龐春秀 丁桂玲 國(guó)占寶 黃家興

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部授粉昆蟲(chóng)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100093）

1 前言

米團(tuán)花（Leucosceptrum canumSmith）是唇形科米團(tuán)花屬的一種大灌木至小喬木，高1.5～7 m，生于海拔400～1900 m 的林緣、水邊和路邊草地，在我國(guó)主要分布在滇中至滇南及西藏、四川等地，在國(guó)外主要分布在不丹、尼泊爾、印度東北部、緬甸、老撾和越南等地。米團(tuán)花也叫漬糖花、漬糖樹(shù)、羊巴巴、蜜蜂樹(shù)花等，是一種蜜粉源植物，其根和葉都具有藥用價(jià)值。米團(tuán)花的花序是由輪傘花序排列成圓柱狀的假穗狀花序，具有白色或粉紅色的筒狀花冠，花期為11月至翌年3月[1-3]。米團(tuán)花的花蜜呈棕黑色，蜜蜂采集米團(tuán)花花蜜釀造后形成具有黑色蜜色的蜂蜜，俗稱“黑蜜”，黑蜜是我國(guó)云南具有特色的一種蜂蜜，由于產(chǎn)量稀少而在蜂蜜市場(chǎng)上的價(jià)格較高。

蜜蜂對(duì)米團(tuán)花花蜜的采集與米團(tuán)花的開(kāi)花泌蜜習(xí)性密切相關(guān)。目前對(duì)于米團(tuán)花花蜜的研究主要集中在其色素的提取、化學(xué)成分及生物活性的分析方面[2-5]，對(duì)于米團(tuán)花開(kāi)花與泌蜜習(xí)性的研究較少。本研究觀察了花序開(kāi)花動(dòng)態(tài)以及單花的花期；測(cè)量了單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律以及單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期中每日的變化規(guī)律；同時(shí)分別測(cè)量了花序頂部、中部和底部三個(gè)區(qū)域內(nèi)單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律和不同區(qū)域的單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期中每日的變化規(guī)律。此外，還分析了花蜜顏色與花蜜糖濃度之間的聯(lián)系。本研究結(jié)果有助于更好了解米團(tuán)花的開(kāi)花與泌蜜習(xí)性，從而為管理蜂群提高對(duì)米團(tuán)花花蜜的采集提供一定的理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)地點(diǎn)與材料

云南省臨滄市滄源縣曼來(lái)村，長(zhǎng)勢(shì)良好的米團(tuán)花大灌木或喬木，觀測(cè)時(shí)間2022年2～3月。

2.2 試驗(yàn)器材

毛細(xì)玻璃管（華西醫(yī)科大學(xué)，0.1mm×100mm），手持糖量計(jì)（ATAGO，MASTER-50H），吸耳球。

2.3 試驗(yàn)方法

2.3.1 花序開(kāi)花動(dòng)態(tài)

在直徑為1 km 的米團(tuán)花大灌木及喬木區(qū)域內(nèi)隨機(jī)從30 個(gè)植株上選取30 個(gè)未開(kāi)的米團(tuán)花花序，在花序開(kāi)花前使用防蟲(chóng)網(wǎng)袋對(duì)整個(gè)花序進(jìn)行套袋處理，以防昆蟲(chóng)和鳥(niǎo)類對(duì)米團(tuán)花花蜜的采集。參照已有的研究方法，以花序中第1 朵單花盛開(kāi)時(shí)為開(kāi)花的起始階段，所有單花盛開(kāi)后作為花序開(kāi)花期的結(jié)束，同時(shí)統(tǒng)計(jì)花序上單花的花蕾期、初花期、盛花期和末花期的時(shí)長(zhǎng)[6,7]；統(tǒng)計(jì)不同花序的長(zhǎng)度以及花序上的單花數(shù)量。

2.3.2 花蜜采集及花蜜糖濃度測(cè)定

在套袋的30 個(gè)花序中隨機(jī)選取花序頂部、中部和底部同時(shí)有單花盛開(kāi)的20 個(gè)花序，在花序頂部、中部和底部區(qū)域內(nèi)各隨機(jī)標(biāo)記1 朵處于花蕾期的單花，共標(biāo)記60 朵單花。在單花盛花期內(nèi)，每日選取9∶30～10∶30、12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 三個(gè)時(shí)間段，使用毛細(xì)玻璃管小心地吸取每朵單花所分泌的花蜜并使用手持糖量計(jì)測(cè)量花蜜的糖濃度。同時(shí)，對(duì)盛花期內(nèi)及盛花期后收集到的每朵單花的花蜜顏色進(jìn)行分類。

2.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行表示，使用GraphPad Prism 8.0.2 進(jìn)行分析和繪圖。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 米團(tuán)花花序的開(kāi)花動(dòng)態(tài)

試驗(yàn)中觀察到米團(tuán)花花序上單花盛開(kāi)的順序不相同：部分花序的單花從花序下部逐漸往花序頂部盛開(kāi)；部分花序的單花由整個(gè)花序的單側(cè)開(kāi)始圍繞整個(gè)花序隨機(jī)盛開(kāi)。花序從出現(xiàn)花苞直至全部開(kāi)放5～7 天，花序從出現(xiàn)花苞至所有單花全部脫落約30 天。試驗(yàn)中隨機(jī)選擇的米團(tuán)花花序的長(zhǎng)度6～16 cm；花序上的單花數(shù)量隨花序的長(zhǎng)度不同而具有差異，約為194～575朵單花。

單花的整個(gè)花期約10 天，根據(jù)已有的研究將單花分為花蕾期、初花期、盛花期和末花期[7]。單花的花蕾期、初花期、盛花期和末花期如圖1所示。花蕾期(圖1(A))：花序上的單花從綠色的骨朵開(kāi)始至出現(xiàn)筒狀花冠的白色為止，約3 天；初花期(圖1(B))：?jiǎn)位ǖ陌咨矤罨ü趧偮堕_(kāi)至整朵單花完全舒展打開(kāi)，小于或等于1 天；盛花期(圖1(C))：?jiǎn)位ㄍ耆蜷_(kāi)并開(kāi)始泌蜜時(shí)進(jìn)入盛花期，約為3 天；末花期(圖1(D))：?jiǎn)位ǖ幕ü谶吘夐_(kāi)始變蔫枯萎時(shí)進(jìn)入末花期，末花期持續(xù)約3 天，末花期時(shí)單花的筒狀花冠和花絲、花藥逐漸萎縮；單花從花序上脫落后如圖1(E)所示。單花所分泌的花蜜被鳥(niǎo)類及昆蟲(chóng)取食后會(huì)更容易從花序上脫落。

圖1 米團(tuán)花花序中單花的花期

3.2 單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律如圖2(A)所示。米團(tuán)花單花泌蜜量呈現(xiàn)先下降，再稍微上升的變化趨勢(shì)。在9∶30～10∶30 時(shí)間段檢測(cè)到的泌蜜量最大(12.18±7.33μL)，在12∶30～13∶30 時(shí)間段的泌蜜量最小(1.95±1.09μL)。在一天的3 個(gè)檢測(cè)時(shí)間段中，米團(tuán)花單花泌蜜量存在極顯著差異(p＜0.01)。9∶30～10∶30 時(shí)間段的泌蜜量極顯著高于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時(shí)間段的泌蜜量(p＜0.01)，12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時(shí)間段的單花泌蜜量之間沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)。單花的花蜜糖濃度呈現(xiàn)由低到高的變化趨勢(shì)。15∶30～16∶30 時(shí)間段的花蜜糖濃度最高(19.21±1.76%)，9∶30～10∶30時(shí)間段的花蜜糖濃度最低(13.92±2.77%)。在一天的3個(gè)檢測(cè)時(shí)間段中，米團(tuán)花單花的花蜜糖濃度存在極顯著差異(p＜0.01)。9∶30～10∶30 時(shí)間段的花蜜糖濃度極顯著低于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30時(shí)間段的花蜜糖濃度(p＜0.01)，12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時(shí)間段的花蜜糖濃度之間沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)。

圖2 單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)每天的變化規(guī)律如圖2(B)所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，單花在盛花期第三天的15∶30～16∶30 時(shí)間段內(nèi)已經(jīng)采集不到花蜜，因此對(duì)單花在盛花期3 天的變化規(guī)律進(jìn)行分析。單花在盛花期內(nèi)每天的泌蜜量存在極顯著差異(p＜0.01)。單花在盛花期第3 天的泌蜜量極顯著低于第1 天和第2 天(p＜0.01)，而第1 天和第2 天的單花泌蜜量間沒(méi)有差異(p＞0.05)。單花泌蜜量在盛花期內(nèi)呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢(shì)。在盛花期第2 天檢測(cè)到的泌蜜量最高(9.43±8.88μL)，在第3 天的泌蜜量最低(1.76±1.85μL)。單花的花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)沒(méi)有差異(p＞0.05)?；厶菨舛仍谑⒒ㄆ诘? 天最高(17.68±1.02%)，在第1 天最低(16.34±4.61%)。

3.3 花序內(nèi)不同區(qū)域單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

在花序的三個(gè)區(qū)域中，中部區(qū)域單花的泌蜜量最高，其次是底部區(qū)域，頂部區(qū)域單花的泌蜜量最低（圖3(A)(C)）。頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最高，其次是中部區(qū)域，底部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最低（圖3(B)(D)）。

花序中不同區(qū)域的單花泌蜜量在一天中的不同時(shí)間段之間存在極顯著差異(p＜0.01)，花序頂部、中部及底部的單花在9∶30～10∶30 的泌蜜量都極顯著高于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30(p＜ 0.01)；不同區(qū)域的單花的泌蜜量之間在3 個(gè)時(shí)間段內(nèi)均沒(méi)有明顯差異(p＞0.05)；中部區(qū)域的單花在9∶30～10∶30時(shí)間段的泌蜜量達(dá)到最高(13.86±8.34μL)，頂部區(qū)域的單花在12∶30～13∶30 的泌蜜量最低(1.75±1.11μL)（圖3(A)）。

圖3 不同區(qū)域內(nèi)的單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

花序中不同區(qū)域內(nèi)單花的花蜜糖濃度在一天中的不同時(shí)間段之間也存在極顯著差異(p ＜0.01)，花序頂部、中部和底部的單花在9∶30～10∶30的花蜜糖濃度都極顯著低于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30(p＜0.01)，3 個(gè)區(qū)域內(nèi)單花的花蜜糖濃度在12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 之間均沒(méi)有顯著差異(p＞0.05)；不同區(qū)域的單花花蜜糖濃度之間在3 個(gè)時(shí)間段內(nèi)均無(wú)顯著差異(p＞0.05)，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度在15∶30～16∶30 最高(20.63±3.34%)，底部區(qū)域單花花蜜糖濃度在9∶30～10∶30 最低(13.23±2.17%)（圖3(B)）。

頂部、中部和底部區(qū)域內(nèi)的單花泌蜜量在盛花期內(nèi)具有極顯著變化(p＜0.01)，三個(gè)區(qū)域的單花在盛花期第3 天的泌蜜量極顯著低于盛花期第1 天和第2 天(p＜0.01)，在盛花期第1 天和第2 天的單花泌蜜量之間沒(méi)有明顯差異(p＞0.05)；不同區(qū)域之間的單花泌蜜量均無(wú)差異(p＞0.05)，中部區(qū)域內(nèi)單花在盛花期第2 天泌蜜量最高(10.77±9.96μL)，頂部區(qū)域的單花在盛花期第3 天泌蜜量最低(1.54±1.86μL)（圖3(C)）。

花序中不同區(qū)域的單花花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)沒(méi)有差異(p＞0.05)，花序底部、中部和頂部之間的單花花蜜糖濃度亦無(wú)差異(p＞0.05)，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度在盛花期第3 天最高(18.13±0.88%)，底部區(qū)域單花花蜜糖濃度在盛花期第2天最低(14.55±0.99%)（圖3(D)）。

3.4 花蜜顏色與花蜜糖濃度

盛花期內(nèi)收集到的單花花蜜呈現(xiàn)出不同的顏色，大致可以分為：淺紅色(圖4：A)、紅色(圖4：B)和深紅色(圖4：C)。盛花期之后的花蜜呈現(xiàn)紫黑色(圖4：D)。通過(guò)分類統(tǒng)計(jì)，淺紅色花蜜的糖濃度范圍為8%～15%，紅色花蜜的糖濃度范圍為13%～20%，深紅色花蜜的糖濃度范圍為15%～25%，而紫黑色花蜜的糖濃度則大于50%。

圖4 花蜜的顏色

4 討論

米團(tuán)花花序上的單花泌蜜量在9∶30～10∶30最高，可能是由于單花在夜間也進(jìn)行泌蜜以及早上空氣濕度較大造成的。在12∶30～13∶30 以及15∶30～16∶30 檢測(cè)到的單花泌蜜量較低、花蜜糖濃度升高，則可能是由于中午氣溫上升而導(dǎo)致花蜜內(nèi)水分蒸發(fā)，從而造成花蜜泌蜜量下降、花蜜糖濃度增加。在盛花期的第1天至第2天，單花泌蜜量逐漸增高，但在盛花期第3 天出現(xiàn)顯著降低，猜測(cè)盛花期的前兩天是單花進(jìn)行泌蜜的主要時(shí)期。

將花序的頂部、中部和底部三個(gè)區(qū)域內(nèi)的單花單獨(dú)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn)，在每日的不同時(shí)間段以及盛花期不同時(shí)間內(nèi)，中部區(qū)域的單花泌蜜量最高，其次是底部區(qū)域，頂部區(qū)域的單花泌蜜量最低。這可能是由于頂部區(qū)域單花盛開(kāi)的方向偏上，花蜜受到太陽(yáng)的照射面積更大，其中的水分更容易蒸發(fā)，從而造成頂部區(qū)域的單花泌蜜量最低而花蜜糖濃度最高。底部區(qū)域單花盛開(kāi)方向偏下，整個(gè)花序中較長(zhǎng)的花藥和花絲的遮擋作用減少了大部分陽(yáng)光對(duì)底部區(qū)域單花的照射，降低了該區(qū)域單花花蜜水分的蒸發(fā)，因此造成底部區(qū)域花蜜糖濃度最低。

研究發(fā)現(xiàn)，花蜜的糖濃度會(huì)影響蜜蜂的采集，當(dāng)花蜜含糖量低于8%時(shí)，蜜蜂對(duì)花蜜不進(jìn)行采集或者采集的積極性較低；當(dāng)花蜜含糖量大于8% 時(shí)，蜜蜂才開(kāi)始采集。外界蜜粉源比較豐富時(shí)，花蜜的含糖量達(dá)到 15%～20%以上時(shí)蜜蜂才對(duì)花蜜進(jìn)行采集[8]。因此，可以根據(jù)米團(tuán)花花蜜的糖濃度變化合理安排蜂群采集花蜜的時(shí)間，有利于提高蜂群的采集積極性。研究發(fā)現(xiàn)，花蜜的粘度也會(huì)影響傳粉者對(duì)花蜜的采集[9]，今后可進(jìn)一步分析米團(tuán)花花蜜的各種理化指標(biāo)對(duì)蜜蜂采集行為的影響。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，米團(tuán)花的花蜜糖濃度隨著花蜜的顏色加深而增高，說(shuō)明花蜜的糖濃度與調(diào)控花蜜顏色的物質(zhì)含量具有一定的相關(guān)性?；壑械姆宇愇镔|(zhì)可以使花蜜呈現(xiàn)出紅色、黃色、琥珀色、棕色、黑色等顏色。深色的花蜜可能是由于花蜜中酚類物質(zhì)的積累，同時(shí)其可能會(huì)形成苦味，導(dǎo)致部分傳粉者拒絕采集[10-12]。已有研究證明米團(tuán)花蜜中三個(gè)呈色化合物單體與米團(tuán)花花蜜呈現(xiàn)棕黑色有關(guān)，這三個(gè)呈色化合物單體均為氨基酸-對(duì)苯醌類化合物，其中的兩個(gè)呈色化合物單體1-[4-(3-羧基丙氨基)-3,6-二氧代環(huán)己基-1,4-二烯基]-吡咯烷-2-羧酸(GAPBQ)和1-[4-(3-氨甲酰基-1-羧基丙氨基)-3,6-二氧代-環(huán)己-1,4-二烯基]-吡咯烷-2-羧酸(GPBQ)被推測(cè)在米團(tuán)花蜜釀造的過(guò)程中形成，而另外一個(gè)呈色化合物單體脯氨酸-對(duì)苯二醌共軛體(DPBQ)則被報(bào)道為米團(tuán)花蜜的主要色素物質(zhì)[13,14]。

5 結(jié)論

米團(tuán)花的一個(gè)花序在盛花期內(nèi)總的泌蜜量為5～15 mL。在一天的三個(gè)檢測(cè)時(shí)間段中，單花的泌蜜量在9∶30～10∶30 最大，單花的花蜜糖濃度在15∶30～16∶30 最高。在盛花期中，花序上的單花在盛花期第2 天的泌蜜量最大，在盛花期第3 天花蜜糖濃度最高。在花序不同的區(qū)域中，花序中部區(qū)域的單花泌蜜量最大，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最高。此外，花蜜的糖濃度和花蜜的顏色具有一定的關(guān)聯(lián)，花蜜的糖濃度可能影響蜂群對(duì)米團(tuán)花花蜜的采集。