面均可提供多層次的信息支持，并賦予“扶正抗癌”新的科學內涵，實現(xiàn)現(xiàn)代化或與現(xiàn)代科學溝通、相融的基礎。

盡管系統(tǒng)生物學的研究方法已經在中醫(yī)現(xiàn)代化研究中開始應用，組學技術也取得一些成果，但仍需重視以下幾點：（1）中醫(yī)科研工作中，應努力培養(yǎng)嚴謹的科研思維，盡可能掌握全面所需的組學技術，注重知識、技術更新；（2）組學技術提供了海量的高通量數據的同時，也對研究者的生物信息處理能力包括提出了一定的要求，包括對數據的篩選、整合、分析、解釋、計算機各種算法及相應軟件的使用及常用生物信息數據庫的數據挖掘；（3）在運用系統(tǒng)生物學等現(xiàn)代技術研究中醫(yī)問題時，應時刻牢記中醫(yī)屬性，保持中醫(yī)思維，提出的猜想、擬研究的問題仍需緊緊圍繞中醫(yī)診療的核心。綜上，筆者認為系統(tǒng)生物學是中醫(yī)肺癌研究中的一大助力，隨著現(xiàn)代技術上的不斷發(fā)展，未來中醫(yī)肺癌方向的研究將取得更大的突破。