張相國(guó)

摘要：【目的】研究不同殺菌劑對(duì)西紅柿灰霉病的防治效果，篩選出防治西紅柿灰霉病的有效藥劑?！痉椒ā抗苍O(shè)置7個(gè)處理，分別為CK處理（空白對(duì)照）、T1處理（40%施佳樂懸浮劑800倍液）、T2處理（20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液）、T3處理（50%福美雙可濕性粉劑800倍液）、T4處理（70%百菌清可濕性粉劑800倍液）、T5處理（50%撲海因可濕性粉劑800倍液）、T6處理（50%甲基托布津可濕性粉劑800倍液），對(duì)上述藥劑進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定及田間病害防治效果試驗(yàn)?！窘Y(jié)果】6種藥劑中，T1（40%施佳樂懸浮劑800倍液）及T2（20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液）抑菌效果及田間防治效果最佳，其EC50值分別為6.9349、8.8478，對(duì)西紅柿葉片灰霉病的平均防效分別為89.76%、87.01%，對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的平均防效分別為83.11%、77.84%，施用這兩種藥劑西紅柿增產(chǎn)率可以達(dá)到394.61%、390.55%。【結(jié)論】40%施佳樂懸浮劑800倍液及20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液可有效防治西紅柿灰霉病。

關(guān)鍵詞：殺菌劑；西紅柿；灰霉??；防治效果

近年來，西紅柿栽培面積日益擴(kuò)大，其病害問題逐年加重，已成為西紅柿生產(chǎn)過程中的一項(xiàng)重大障礙。西紅柿灰霉病是由灰葡萄孢菌感染而引發(fā)的一種重要病害，該病在全國(guó)范圍內(nèi)普遍發(fā)生，造成了嚴(yán)重的減產(chǎn)減收問題。一般地塊在發(fā)生灰霉病后，西紅柿?xí)p產(chǎn)20%-40%，而重癥地塊可能會(huì)減產(chǎn)60%以上。西紅柿灰霉病主要通過菌絲體以及分生孢子的形式存在于病殘?bào)w內(nèi)，或者以菌核的方式于土壤內(nèi)越冬或者越夏[1]。若條件適宜，經(jīng)菌核萌發(fā)的分生孢子可在氣流、雨水、農(nóng)事操作或者露水等作用下散播，侵入到花器或者傷口內(nèi)而染病。低溫高濕是灰霉病的主要發(fā)病因素，在18-23℃的溫度范圍內(nèi)病菌最易滋生。在溫度為20℃，相對(duì)濕度持續(xù)超過90%時(shí)病害最為嚴(yán)重，該病一旦發(fā)生傳播速度極快，會(huì)對(duì)西紅柿的產(chǎn)量及品質(zhì)造成嚴(yán)重影響，給種植戶造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

當(dāng)前，防治西紅柿灰霉病的主要方式為化學(xué)防治，常見防治藥劑有百菌清、異菌脲、嘧霉胺等。長(zhǎng)期使用化學(xué)藥劑尤其是內(nèi)吸性殺菌劑，極容易導(dǎo)致灰葡萄孢菌產(chǎn)生抗藥性，影響其防治效果[2]?；诖?，需要測(cè)量灰葡萄孢菌對(duì)常見化學(xué)殺菌劑的抗性水平，篩選出防治效果優(yōu)異的殺菌劑，以滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)需求。本文對(duì)當(dāng)前市場(chǎng)上常見的集中藥劑測(cè)量了室內(nèi)抑菌能力及田間病害防治效果，希望能夠?yàn)槲骷t柿灰霉病的防治提供理論依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 病原菌

2019年，由某村采摘灰霉病西紅柿，對(duì)灰霉病菌分離及純化后，接種于PDA培養(yǎng)基（土豆200g、葡萄糖20g、瓊脂15-20g、水1000ml），并置于1-4℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 供試藥劑

50%甲基托布津可視性粉劑由日本曹達(dá)株式會(huì)社提供；70%百菌清可濕性粉劑由日本曹達(dá)株式會(huì)社提供；20%禾益1號(hào)懸浮劑由浙江禾益農(nóng)化有限公司提供；50%撲海因可濕性粉劑由法國(guó)羅納普朗克公司提供；50%福美雙可濕性粉劑由天津農(nóng)藥廠提供；40%施佳樂懸浮劑由法國(guó)安萬特作物科學(xué)公司提供。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定

采用抑制灰葡萄孢菌絲生長(zhǎng)率的方法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。在毒力預(yù)備試驗(yàn)基礎(chǔ)之上，采用無菌水將上述供試藥劑逐步稀釋為20、50、100、200mg/kg，分別將各濃度配比設(shè)置為帶藥PDA平板（培養(yǎng)基配方組成為20g瓊脂、10g葡萄糖、2g磷酸二氫鉀、2gDL-天門冬酰胺、1L蒸餾水），在每個(gè)培養(yǎng)皿中央位置接種一個(gè)直徑為5mm的灰霉病菌。以不加藥劑作為對(duì)照處理，各個(gè)處理均重復(fù)5次。將培養(yǎng)皿置于23℃下恒溫培養(yǎng)4日后，對(duì)各個(gè)處理菌落直徑進(jìn)行測(cè)量。各個(gè)菌落均需測(cè)量?jī)蓚€(gè)垂直的直徑，并計(jì)算其平均值，進(jìn)而獲取菌落凈生長(zhǎng)直徑。利用下式計(jì)算抑菌率：

生長(zhǎng)抑制率（%）=（對(duì)照菌落凈直徑-處理菌落凈直徑）/對(duì)照菌落凈直徑*100%

將抑菌率作為依變量y，將所用藥劑質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)值作為自變量x，利用最小二乘法建立“質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)-幾率值”直線方程，即y=a+bx。當(dāng)y=5時(shí)，求得x值的負(fù)對(duì)數(shù)，即EC50值（半最大效應(yīng)濃度，即能引起50%最大效應(yīng)的濃度）。

1.4 田間大棚防治試驗(yàn)

1.4.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于山東省菏澤市鄄城縣蔬菜基地大棚內(nèi)進(jìn)行，試驗(yàn)西紅柿品種為早豐西紅柿。大棚內(nèi)土壤為沙壤土，該大棚已連續(xù)種植西紅柿3年，歷年來灰霉病發(fā)病均較為嚴(yán)重。在大棚內(nèi)采取相同的管理方式，在試驗(yàn)期間將大棚內(nèi)溫度控制在10-20℃，大棚內(nèi)濕度超過85%。

1.4.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)共設(shè)置7個(gè)處理，分別為CK處理（空白對(duì)照）、T1處理（40%施佳樂懸浮劑800倍液）、T2處理（20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液）、T3處理（50%福美雙可濕性粉劑800倍液）、T4處理（70%百菌清可濕性粉劑800倍液）、T5處理（50%撲海因可濕性粉劑800倍液）、T6處理（50%甲基托布津可濕性粉劑800倍液），各個(gè)處理分別重復(fù)三次，共設(shè)置21個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，各小區(qū)面積為50m2，采用塑料薄膜將小區(qū)隔離開來。分別在3月22日、3月29日、4月5日對(duì)西紅柿噴藥一次，各個(gè)小區(qū)用水量均為5kg。

1.4.3 發(fā)病強(qiáng)度登記劃分

西紅柿葉片被害等級(jí)見表1，西紅柿果實(shí)被害等級(jí)見表2。

1.4.4 調(diào)查方法

在各個(gè)小區(qū)內(nèi)定株10棵并進(jìn)行調(diào)查，分別取植株上部、中部、下部葉片各10片。在果實(shí)調(diào)查中，對(duì)定株上的全部果實(shí)調(diào)查。在首次噴藥前調(diào)查發(fā)病基數(shù)，在最后一次噴藥后7日調(diào)查防治效果。對(duì)西紅柿灰霉病葉病情指數(shù)、果實(shí)病情指數(shù)計(jì)算，并計(jì)算校正防效。

校正防效（%）=（對(duì)照區(qū)病情指數(shù)增長(zhǎng)率-處理區(qū)病情指數(shù)增長(zhǎng)率）/對(duì)照區(qū)病情指數(shù)增長(zhǎng)率*100%

在西紅柿成熟后，收獲西紅柿并計(jì)算產(chǎn)量及增產(chǎn)率。

增產(chǎn)率（%）=（處理區(qū)西紅柿產(chǎn)量/對(duì)照區(qū)西紅柿產(chǎn)量-1）*100%

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果

在包含有藥物的PDA平板上，西紅柿灰霉病菌的生長(zhǎng)受到了一定程度的抑制，在培養(yǎng)4日后，不同藥物、不同濃度配比菌落直徑及抑菌率見表3。從表3中可以看出，隨著用藥濃度的增加，各個(gè)藥劑抑菌率均持續(xù)上升。在同一用藥濃度下，以40%施佳樂懸浮劑抑菌率為最高，其余依次為20%禾益1號(hào)懸浮劑、50%福美雙可濕性粉劑。在藥物濃度為200mg/kg 時(shí)，40%施佳樂懸浮劑抑菌率可以達(dá)到92.83%，20%禾益1號(hào)懸浮劑抑菌率為90.96%，50%福美雙可濕性粉劑抑菌率達(dá)到了82.46%

以殺菌劑有效成分含量對(duì)數(shù)值為x值、以菌絲生長(zhǎng)抑制率概率值為y值，計(jì)算毒力回歸方程及EC50值，計(jì)算結(jié)果見表4。從表4中可以看出，T1、T2、T3、T4、T5、T6對(duì)西紅柿灰霉病菌的EC50值分別為6.9349、8.8478、10.6512、16.9242、38.6826、99.7918，通過比較EC50值，可以認(rèn)為，T1、T2、T3對(duì)西紅柿灰霉病菌具備較強(qiáng)的抑菌性，其抑菌性明顯高于T4、T5、T6。

2.2 不同殺菌劑對(duì)西紅柿灰霉病的田間防治效果

2.2.1 不同殺菌劑對(duì)西紅柿葉片灰霉病的田間防治效果

不同殺菌劑對(duì)西紅柿葉片灰霉病的田間防治效果見表5。從表5中可以看出，在藥劑處理前，西紅柿葉片發(fā)病較輕，藥劑的施用可對(duì)病情的發(fā)展有效控制。試驗(yàn)結(jié)果表明，在上述6種藥劑中，T1、T2的防效較為明顯，平均防效分別為89.76%、87.01%，顯著優(yōu)于其他處理。T3、T4兩種藥劑對(duì)西紅柿葉灰霉病的防治效果也較好，平均防效分別為73.12%、62.89%，明顯優(yōu)于T5、T6兩個(gè)處理。后兩者對(duì)西紅柿灰霉病的防效表現(xiàn)一般，表明西紅柿灰霉病菌已對(duì)上述兩種殺菌劑產(chǎn)生抗藥性。

2.2.2 不同殺菌劑對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的田間防治效果

不同殺菌劑對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的田間防治效果見表6。從表6可以看出，在施用藥劑后，西紅柿灰霉病病情得到了不同程度的控制。在幾個(gè)藥劑處理當(dāng)中，T1、T2防效較高并較為穩(wěn)定，其平均防效分別為83.11%及77.84%，二者間差異不顯著，但是明顯高于其他藥劑處理；T3、T4、T5三種藥劑對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的防治效果無顯著差異，平均防效分別為62.85%、58.96%、56.73%，三者防效居中，明顯高于T6；T6對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的田間防效最差，僅49.51%。試驗(yàn)結(jié)果表明，T1、T2對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的田間防治效果良好，持效期長(zhǎng)，推薦使用；T3、T4、T5三種藥劑對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病的防治效果一般，在生產(chǎn)上也可以使用；而T6對(duì)西紅柿果實(shí)灰霉病防治效果較差，可能因?yàn)樵谠摰貐^(qū)已長(zhǎng)期使用這一藥物，灰霉病菌對(duì)這一藥劑已產(chǎn)生抗藥性，不宜在生產(chǎn)上繼續(xù)使用。

2.2.3 不同殺菌劑對(duì)西紅柿產(chǎn)量的影響

不同殺菌劑對(duì)西紅柿產(chǎn)量的影響見表7。從表7可以看出，西紅柿灰霉病的發(fā)生程度會(huì)對(duì)西紅柿的產(chǎn)量造成較大影響。在西紅柿灰霉病防治過程中，所選擇防治藥劑不適宜或者防治效果不佳，會(huì)對(duì)溫室西紅柿的產(chǎn)量造成嚴(yán)重影響，若藥劑防治效果良好，可顯著提升大棚西紅柿的產(chǎn)量。研究表明，在6種不同的防治藥劑中，T1、T2、T3、T4四種藥劑可有效降低西紅柿灰霉病的發(fā)生概率，顯著提升西紅柿的產(chǎn)量，相較于對(duì)照處理，西紅柿增產(chǎn)率達(dá)到了298.55%-394.61%，其中以T1處理西紅柿產(chǎn)量為最高。

3 討論

殺菌劑對(duì)病原菌的EC50值是衡量殺菌劑對(duì)病原菌抑菌效果的一個(gè)重要標(biāo)準(zhǔn)，這一指標(biāo)可為殺菌劑進(jìn)行實(shí)際藥效試驗(yàn)提供參考及借鑒。EC50值越小，表明藥劑對(duì)西紅柿灰霉病菌的抑制效果越強(qiáng)，其實(shí)際防治效果越好[3]。

梁紅新等[4]發(fā)現(xiàn)，50%啶酰菌胺1000倍液、400g/L施佳樂l000倍液、50％異菌脲1000倍液對(duì)西紅柿葉片和果實(shí)灰霉病具備良好的防治效果，可輪換使用。賢小勇等發(fā)現(xiàn)[5]，400g/L嘧霉胺懸浮劑，250g/L嘧菌酯懸浮劑和50％腐霉利可濕性粉劑的防效分別為86.4％、82.3％和80.5％，高于其他供試藥劑的防治效果。王勇等[6]對(duì)6種殺菌劑對(duì)西紅柿灰霉病菌的抑制作用和防治效果進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)25%菌思奇EC、施佳樂40%SC對(duì)西紅柿灰霉病的防治效果較好。本研究結(jié)果表明，40%施佳樂懸浮劑800倍液及20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液的抑菌效果最好。40%施佳樂懸浮劑是以保護(hù)作用、治療病菌潛伏侵染及抑制病害擴(kuò)展為特點(diǎn)的殺菌劑，具有抑制真菌病原侵染酶分泌的功能，同時(shí)可迅速滲透植物組織在表層傳導(dǎo)，其毒性較低，可有效防治西紅柿、黃瓜、葡萄等灰霉病。因此，40%施佳樂懸浮劑可滿足西紅柿農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的迫切需求。施佳樂對(duì)灰霉病具備良好的防效，但是在具體應(yīng)用還需注意，施佳樂在蔬菜上的安全間隔期為3日。在不通風(fēng)的棚室內(nèi)，若用藥劑量過高，可能會(huì)導(dǎo)致部分作物葉片出現(xiàn)褐色斑點(diǎn)，因而必須嚴(yán)格按照標(biāo)簽推薦的濃度使用，注意施藥后通風(fēng)，需待葉片水分干燥后才可關(guān)棚[7]。施佳樂對(duì)溫度不敏感，及時(shí)在相對(duì)較低的溫度下使用，仍然可獲取良好的保護(hù)及治療效果。

20%禾益1號(hào)懸浮劑屬于腐霉利系內(nèi)吸性殺菌劑，具有保護(hù)和治療作用，對(duì)低溫高濕條件下發(fā)生的灰霉病具有良好的防治效果。20%禾益1號(hào)懸浮劑的安全間隔期為14日，每季最多可以使用2次，需注意該藥劑應(yīng)隨配隨用，不得長(zhǎng)時(shí)間防治，不得將該藥劑與堿性物質(zhì)混用，不得與有機(jī)磷農(nóng)藥混配[8]。

另外，病原菌對(duì)20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液、50%福美雙可濕性粉劑800倍液較為敏感，也是生產(chǎn)中較好的選擇。但是病原菌對(duì)50%撲海因可濕性粉劑800倍液、50%甲基托布津可濕性粉劑800倍液已表現(xiàn)出一定的抗藥性，需引起高度重視，在實(shí)際生產(chǎn)過程中需注意交替用藥。

4 結(jié)論

西紅柿灰霉病菌繁殖速度快，極容易發(fā)生變異，同時(shí)具備較高的適合度，因而被劃分為高抗性風(fēng)險(xiǎn)病原菌[9-10]。西紅柿灰霉病會(huì)對(duì)西紅柿果實(shí)的商品性造成較大影響，一旦發(fā)病除影響西紅柿的食用價(jià)值外，還會(huì)導(dǎo)致商品產(chǎn)量的大大降低，而選擇科學(xué)有效的防治藥劑可大幅度提升西紅柿的商品產(chǎn)量，具備極為顯著的增產(chǎn)效果。基于此，必須科學(xué)選擇西紅柿灰霉病的防治藥劑?？墒┯?0%施佳樂懸浮劑800倍液及20%禾益1號(hào)懸浮劑800倍液防治西紅柿霜霉病，其防治效果較好，推薦使用，也可使用50%福美雙可濕性粉劑800倍液、70%百菌清可濕性粉劑800倍液兩種藥劑，雖然其防治效果一般，但是仍然可以在田間使用。為避免抗藥性的產(chǎn)生，建議在實(shí)際生產(chǎn)過程中對(duì)上述4種藥劑輪換使用。同時(shí)在日常栽培管理中，需對(duì)大棚內(nèi)溫度及濕度加強(qiáng)控制，通過提升溫度降低濕度，為西紅柿營(yíng)造一個(gè)良好的生長(zhǎng)環(huán)境，破壞病菌發(fā)生的環(huán)境條件下，以有效減輕灰霉病對(duì)西紅柿造成的影響。

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