慢性腎臟病患者血清HMGA2蛋白、FGF-23水平與腎功能損傷程度的相關(guān)性研究

張瑞，何娜，郗雋

西電集團(tuán)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 701177

慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)是由各種原發(fā)或者繼發(fā)腎小球腎炎、腎小管損傷和腎血管病變導(dǎo)致的腎臟損傷或腎功能障礙[1]。CKD根據(jù)腎小球?yàn)V過(guò)率(glomerular filtration rate，GFR)可分為5 期，進(jìn)展至晚期時(shí)需進(jìn)行血液透析或腎臟替代治療[2]。多項(xiàng)研究表明，CKD早期發(fā)現(xiàn)和早期干預(yù)可顯著降低并發(fā)癥產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)，恢復(fù)腎功能，但CKD早期無(wú)特異性表現(xiàn)，多數(shù)患者確診時(shí)腎損傷已達(dá)中晚期，腎功能損傷可逆性較低，嚴(yán)重影響治療效果[3-4]。高遷移率族蛋白A2(high mobility group protein A1，HMGA2)是一種非組蛋白染色體蛋白，可通過(guò)與DNA的高親和性調(diào)控誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄，在維持干細(xì)胞分化潛能和自我更新方面起關(guān)鍵作用，在胚胎期高表達(dá)，在成熟細(xì)胞中幾乎不表達(dá)，但在腫瘤細(xì)胞中存在高表達(dá)[5]。研究表明，在產(chǎn)生間質(zhì)的轉(zhuǎn)化細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中，HMGA2 存在高表達(dá)，HMGA2 已被證實(shí)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，目前與CKD 相關(guān)研究較少，但上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與CKD 密切相關(guān)，HMGA2 可能與CKD 腎功能損傷存在一定相關(guān)性[6]。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(fibroblast growth factor 23，F(xiàn)GF-23)是一種由骨細(xì)胞生成，可促進(jìn)新血管生成、修復(fù)受損細(xì)胞的磷酸鹽調(diào)節(jié)激素，與CKD 的發(fā)展密切相關(guān)[7]。本研究旨在分析血清HMGA2蛋白、FCF-23 水平與腎功能損傷程度的相關(guān)性，以期指導(dǎo)CKD患者的早期發(fā)現(xiàn)與干預(yù)治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年2 月至2022 年3 月在西電集團(tuán)醫(yī)院診治的108例CKD患者(CKD組)為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合改善全球腎臟病預(yù)后組織(kidney disease：improVing 910bal outcomes，KDIGO)2012 年發(fā)布的《慢性腎臟疾病評(píng)估和管理的臨床實(shí)踐診療指南》[8]中的CKD 診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)非血液透析者；(3)所有患者臨床資料完整，均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腎移植者；(2)合并有嚴(yán)重心、肝、腦等重要器官疾病或腫瘤者；(3)存在免疫系統(tǒng)功能障礙者；(4)認(rèn)知障礙或無(wú)法溝通者；(5)急性腎損傷者；(6)近3個(gè)月服用免疫抑制劑者。CKD組患者中男性57 例，女性51 例；年齡33～65 歲，平均(48.13±7.13)歲；糖尿病腎病35 例，腎小球腎炎32 例，高血壓腎小動(dòng)脈硬化41 例。根據(jù)國(guó)際KDIGO 指南[8]的CKD 分期標(biāo)準(zhǔn)，以GFR 為標(biāo)準(zhǔn)將患者劃分為1～5 期，其中A 組42例(1～2期)、Β組45例(3～4期)和C 組21例(5 期)。選取同期參加體檢的健康者108 例作為對(duì)照組，其中男性60 例，女性48 例；年齡35～67 歲，平均(49.67±6.58)歲。CKD組和對(duì)照組受檢者的性別和年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法

1.2.1 檢測(cè)方法 (1)HMGA2 水平：抽取兩組受檢者晨間外周血5 mL，室溫下靜置30 min后離心取上層血清，-80℃保存，使用購(gòu)于上海彩佑實(shí)業(yè)有限公司的ELISA 試劑盒檢測(cè)HMGA2 蛋白水平(貨號(hào)：IHC0100731)；(2) FCF-23 水平：取上述外周血采用ELISA 法嚴(yán)格按照試劑盒操作方法檢測(cè)FCF-23 水平(貨 號(hào)：EH189RΒ)；(3)尿 素 氮(blood urea nitrogen，ΒUN)水平：取上述外周血采用北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)的PUZS-600A/Β 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ΒUN水平。

1.2.2 觀察指標(biāo) (1)比較CKD組和對(duì)照組受檢者的HMGA2、FCF-23及ΒUN水平；(2)比較不同分期CKD 患者的HMGA2、FCF-23 及ΒUN 水平；(3)分析CKD患者血清HMGA2、FCF-23水平與腎功能損傷的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間兩兩采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差；采用Pearson 相關(guān)系數(shù)分析CKD 患者血清HMGA2、FCF-23 水平與腎功能損傷的相關(guān)性。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)α=0.05，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CKD組和對(duì)照組受檢者的HMGA2、FCF-23及ΒUN 水平比較 CKD 組患者的HMGA2、FCF-23及ΒUN 水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。

表1 CKD 組和對(duì)照組受檢者的HMGA2、FCF-23 及BUN 水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGA2, FCF-23, and BUN between CKD group and control group(±s)

表1 CKD 組和對(duì)照組受檢者的HMGA2、FCF-23 及BUN 水平比較(±s)Table 1 Comparison of HMGA2, FCF-23, and BUN between CKD group and control group(±s)

組別CKD組對(duì)照組t值P值例數(shù)108 108 HMGA2(ng/mL)3.59±1.42 0.96±0.43 18.422 0.001 FCF-23(pg/mL)432.16±43.15 306.55±35.63 23.327 0.001 ΒUN(μmol/L)6.43±1.46 4.35±1.27 11.171 0.001

2.2 不同分期CKD 患者的HMGA2、FCF-23 及ΒUN水平比較 A 組患者的血清HMGA2、FCF-23 及ΒUN 水平明顯低于Β 組和C 組，而Β 組患明顯低于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同分期CKD患者的HMGA2、FCF-23及BUN水平比較(±s)Table 2 Comparison of HMGA2,FCF-23, and BUN among patients with different CKD staging(±s)

表2 不同分期CKD患者的HMGA2、FCF-23及BUN水平比較(±s)Table 2 Comparison of HMGA2,FCF-23, and BUN among patients with different CKD staging(±s)

注：與A組患者比較，aP＜0.05，與Β組患者比較，bP＜0.05。Note:Compared with group A,aP＜0.05,Compared with group Β,bP＜0.05.

組別A組Β組C組F值P值例數(shù)42 45 21 HMGA2(ng/mL)3.01±0.97 3.42±1.24a 5.13±2.01ab 18.130 0.001 FCF-23(pg/mL)398.53±40.37 444.86±46.34a 472.19±48.74ab 22.232 0.001 ΒUN(μmol/L)4.87±1.42 6.98±2.07a 8.37±2.41ab 26.409 0.001

2.3 CKD患者血清HMGA2、FCF-23水平與腎功能損傷的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，CKD組患者血清HMGA2、FCF-23水平與ΒUN呈明顯正相關(guān)(r=0.513、0.425，P＜0.05)。

3 討論

CKD 是一種病因較為復(fù)雜且所有年齡均可發(fā)生的進(jìn)展性疾病，全球發(fā)病率為10.1%～13.3%，因并發(fā)癥多，治療費(fèi)用高，已成為世界公共衛(wèi)生問(wèn)題[9-10]。HMGA2蛋白具有HMGA家族特征性A-T結(jié)構(gòu)，其所具有的GRP三肽模式對(duì)DNA單鏈有強(qiáng)親和力，可誘導(dǎo)DNA分子發(fā)生彎曲、拉伸和解旋，可影響基因轉(zhuǎn)錄[11]。HMGA2蛋白可直接作用于轉(zhuǎn)錄因子Snail 的調(diào)節(jié)區(qū)域使其發(fā)生轉(zhuǎn)錄，刺激多種分子促進(jìn)腎小管上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生腎功能損傷[12]。李凱等[13]提出，HMGA2與腫瘤侵襲和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化關(guān)系密切。郭哲等[14]發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病患者血清HMGA2 蛋白水平隨腎功能下降而上升，且與腎小管間質(zhì)病變程度密切相關(guān)。在本研究中，CKD組HMGA2水平高于對(duì)照組，不同分期CKD患者中，A組CKD 患者血清HMGA2 水平明顯低于Β 組和C 組患者，Β 組 患 者 血 清HMGA2 水平低于C 組患者(P＜0.05)，結(jié)果說(shuō)明，血清HMGA2蛋白水平可反映腎功能損傷嚴(yán)重程度，HMGA2可作用于腎臟細(xì)胞，調(diào)控腎小管細(xì)胞分化和纖維化，CKD患者體內(nèi)HMGA2 蛋白表達(dá)異常，加快腎小管細(xì)胞纖維化進(jìn)程，腎小球細(xì)胞進(jìn)一步受損，進(jìn)而導(dǎo)致腎功能下降。

FGF-23 由骨細(xì)胞分泌，主要作用于腎臟，可調(diào)節(jié)磷的重吸收和維生素D 的代謝[15]。除在腎臟外，F(xiàn)GF-23 蛋白在小腸、腦、甲狀腺和肝等組織和器官也有不同程度的表達(dá)，F(xiàn)GF-23可直接作用于甲狀腺，調(diào)節(jié)PTH的分泌，進(jìn)而調(diào)控機(jī)體內(nèi)鈣磷等礦物離子代謝平衡[16]。閆奇奇等[17]發(fā)現(xiàn)，在CKD 早期，腎功能開(kāi)始下降，其他指標(biāo)正常時(shí)，血清FGF-23蛋白水平出現(xiàn)代償性升高，維持機(jī)體內(nèi)礦物離子平衡。楊雄等[18]研究發(fā)現(xiàn)，CKD患者血清FGF-23蛋白濃度越高，肌酐清除率越低，越易發(fā)生血管受損和血管鈣化等并發(fā)癥。在本研究中，CKD組血清FCF-23水平高于對(duì)照組，不同分期CKD患者中，A組CKD患者血清FCF-23水平明顯低于Β組和C組患者，Β組患者血清FCF-23水平低于C 組患者(P＜0.05)，結(jié)果說(shuō)明，血清FCF-23 水平與CKD 分期增加和腎功能損傷程度增加有關(guān)，可能與FCF-23 參與鈣磷等礦物離子的代謝有關(guān)。蛋白質(zhì)的磷酸化是維持細(xì)胞生命活動(dòng)的基礎(chǔ)之一，CKD患者體內(nèi)FCF-23 高表達(dá)會(huì)引起機(jī)體內(nèi)磷代謝紊亂，影響細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)磷酸化水平，損傷腎小球細(xì)胞，同時(shí)FCF-23 還可通過(guò)調(diào)節(jié)絲裂原激活的蛋白激酶信號(hào)通路影響腎小球細(xì)胞的增殖和代謝，F(xiàn)CF-23高表達(dá)會(huì)抑制腎小球細(xì)胞增殖和代謝導(dǎo)致腎小球細(xì)胞減少進(jìn)一步損傷腎功能，因而血清FCF-23 水平與腎臟損傷程度關(guān)系密切，與田浩等[19]研究一致。

ΒUN 主要由腎小球排出，其血清含量異常升高時(shí)，提示腎小球細(xì)胞受損，ΒUN 是臨床上判斷腎功能的重要指標(biāo)。馮小娟等[20]發(fā)現(xiàn)CKD 3～5 期患者血清FCF-23 水平與磷和PTH 正相關(guān)明顯，與GFR 成負(fù)相關(guān)，可通過(guò)調(diào)節(jié)血磷水平調(diào)控FCF-23 蛋白水平進(jìn)而減少并發(fā)癥的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)，CKD 組患者血清HMGA2 及FCF-23 蛋白水平與ΒUN 呈正相關(guān)(P＜0.05)，結(jié)果說(shuō)明隨著CKD 分期增加，患者血清HMGA2 及FCF-23 水平增加，腎功能下降明顯，隨著患者病情加劇，患者體內(nèi)血清HMGA2及FCF-23異常性表達(dá)增加，腎功能也隨之下降，因而在疾病后期可通過(guò)調(diào)控HMGA2及FCF-23水平提高患者生存質(zhì)量。

綜上所述，與健康對(duì)照組相比，CKD 患者血清HMGA2 蛋白、FCF-23 水平升高，且血清HMGA2 蛋白、FCF-23水平與腎功能損傷程度有關(guān)。