甜瓜雙單倍體組培生根過程中內源激素、多胺及相關氧化酶活性的變化

趙衛(wèi)星 高寧寧 康利允 程志強 梁慎 常高正 李海倫 王慧穎 徐小利 李曉慧

DOI：10.13925/j.cnki.gsxb.20230148

摘? ? 要：【目的】探究甜瓜雙單倍體組培苗內源激素、多胺類物質和關聯(lián)酶對不定根誘導分化和伸長響應的生理機制。【方法】以未受精子房離體培養(yǎng)獲得的雙單倍體芽為試材，在生根培養(yǎng)基上誘導培養(yǎng)，探討和分析其生根過程中內源激素、多胺類物質含量以及相關酶活性的變化規(guī)律?！窘Y果】生根誘導過程中吲哚乙酸（IAA）、脫落酸（ABA）含量呈現(xiàn)“下降-升高”的趨勢，分別在第7天和第14天達到最低值；赤霉素（GA3）含量先升高后下降，在第7天時達到最大值；玉米素核苷（ZR）含量呈現(xiàn)“下降-升高-下降”的趨勢，在第21天達到最大值；IAA/ABA和過氧化物酶（POD）活性逐漸升高，IAA/ZR和精胺（Spm）、亞精胺（Spd）、腐胺（Put）含量及吲哚乙酸氧化酶（IAAO）、多酚氧化酶（PPO）活性呈現(xiàn)“升高-下降-升高”的趨勢。相關性分析可知，Put與IAA/ABA、Spm以及IAAO與GA3存在極顯著正相關性（p＜0.01），Spm與IAA/ABA、Spd，Put與Spd、POD以及IAAO與PPO呈顯著正相關性（p＜0.05），Spd與ABA含量存在極顯著負相關性（p＜0.01）。【結論】一定范圍內的IAA、ABA含量、IAA/ABA和IAA/ZR升高及GA3、ZR含量降低有利于不定根誘導分化和生長發(fā)育，后期組培苗體內Spm、Spd、Put含量的升高有利于不定根的形成，IAAO、PPO、POD酶活性變化與不定根的發(fā)生和伸長也有密切聯(lián)系。

關鍵詞：甜瓜；雙單倍體芽；組培生根；內源激素；多胺；關聯(lián)酶

中圖分類號：S652 文獻標志碼：A 文章編號：1009-9980（2023）10-2195-09

Dynamic changes in polyamines， endogenous hormones and oxidase activities during rooting of double haploid muskmelon in vitro plantlets

ZHAO Weixing1， GAO Ningning1， KANG Liyun1， CHENG Zhiqiang2， LIANG Shen1， CHANG Gaozheng1， LI Hailun1， WANG Huiying1， XU Xiaoli1， LI Xiaohui 1*

（1Institute of Horticulture， Henan Academy of Agricultural Sciences， Zhengzhou 450002， Henan， China; 2Kaifeng Agricultural and Forestry Research Institute， Kaifeng 475004， Henan， China）

Abstract： 【Objective】 Muskmelon is one of the most important fruits in the world， which plays an important role in the adjustment of agricultural planting structure in China. But the narrow genetic basis， the lack of excellent germplasm resources， the long cycle and low efficiency of traditional breeding technology lead to the slow renewal of excellent varieties， which restricts the sustainable development of muskmelon industry. As a breeding method that can quickly and effectively obtain homozygous germplasm， the double monomer culture technology has become a research hotspot for muskmelon breeding workers at home and abroad. Rooting induction culture is an important part of the double haploid tissue culture system， which is directly related to the survival rate and seedling quality of tissue culture plantlets. There are many internal and external factors affecting the rooting process， including endogenous hormones， polyamines， related oxidases and exogenous substances such as ethylene and salicylic acid. The study aimed at investigating the changes of endogenous hormones， polyamine contents and related oxidase activities in the rooting culture process of melon double haploid shoots， in order to clarify the physiological mechanism of the response to adventitious root induction， differentiation and elongation， and to provide reference for regulating the rapid rooting of melon double haploid tissue culture plantlets. 【Methods】The unfertilized ovary of thick-skinned muskmelon hybrids Jinxiucuiyu was cultured on MS+0.03 mg·L-1 TDZ+0.2 mg·L-1 KT+0.01 mg·L-1 IAA+15% coconut juice medium to obtain haploid buds， and then doubled with 700 mg·L-1 colchicines， after identification by flow cytometry， the double haploid buds with the same growth were selected and transfered onto MS+0.1 mg·L-1 IAA+30 g·L-1 sucrose+6 g·L-1 agar medium （pH=5.86） for rooting culture， all of were incubated at （25±2） ℃， under a 16 h light/8 h dark cycle and 3000-4000 lx light intensity， the contents of endogenous hormones， polyamines and related oxidase activities in the basal stems were measured by liquid chromatography and catechol， colorimetry method at 0， 7， 14， 21 28 d respectively. 【Results】 During the course of rooting induction， the contents of indoleacetic acid （IAA） and abscisic acid （ABA） decreased firstly and then increased. The content of gibberellin （GA3） rose in the first seven days and decreased between the 7th day and the 28th day. The variation in zeatin nucleoside （ZR） content followed a pattern of “decrease-increase-decrease”. The content of IAA/ABA and peroxidase （POD） activities increased gradually. The IAA/ZR ratio and spermine （Spm）， spermidine （Spd）， putrescine（Put） contents and indoleacetic acid oxidase （IAAO）， polyphenol oxidase（PPO） activities showed a trend of “increase-decrease-increase”， the three polyamines reached the first peak on the 14th day and reached the maximum on the 28th day， the ratio of IAA/ZR reached the first peak on the 14th day and reached the maximum on the 28th day， the activities of IAAO and PPO increased rapidly from 0 to 7 days， reaching the maximum on the 7th and 14th days respectively， and the change range of them was relatively small from 7 to 28 days， and IAA content decreased rapidly from 0 to 7 d， decreased slowly in 7-14 d， increased slowly in 14-21 d， increased rapidly in 21-28 d， ABA content decreased rapidly in 0-14 d， increased slowly in 14-28 d. The correlation analysis showed that there were significant positive correlations between Put and IAA/ABA value， Spm， and between GA3 contents and IAAO activity （p＜0.01）， and significant positive correlations between Spm content and IAA/ABA value， Spd， and between Put and Spd contents， POD activities， and between IAAO and PPO activities （p＜0.05）， and significant negative correlation between Spd and ABA contents （p＜0.01）. It was proved that IAA/ABA ratio and Put content would play an important role in promoting the differentiation and growth of adventitious roots of muskmelon double haploid tissue culture plantlets. 【Conclusion】 The increase of IAA， ABA contents， IAA/ABA and IAA/ZR values and the decrease of GA3 and ZR contents in a certain range were conducive to adventitious root induction， differentiation and growth， the increase of Spm， Spd Put contents in late tissue culture plantlets was conducive to the formation of adventitious roots. In addition， the changes of IAAO， PPO， POD enzyme activities were closely related to the occurrence and elongation of adventitious roots.

Key words： Muskmelon; Double haploid; Tissue culture; Endogenous hormone; Polyamine; Associated enzyme

甜瓜（Cucumis melo L.）是全世界普遍栽培的一種葫蘆科作物，具有較高的商品價值和經(jīng)濟價值[1]。甜瓜遺傳基礎狹窄，優(yōu)異種質資源缺乏，傳統(tǒng)育種技術周期長、效率低，導致優(yōu)良品種更新慢，制約了我國甜瓜產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。雙單倍體培養(yǎng)技術作為可以快速有效獲取純合種質的一種育種手段，已成為國內外甜瓜育種工作者研究的熱點[2-4]。植物不定根的發(fā)生受多種內外因素的影響，內源植物激素是誘導不定根發(fā)生的主導因子[5-6]。王雪姣[7]的研究發(fā)現(xiàn)，吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）、細胞分裂素（ZR）對不定根的形成有促進作用，脫落酸（ABA）則對不定根的形成有抑制作用，IAA/ABA比值的提高，有利于不定根的形成。多胺作為一類生長調控物質，可通過影響激素的代謝或信號傳導調控不定根的發(fā)生與伸長[8-9]。Faivre-Rampant等[10]對煙草的研究發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中添加精胺（Spm）、亞精胺（Spd）、腐胺（Put）等多胺類物質對幼苗不定根形成有明顯促進作用；相關氧化酶活性與植物不定根的發(fā)生和發(fā)展也有著密切的關系[11]。徐盼盼[12]對牡丹外植體組織培養(yǎng)研究，認為吲哚乙酸氧化酶（IAAO）能夠氧化植物體內的IAA，從而影響不定根的形成，多酚氧化酶（PPO）、過氧化物酶（POD）可以催化酚類物質與IAA結合成一種“IAA-酚酸復合物”，加速不定根的產(chǎn)生。目前，國內外大多數(shù)學者對甜瓜雙單倍體的研究多集中在培養(yǎng)體系建立方面，并取得了一定的研究進展[13-16]，但有關誘導組培生根過程中內源激素、多胺類物質及相關氧化酶活性的變化未見報道。為此，筆者在本研究中主要通過探究甜瓜雙單倍體芽生根培養(yǎng)過程內源激素、多胺類物質含量以及相關氧化酶活性的變化規(guī)律，以期闡明其對不定根誘導分化和伸長響應的生理機制，為調控甜瓜雙單倍體組培苗快速生根提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

供試品種為錦繡脆玉，由河南省農(nóng)業(yè)科學院園藝研究所選育的厚皮甜瓜雜交種；將其未受精子房離體培養(yǎng)獲得的芽，經(jīng)流式細胞儀鑒定為單倍體，利用秋水仙素進行加倍，再經(jīng)流式細胞儀鑒定確認為雙單倍體芽[17]。

1.2 試驗設計

選取長勢一致的雙單倍體芽接入培養(yǎng)基（MS+IAA 0.1 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖+6 g·L-1瓊脂，pH=5.86）中，在溫度（25±2） ℃、光照度3 000～4 000 lx、光照時間16 h·d-1的條件下進行生根培養(yǎng)。每瓶接種8株，共接入120瓶。分別生長至0、7、14、21、28 d，取基部莖段（長度約0.5 cm）進行內源激素、多胺及相關酶活性的測定。試驗采用隨機區(qū)組設計，每個測定時段隨機選6瓶，3次重復。

1.3 測定項目與方法

內源激素：吲哚乙酸、玉米素核苷（ZR）、赤霉素、脫落酸含量測定采用液相色譜法[18]。液相色譜條件：島津LC-20AT，紫外檢測器SPD-20A，柱溫箱CTO-20AC，C18反相色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相A：100%甲醇；B：0.1%乙酸水溶液；A∶B=55∶45；進樣量20 μL，流速0.8 mL·min-1，柱溫30 ℃，紫外波長254 nm。

多胺類物質：精胺、亞精胺、腐胺含量測定采用液相色譜法[19]。液相色譜條件：伍豐LC-100，C18反相色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相A：90%乙腈/10%（含0.1%乙酸的0.1 mol·L-1乙酸胺）；B：10%乙腈/90%（含0.1%乙酸的0.1 mol·L-1乙酸胺）；A∶B=60∶40；進樣量20 μL，流速0.8 mL·min-1，柱溫35 ℃，紫外波長254 nm。

相關酶活性：多酚氧化酶活性測定采用鄰苯二酚法，吲哚乙酸氧化酶和過氧化物酶活性測定采用比色法，均參照李合生[20]的方法略有改動。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2013和SPSS 20.0軟件進行處理分析，差異性比較采用Duncans新復極差法。

2 結果與分析

2.1 甜瓜雙單倍體生根過程中不同時期的變化

從圖1可以看出，接種后7 d時莖段基部細胞開始啟動分化，愈傷組織開始出現(xiàn)，以后進入細胞分裂旺盛期，14 d時不定根根原基逐漸開始形成，21 d時外植體上形成肉眼可見的不定根，之后不定根數(shù)量和長度逐漸增加和伸長，28 d以后須根數(shù)量和伸長量明顯增加。

2.2 甜瓜雙單倍體生根過程中內源激素含量及比值的變化

甜瓜雙單倍體生根過程中內源激素IAA、ABA含量（w，后同）均呈現(xiàn)下降-升高的趨勢，GA3含量呈現(xiàn)升高-下降的趨勢，ZR含量則呈現(xiàn)下降-升高-下降的趨勢（圖2）。其中，IAA含量在第7天時最低，0～7 d下降迅速，7～21 d上升緩慢，21～28 d上升迅速，在28 d達到最高值，為0.33 μg·g-1；ABA含量在0 d時最高，為0.35 μg·g-1，在第14天達到最低，0～14 d迅速下降，14～28 d緩慢上升；GA3含量在第7天達到最高值，為4.41 μg·g-1，0～7 d上升迅速，7～21 d下降速度較快，21～28 d下降平緩；ZR含量在0～7 d緩慢下降，7～21 d迅速上升，21～28 d又迅速下降，在21 d時最高為3.11 μg·g-1。上述結果表明，甜瓜雙單倍體組培苗生根與IAA、ABA、ZR、GA3 4種內源激素密切相關，在幼苗發(fā)育后期，一定范圍內的IAA、ABA含量升高及GA3、ZR含量降低有利于不定根誘導分化和生長發(fā)育。

IAA/ABA值呈現(xiàn)逐漸增長趨勢，其中0～7 d增長緩慢，7～28 d增長迅速；IAA/ZR值呈現(xiàn)升高-下降-升高的變化趨勢，0～21 d變化較為平緩，21～28 d升高迅速（圖3）。表明IAA/ABA、IAA/ZR的值與甜瓜雙單倍體生根有緊密關系，后期IAA/ABA和IAA/ZR值的升高有利于不定根的發(fā)生。

2.3 甜瓜雙單倍體在生根過程中多胺類物質含量的變化

腐胺、精胺和亞精胺含量在誘導生根過程中均呈現(xiàn)升高-下降-升高的變化趨勢（圖4），0～14 d和21～28 d逐漸上升，14～21 d逐漸下降，在14 d時達到第一個峰值，分別為14.65 μg·g-1、4.90 μg·g-1、12.57 μg·g-1，且14～28 d均顯著高于第0天，第28天分別比第0天提高387.08%、796.55%、327.16%。Put和Spm含量0～7 d變化較為平緩，7～28 d變化幅度較大，Spd含量則在0～7 d變化幅度較大，7～28 d變化較為平緩。表明甜瓜雙單倍體生根過程與多胺類物質Put、Spm和Spd含量有關，后期其含量的升高有利于不定根的形成。

2.4 甜瓜雙單倍體在生根過程中相關酶活性的變化

甜瓜雙單倍體在生根過程中，吲哚乙酸氧化酶、多酚氧化酶活性呈現(xiàn)升高-下降-升高的趨勢，過氧化物酶活性呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢（圖5）。其中，IAAO、PPO活性在0～7 d時上升較快，分別在第7天和第14天時達到最大值，為201.55 μg·g-1·h-1、385.00 U·g-1，7～28 d時變化幅度相對較小，但其活性均顯著高于第0天；POD活性在0～7 d時上升較慢，7～28 d時上升較快，在第28天達到最大值，為1 105.54 U·g-1，除第0天和第7天差異不顯著外，其他測定天數(shù)間差異均達顯著水平。結果表明，甜瓜雙單倍體在生根過程中可通過調控相關酶的活性來促進不定根的發(fā)生。

2.5 在誘導生根過程中多胺類物質、內源激素含量及關聯(lián)酶活性的相關性分析

由甜瓜雙單倍體誘導生根過程中多胺類物質、內源激素含量與3種關聯(lián)酶活性相關性分析（表1）可見，IAA/ABA與Put、Spm、POD呈顯著或極顯著正相關（r=0.93**、0.86*、0.96**）；GA3與IAAO酶活呈極顯著正相關（r=0.97**）；IAA與IAA/ZR呈顯著正相關（r=0.86*）。Put與Spm、Spd和POD呈顯著或極顯著正相關（r=0.98**、0.85*、0.91*）；Spm與Spd呈顯著正相關（r=0.83*）；IAAO與PPO呈顯著正相關（r=0.91*）。表明IAA/ABA比值和Put含量對甜瓜雙單倍體組培苗不定根誘導分化和生長有重要促進作用。

3 討 論

不定根的形成在植物發(fā)育生物學中是一個重要的課題[21]。本研究表明，甜瓜雙單倍體組培苗生根與IAA、ABA、ZR、GA3 4種內源激素以及IAA/ABA、IAA/ZR的比值密切相關。其中內源激素IAA、ABA含量變化呈現(xiàn)下降-升高的趨勢，與閆帥等[22]對杜梨組培苗的研究結果一致；可能是根原基尚未形成時，IAAO酶活性增強促使IAA降解，后期不定根原基的誘導和局部生長素水平升高同時發(fā)生；在一定范圍內ABA濃度升高可以促進不定根的發(fā)生，過高濃度ABA又會抑制不定根的發(fā)生，而賀丹等[23]對牡丹試管苗的研究則與本研究結果中ABA的變化相反，造成這種差異的原因可能與不同植物種類生根過程對ABA的敏感程度以及所設置的環(huán)境條件不同有關。本試驗結果中GA3含量呈現(xiàn)升高-下降的趨勢，表明GA3的調節(jié)作用在根原基的形成后逐步顯現(xiàn)，且后期GA3含量降低，在一定程度上促進了不定根的形成，與王金祥等[24]對綠豆插條生根的研究結果一致。玉米素核苷是天然細胞分裂素，在植物的生長過程中促進細胞分裂和擴大[25]。本研究中，ZR含量則呈現(xiàn)下降-升高-下降的變化趨勢，可能與根原基形成前后及根伸長時細胞數(shù)量和分裂速度對ZR需求量存在差異有關，這在賀丹等[23]對牡丹試管苗生根的研究中得到了驗證。本研究結果還表明，在誘導生根后期IAA/ABA和IAA/ZR比值增大更有利于甜瓜雙單倍體不定根的發(fā)生和伸長，這與對菊花[9]、百合[26]組培生根的研究結果一致。激素作為植物的內源信號在生根過程中發(fā)揮著作用，內源激素之間可能會存在著一種協(xié)同或拮抗作用，但具體調控不定根的形成機制還有待進一步研究。

多胺代謝的特征之一是參與了植物的生物和非生物因素脅迫[27]，其含量的變化可有效改變關聯(lián)酶的活性以提高植物體的抗逆性，進而調控生命活動[28]。本研究結果表明，甜瓜雙單倍體在生根過程中多胺類物質脯氨、精氨和亞精胺含量均呈現(xiàn)升高-下降-升高的變化趨勢，后期其含量的升高有利于不定根的形成和伸長，與閆帥等[22]杜梨組培生根的研究結果一致。這可能是多胺類物質在根原基形成前和形成后主要參與對外界脅迫的抵御，根原基形成過程中則主要參與不定根根原基的誘導，但其具體原因還需進一步探討。

植物的生根是一個復雜的生理活動過程，體內相關氧化酶如吲哚乙酸氧化酶、多酚氧化酶、過氧化物酶在這一過程中發(fā)揮重要作用[29]。在本研究中，IAAO、PPO酶活性在愈傷組織誘導階段逐漸上升，在不定根形成后呈現(xiàn)下降趨勢，在伸長期又逐漸升高，與王瑞等[11]對油茶和賀丹等[23]對牡丹組培苗的研究結果基本一致，可能與2種酶在生根過程中調控有關激素和多胺類物質的形成有關，這在2種酶活性與相關激素和多胺類物質含量的相關性中也得到了證實；POD活性在生根過程中則呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢，可能與其調控IAA/ABA的比值有關。這充分揭示了甜瓜雙單倍體不定根的發(fā)生和伸長與這3種氧化酶活性有密切關系。

4 結 論

甜瓜雙單倍體組培苗生根與IAA、ABA、ZR、GA3以及多胺類物質Spm、Spd、Put含量密切相關，一定范圍內的IAA、ABA 含量升高及GA3、ZR含量降低有利于不定根誘導分化和生長發(fā)育，IAA/ABA、IAA/ZR比值升高有利于不定根的發(fā)生；后期組培苗體內Spm、Spd、Put含量的升高有利于不定根的形成；其中IAA/ABA的比值及Put含量在誘導生根過程中發(fā)揮著重要的調控作用，IAAO、PPO、POD酶活性與不定根的發(fā)生和伸長也有密切關系。

參考文獻 References：

[1] 張雪嬌. 甜瓜果實相關性狀QTL分析[D]. 哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學，2013.

ZHANG Xuejiao. The QTL analysis of traits related fruits in melon （Cucumis melo L.）[D]. Harbin：Northeast Agricultural University，2013.

[2] DONG Y Q，ZHAO W X，LI X H，LIU X C，GAO N N，HUANG J H，WANG W Y，XU X L，TANG Z H. Androgenesis，gynogenesis，and parthenogenesis haploids in cucurbit species[J]. Plant Cell Reports，2016，35（10）：1991-2019.

[3] 李海倫，王琰，趙衛(wèi)星，李曉慧，常高正，高寧寧，梁慎，康利允，徐小利. 甜瓜未受精子房或胚珠離體培養(yǎng)研究進展[J]. 北方園藝，2019（10）：134-140.

LI Hailun，WANG Yan，ZHAO Weixing，LI Xiaohui，CHANG Gaozheng，GAO Ningning，LIANG Shen，KANG Liyun，XU Xiaoli. Advances in unfertilized ovary or ovule of melon in vitro culture[J]. Northern Horticulture，2019（10）：134-140.

[4] 柯思佳，錢春桃，包衛(wèi)紅，倪維晨，李瑞霞. 甜瓜離體雌核發(fā)育誘導單倍體研究進展[J]. 中國瓜菜，2018，31（9）：1-5.

KE Sijia，QIAN Chuntao，BAO Weihong，NI Weichen，LI Ruixia. Research progress of in vitro gynogenesis induction haploid in melon[J]. China Cucurbits and Vegetables，2018，31（9）：1-5.

[5] 蒙海濤，韓清芳，賈志寬，李子芳，王瑩. 水培紫花苜蓿的莖段生根過程中內源激素含量變化[J]. 植物生理學通訊，2008，44（3）：498-500.

MENG Haitao，HAN Qingfang，JIA Zhikuan，LI Zifang，WANG Ying. Changes of the endogenous hormone contents in alfalfa stem segments during the rooting process under solution culture[J]. Plant Physiology Communications，2008，44（3）：498-500.

[6] 馬振華，趙忠，張曉鵬，張博勇，趙輝，詹曉紅. 四倍體刺槐扦插生根過程中氧化酶活性的變化[J]. 西北農(nóng)林科技大學學報（自然科學版），2007，35（7）：85-89.

MA Zhenhua，ZHAO Zhong，ZHANG Xiaopeng，ZHANG Boyong，ZHAO Hui，ZHAN Xiaohong. Studied on the oxidation enzymes activities in the periods of making roots in the green branch of Robinia pseudoacacia[J]. Journal of Northwest A & F University （Natural Science Edition），2007，35（7）：85-89.

[7] 王雪嬌. 藍莓組培苗扦插繁殖技術與生根機理的研究[D]. 哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學，2016.

WANG Xuejiao. Cutting propagation techinique and rooting mechanism of blueberries tissue culture[D]. Harbin：Northeast Agricultural University，2016.

[8] MOHAN B S，HOSETTI B B. Phytotoxicity of cadmium on the physiological dynamics of Salvinia natans L. grown in macrophyte ponds[J]. Journal of Environmental Biology，2006，27（4）：701-704.

[9] 徐東花，孫霞，孫憲芝，徐璐. 亞精胺調控菊花不定根發(fā)生的生理機制[J]. 植物生理學報，2014，50（10）：1546-1554.

XU Donghua，SUN Xia，SUN Xianzhi，XU Lu. Physiological mechanism of spermidine regulation on formation of adventitious roots in Chrysanthemum[J]. Plant Physiology Journal，2014，50（10）：1546-1554.

[10] FAIVRE-RAMPANT O，KEVERS C，DOMMES J，GASPAR T. The recalcitrance to rooting of the micropropagated shoots of the rac tobacco mutant：implications of polyamines and of the polyamine metabolism[J]. Plant Physiology and Biochemistry，2000，38（6）：441-448.

[11] 王瑞，陳永忠，王湘南，彭邵鋒，楊小胡，陳隆升，馬力. 油茶組培苗生根過程中生理生化指標的變化[J]. 經(jīng)濟林研究，2015，33（2）：68-72.

WANG Rui，CHEN Yongzhong，WANG Xiangnan，PENG Shaofeng，YANG Xiaohu，CHEN Longsheng，MA Li. Changes of physiological and biochemical indexes during tissue culture seedlings rooting in Camellia oleifera[J]. Nonwood Forest Research，2015，33（2）：68-72.

[12] 徐盼盼. 環(huán)境因子對牡丹試管苗生根的影響[D]. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學，2011.

XU Panpan. The effect of environmental factor on rooting culture of Paeonia suffruticosa in vitro[D]. Zhengzhou：Henan Agricultural University，2011.

[13] 牛明明. 甜瓜離體雌核發(fā)育誘導單倍體研究[D]. 哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學，2012.

NIU Mingming. Study of gynogenesis in vitro to induce haploid plants in melon[D]. Harbin：Northeast Agricultural University，2012.

[14] 韓麗華. 厚皮甜瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)技術[D]. 保定：河北農(nóng)業(yè)大學，2004.

HAN Lihua. In vitro gynogenesis in melon （Cucumis melo L.） from unpollinated ovules[D]. Baoding：Hebei Agricultural University，2004.

[15] 高寧寧，李曉慧，康利允，常高正，梁慎，徐小利，李海倫，王慧穎，趙衛(wèi)星. 厚皮甜瓜未受精子房離體培養(yǎng)獲得胚囊再生植株[J]. 果樹學報，2020，37（7）：1036-1045.

GAO Ningning，LI Xiaohui，KANG Liyun，CHANG Gaozheng，LIANG Shen，XU Xiaoli，LI Hailun，WANG Huiying，ZHAO Weixing. Acquisition of plants regenerated from embryo sac of unfertilized ovary in muskmelon[J]. Journal of Fruit Science，2020，37（7）：1036-1045.

[16] 賈媛媛，張永兵，刁衛(wèi)平，陳勁楓，程志芳，張曉青. 雙單倍體甜瓜的獲得及其初步定性研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學，2008，36（1）：116-118.

JIA Yuanyuan，ZHANG Yongbing，DIAO Weiping，CHEN Jinfeng，CHENG Zhifang，ZHANG Xiaoqing. Obtainment of double haploid melon and its preliminary property study[J]. Jiangsu Agricultural Sciences，2008，36（1）：116-118.

[17] 高寧寧，李曉慧，康利允，梁慎，常高正，李海倫，王慧穎，王琰，徐小利，趙衛(wèi)星. 單倍體甜瓜染色體加倍技術研究[J]. 中國瓜菜，2021，34（6）：28-32.

GAO Ningning，LI Xiaohui，KANG Liyun，LIANG Shen，CHANG Gaozheng，LI Hailun，WANG Huiying，WANG Yan，XU Xiaoli，ZHAO Weixing. Study on chromosome doubling technique of haploid muskmelon[J]. China Cucurbits and Vegetables，2021，34（6）：28-32.

[18] 郭敏敏，王清連，胡根海. 利用高效液相色譜法分離和測定棉花組織培養(yǎng)過程中4種內源激素[J]. 生物技術通訊，2009，20（2）：213-216.

GUO Minmin，WANG Qinglian，HU Genhai. Separation and determination of four plant hormones during somatic embryogenesis of Gossypium hirsutum L. with HPLC[J]. Letters in Biotechnology，2009，20（2）：213-216.

[19] 劉俊，吉曉佳，劉友良. 檢測植物組織中多胺含量的高效液相色譜法[J]. 植物生理學通訊，2002，38（6）：596-598.

LIU Jun，JI Xiaojia，LIU Youliang. High performance liquid chromatography method for measuring polyamine content in plant tissue[J]. Plant Physiology Communications，2002，38（6）：596-598.

[20] 李合生. 植物生理生化實驗原理和技術[M]. 北京：高等教育出版社，2000.

LI Hesheng. Principles and techniques of plant physiological biochemical experiment[M]. Beijing：Higher Education Press，2000.

[21] 趙艷，高曉余，查友貴，王靜，王斌，肖春，葉敏. 植物生長調節(jié)劑與不定根的形成[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學，2011，50（1）：12-16.

ZHAO Yan，GAO Xiaoyu，ZHA Yougui，WANG Jing，WANG Bin，XIAO Chun，YE Min. Plant growth regulators and adventitious root formation[J]. Hubei Agricultural Sciences，2011，50（1）：12-16.

[22] 閆帥，張少瑜，徐鍇，袁繼存，李曉光，周江濤，程存剛，趙德英. 杜梨組培生根過程中多胺、內源激素及相關氧化酶活性的變化[J]. 果樹學報，2019，36（3）：318-326.

YAN Shuai，ZHANG Shaoyu，XU Kai，YUAN Jicun，LI Xiaoguang，ZHOU Jiangtao，CHENG Cungang，ZHAO Deying. Dynamic changes in polyamines，endogenous hormones and oxidase activities during rooting of in vitro plantlets of Pyrus betulifolia Bunge[J]. Journal of Fruit Science，2019，36（3）：318-326.

[23] 賀丹，王政，何松林. 牡丹試管苗生根過程解剖結構觀察及相關激素與酶變化的研究[J]. 園藝學報，2011，38（4）：770-776.

HE Dan，WANG Zheng，HE Songlin. Adventitious root generating process and hormone and enzyme changes in vitro Paeonia suffruticosa[J]. Acta Horticulturae Sinica，2011，38（4）：770-776.

[24] 王金祥，潘瑞熾. 綠豆插條生根過程中內源激素含量變化[J]. 植物生理學通訊，2004，40（6）：696-698.

WANG Jinxiang，PAN Ruichi. Changes in endogenous hormone contents of mung bean during adventitious root formation of cuttings[J]. Plant Physiology Communications，2004，40（6）：696-698.

[25] 潘瑞熾.植物生理學[M].7版. 北京：高等教育出版社，2013.

PAN Ruichi. Plantphysiology[M]. 7th ed. Beijing：Higher Education Press，2013.

[26] 孫亮，王有國，賈文杰，王立，王齊. 外源H2O2對百合小鱗莖生根發(fā)芽和內源激素含量的影響[J]. 中國農(nóng)學通報，2017，33（16）：65-70.

SUN Liang，WANG Youguo，JIA Wenjie，WANG Li，WANG Qi. Effects of exogenous H2O2 on rooting and germination and endogenous hormone contents of lily bulb[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin，2017，33（16）：65-70.

[27] 李亞棟，何近剛. 植物多胺代謝與脅迫響應研究進展[J]. 華北農(nóng)學報，2012，27（S1）：240-245.

LI Yadong，HE Jingang. Advance in metabolism and response to stress of polyamines in plant[J]. Acta Agriculturae Boreali-Sinica，2012，27（S1）：240-245.

[28] 杜紅陽，劉骨挺，楊青華，劉懷攀. 小麥胚中不同形態(tài)多胺含量的變化及其與耐旱性的關系[J]. 作物學報，2016，42（8）：1224-1232.

DU Hongyang，LIU Guting，YANG Qinghua，LIU Huaipan. Dynamics in contents of different types of polyamine in wheat embryos and its relationship with resistance to drought stress[J]. Acta Agronomica Sinica，2016，42（8）：1224-1232.

[29] 陳啟文，周月琴，韓艷娜，李葉云，江昌俊. 茶樹扦插生根過程中3種氧化酶活性及多酚含量變化研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)大學學報，2013，40（6）：908-911.

CHEN Qiwen，ZHOU Yueqin，HAN Yanna，LI Yeyun，JIANG Changjun. Changes of three oxidase activities and polyphenol content in tea cuttings in the process of rooting[J]. Journal of Anhui Agricultural University，2013，40（6）：908-911.

收稿日期：2023-04-12 接受日期：2023-06-26

基金項目：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部財政部：國家西甜瓜產(chǎn)業(yè)技術體系建設項目（CARS-25）；河南省西甜瓜產(chǎn)業(yè)技術體系建設項目（HARS-22-10-G1）；河南省科技攻關項目（222102110208）；河南農(nóng)業(yè)科學院自主創(chuàng)新項目（2023ZC033）

作者簡介：趙衛(wèi)星，男，副研究員，博士，主要從事西甜瓜遺傳育種及栽培生理研究。Tel：0371-65748477，E-mail：wxzhao2008@163.com

通信作者Author for correspondence. E-mail：lixiaohui80@126.com