師文竹,舒敏,余澤文,張運(yùn)海
(四川律貝生物科技有限公司,四川 成都 610000)
2021 年4 月13、22 日。試驗地位于觀音巖增殖放流站。
催產(chǎn)藥物選擇寧波第二激素廠生產(chǎn)的鯉魚腦垂體(PG)、絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素釋放激素類似物(LHRH-A3)進(jìn)行搭配。精子保存液為0.9%的生理鹽水。
親魚進(jìn)入室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)后,按照四川律貝生物科技有限公司《室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)的操作規(guī)程》,早、中、晚測量水溫、水質(zhì)參數(shù)??刂扑疁刈兎? ℃,ρ(溶解氧)≥5 mg/L,pH 值為7.5~8.5,ρ(氨氮)<0.1 mg/L,ρ(亞硝酸鹽氮)<0.04 mg/L,及時清污。
1.4.1 親本選擇
1.4.2 人工催產(chǎn)
1.4.3 人工授精
雄魚腹部,使精液流出,用干燥的吸管吸取精液于精子保存液中。
固定雌魚,擦干生殖孔周圍的水分,并將尾部略朝魚體的一側(cè)彎曲,避免魚卵擠出后沿尾部方向流失。沿著胸部向生殖孔方向推壓雌魚的腹部,同時取吸管放置于雌魚肛門處,使魚卵順吸管而下,擠入干燥的白瓷盆中,避免魚卵黏在其體表。通過對親魚腹部連續(xù)推壓,直至魚卵不再排出為止。推壓時應(yīng)注意力度,避免對親魚造成損傷。
將保存液中的精子放入采集的魚卵中,并加入魚卵量2 倍左右的清水,用羽毛或手輕輕攪拌1~2 min,使精液充分均勻分散于水中,便于魚卵充分受精,再使用清水漂洗魚卵,直至水體干凈為止。
1.4.4 人工孵化及胚胎發(fā)育
圖1 孵化桶孵化
表1 長鰭吻繁殖結(jié)果
批次 催產(chǎn)日期 針次 催產(chǎn)時間 水溫/℃ 效應(yīng)時間/h孵化率/%104-13119:0019.6151.501.2885.331.2093.75 04-14207:00 204-22119:0021.311.50.900.8493.330.8095.23 04-23207:00獲得卵數(shù)/萬粒受精卵數(shù)/萬粒受精率/%出苗數(shù)/萬尾
圖2 長鰭吻胚胎發(fā)育過程
魚類性腺發(fā)育通常由內(nèi)源性因素(性激素水平)和外源性因素(營養(yǎng)、光照水溫、水流等)共同決定[7]。鯉科魚類人工繁殖過程中,一般采用2 次注射法進(jìn)行催產(chǎn),且效果較好[8-9]。管敏等[6]研究認(rèn)為,長鰭吻對催產(chǎn)劑的敏感性較差,需要采用較高劑量3 針注射的催產(chǎn)方式,但是催產(chǎn)率較低,僅有8.1%。采用1 次注射人工催產(chǎn)藥物PG(mg)+LHRH-A(2μg),對細(xì)鱗裂腹魚的人工催產(chǎn)效果較好[10]。本試驗選擇人工催產(chǎn)藥物PG+HCG+LHRH-A3搭配,采用2 針注射,催產(chǎn)率、受精率和孵化率均達(dá)到較高水平,說明了2 針注射催產(chǎn)方式,可成功對長鰭吻進(jìn)行人工繁殖,同時還減小了親魚的機(jī)械損傷,提升了產(chǎn)后親魚的成活率。
魚類受精卵在孵化過程中,會受到諸多外部環(huán)境因素的影響,主要有溫度、pH 值、氨氮、水溫等,水溫對魚類胚胎發(fā)育影響較大。尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)胚胎發(fā)育的最佳溫度為28~30 ℃[11];倒刺鲃(Spinibarbus denticulatus)胚胎發(fā)育的最佳溫度為24~29 ℃,在最佳孵化溫度范圍內(nèi),孵化率也會隨溫度升高而升高[12]。點帶石斑魚(Epinephelus malabaricus)的孵化水溫,對胚胎發(fā)育有顯著的影響[13]。黃姑魚(Nibea albiflora)在32 ℃<水溫<17 ℃時,不能孵化;在海水鹽度2.5%時,孵化適宜水溫為20~29 ℃,最佳水溫為20~23 ℃[14]。本試驗發(fā)現(xiàn),長鰭吻受精卵在19~22.5 ℃時,均可以成功孵化,且保持較高的孵化水平,隨著水溫升高,孵化時間會相應(yīng)縮短,但對孵化率的影響不大。