點蜂緣蝽試驗種群的室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)

郭江龍　李耀發(fā)　安靜杰　黨志紅　魏洪亮　高占林

摘? ? 要：點蜂緣蝽是危害我國大豆生產(chǎn)的重要害蟲，采用室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)提供大量發(fā)育一致的標(biāo)準(zhǔn)試蟲是研究該蟲生物學(xué)特性、綜合防治、抗藥性機制等的重要前提。為提高點蜂緣蝽室內(nèi)飼養(yǎng)的水平，滿足實驗室用蟲需求，采用新鮮蕓豆莢和四季豆莢作為點蜂緣蝽的食料，以直徑12 cm、高10 cm的塑料圓形養(yǎng)蟲盒為容器，并在其中放置了彎曲紙條增加養(yǎng)蟲盒內(nèi)空間異質(zhì)性，在室內(nèi)可控條件下對點蜂緣蝽的生長發(fā)育進(jìn)行研究。結(jié)果表明：在溫度（25±1） ℃，濕度30%～50%，光暗比16 h∶8 h條件下，取食蕓豆莢和四季豆莢的點蜂緣蝽若蟲平均發(fā)育歷期無顯著差異，分別為29.85、31.48 d，并且若蟲期平均存活率也無顯著差異。然而，取食蕓豆莢點蜂緣蝽成蟲的產(chǎn)卵期、單雌產(chǎn)卵量、雌蟲壽命顯著高于取食四季豆莢的成蟲，其參數(shù)分別為63.80 d、251.40粒、74.20 d。因此，采用新鮮蕓豆莢飼養(yǎng)點蜂緣蝽，能夠?qū)崿F(xiàn)點蜂緣蝽的批量飼養(yǎng)。

關(guān)鍵詞：點蜂緣蝽；飼養(yǎng)技術(shù)；蕓豆莢；四季豆莢

中圖分類號：S433.3? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ? ? ? ?DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2023.S.023

The Laboratory Rearing Technique for the Experimental Population of Riptortus pedestris Fabricius

GUO Jianglong1， LI Yaofa1， AN Jingjie1， DANG Zhihong1， WEI Hongliang2， GAO Zhanlin1

（1. Plant Protection Institute， Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences / IPM Center of Hebei Province / Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Northern Region of North China， Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Baoding， Hebei 07100， China; 2. Plant Protection and Quarantine Station of Baoding， Baoding， Hebei 071051， China）

Abstract：Riptortus pedestris is an important pest of soybean in China. The use of laboratory rearing technique to provide a large number of uniformly developing insect is an important prerequisite for studying the biological characteristics， integrated management and resistance mechanisms and so on. In order to improve the laboratory rearing and meet the needs of R. pedestris， the growth and development of R. pedestris were studied under controlled indoor conditions using Phaseolus coccineus and Phaseolus vulgaris as food， and the plastic round box of 12 cm in diameter and 10 cm in heigh was used as a container， in which curved paper strips were placed to increase the heterogeneity of the box. The results showed that there was no significant difference in developmental period of nymph stage between P. coccineus （29.85 d） and P. vulgaris （31.48 d） groups under the condition of （25±1） ℃， 30%～50% RH， and 16 h∶8 h L∶D. There was also no significant difference in survival rate of nymph stage. However， the oviposition period， egg production and female longevity of R. pedestris feeding on P. coccineus were significantly higher than those of R. pedestris feeding on P. vulgaris， with parameters of 63.80 d， 251.40 and 74.20 d， respectively. Therefore， the use of P. coccineus as food enables the mass rearing of R. pedestris.

Key words： riptortus pedestris; rearing technique; phaseolus coccineus; phaseolus vulgaris

點蜂緣蝽（Riptortus pedestris Fabricius）隸屬半翅目Hemiptera蛛緣蝽科Alydidae，是一種世界性重要的刺吸式害蟲，廣泛分布于中國、日本、韓國、印度、馬來西亞等東亞和東南亞地區(qū)[1-2]。該蟲主要分布在我國廣東、福建、臺灣、四川、江西、安徽、河南、河北、遼寧、吉林等地區(qū)，其最北采集地位于吉林省安圖縣二道白河鎮(zhèn)[3]。點蜂緣蝽寄主十分廣泛，能夠危害多種豆科作物，包括大豆（Glycine max）、綠豆（Vigna radiata）、豇豆（Vigna unguiculata）菜豆（Phaseolus vulgaris）、赤小豆（Vigna angularis），以及柿子、蘋果、柑桔等多種果樹[4-7]。大豆受到點蜂緣蝽危害后主要表現(xiàn)為植株后期不能正常鼓?；蛘卟还牧＃３墒炱谌~片、葉柄、豆莢、莖稈等仍保持濃綠色，甚至干枯也不變黃、落葉。我國點蜂緣蝽對大豆的危害也曾因這一癥狀被稱為“癥青”現(xiàn)象[8]。郭建秋等[8]和常麗丹等[9]研究發(fā)現(xiàn)，噴施菊酯類殺蟲劑可以明顯降低“癥青”發(fā)病株率。至此，點蜂緣蝽才逐漸進(jìn)入科研人員視野并與大豆“癥青”現(xiàn)象聯(lián)系到一起[6，10-11]。近年來，點蜂緣蝽在我國危害逐年加重，造成大豆嚴(yán)重減產(chǎn)，甚至絕收[6-7]，而東亞地區(qū)包括日本群島和朝鮮半島則更早就發(fā)現(xiàn)了該蟲的危害[12-13]。該蟲在我國1年發(fā)生2～3代不等，以成蟲在田間殘留秸稈、落葉和雜草中越冬，具有明顯滯育現(xiàn)象。成蟲和若蟲均可刺吸植株汁液，在大豆結(jié)實早期，往往群集危害，致使花蕾凋落、籽粒不飽滿、有莢無粒，嚴(yán)重時全株枯死，顆粒無收[14]。

采用室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)提供大量標(biāo)準(zhǔn)試蟲，對于研究害蟲行為變化、生理生化，以及篩選高效低毒化學(xué)藥劑和生物源藥劑等具有重要的作用，同時也是提高害蟲綜合治理水平不可或缺的手段之一。因此，室內(nèi)人工飼養(yǎng)已成為了當(dāng)前害蟲研究的重要內(nèi)容。多種害蟲的室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)被報道，如陸宴輝等[15]利用四季豆對綠盲蝽和中黑盲蝽進(jìn)行了室內(nèi)飼養(yǎng)探索；金銀利等[16]采用3因子2水平正交試驗設(shè)計對綠盲蝽（Apolygus lucorum）人工飼料進(jìn)行了優(yōu)化；路子云等[17]在傳統(tǒng)飼養(yǎng)粘蟲（Mythimma separata）的方法基礎(chǔ)上，改進(jìn)了飼養(yǎng)技術(shù)，進(jìn)一步提高了粘蟲的卵孵化率和存活率；秦啟聯(lián)對[18]詳細(xì)介紹了棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）的室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)與流程。目前，我國對于點蜂緣蝽的研究內(nèi)容僅限于生物學(xué)、形態(tài)特征、田間危害癥狀以及防治技術(shù)等方面[6，8，10-11]。對于室內(nèi)飼養(yǎng)方面，陳菊紅等[19]曾開展了溫度對點蜂緣蝽生長發(fā)育和種群繁殖的研究；胡英露等[20]研究了大豆莢飼養(yǎng)對點蜂緣蝽生殖力和種群趨勢的影響。此外，Mainali等[21]測定了豇豆、蕓豆、無絲豆等6種豆類種子對點蜂緣蝽生長發(fā)育和繁殖力的影響，認(rèn)為豇豆是最適宜的天然飼料。然而，關(guān)于規(guī)范化的點蜂緣蝽室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)與流程還未見報道。因此，考慮到點蜂緣蝽的危害性和室內(nèi)飼養(yǎng)的重要性，本研究擬探索一套適用于國內(nèi)點蜂緣蝽的室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)，篩選最佳的飼養(yǎng)方法，為該蟲試驗種群的建立、后期防治藥劑篩選、生物學(xué)特性等方面的研究提供充足的蟲源奠定堅實的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試點蜂緣蝽于2019年7月，采自河北省石家莊市平山縣近掌村，并在河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所殺蟲劑研究室用新鮮豆莢飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為（25±1）℃，濕度30%～50%，光暗比16 h∶8 h。以新鮮的蕓豆莢（Phaseolus coccineus）和四季豆莢（Phaseolus vulgaris）作為點蜂緣蝽備選飼料。

1.2 豆莢對點蜂緣蝽生長發(fā)育和繁殖的影響

采集同一天孵化的200頭1齡若蟲供試。將初孵若蟲用毛筆輕輕挑入底部放有濾紙的8 cm×8 cm ×5 cm養(yǎng)蟲盒內(nèi)，分別以蕓豆莢和四季豆莢為飼料，用帶孔盒蓋蓋住，每盒1頭，于（25±1） ℃養(yǎng)蟲室內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng)，成蟲羽化后單對放入直徑12 cm、高10 cm的塑料圓形養(yǎng)蟲盒內(nèi)，放入新鮮豆莢和3～5根1 cm寬、15 cm長的彎曲紙條，用50目細(xì)紗網(wǎng)封口，每天觀察記錄若蟲蛻皮、死亡、羽化、成蟲產(chǎn)卵前期、產(chǎn)卵期、產(chǎn)卵量、卵孵化、壽命等情況，并及時更換新鮮豆莢。

1.3 飼養(yǎng)方法

1.3.1 飼養(yǎng)條件 以直徑12 cm、高10 cm的塑料圓形養(yǎng)蟲盒為容器，采用50目細(xì)紗網(wǎng)封口，并確保通風(fēng)透氣。養(yǎng)蟲室內(nèi)溫度（25±1） ℃，濕度30%～50%，光暗比16 h∶8 h。以新鮮豆莢（市售）為點蜂緣蝽飼料，飼喂前用含有洗潔精的清水和0.5%次氯酸鈉溶液依次浸泡10 min后，以去除豆莢表面農(nóng)藥殘留，用清水反復(fù)沖洗至無異味，放到吸水紙上，室溫下自然晾干備用。

1.3.2 卵的收集 取點蜂緣蝽成蟲24 h內(nèi)產(chǎn)在紙條或豆莢上的卵，置于養(yǎng)蟲盒內(nèi)，盒底放1張吸水濾紙，避免因濕度過大，而造成若蟲死亡。每盒卵量約為50粒左右，用50目細(xì)紗網(wǎng)封口待其孵化。盒內(nèi)放入1 個直徑3 cm的小型培養(yǎng)皿，皿內(nèi)放入吸滿蒸餾水的棉球1個，以保持養(yǎng)蟲盒內(nèi)濕度。培養(yǎng)8 d左右，放入消毒處理后的新鮮豆莢，每盒2根，豆莢每2 d更換1次。待點蜂緣蝽卵全部孵化后（約至卵后第12天），取出產(chǎn)卵紙條和豆莢，及時更換豆莢。

1.3.3 若蟲的飼養(yǎng) 在裝有點蜂緣蝽初孵若蟲養(yǎng)蟲盒內(nèi)放入2～3根1 cm寬、15 cm長的紙條，并用手揉至彎曲，以增加養(yǎng)蟲盒內(nèi)的空間異質(zhì)性[15]，減少個體間的相互干擾，有利于若蟲存活。每盒內(nèi)保持初孵若蟲約40～50頭，每2 d觀察1次，并及時更換豆莢。視若蟲大小適當(dāng)增加豆莢數(shù)量。

1.3.4 成蟲的飼養(yǎng) 點蜂緣蝽若蟲飼養(yǎng)約30 d左右，待若蟲完成5次蛻皮、羽化為成蟲后，將當(dāng)天羽化的成蟲配對并轉(zhuǎn)入養(yǎng)蟲盒中，每盒不超過15對成蟲。養(yǎng)蟲盒中放入3根新鮮豆莢和3～5根彎曲的紙條作為成蟲產(chǎn)卵和活動空間，及時更換豆莢。接蟲10 d左右，點蜂緣蝽開始產(chǎn)卵，并取卵進(jìn)行下一個飼養(yǎng)周期，直至成蟲全部死亡。

1.4 數(shù)據(jù)處理

本研究所有數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤來表示。采用Microsoft Excle 2013和SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和統(tǒng)計分析。為了明確不同豆莢對點蜂緣蝽生長發(fā)育和繁殖能力的影響，若蟲發(fā)育歷期、存活率、成蟲壽命、產(chǎn)卵期、單雌產(chǎn)卵量等各項參數(shù)的均值差異分析采用t-測驗。數(shù)據(jù)分析前，先對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗，分析的顯著水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 豆莢對若蟲發(fā)育歷期的影響

由表1可知，點蜂緣蝽取食蕓豆莢和四季豆均可完成若蟲發(fā)育。1～5齡若蟲的發(fā)育歷期在2組處理間均無顯著差異（P>0.05），取食蕓豆莢點蜂緣蝽若蟲的平均發(fā)育歷期為29.85 d，四季豆莢飼養(yǎng)時，其若蟲發(fā)育歷期為31.48 d，2組處理間沒有顯著性差異（P>0.05）。

2.2 豆莢對若蟲存活率的影響

從點蜂緣蝽若蟲存活率（表2）來看，從1齡至5齡若蟲，蕓豆莢飼養(yǎng)點蜂緣蝽各齡若蟲平均存活率為79.44%～93.33%，其中1齡平均存活率最高為93.33%，2齡最低為79.44%，若蟲期平均存活率為45.44%；而四季豆莢飼養(yǎng)點蜂緣蝽各齡若蟲平均存活率為80.95%～93.27%，其中4齡平均存活率最高為93.27%，2齡最低為79.44%，若蟲期平均存活率為49.16%，2組處理間無顯著差異（P>0.05）。

2.3 豆莢對成蟲生殖發(fā)育和卵的影響

從點蜂緣蝽成蟲繁殖力（表3）來看，取食2種豆莢后，其平均產(chǎn)卵前期、卵孵化率、雄蟲壽命均無顯著差異（P>0.05）。從產(chǎn)卵期、單雌產(chǎn)卵量、雌蟲壽命來看，取食蕓豆莢的點蜂緣蝽成蟲明顯高于取食四季豆莢的成蟲（P<0.05），飼喂蕓豆莢點蜂緣蝽成蟲平均產(chǎn)卵期為63.80 d，平均單雌產(chǎn)卵量251.40粒（產(chǎn)卵量范圍161～330粒），雌蟲平均壽命為74.2 d，而飼喂四季豆莢成蟲的平均產(chǎn)卵期為37.75 d，平均單雌產(chǎn)卵量80.75粒（產(chǎn)卵量范圍43～113粒），雌蟲平均壽命為47.2 d。而從卵歷期來看，食用蕓豆莢的平均歷期稍長于食用四季豆莢的歷期，分別為10.23、9.16 d，兩者差異顯著（P<0.05）。

3 討論與結(jié)論

本研究為讀者提供了一套規(guī)范化的點蜂緣蝽室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)流程，可為科學(xué)研究提供充足且發(fā)育一致的蟲源。本研究針對點蜂緣蝽飼養(yǎng)食料、密度、光周期和種群退化進(jìn)行討論，便于科研工作者理解飼養(yǎng)方法中的幾個關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)，提高點蜂緣蝽室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)水平。

3.1 飼養(yǎng)食料

從本研究結(jié)果來看，蕓豆莢為點蜂緣蝽成蟲和若蟲繁殖較適宜的食料選擇，而Mainali等[20]在測定幾種豆類對點蜂緣蝽種群繁殖力的研究中，蕓豆莢飼養(yǎng)點蜂緣蝽若蟲時，其死亡率達(dá)到了93%，其成蟲壽命僅為18 d左右，明顯低于本研究；同時，Mainali等[20]研究認(rèn)為，豇豆是點蜂緣蝽最佳的飼料選擇，其單雌產(chǎn)卵量為218.40粒卵，低于本研究蕓豆莢飼養(yǎng)的251.40粒卵。陳菊紅等[13]利用大豆苗和鮮蕓豆莢進(jìn)行點蜂緣蝽成蟲飼養(yǎng)時，發(fā)現(xiàn)其最佳飼養(yǎng)條件（24 ℃）下，點蜂緣蝽單雌產(chǎn)卵量為87.39粒。胡英露等[19]用鼓粒期鮮豆莢飼養(yǎng)點蜂緣蝽，發(fā)現(xiàn)其平均單雌產(chǎn)卵量為116.32粒卵，雌雄蟲的壽命分別為46.26、52.75 d，顯著低于本研究所獲得的數(shù)據(jù)?；诖耍狙芯空J(rèn)為，在適宜的飼料條件下，室內(nèi)采用蕓豆莢作為點蜂緣蝽食料，可以進(jìn)行大規(guī)模飼養(yǎng)。然而，根據(jù)以往的經(jīng)驗，筆者發(fā)現(xiàn)市場采購的蕓豆莢會有農(nóng)藥殘留，可能導(dǎo)致點蜂緣蝽低齡若蟲大批量死亡。因此，在飼喂之前，需將蕓豆莢依次放入含有洗潔精的清水和0.5%次氯酸鈉溶液中浸泡10 min，然后再用清水清洗5～7遍，晾干后方可使用。點蜂緣蝽在飼養(yǎng)過程中也會排放一些糞便，容易導(dǎo)致豆莢腐爛，應(yīng)定期查看和更換豆莢。此外，操作時應(yīng)避免豆莢在養(yǎng)蟲盒內(nèi)滾動致低齡若蟲死亡的發(fā)生。

3.2 飼養(yǎng)密度

點蜂緣蝽若蟲和成蟲活動能力極強，其2～5齡若蟲爬行距離為3.4～4.28 m·h-1，成蟲飛行速度可達(dá)10.8 km·h-1，并且雄蟲存在同性斗爭行為[3]。同時，點蜂緣蝽若蟲和成蟲均會排泄大量液體糞便，導(dǎo)致豆莢易腐爛。因此，在飼養(yǎng)過程中，種群密度不易過大，若蟲40～50頭·盒-1，成蟲不超過15對·盒-1為宜，并定期清理養(yǎng)蟲盒、更換新紙條。

3.3 光周期

光周期是昆蟲感受外界環(huán)境變化重要的信號，對昆蟲生殖發(fā)育具有重要的影響，可引起昆蟲滯育[3]。點蜂緣蝽作為一種兼性滯育昆蟲，在短日照條件下（小于13.5 h）雌成蟲即可進(jìn)入其生殖滯育狀態(tài)[22]。前期研究發(fā)現(xiàn)，室內(nèi)飼養(yǎng)點蜂緣蝽，當(dāng)光暗比為12 h∶12 h時，其雌蟲經(jīng)歷30 d以上，也未發(fā)現(xiàn)交配和產(chǎn)卵行為（未發(fā)表數(shù)據(jù)）。因此，為了保證充足且整齊的蟲源，在飼養(yǎng)過程中，每日光照時長應(yīng)長于14 h，光暗比為16 h∶8 h是一個較合適的飼養(yǎng)條件。3.4 種群退化問題

在室內(nèi)長期飼養(yǎng)昆蟲過程中，無論使用植物自然食料還是人工飼料，昆蟲種群的生活力都可能會出現(xiàn)不同程度的衰退現(xiàn)象，甚至出現(xiàn)飼養(yǎng)難以為繼，其中病原菌或微孢子蟲在體內(nèi)積累和近緣繁殖是造成該現(xiàn)象的重要因素。針對病原菌或微孢子蟲在體內(nèi)積累問題，應(yīng)對飼養(yǎng)的裝置和空間進(jìn)行定期殺菌消毒處理，如在飼養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)蟲體感染細(xì)菌、病毒或在蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)微孢子蟲，應(yīng)立即丟棄，并對飼養(yǎng)空間進(jìn)行徹底消毒，引入新的蟲源；針對近緣繁殖的問題，可以定期采集一些野外親本，或者選擇來自不同地區(qū)的種群進(jìn)行交配，增加種群遺傳多樣性，延緩生活力衰退[23]，保證充足的蟲源。

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收稿日期：2023-04-06

基金項目：河北省重點研發(fā)計劃（22326513D）；河北省大豆產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（HBCT2023030206）

作者簡介：郭江龍（1989—），男，河北寧晉人，助理研究員，博士，主要從事農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究。

通訊作者簡介：高占林（1966—），男，河北樂亭人，研究員，主要從事農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治研究。