邱靜 宋媛 王妮 王佳人 陳靜 陳光英 趙振東 何文英

摘 要：諾麗果（noni）是海南的一種特色水果，具有多種藥效價(jià)值，但關(guān)于其植物蛋白的研究卻很少。本研究采用基于BPP+酚提取法的雙向電泳技術(shù)，通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)花蕾期、半成熟及成熟期等3 個(gè)時(shí)期產(chǎn)自海南的諾麗果實(shí)進(jìn)行蛋白質(zhì)的提取分離，獲得其植物蛋白指紋圖譜；利用Image Master 5.0 軟件分析凝膠圖像篩選出高表達(dá)蛋白；再利用MALDI-TOF-MS 技術(shù)對(duì)這些蛋白酶解產(chǎn)物進(jìn)行質(zhì)譜鑒定；通過(guò)生物信息學(xué)手段對(duì)3 種諾麗果實(shí)的高表達(dá)蛋白初步進(jìn)行蛋白功能分析。結(jié)果表明：花蕾期、半成熟及成熟諾麗果實(shí)分別有44、49 和40 個(gè)高表達(dá)蛋白，通過(guò)質(zhì)譜鑒定，確定了其中分別有33、22 和39 個(gè)蛋白，從屬不同植物功能的蛋白種類(lèi)；不同成熟期的高表達(dá)蛋白差異較大，涉及葉綠體連接酶、半胱氨酸蛋白酶、蛋白激酶、泛素連接酶、生長(zhǎng)素反應(yīng)因子等多種蛋白質(zhì)。該研究為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用諾麗果的植物蛋白提供科學(xué)合理的理論指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞：諾麗果；不同成熟期；蛋白；功能分析

中圖分類(lèi)號(hào)：S759.83 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

諾麗（Noni）即海巴戟（Morinda citrifolia L.），又名熱帶海巴戟、海巴戟天、四季果等，屬茜草科巴戟天屬植物，是一種生長(zhǎng)于熱帶及亞熱帶的多年生常綠闊葉灌木或小喬木，波利尼西亞土著將諾麗作為民間藥物使用已有2000 多年歷史，民間多用于治療發(fā)燒、腹瀉、便秘、哮喘、惡心嘔吐、蚊蟲(chóng)叮咬及動(dòng)物咬傷引起的感染等疾病[1-2]。

諾麗植株的多部位含有多種活性成分，近年來(lái)已從諾麗的根、莖、葉、花、果實(shí)、樹(shù)皮、芯材等部位分離鑒定了300 余種化合物，主要包括黃酮、多糖、香豆素、蒽醌、環(huán)烯醚萜、生物堿、木脂素、香豆素、三萜、甾醇等化學(xué)成分[3]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，諾麗具有抗炎、抗癌、抗氧化、抗焦慮、抗抑郁、降血脂、降血糖、肝保護(hù)、改善記憶、提高耐力、提高免疫力、減輕骨質(zhì)疏松癥、改善關(guān)節(jié)疼痛及活動(dòng)度、對(duì)缺血性神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用、多巴胺雙向調(diào)節(jié)等作用[4]。作為一種傳統(tǒng)藥食同源的植物，諾麗果實(shí)也是一種特色的熱帶水果，據(jù)報(bào)道，其中含有275 種以上的營(yíng)養(yǎng)成分，除含抗氧化物、東莨菪堿、多醣體、及罕見(jiàn)的對(duì)人體健康非常重要的17 種虹甙類(lèi)（環(huán)烯醚萜類(lèi)）等化學(xué)成分以外，還包括人體所需的20 種必需氨基酸、9 種人體內(nèi)無(wú)法自行生成的必需氨基酸；另含有豐富維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B3、葉酸等14 種維生素，含有鉀、鈉、鋅、鈣、鐵、鎂、磷、銅和硒等16 種礦物質(zhì)，硒含量為其他水果的10 倍以上[5-7]。

由于諾麗的高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，早在2010 年諾麗果漿被中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部列入了新資源食品名單，諾麗種植在我國(guó)海南省和云南省已具備一定規(guī)模[3]。通過(guò)追蹤不同產(chǎn)地諾麗果關(guān)鍵發(fā)育期主要活性物質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化，不僅為諾麗果原材料的實(shí)時(shí)采收、質(zhì)量控制以及縮短諾麗產(chǎn)品生產(chǎn)成本與周期提供科學(xué)依據(jù)[8]，也可對(duì)不同成熟度諾麗果進(jìn)行主要活性成分分析。國(guó)內(nèi)最新報(bào)道了云南產(chǎn)諾麗果不同成熟度諾麗果中多糖、總黃酮、總酚、總蒽醌、莨菪亭、總皂苷、桃葉珊瑚苷、蛋白質(zhì)含量測(cè)定的研究，結(jié)果表明成熟度與活性成分間具有一定的相關(guān)性[8]。

國(guó)外也有較多關(guān)于諾麗果實(shí)及種子的種植、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、藥理活性及機(jī)制的研究[9-11]。通過(guò)查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)雖然有較多關(guān)于諾麗化學(xué)成分提取及其生物或藥理活性的研究，但還未見(jiàn)有諾麗不同成熟度的蛋白提取及其指紋圖譜的建立或其中功能蛋白發(fā)現(xiàn)分析的報(bào)道。作為一種有較高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及藥理活性的藥食同源植物，研究其所含植物蛋白名稱、發(fā)現(xiàn)與其藥物活性相關(guān)的關(guān)鍵蛋白，對(duì)深度了解諾麗果實(shí)、指導(dǎo)育種、進(jìn)一步開(kāi)發(fā)諾麗果實(shí)均具有非常重要的理論和實(shí)際意義。本研究利用蛋白質(zhì)組學(xué)的雙向電泳技術(shù)[12]，獲得海南不同成熟期的諾麗果蛋白圖譜，并利用生物質(zhì)譜及生物信息學(xué)技術(shù)，鑒定分析諾麗果關(guān)鍵發(fā)育期主要蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)變化，為進(jìn)一步深入研究和開(kāi)發(fā)諾麗果提供科學(xué)合理的指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

花蕾期、半成熟及成熟諾麗果果實(shí)樣品，均采集于海南?？跂|山鎮(zhèn)諾麗果種植園（20°02′45.97″N，110°11′38.39″E），經(jīng)海南師范大學(xué)生命科學(xué)院的陳玉凱副教授鑒定確為花蕾期、半成熟及成熟諾麗果果實(shí)（圖1）。將采集回來(lái)的花蕾期、半成熟及成熟諾麗果樣品用超純水清洗干凈，用錫箔紙包裹住放入保鮮袋中，于–80 ℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

蛋白提取儀器及試劑：臺(tái)式恒溫振蕩器（精宏）；QL-866 渦旋混合器；SIGMA3-18K 低溫超速離心機(jī)（德國(guó)SIGMA）；超純水系統(tǒng)（上海和泰）；EYELA 搖床（東京理化）；蛋白質(zhì)等電聚焦儀（Ettan IPGphor3）， 固相pH 梯膠條（pH3～10）；Image scanner III 掃描儀（美國(guó)通用公司GE Healthcare）；Image Master 5.0 凝膠圖像分析軟件；MultiTemp IV 恒溫循環(huán)器；UV-2700 紫外分光光度計(jì)（日本島津）；KQ2200E 型超聲波清洗儀（曙峰企業(yè)）；GM-0.33A 型隔膜真空泵（津騰）；Voyager-DE PRO ABI4700 時(shí)間飛行質(zhì)譜儀（美國(guó)ABI 公司）。所有試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭袑?shí)驗(yàn)用水為超純水。

1.2 方法

1.2.1 BPP+酚抽提法提取蛋白 （1）取出樣品，切成小塊， 置于預(yù)冷的干凈研缽中， 加入少許 PVPP 粉末和少許二氧化硅粉末，在液氮環(huán)境中研磨到粉末狀；稱取3 g 研磨好的樣品粉末，加入至10 mL 離心管中，再加入10 mL BPP 提取緩沖液，充分渦旋震蕩10 min；再加入10 mLTris飽和酚，渦旋10 min；在SIGMA3-18K 低溫超速離心機(jī)中離心15 min（4 ℃，轉(zhuǎn)速：16000×g）；移取上層清液轉(zhuǎn)移至干凈離心管中，加入5 mLBPP 提取緩沖液，渦旋震蕩10 min 后離心15 min；再移取3 mL 上層清液轉(zhuǎn)移至干凈離心管中，加入15 mL 預(yù)冷過(guò)飽和硫酸銨甲醇溶液（AM 沉淀劑），置于–20 ℃冰箱中沉淀12 h 以上；從冰箱中取出離心管，用 AM 沉淀劑配平后離心15 min棄上清液；每管再加入2 mL 預(yù)冷甲醇，去上清液，渦旋均勻，重復(fù)2 次；再分別加入 2 mL 預(yù)冷丙酮，重復(fù)2 次轉(zhuǎn)移及離心步驟；去除上清液，分別加入適量DTT，混合均勻，按10 mg/mL 加入適量裂解液，于20 ℃恒溫溶解2 h 以上；待蛋白完全溶解到裂解液后，離心，取上清液，測(cè)定蛋白濃度。

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定蛋白質(zhì)含量。稱取1 mg牛血清蛋白充分溶解于1 mL 超純水中，配制成1 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白儲(chǔ)備液。分別準(zhǔn)確量取1 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白儲(chǔ)備液若干體積，用超純水配制成0、2、4、6、8、10 μg/mL 的牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液。利用紫外分光光度計(jì)，測(cè)定在595 nm 處的吸光度值，根據(jù)朗伯-比爾定律，以牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2 蛋白質(zhì)含量測(cè)定 采用Bradford 法測(cè)定樣品的蛋白濃度[13]， 使用紫外分光光度計(jì)， 在595 nm 的波長(zhǎng)下測(cè)定花蕾期、半成熟及成熟諾麗果蛋白提取液的紫外吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)的含量。

1.2.3 單向電泳實(shí)驗(yàn) 根據(jù)吳秀麗等[14]的方法進(jìn)行單向電泳實(shí)驗(yàn)，確定雙向電泳的最佳上樣濃度。

1.2.4 雙向電泳實(shí)驗(yàn) 移取含有1.3 mg 蛋白質(zhì)的提取液，用蛋白裂解液稀釋至樣品體積為455 μL，加5 μL IPG Buffer 于離心管中，輕輕震蕩使其混合均勻，轉(zhuǎn)移至IPG 膠條（pH 3～10）上，20 ℃恒溫水化18 h 以上；保持室溫20 ℃左右，設(shè)置聚焦極限電流為每根膠條50 μA，電壓參數(shù)如表1所示，進(jìn)行一向等電聚焦；再將膠條放置在搖床上平衡15 min；在制備好的聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行二向垂直電泳操作，設(shè)置參數(shù)為：每張膠片5 W進(jìn)行預(yù)電泳1 h，每張膠片7 W 至電泳結(jié)束；再進(jìn)行凝膠染色和脫色、凝膠掃描和用ImageMaster 軟件分析凝膠圖譜[14]，篩選出高表達(dá)的蛋白并進(jìn)行編號(hào)。

1.2.5 生物質(zhì)譜鑒定及分析 挖取高表達(dá)蛋白質(zhì)，分別用150 μL 超純水、150 μL 脫色液和100μL 乙腈處理，放置在搖床上搖蕩30 min，轉(zhuǎn)速設(shè)置為150 r/min，搖蕩后吸出離心管中的水，以上步驟重復(fù)3 次，直至蛋白粒變?yōu)闊o(wú)色，置于室溫下風(fēng)干；將蛋白樣品離心后加入適量胰蛋白酶，放置在4 ℃冰箱中1 h 左右；再將其放置在PCR 儀上酶解蛋白（37 ℃，13 h）；設(shè)置轉(zhuǎn)速7000×g，離心5 min（20 ℃），備用；利用MALDI-TOF-MS進(jìn)行蛋白鑒定；將所得的質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過(guò)MascotDistiller 軟件進(jìn)行分析，再利用Matrix Science（http：//www.matrixscience.com）網(wǎng)站進(jìn)行搜庫(kù)比對(duì)，確定蛋白的名稱、種類(lèi)及其他信息。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同成熟期諾麗果蛋白提取

通過(guò)Bradford 法測(cè)定3 種諾麗果的蛋白濃度，在波長(zhǎng)為595 nm 處通過(guò)測(cè)定系列梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白溶液的吸光度值，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線方程（未顯示），計(jì)算得出花蕾期、半成熟及成熟諾麗果蛋白溶液的濃度分別為6.808、11.30、5.89 mg/mL。

為獲得雙向電泳合適的上樣濃度，進(jìn)行單向電泳實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖2 所示。不同成熟期諾麗果的蛋白分子量介于15～130 kDa 之間，花蕾期的蛋白主要在17、20、25 kDa 左右，半成熟期的蛋白主要在17、20、33 kDa 左右，而成熟期的蛋白則主要集中在15、20、25、33 kDa 左右。另外，從圖2 可以清晰看出樣品的蛋白條帶，說(shuō)明不同成熟期諾麗果實(shí)蛋白質(zhì)未降解，可以進(jìn)行后續(xù)雙向電泳實(shí)驗(yàn)操作。

在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，通過(guò)雙向電泳實(shí)驗(yàn)可以得到清晰明顯、分離效果很好的蛋白凝膠圖譜，再經(jīng)ImageMaster 軟件分析在蛋白凝膠圖譜上標(biāo)記高表達(dá)的蛋白點(diǎn)?；ɡ倨?、半成熟及成熟諾麗果實(shí)分別有44、49 和40 個(gè)高表達(dá)蛋白（圖3）。

2.2 不同成熟期諾麗果蛋白質(zhì)譜鑒定

將不同成熟期諾麗果中的若干高豐度蛋白質(zhì)點(diǎn)，經(jīng)過(guò)挖點(diǎn)、酶解和提取處理后，利用基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（MALDITOF-MS）對(duì)其進(jìn)行分析和鑒定，并設(shè)置參數(shù)以基質(zhì)峰、酶自切峰進(jìn)行校正，測(cè)定各蛋白肽段的質(zhì)譜數(shù)據(jù)，再通過(guò)植物蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行對(duì)比來(lái)確定這些蛋白的名稱、種類(lèi)等信息，最終成功鑒定出花蕾期有33 個(gè)蛋白點(diǎn)、半成熟期有23 個(gè)蛋白點(diǎn)、成熟期有39 個(gè)蛋白點(diǎn)，結(jié)果分別如表2、表3 及表4 所示。

2.3 不同成熟期諾麗果蛋白功能分析

以上通過(guò)利用雙向電泳實(shí)驗(yàn)和MALDI-TOFMS生物質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)海南不同成熟期的諾麗果實(shí)中植物蛋白的提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，成功匹配了花蕾期、半成熟及成熟諾麗果實(shí)分別有44、49 和40 個(gè)高表達(dá)蛋白，通過(guò)質(zhì)譜鑒定，相應(yīng)確定了分別有33、49 及39 個(gè)蛋白，從屬不同植物功能的蛋白種類(lèi)，對(duì)這些差異表達(dá)的蛋白進(jìn)行了簡(jiǎn)單的生物學(xué)功能分析，詳見(jiàn)表5～表7?；ɡ倨诤桶氤墒炱谙嗤牡鞍子校毫蜓踹€蛋白、驅(qū)動(dòng)蛋白、葉綠體、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶、蛋白連接酶、Squamosa 啟動(dòng)子結(jié)合樣蛋白、轉(zhuǎn)錄因子；花蕾期和成熟期相同的蛋白有：轉(zhuǎn)移酶、可能的抗病蛋白、F-box 蛋白；半成熟期和成熟期相同的蛋白有：蛋白短梗、半胱氨酸蛋白酶、轉(zhuǎn)移酶、葉綠體、蛋白質(zhì)Ycf2。

3 討論

諾麗果不同成熟期的蛋白相差較大，表現(xiàn)在眾多的生長(zhǎng)、發(fā)育及遺傳功能方面?；ɡ倨诘?3號(hào)根向光蛋白與半成熟期的31 號(hào)光敏色素均與植物的光感應(yīng)相關(guān)，由于開(kāi)花是植物從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的一個(gè)重要轉(zhuǎn)折點(diǎn)，直接影響著種子植物生育期的早晚、授粉及種子發(fā)育的最佳時(shí)期，這暗示不僅可通過(guò)人為調(diào)節(jié)光的某些特性來(lái)調(diào)控花蕾期諾麗果的根向光蛋白，從而促使花蕾期諾麗果盡快開(kāi)花，也可從不同成熟的諾麗果提取根向光蛋白并用于科學(xué)培植諾麗果[91]。此外，發(fā)現(xiàn)花蕾期的8 號(hào)蛋白枯草桿菌蛋白酶[92]、18 號(hào)蛋白可能的抗病蛋白R(shí)PP1[93]與成熟期的19 號(hào)抗病蛋白Pik-1[94]，均與植物抵抗病菌相關(guān)，也表明這3種抗病蛋白可有望開(kāi)發(fā)為高效、低毒的生物農(nóng)藥。

本研究發(fā)現(xiàn)部分蛋白與動(dòng)物體內(nèi)的蛋白相同，具有不同的生物學(xué)或藥學(xué)功能，如花蕾期的1、28 號(hào)蛋白和半成熟期的34 為硫氧還原蛋白，作為一種小的熱穩(wěn)定酸性蛋白，是細(xì)胞中重要的氧化還原蛋白，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞抗氧化、抗脅迫、細(xì)胞凋亡、DNA 結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性等功能，說(shuō)明在諾麗果花蕾期到半成熟期的發(fā)育過(guò)程中，可能在抗氧化應(yīng)激、阻止線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞死亡、調(diào)節(jié)某些基因的表達(dá)等方面起關(guān)鍵作用[15]；作為人體重要的內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)之一，硫氧還原蛋白被研究證明具有出色的抗氧化活性或調(diào)節(jié)眾多細(xì)胞生存相關(guān)信號(hào)通路，從而抵抗活性氧損傷[95]。

花蕾期的2 號(hào)、成熟期的24 號(hào)蛋白為驅(qū)動(dòng)蛋白，作為一類(lèi)重要的微管調(diào)節(jié)蛋白，可能在諾麗果的神經(jīng)元的發(fā)育、紡錘體的組裝和染色體的分離過(guò)程中起著重要的作用[16]，人體驅(qū)動(dòng)蛋白是分子馬達(dá)的一種，其通過(guò)結(jié)合和水解ATP，導(dǎo)致頸部發(fā)生構(gòu)象變化，促使驅(qū)動(dòng)蛋白沿著微管“行走”，完成細(xì)胞中貨物運(yùn)輸?shù)墓ぷ?，能為?xì)胞生命活動(dòng)提供動(dòng)力[96]。花蕾期中編號(hào)6、20、24 和29 均為蛋白連接酶，其中編號(hào)6 和20 為E3 泛素蛋白連接酶，其廣泛參與細(xì)胞內(nèi)的代謝過(guò)程，比如細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞的凋亡，人體這些酶的調(diào)節(jié)異常與多種疾病有關(guān)，如神經(jīng)系統(tǒng)疾病與惡性腫瘤等[23]。編號(hào)24 和29 為生物素蛋白連接酶，通過(guò)調(diào)節(jié)微生物的乙酰輔酶A 羧化酶和丙酮酸羧化酶，控制重要代謝途徑的關(guān)鍵反應(yīng)，從而有效控制微生物生長(zhǎng)，也是極具開(kāi)發(fā)前景的抗菌新靶點(diǎn)[24]；花蕾期的18、成熟期的19 抗病蛋白能識(shí)別病原體及微生物，并觸發(fā)免疫，對(duì)抗病原體以及微生物的侵?jǐn)_[35]?；ɡ倨?7、成熟期的34 號(hào)為F-box 蛋白，作為泛素連接酶復(fù)合物SCF的重要組成物，可能參與調(diào)控諾麗果的整個(gè)細(xì)胞周期，對(duì)人體診治腫瘤以及生殖方面的疾病也有重要的作用[34]。成熟期的8 號(hào)天冬酰胺酰β-羥化酶是一種能催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸和氨的酰胺基水解酶，廣泛存在于植物、動(dòng)物和微生物中；人類(lèi)天冬氨酰參與并調(diào)節(jié)惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移，在多種惡性腫瘤中過(guò)表達(dá)，參與并調(diào)節(jié)惡性腫瘤細(xì)胞的侵襲及轉(zhuǎn)移，并可介導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)，在腫瘤靶向治療、免疫治療中的作用逐漸受到重視[67]。成熟期的10 級(jí)12 號(hào)蛋白為鈣依賴性蛋白激酶，在Ca2+介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用，可能參與調(diào)控成熟期諾麗果的植物激素信號(hào)通路、生物脅迫反應(yīng)及其根、莖、葉或種子發(fā)育等過(guò)程[69]；人體鈣依賴性蛋白激酶對(duì)膽管癌細(xì)胞HuCCT1 血管的生成有一定的影響和調(diào)控[97]。半成熟期的10、13、14、16、18、19、20、21、22 和成熟期的29 號(hào)為半胱氨酸蛋白酶，是植物中重要的蛋白酶家族之一，可能參與半成熟期和成熟期諾麗果種子萌發(fā)、幼苗發(fā)育、脅迫響應(yīng)和組織分化衰老等過(guò)程[46]；人體半胱氨酸蛋白酶抑制劑S 對(duì)于胃癌的鑒別具有重要作用，對(duì)極有可能作為新的腫瘤標(biāo)志物以及它對(duì)于胃腸癌診斷具有極其重要的參考價(jià)值[98]。

諾麗果是一種藥食同源的植物，雖然大部分現(xiàn)有的研究是關(guān)于諾麗果不同部位化學(xué)成分的提取及在營(yíng)養(yǎng)食品等方面的應(yīng)用，但從蛋白質(zhì)組學(xué)的方法挖掘諾麗果的科學(xué)及實(shí)用價(jià)值的國(guó)內(nèi)外研究卻很少有。本研究用蛋白質(zhì)組學(xué)揭示了不同成熟期果實(shí)的蛋白種類(lèi)及功能，以上結(jié)果表明在不同成熟期的諾麗果中大多數(shù)蛋白、激素以及酶均存在著藥學(xué)作用，在一定程度上可補(bǔ)充說(shuō)明諾麗果的藥理活性，對(duì)后續(xù)深入了解諾麗果實(shí)、指導(dǎo)育種以及進(jìn)一步開(kāi)發(fā)諾麗果實(shí)提供理論依據(jù)。

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