閆國華, 李婭, 胡紅英, 李勤
(新疆大學生命科學與技術(shù)學院,新疆生物資源基因工程重點實驗室,烏魯木齊 830017)
金小蜂屬PteromalusSwederus, 1795隸屬膜翅目Hymenoptera 小蜂總科Chalcidoidea 金小蜂科Pteromalidae 金小蜂亞科Pteromalinea,是一類重要的寄生性天敵昆蟲,可廣泛應用于農(nóng)林牧業(yè)的害蟲生物防控,在控制蟲害爆發(fā)、維持生態(tài)平衡上具有潛在的巨大價值。金小蜂屬種的準確鑒定是開展生物防治應用的前提和關鍵,Smith 等(2011)曾利用P. cerealellae(Ashmead, 1902)防治四紋豆象Callosobruchus maculatus(Fabricius, 1775)。
金小蜂屬是金小蜂科中最大的屬,種類繁多、形態(tài)多樣、體型微小、生境復雜、廣布于除南極洲外的各大陸(葉慧子等,2012;Baur,2015;Noyes,2019)。目前,全世界已知金小蜂488種,中國記錄15 種(Noyes,2019;楊忠岐等,2020)。Graham(1969)厘定了金小蜂屬66 種,并根據(jù)上顎齒式(3∶4 或4∶4)將該屬分為2 亞屬:金小蜂亞屬Pteromalus subg.和哈金小蜂亞屬Habrocytussubg.,其中,哈金小蜂亞屬又分為9 個種團,分別為P.(Habrocytus)platyphilus-Group、P.(H.)chlorospilus-Group、P.(H.)ochrocerus-Group、P.(H.)bedeguaris-Group、P.(H.)dispar-Group、P.(H.)capreae-Group、P.(H.)altus-Group、P.(H.)albipennis-Group 和P.(H.)sequester-Group。目前,對金小蜂屬的分類鑒定工作主要使用經(jīng)典形態(tài)學方法,相關研究多是新種描述或新記錄的報道(Dzhanokmen,2001;Klimmek & Baur,2018;楊忠岐等,2020),尚缺乏針對該屬的系統(tǒng)性修訂。
隨著分子生物學的迅猛發(fā)展,核苷酸測序手段日新月異,DNA 條形碼技術(shù)為寄生蜂種類的準確鑒定和探討它們的系統(tǒng)發(fā)育關系等工作提供了新的工具和研究途徑(Hebertet al.,2003,2016;Bauret al.,2014;楊蘭,2020;Haaset al.,2021)。截止目前,雖然已有部分金小蜂屬物種已被DNA 條形碼標記(姚勤英,2017;Malettiet al.,2020),且被收錄于NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)數(shù)據(jù)庫。但整體上,金小蜂屬物種的基因分子數(shù)據(jù)仍十分匱乏。
本研究對采自新疆北部地區(qū)的金小蜂屬標本進行分類研究,旨在查明新疆金小蜂屬的本底資源,研究結(jié)果不僅豐富我國金小蜂屬數(shù)據(jù)庫資源,同時也能為利用該類群進行防治新疆本地的農(nóng)林牧害蟲提供前期理論基礎。
1.1.1 標本采集、挑揀與保存 2020—2021 年,對新疆維吾爾自治區(qū)阿勒泰地區(qū)、生產(chǎn)建設兵團第十師、塔城地區(qū)、博爾塔拉蒙古自治州、伊犁哈薩克自治州和昌吉回族自治州24 個縣市的荒漠、農(nóng)田、牧場、林下草地、濕地和路邊雜草6種生境進行掃網(wǎng)采集(附錄Ⅰ)。標本浸置于裝有無水乙醇的自封袋(27 cm×20 cm)帶回實驗室,在Nikon SMZ745T 體視顯微鏡下進行標本分類,將挑出的金小蜂標本放入裝有無水乙醇的凍存管(2 mL),?20 ℃保存。所有研究標本均保存于新疆大學昆蟲標本館。
1.1.2 標本制作 使用三角片點膠法把部分浸制標本制作成三角片針插標本(肖暉等,2019),使用玻片法將觸角制成玻片標本。
1.1.3 標本鑒定及圖像的獲取 使用Nikon SMZ745T 體視顯微鏡鑒定、測量和描述標本。分類系統(tǒng)及形態(tài)特征描述參考Graham(1969)、Klim?mek和Baur(2018)。形態(tài)術(shù)語縮寫包括,兩后單眼內(nèi)緣間最短距離(POL)、后單眼外緣與復眼內(nèi)緣間最短距離(OOL)。
使用Nikon SMZ 25-DSU3 全自動拍照系統(tǒng)獲取針插標本外部形態(tài)特征圖,使用Nikon Ci3 生物顯微鏡獲取觸角的特征圖,利用Adobe Photoshop CS5進行圖片處理和排版。
在傳統(tǒng)形態(tài)分類的基礎上,每種挑選2~3頭標本用于分子測序,通過遺傳距離比較和系統(tǒng)發(fā)育關系分析,對形態(tài)學鑒定結(jié)果進行驗證。
1.2.1 DNA 提取 由于金小蜂幾丁質(zhì)外骨骼相對堅硬,統(tǒng)一移除金小蜂的左后足,使組織溶解于裂解液中,將包含左后足的整體標本(每種2~3 頭標本)置于2 mL 離心管進行蟲體的清潔前處理并編號(王琦等,2015),按照TIANamp Genomic DNA Kit提取試劑盒說明書,提取基因組DNA。
1.2.2 目的片段擴增、檢測及測序 選用轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)ITS2 序列片段作為分子標記,擴增ITS2 序列的引物為通用引物(ITS2-F:5’-ATTCCCGGACCAC GCCTGGCTGA-3’,ITS2-R:5’-TCCTCCGCTTATTG ATATGC-3’)。PCR 擴增體系和程序參考楊蘭(2020)。PCR 產(chǎn)物在1%瓊脂糖凝膠中進行電泳,130 V 18 min,電泳結(jié)束后,將瓊脂糖凝膠置于WD-9413B 凝膠成像系統(tǒng)的紫外燈下觀察拍照。委托上海生工生物工程股份有限公司進行PCR 產(chǎn)物雙向測序。
1.2.3 目的序列拼接與確認 利用Contig Ex?press 9. 1查看序列峰圖質(zhì)量并進行人工校對,將校對后的正、反向序列進行拼接。將拼接好的金小蜂屬ITS2 序列與GenBank 數(shù)據(jù)庫數(shù)據(jù)進行同源性比對與分析,進一步確認測定的目標序列來自金小蜂屬,排除因試驗污染而導致測序結(jié)果不準確。
1.2.4 種內(nèi)和種間遺傳距離計算與系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建 選取蠅蛹金小蜂屬Nasonia的4條ITS2序列[蠅蛹金小蜂N. vitripennis(Walker, 1936):U02960.1、蠅蛹金小蜂N. vitripennis(Walker,1936): U02959.1、N. giraultiDarling, 1990:U02955.1 和N. giraultiDarling, 1990: U02953.1]為外群,并從NCBI上下載已有的金小蜂屬ITS2序列[蝶蛹金小蜂P. puparum(L., 1758):KM272555.1、Pteromalussp.:HM574115.1、Pteromalussp.:HM574114.1]。與本研究所測3 種青綠金小蜂的ITS2 基因序列進行種內(nèi)和種間遺傳距離計算和系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建。利用MEGA X 通過Kimura 雙參數(shù)模型(Tamuraet al.,2013)進行種內(nèi)和種間遺傳距離計算,采用鄰接法和最大似然法構(gòu)建系統(tǒng)樹。根據(jù)遺傳距離和構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹對3 種青綠金小蜂進行分子鑒定,進一步驗證形態(tài)鑒定結(jié)果。
觸角窩明顯位于復眼下緣上方;唇基下緣微凹;前翅緣室下表面毛列通常在中部之前中斷;并胸腹節(jié)側(cè)褶后部強烈收縮(Dzhanokmen,2001;Klimmek & Baur,2018;Malettietet al.,2020)。
發(fā)現(xiàn)青綠金小蜂種團中的中國新記錄3種,分別為長腹青綠金小蜂P. elevatus(Walker, 1834),青綠金小蜂P. albipennisWalker, 1835 和類青綠金小蜂P. temporalis(Graham, 1969)。
中國金小蜂屬分種檢索表(雌)
2.2.1 長腹青綠金小蜂Pteromalus elevatus(Walker, 1834)(中國新記錄種)(圖版Ⅰ~圖版Ⅲ)
Eutelus elevatusWalker, 1834: 366.
Pteromalus boreusWalker, 1839: 244. Synony?mized by Graham, 1969: 538.
Etroxys(Habrocytus)dentiferThomson, 1878:113. Synonymized by Graham, 1969: 539.
Pteromalus ceropasadesWalker, 1839: 214.Synonymized by Graham, 1969: 538.
Pteromalus deucetiusWalker, 1839: 245. Syn?onymized by Graham, 1969: 539.
Pteromalus elevatus(Walker, 1834); Kurdju?mov,1913: 1-24; Erd?s,1948: 40; Garrido &Nieves Aldrey, 1990: 80; Dzhanokmen, 1998: 707;Dzhanokmen, 2001: 82; Klimmek & Baur, 2018: 13.
描述:雌蟲體長5.5 mm(圖版Ⅰ:1)。體暗綠色具金屬光澤;復眼紫粉色,單眼淺褐色;觸角柄節(jié)基部1/6 黃棕色,端部5/6 與體同色,梗節(jié)背方和環(huán)節(jié)褐黃色,索節(jié)和棒節(jié)棕色;上顎褐色,齒深褐色;各足基節(jié)和腿節(jié)中部與體同色,端跗節(jié)淺褐色,其余各節(jié)米褐色或黃褐色;前翅透明無斑,翅脈淺棕色。
頭前面觀(圖版Ⅰ:2),頭寬為高的1.2 倍,顏面下方隆起且被明顯的長白毛;唇基具縱刻紋,下緣中央微凹,無齒;上顎左3 右4;復眼距為復眼高的1.4 倍,復眼高為寬的2.1 倍;觸角著生位置稍高于復眼下緣,觸式11263;觸角窩上緣至中單眼的距離為觸角窩下緣至唇基距離的1.4 倍;觸角(圖版Ⅱ:1)最多伸達中單眼下緣,長為寬的5.1倍;柄節(jié)長為復眼高的0.8倍;觸角梗節(jié)長為寬的1.7倍,為第1索節(jié)長的0.88倍;2環(huán)節(jié)橫寬;觸角各索節(jié)連接緊密,具2輪感覺毛,第1索節(jié)至第3索節(jié)長為寬的1.4 倍,第4 索節(jié)和第5 索節(jié)長為寬的1.2 倍,第6 索節(jié)長為寬的0.9 倍;棒節(jié)長為寬的1.8 倍,長于末2 節(jié)長度之和,為末2 節(jié)的1.1 倍;觸角梗鞭之和大于頭寬,為頭寬的0.8 倍。頭側(cè)面觀,復眼長徑為短徑的1.5 倍;顎眼溝完整,顎眼距為復眼高的0.5 倍。頭背面觀(圖版Ⅱ:2),無后頭脊,頭寬為長的2.4 倍;POL 為OOL 的1.5 倍;上頰長為復眼長的0.4倍。
胸部背面觀(圖版Ⅲ:1),具規(guī)則凸脊型網(wǎng)狀刻點,胸寬小于頭寬,為頭寬的0.9 倍;前胸背板前緣具脊,中部長為寬的0.1 倍,窄于中胸盾片,為中胸盾片的0.9 倍,中部長為中胸盾片的1/5;中胸盾片長為寬的0.6 倍,盾縱溝淺,不完整;小盾片膨起具網(wǎng)狀刻點,無橫溝,長為寬的0.9 倍;并胸腹節(jié)(圖版Ⅲ:2)具網(wǎng)狀刻紋,長為小盾片長的0.4 倍;中域前緣和后緣具大型凹陷,后緣凹陷較前緣大,長為寬的0.2 倍;中脊完整,隆起,呈齒狀;側(cè)褶和橫脊完整;頸部明顯,具橫形脊;氣門長橢圓形,氣門著生區(qū)向上呈三角形凸起,高出側(cè)胼,側(cè)胼胝表面粗糙,具數(shù)根毛。胸部側(cè)面觀,胸腹側(cè)片光滑,為翅基片長的0.6 倍;中胸側(cè)片除中胸后側(cè)片上區(qū)光滑外,其余具網(wǎng)狀刻點。前翅長,伸出柄后腹,長為寬的2.4倍;前緣室上表面無毛,下表面具1列完整的毛,后1/3 處具數(shù)根散生毛,基室基脈上表面光滑,下表面基脈具6根柔毛;透明斑大,后緣開放;緣脈長為后緣脈長的0.8 倍,為痣脈長的1.1 倍,后緣脈長為痣脈長的1.3 倍。后足基節(jié)無毛,具精細的網(wǎng)狀刻紋,后足腿節(jié)長為寬的3.6倍。
圖版Ⅰ 雌性金小蜂屬體背面觀(1、3、5)和頭正面觀(2、4、6)Plate Ⅰ Pteromalus spp. (♀) body in dorsal view (1, 3, 5) and head in frontal view (2, 4, 6)
柄后腹(圖版Ⅰ:1)扁平呈披針形,長為寬的3.5倍;柄后腹長于中軀,為中軀長的1.9倍;柄后腹長于頭胸之和,為頭胸之和的1.5倍;柄后腹第1節(jié)背板光滑,后緣呈弧形,長為寬的0.8 倍,為整個柄后腹長的0.2倍,除柄后腹第2節(jié)背板光滑外,從柄后腹第3節(jié)起背板側(cè)面及中間均具細脊紋和毛,表面的毛逐漸增多,第7 背板長大于寬,長為基部寬的1.5 倍。產(chǎn)卵器露出,露出部分長為第7 背板長的0.6倍。肛下板末端僅伸達腹部的0.2倍處。
圖版Ⅱ 雌性金小蜂屬的觸角(1、3、5)和頭背面觀(2、4、6)Plate Ⅱ Pteromalus spp. (♀) antennae (1, 3, 5) and head in dorsal view (2, 4, 6)
雄蟲未知。
檢視標本:1♀,新疆阿勒泰地區(qū)富蘊縣,雜草網(wǎng)掃,89°32′4.90″E,47°0′53.64″N,海拔1 360 m,2020-Ⅶ-11,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)阿勒泰市,草場網(wǎng)掃,87°10′39.12″E,47°32′39.82″N,海拔420 m,2021-Ⅵ-24,李勤組采;2♀♀,新疆伊犁哈薩克自治州鞏留縣,苜蓿地網(wǎng)掃,82°31′4.20″E,43°20′22.86″N,海拔988 m,李勤組采;4♀♀,新疆伊犁哈薩克自治州新源縣,玉米地旁新疆鼠尾草地網(wǎng)掃,83°34′53.73″E,43°24′12.16″N,海拔1 044 m,2021-Ⅶ-11,李勤組采。
生物學:該種寄主為雙翅目Diptera 的實蠅科Tephritidae,膜翅目Hymenoptera 的癭蜂科Cynipi?dae、廣肩小蜂科Eurytomidae 和鱗翅目Lepidoptera的粉蝶科Pieridae 昆蟲,而寄主主要與菊科Astera?ceae的頂羽菊屬Acroptilon、飛廉屬Carduus、矢車菊屬Centaurea、薄鱗菊屬Chartolepis、薊屬Cirsium、那夷菊屬Dubautia、苦苣菜屬Sonchus、忍冬科Caprifo?liaceae 的刺頭草屬Cephalaria和木樨科Oleaceae 的木樨欖屬Olea的植物有關(Klimmek & Baur,2018)。
分布:中國新疆(富蘊縣、阿勒泰市、鞏留縣、新源縣),奧地利,比利時,保加利亞,德國,匈牙利,馬其頓,荷蘭,瑞士,羅馬尼亞,西班牙,瑞典,黑山,捷克,英國,伊朗,烏克蘭,俄羅斯,塔吉克斯坦,哈薩克斯坦,吉爾吉斯斯坦,摩爾多瓦,烏茲別克斯坦,土耳其,美國,加拿大。
圖版Ⅲ 雌性金小蜂屬體中軀(1、3、5)和并胸腹節(jié)背面觀(2、4、6)Plate Ⅲ Pteromalus spp. (♀) thorax (1, 3, 5) and propodeum in dorsal view (2, 4, 6)
討論:Dzhanokmen(2001)在對哈薩克斯坦金小蜂屬物種修訂中描述過該種,其描述與本研究檢視標本有2 處不同:第七背板長為基部寬的1.8 倍(而筆者檢視標本第七背板長為基部寬的1.4 倍);體色大體呈暗綠色具金屬光澤,在某些角度呈銅色反光(而筆者檢視標本體色大體呈暗綠色具金屬光澤,在某些角度呈藍色反光)。造成該差異的原因可能是分布地不同。
2.2.2 青綠金小蜂Pteromalus albipennisWalker, 1835(中國新記錄種)(圖版Ⅰ~圖版Ⅲ)
Pteromalus albipennisWalker, 1835: 198.
Pteromalus coeruleusDalman, 1820: 29-31.Synonymized by Thomson, 1878: 544.
Pteromalus cingulipesWalker, 1835: 197. Syn?onymized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus plenusWalker, 1835: 199. Synony?mized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus albipennisZetterstedt, 1838: 424.Synonymized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus zelusWalker, 1839: 270. Synony?mized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus coenoWalker, 1848: 124, 186. Syn?onymized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus diomedonWalker, 1848: 209. Syn?onymized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus orthagusWalker, 1848: 209. Syn?onymized by Graham, 1969: 544.
Etroxys(Habrocytus)beryllinusThomson,1879: 112. Synonymized by Graham, 1969: 544.
Pteromalus albipennisWalker, 1835; Erd?s,1948: 40; Dzhanokmen, 1998: 709; Polaszek,2000: 45-49; Dzhanokmen, 2001: 92; Klimmek &Baur, 2018: 13.
描述:雌蟲體長4.2 mm(圖版Ⅰ:3)。體青綠色具金屬光澤;復眼紫羅蘭色,單眼褐色;觸角柄節(jié)基部1/3 黃褐色,端部2/3 與體同色;上顎褐色,齒黑褐色;各足基節(jié)和腿節(jié)中部與體同色,端跗節(jié)黑褐色,其余各節(jié)黃色或黃褐色;前翅透明無斑,翅脈褐色。
頭前面觀(圖版Ⅰ:4),頭寬為高的1.3 倍,顏面具凸脊型網(wǎng)狀刻點且被明顯的短白毛;唇基具縱刻紋,下緣中央微凹,無齒;上顎左3右4;復眼距為復眼高的1.4 倍,復眼高為寬的2.3 倍;觸角位于復眼下緣之上,觸式11263;觸角窩上緣至中單眼的距離為觸角窩下緣至唇基距離的1.3 倍;觸角(圖版Ⅱ:3)柄節(jié)最多伸至中單眼下緣,長為寬的6.2 倍;柄節(jié)長為復眼高的0.8 倍;梗節(jié)長為寬的1.6 倍,為第1 索節(jié)的0.9 倍;2 環(huán)節(jié)橫寬;觸角各索節(jié)緊密連接,具2 輪感覺毛,第1 索節(jié)長為寬的1.3 倍,第2 索節(jié)至第4 索節(jié)長為寬的1.1 倍,第5 索節(jié)長為寬的0.9 倍,第6 索節(jié)長為寬的0.8 倍;棒節(jié)長為寬的2.4 倍,長于末2 節(jié)長度之和,為末2 節(jié)的1.4倍;觸角梗鞭之和略小于頭寬。頭側(cè)面觀,復眼長徑為短徑的1.4 倍;顎眼溝完整,顎眼距為復眼高的0.6 倍。頭背面觀(圖版Ⅱ:4),無后頭脊,頭寬為長的2.4 倍;POL 為OOL 的1.6 倍;上頰長為復眼長的0.4倍。
胸部背面觀(圖版Ⅲ:3),具規(guī)則凸脊型網(wǎng)狀刻點,胸寬小于頭寬,為頭寬的0.9 倍;前胸背板前緣具脊,中部長為寬的0.1 倍,稍窄于中胸盾片,為中胸盾片的0.9 倍;中部長為中胸盾片的1/7;中胸盾片長為寬的0.6 倍,盾縱溝淺,不完整;小盾片膨起具網(wǎng)狀刻點,無橫溝,長為寬的0.9 倍;并胸腹節(jié)(圖版Ⅲ:4),具網(wǎng)狀刻紋,長為小盾片長的0.3 倍;中域前緣和后緣具大型凹陷,前緣具12 個大型凹窩,長為寬的0.2 倍;中脊完整,隆起;側(cè)褶和橫脊完整;頸部具橫形脊;氣門大,長橢圓形,背面觀氣門著生區(qū)向上呈三角形凸起,高出側(cè)胼,側(cè)胼胝表面粗糙,具數(shù)根毛。胸部側(cè)面觀,胸腹側(cè)片光滑,為翅基片長的0.8 倍;中胸側(cè)片除中胸后側(cè)片上區(qū)光滑外,其余具網(wǎng)狀刻點。前翅長,伸出柄后腹,長為寬的2.6倍;前緣室上表面無毛,下表面后1/3處具數(shù)根散生毛,基室基脈光滑無毛;透明斑大,后緣開放;緣脈稍長于后緣脈,為痣脈長的1.5 倍,后緣脈長為痣脈長的1.4 倍。后足基節(jié)無毛,具精細的網(wǎng)狀刻紋,后足腿節(jié)長為寬的3.4倍。
柄后腹(圖版Ⅰ:3)長卵圓形,長為寬的3.0 倍;柄后腹長于中軀,為中軀長的1.6 倍,為頭胸之和的1.4倍;柄后腹第1節(jié)光滑,后緣呈弧形,長為寬的0.8 倍,為整個柄后腹長的0.2 倍,從柄后腹第2 節(jié)背板起側(cè)面及中間均具細脊紋和毛,表面的毛逐漸增多,第7節(jié)背板長小于寬,長為基部寬的0.6倍。產(chǎn)卵器露出,露出部分長為第7 背板長的1.7 倍。肛下板末端伸達腹部的0.5倍處。
雄蟲未知。
檢視標本:4♀♀,新疆阿勒泰地區(qū)富蘊縣,雜草網(wǎng)掃,89°32′4.90″E,47°0′53.64″N,海拔1 360 m,2020-Ⅶ-11,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)阿勒泰市,雜草網(wǎng)掃,87°54′4.09″E,47°32′37.86″N,海拔470 m,2021-Ⅵ-24,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)富蘊縣,雜草網(wǎng)掃,89°46′53.30″E,47°12'40.69″N,海拔1 156 m,2021-Ⅵ-23,李勤組采;1♀,新疆塔城地區(qū)額敏縣,麥田雜草網(wǎng)掃,83°47′44.23″E,46°23′52.63″N,海拔542 m,李勤組采,2021-Ⅵ-28;2♀♀,新疆伊犁哈薩克自治州特克斯縣,麥田網(wǎng)掃,81°48′31.81″E,43°13′19.12″N,海拔1 201 m,2021-Ⅶ-8,李勤組采;2♀♀,新疆伊犁哈薩克自治州昭蘇縣,雜草網(wǎng)掃,81°14′59.91″E,43°8′33.12″N,海拔1 750 m,2021-Ⅶ-9,李勤組采;1♀,新疆伊犁哈薩克自治州特克斯縣,麥田雜草網(wǎng)掃,81°47′23.76"E,43°9′19.98″N,海拔1 184 m,2021-Ⅶ-9,李勤組采;1♀,新疆伊犁哈薩克自治州新源縣,玉米地旁新疆鼠尾草地網(wǎng)掃,83°34′53.73″E,43°24′12.16″N,海拔1 044 m,2021-Ⅶ-11,李勤組采。
生物學:寄主為實蠅科昆蟲,該寄主主要與菊科的牛蒡?qū)貯rctium、羊菊屬Arnica、飛廉屬Car?duus、矢車菊屬、還陽參屬Crepis、旋覆花屬Inula、風毛菊屬Saussurea、偽泥胡菜屬Serratula和苦苣菜屬的植物有關(Klimmek & Baur,2018)。
分布:中國新疆(富蘊縣、阿勒泰市、額敏縣、特克斯縣、昭蘇縣、新源縣),比利時,捷克,斯洛伐克,德國,匈牙利,伊朗,意大利,摩爾多瓦,荷蘭,羅馬尼亞,塞爾維亞,西班牙,瑞典,瑞士,土耳其,英國,哈薩克斯坦。
2.2.3 類青綠金小蜂Pteromalus temporalis(Graham, 1969)(中國新記錄種;圖版Ⅰ~圖版Ⅲ)
Habrocytus temporalisGraham, 1969, 547.
Pteromalus temporalisGraham, 1969; Klimmek& Baur, 2018: 13.
描述:雌蟲體長4.4 mm(圖版Ⅰ:5)。體亮綠色具金屬光澤;復眼粉白色,單眼無色;觸角柄節(jié)橙黃色,余節(jié)褐色;上顎褐色,齒黑褐色;各足基節(jié)和腿節(jié)與體同色,端跗節(jié)黑褐色,其余各節(jié)黃色或黃褐色;前翅透明無斑,翅脈棕色。
頭前面觀(圖版Ⅰ:6),頭寬為高的1.2 倍,顏面具凸脊型網(wǎng)狀刻點且被明顯的短白毛;唇基具縱刻紋,下緣中央微凹,無齒;上顎左3右4;復眼距為復眼高的1.5 倍,復眼高為寬的2.4 倍;觸角位于復眼下緣之上,觸式11263;觸角窩上緣至中單眼的距離為觸角窩下緣至唇基距離的2.4 倍;觸角(圖版Ⅱ:5)柄節(jié)最多伸至中單眼下緣,長為寬的6.5 倍;柄節(jié)長為復眼高的0.9 倍;觸角梗節(jié)長為寬的1.5 倍,為第一索節(jié)的0.8 倍;2 環(huán)節(jié)橫寬;觸角各索節(jié)連接緊密,具2 輪感覺毛,第1 索節(jié)長為寬的1.4 倍,第2 索節(jié)長為寬的1.1 倍,第3 索節(jié)長寬相等,第4 索節(jié)和第5 索節(jié)長為寬的0.9 倍,第6 索節(jié)長為寬的0.8 倍;棒節(jié)長為寬的2.3 倍,長于末2 節(jié)長度之和,為末2節(jié)長度之和的1.3倍;觸角梗鞭長度之和大于頭寬,為頭寬的1.1 倍。頭側(cè)面觀,復眼長徑為短徑的1.4 倍;無顎眼溝,顎眼距為復眼高的0.4 倍。頭背面觀(圖版Ⅱ:6),無后頭脊,頭寬為長的1.9 倍;POL 為OOL 的1.5 倍;上頰長為復眼長的0.4倍。
胸部背面觀(圖版Ⅲ:5),具規(guī)則凸脊型網(wǎng)狀刻點,胸寬等于頭寬;前胸背板前緣具脊,中部長為寬的0.1倍,稍窄于中胸盾片,為中胸盾片的0.9倍,中部長約為中胸盾片長的1/4;中胸盾片長為寬的0.6倍,盾縱溝淺,不完整;小盾片膨起具網(wǎng)狀刻點,無橫溝,長寬幾乎等長;并胸腹節(jié)(圖版Ⅲ:6)表面具網(wǎng)狀刻紋,長為小盾片的0.6 倍;中域前緣和后緣具大型凹陷,后緣凹陷較前緣小,前緣具10個大型凹窩,長為寬的0.5 倍;中脊完整,隆起;側(cè)褶和橫脊完整;頸部具橫形脊;氣門長橢圓形,背面觀氣門著生區(qū)向上呈三角形凸起,高出側(cè)胼,長為寬的2.4 倍,側(cè)胼胝表面粗糙,具數(shù)根白毛。胸部側(cè)面觀,胸腹側(cè)片光滑,為翅基片長的0.8 倍;中胸側(cè)片除中胸后側(cè)片上區(qū)光滑外,其余具網(wǎng)狀刻點。前翅僅伸達第七背板中部,長為寬的2.4 倍;前緣室上表面無毛,下表面后1/3 處具數(shù)根散生毛,基室基脈光滑無毛;透明斑后緣開放;緣脈為后緣脈的0.82 倍,為痣脈長的1.4 倍,后緣脈長為痣脈長的1.7 倍。后足基節(jié)無毛,具精細的網(wǎng)狀刻紋,后足腿節(jié)長為寬的3.7倍。
柄后腹(圖版Ⅰ:5)長卵圓形,長為寬的2.5 倍;柄后腹長于中軀,為中軀長的1.5 倍,為頭胸之和長的1.3 倍;柄后腹第1 節(jié)背板光滑,后緣呈弧形,長為寬的0.7 倍,為整個柄后腹長的0.3 倍,從柄后腹第2節(jié)背板節(jié)側(cè)面及中間均具細脊紋和毛,表面的毛逐漸增多,第7 背板長大于寬,長為基部寬的1.6 倍。產(chǎn)卵器露出,露出部分長與第7 節(jié)背板等長。肛下板末端伸達腹部的0.5倍處。
雄蟲未知。
檢視標本:5♀♀,新疆阿勒泰地區(qū)富蘊縣,路邊雜草網(wǎng)掃,89°32′4.90″E,47°0′53.64″N,海拔1 360 m,2020-Ⅶ-11,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)哈巴河縣,路邊雜草網(wǎng)掃,80°19′22.63″E,47°58′59.14″N,海拔530 m,2020-Ⅶ-14,李勤組采;2♀♀,新疆阿勒泰地區(qū)清河縣,草地網(wǎng)掃,90°21′28.67″E,46°41′3.99″N,海拔1 240 m,2020-Ⅶ-10,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)清河縣,草場網(wǎng)掃,90°19′57.88″E,46°40′43.69″N,海拔1 197 m,2021-Ⅵ-22,李勤組采;1♀,新疆阿勒泰地區(qū)清河縣,草場網(wǎng)掃,90°0′58.42″E,46°55′43.92″N,海拔1 427 m,2021-Ⅵ-22,李勤組采;1♀,新疆塔城地區(qū)裕民縣,路邊雜草網(wǎng)掃,83°0′1.91″E,46°12′43.03″N,海拔670 m,2021-Ⅵ-30,李勤組采;1♀,新疆塔城地區(qū)額敏縣,林下草地網(wǎng)掃,83°53′17.52″E,46°21′43.91″N,海拔645 m,2021-Ⅵ-28,李勤組采;1♀,新疆伊犁哈薩克自治州昭蘇縣,路邊雜草網(wǎng)掃,81°14′59.92″E,43°8′33.12″N,海拔1 750 m,2021-Ⅶ-9,李勤組采。
生物學:未知。
分布:中國新疆(清河縣、富蘊縣、哈巴河縣、裕民縣、昭蘇縣),保加利亞,荷蘭,西班牙,瑞典。
討論:該種與青綠金小蜂非常相似。區(qū)別于青綠金小蜂的特征為:觸角柄節(jié)橙黃色;頭背面觀,頭寬稍大于頭長,頭長的2.1倍;POL 為OOL 的1.5 倍;并胸腹節(jié)中域端部具網(wǎng)狀刻點,氣門大,長橢圓形。
2.3.1 DNA 條形碼的獲取 通過對3 種青綠金小蜂雌性成蟲進行DNA 條形碼的測序,共獲取8條ITS2序列(表1)。
表1 新疆青綠金小蜂種團的物種ITS2序列信息Table 1 ITS2 sequence information of the Albipennis group species in Xinjiang
2.3.2 遺傳距離估算 金小蜂的種內(nèi)遺傳距離與種間遺傳距離間無重疊區(qū)域。3 個中國新記錄種的種間遺傳距離范圍0.063 3~1.317 9,長腹青綠金小蜂和青綠金小蜂的種間遺傳距離最大,為1.317 9;青綠金小蜂和類青綠金小蜂的種間遺傳距離最小,為0.063 3。其中,長腹青綠金小蜂的種內(nèi)遺傳距離最大,為0.004 2;青綠金小蜂和類青綠金小蜂種內(nèi)遺傳距離均為0。雖然青綠金小蜂和類青綠金小蜂的親緣關系較近,但可以達到種類鑒定的要求(>2%),可準確區(qū)分該3種金小蜂。
2.3.3 系統(tǒng)發(fā)育樹分析 ML 和NJ系統(tǒng)發(fā)育關系重建的拓撲結(jié)構(gòu)基本一致,均能顯示3種青綠金小蜂均各自聚為一支(圖1),顯示為3個獨立的物種,與形態(tài)學鑒定結(jié)果一致。青綠金小蜂與類青綠金小蜂兩者之間的遺傳關系較接近,而長腹青綠金小蜂與兩者間的遺傳關系較遠。此外,青綠金小蜂與類青綠金小蜂外部形態(tài)十分相似,推測為近緣種,NJ 系統(tǒng)發(fā)育樹和ML系統(tǒng)發(fā)育樹均顯示該2種聚為一支,支持2種為近緣種的鑒定結(jié)果。
圖1 基于ITS2序列重建的金小蜂屬NJ樹(左)和ML樹(右)Fig. 1 NJ tree (left) and ML tree (right) of the genus Pteromalus reconstructed based on ITS2 sequence
青綠金小蜂種團物種豐富,目前世界已知29 種,主要分布于歐洲(Klimmek & Baur,2018)。本研究首次報道該種團在中國分布,在對新疆北部地區(qū)金小蜂屬資源調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)該種團的3 個新記錄種:青綠金小蜂、類青綠金小蜂和長腹青綠金小蜂。本研究記述了3種的外部形態(tài)特征,并提供了鑒別特征圖以及3種的ITS2序列,構(gòu)建了ML 和NJ 系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果表明3 種青綠金小蜂為3 個獨立的物種,分子結(jié)果與形態(tài)鑒定結(jié)果一致。該研究結(jié)果豐富了我國金小蜂數(shù)據(jù)庫資源,并豐富了NCBI 數(shù)據(jù)庫,為進一步查明新疆金小蜂屬的本底資源奠定了堅實基礎。
表2 金小蜂ITS2序列的種內(nèi)與種間的遺傳距離Table 2 Intraspecific and interspecific distances of Pteromalidae species based on the sequence of ITS2
此外,在厘定新疆北部金小蜂屬標本時,亦發(fā)現(xiàn)了該屬的另一種團——隱金小蜂種團Pteroma?lus sequester-Group,由于該種團種類繁多,形態(tài)極為相似,生境類型復雜,鑒定十分困難。世界范圍內(nèi)Baur 等學者使用形態(tài)計量學、生物地理學及分子標記(如COI、cyt b等)等整合分類學手段解決青綠金小蜂種團和黑青金小蜂等種團的物種鑒定困難的問題(Peters & Baur,2011;Bauret al.,2014;
Baur,2015;Klimmek & Baur,2018;Malettiet al.,2020),本研究團隊擬采用此方法厘清新疆隱金小蜂種團物種資源。
明確金小蜂種類,亦要明確其寄主信息方能開展利用金小蜂屬種類的生防實踐應用。據(jù)文獻記載,青綠金小蜂種團的寄主主要為雙翅目實蠅科昆蟲,該寄主主要棲息于菊科植物(Klimmek &Baur,2018)。本研究從新疆阿勒泰富蘊縣闊孜克村路邊大薊Cirsium japonicumFisch.exDC.上網(wǎng)掃,發(fā)現(xiàn)了3 種青綠金小蜂,并采集到了大量的實蠅科昆蟲。但有關兩者是否為寄生與被寄生的關系,有待后期室內(nèi)飼養(yǎng)實蠅科昆蟲進行核實。
致謝:感謝本課題組鐘問副教授對文章的修改和完善;感謝本課題組標本采集者,師弟張同友和師妹楊萌在標本挑揀過程中的辛苦付出;感謝康寧博士、席歐彥博士和周樂師姐在標本鑒定和DNA分子實驗過程中給予的極大幫助;感謝新疆千欣儀器有限公司王朝工程師對圖版的修改與完善。
附錄Ⅰ 新疆北部地區(qū)金小蜂標本采集位點、時間、生境信息Appendix Ⅰ Collecting site, times and habitat of Pteromalids in Northern Xinjiang