牛國(guó)保 孫德嶺 單曉政 劉莉莉 文正華 江漢民 張小麗 姚星偉*

（1 天津科潤(rùn)農(nóng)業(yè)科技股份有限公司蔬菜研究所，蔬菜種質(zhì)創(chuàng)新國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津市蔬菜育種企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300384；2 天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，天津 300384）

以往的花椰菜離體培養(yǎng)成苗技術(shù)需經(jīng)過(guò)穴盤(pán)或營(yíng)養(yǎng)缽培養(yǎng)后再移栽，組培苗生長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)，移栽成活率常不足60%，而采用組培苗溫室直接移栽成苗技術(shù)，可以大幅縮短花椰菜組培苗繼代培養(yǎng)時(shí)間，將移栽成活率提高至90%以上，且操作簡(jiǎn)單，成本低。

花椰菜在我國(guó)蔬菜周年供應(yīng)中占有重要地位，隨著我國(guó)花椰菜種植面積的擴(kuò)大，需種量逐年上升，花椰菜種業(yè)市場(chǎng)熱度增加，一些銷售商或個(gè)人也加入到了花椰菜育種隊(duì)伍中（牛國(guó)保 等，2020）。優(yōu)良育種材料是花椰菜育種的關(guān)鍵，創(chuàng)新親本材料過(guò)程中應(yīng)用的誘變育種、基因編輯、小孢子離體培養(yǎng)和大孢子培養(yǎng)等技術(shù)都是基于細(xì)胞培養(yǎng)，因此建立高效的組織培養(yǎng)和植株再生體系是蔬菜遺傳轉(zhuǎn)化成功的關(guān)鍵性基礎(chǔ)之一（陶興林 等，2017）。

近年來(lái)，育種家對(duì)花椰菜離體培養(yǎng)成苗技術(shù)進(jìn)行了全方面研究（黃俊軒 等，2014；林琿 等，2014；徐傳懷 等，2014；萬(wàn)瓊蓮 等，2016；史滟滪 等，2019），但對(duì)成苗后的組培苗馴化和移栽研究較少。華北地區(qū)一般在8—12 月獲得花椰菜組培苗，經(jīng)過(guò)7～8 次繼代培養(yǎng)后，于翌年6 月移栽到穴盤(pán)，7 月移栽于露地，9 月移栽到溫室越冬留種；或8 月移栽到穴盤(pán)，9 月移栽于保護(hù)地栽培留種。由于6—8 月天氣炎熱、濕度低，花椰菜組培苗移栽成活率往往不足60%，且整個(gè)制種周期長(zhǎng)，造成了極大的資源和勞動(dòng)力浪費(fèi)。為此，筆者團(tuán)隊(duì)根據(jù)實(shí)際工作需要，探索出花椰菜組培苗溫室直接移栽成苗技術(shù)，經(jīng)過(guò)不斷完善和創(chuàng)新，該技術(shù)大幅縮短了組培苗繼代培養(yǎng)時(shí)間，并將組培苗移栽成活率提高至90%以上?，F(xiàn)將該技術(shù)總結(jié)如下，以期在花椰菜育種材料留種擴(kuò)繁過(guò)程中得以有效應(yīng)用與推廣。

1 組培苗煉苗

花椰菜組培苗由于長(zhǎng)時(shí)間在弱光條件下培養(yǎng)，長(zhǎng)勢(shì)較弱、莖葉細(xì)長(zhǎng)，若直接移栽到自然環(huán)境中，成活率極低，因此要在移栽前20 d（天）進(jìn)行煉苗，使組培苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境。選擇補(bǔ)充自然光，光照強(qiáng)度增加至5 000 lx，將光照時(shí)間從16 h（小時(shí)）縮短到10 h（小時(shí)），培養(yǎng)溫度由24 ℃降至15～20℃，以降低花椰菜組培苗的生長(zhǎng)速率，培養(yǎng)壯苗，促進(jìn)根系發(fā)育。

2 移栽時(shí)間選擇

當(dāng)花椰菜組培苗長(zhǎng)至三葉一心時(shí)即可進(jìn)行移栽，一般選擇9 月中旬至翌年1 月中旬直接移栽到溫室。移栽時(shí)間過(guò)早，外界溫度較高，濕度過(guò)低，移栽成活率低；移栽過(guò)晚，盛花期進(jìn)入5 月中旬以后受熱干風(fēng)的影響，花粉活力降低，授粉效果極差，獲得種子較少甚至絕收。

3 苗床準(zhǔn)備

在溫室內(nèi)選擇光照充足、通風(fēng)條件好、保溫效果優(yōu)的地塊建苗床，用微耕機(jī)將土打碎，做寬1.2 m 的高畦，畦面要平整，在畦面上打直徑20 cm、深10 cm 左右的圓形定植孔，孔間距50 cm。苗床晾曬7 d（天），使土壤保持良好的通透性。移栽前用2%春雷霉素水劑500 倍液+75%福美雙粉劑800 倍液噴灑畦面進(jìn)行消毒。

4 組培苗移栽

將馴化后的花椰菜組培苗從組培瓶中取出，用清水沖洗掉根部的培養(yǎng)基，輕拿輕放，以免弄傷幼苗，然后移栽到苗床上。不宜太深，用細(xì)土埋住根部即可，注意土壤不要壓到葉片，保持植株直立。移栽后每株苗澆水800 mL 即可，澆水過(guò)多濕度大，幼苗容易發(fā)生病害；澆水太少，幼苗容易失水干死。畦上鋪滴灌帶，覆蓋白色薄膜并壓實(shí)四周。在畦上搭建高1 m 的小拱棚，小拱棚外再加蓋一層白色薄膜，四周用土壓嚴(yán)，小拱棚內(nèi)保持一定的空氣濕度；外層薄膜上覆蓋40 目遮陽(yáng)網(wǎng)，以減少土壤水分蒸發(fā)，防止組培苗失水。

每天早晨日光溫室揭開(kāi)棉被1 h（小時(shí)）后，拍打掉小拱棚外層薄膜上的水珠，適當(dāng)放風(fēng)2 h（小時(shí)）。移栽7 d（天）后將幼苗從薄膜中摳出，用細(xì)土壓好薄膜，適當(dāng)揭去遮陽(yáng)網(wǎng)，增加光照，陽(yáng)光充足時(shí)每天11：00—14：00 覆蓋遮陽(yáng)網(wǎng)，減少水分蒸發(fā)。移栽15 d（天）后去除遮陽(yáng)網(wǎng)，小拱棚兩端放風(fēng)；移栽40 d（天）后除去二層薄膜，撤下小拱棚。

5 移栽后的田間管理

撤去小拱棚后檢查花椰菜組培苗的成活情況，拔去死株，保持通風(fēng)。當(dāng)植株結(jié)球抽枝后用短竹竿固定枝條，使枝條開(kāi)花結(jié)籽時(shí)不倒伏；開(kāi)花期套上硫酸紙袋進(jìn)行隔離和單株蕾期人工授粉。

田間管理不宜大水大肥，緩苗后每667 m2隨水追施三元復(fù)合肥（N-P-K 為15-15-15）20 kg，土壤保持見(jiàn)濕見(jiàn)干；授粉后每667 m2沖施磷酸二氫鉀10 kg。苗期主要預(yù)防霜霉病，結(jié)球期主要防治黑腐病，抽薹以后主要防治菌核??；3 種病害發(fā)生前或發(fā)生初期可用50%多菌靈可濕性粉劑1 000倍液+40%菌核凈可濕性粉劑1 500 倍液噴霧，間隔15 d（天）后使用75%百菌清可濕性粉劑500倍液+2%春雷霉素水劑500 倍液噴霧。蟲(chóng)害主要有甜菜夜蛾、紅蜘蛛和蚜蟲(chóng)等，防治紅蜘蛛、甜菜夜蛾可用42%甲維·茚蟲(chóng)威懸浮劑1 000 倍液 +10%高效氯氰菊酯懸浮劑1 500 倍液噴霧；蚜蟲(chóng)可用70%啶蟲(chóng)脒水分散劑1 500 倍液噴霧，共噴3 次，每次間隔14 d（天）；一般溫室底部靠近棚膜的位置蟲(chóng)害發(fā)生較重，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注，做到勤看勤防。

6 小結(jié)

組織培養(yǎng)作為一項(xiàng)成熟的技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于花椰菜育種，是獲得和保留花椰菜種質(zhì)資源的重要途徑（張志仙 等，2015），但組培苗不經(jīng)過(guò)穴盤(pán)或營(yíng)養(yǎng)缽培養(yǎng)直接進(jìn)行移栽，在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用較少。筆者應(yīng)用花椰菜組培苗溫室直接移栽成苗技術(shù)，使組培苗移栽時(shí)間從原來(lái)的6—8 月拓寬到9 月中旬至翌年1 月中旬，簡(jiǎn)化了以往先要移栽到穴盤(pán)培養(yǎng)等環(huán)節(jié)，減少了組培苗繼代培養(yǎng)次數(shù)，保證了組培苗不退化，同時(shí)有效解決了花椰菜組培苗移栽成活率低的問(wèn)題，簡(jiǎn)單易學(xué)，成本低廉。該技術(shù)的關(guān)鍵是選擇合適的移栽時(shí)間，如早熟品種由于移栽較晚，其春化時(shí)間早，往往花球長(zhǎng)毛、松散，甚至不能形成正常花球，直接出現(xiàn)綠蕾球，只能留種等到秋季種植后再調(diào)查生物學(xué)性狀。后續(xù)將對(duì)該項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行更深入的研究，不斷完善栽培技術(shù)和方法，使其在實(shí)際生產(chǎn)中得到更廣泛的應(yīng)用。