規(guī)模豬場開展常態(tài)化非洲豬瘟檢測的做法與體會

李忠輝 建寧縣伊家鄉(xiāng)畜牧水產(chǎn)站 福建建寧 354500

非洲豬瘟防控常態(tài)化時期， 規(guī)模豬場要夯實非洲豬瘟防控基礎，保障規(guī)模豬場正常生產(chǎn)，最重要的是構(gòu)建完善的生物安全體系，加強生產(chǎn)管理、調(diào)運監(jiān)管、檢疫檢驗、疫病監(jiān)測、病死豬無害化處理和糞污資源化利用等閉環(huán)管理。 在多年的防控非洲豬瘟的生產(chǎn)實踐中體會到，在做好生物安全的基礎上，規(guī)模豬場建設自檢實驗室，開展非洲豬瘟常態(tài)化檢測，對做好非洲豬瘟防控起到了重要的作用。

1 開展規(guī)模豬場常態(tài)化檢測的主要作用

1.1 風險評估與風險排查 豬場主動開展非洲豬瘟檢測，檢測樣品出陽性結(jié)果是代表核酸陽性，雖然不能判斷它具有活性或具有感染性， 但能夠表明病原的感染痕跡；檢測核酸陰性結(jié)果，最起碼能說明對環(huán)境的清理、清洗、消毒起到了一定作用；如果環(huán)境檢測核酸陽性，說明清理、清洗、消毒工作是不徹底的。如果沒有檢出非洲豬瘟病毒，說明可以繼續(xù)沿用現(xiàn)有方案“嚴防死守”，使自己心中有底氣，繼續(xù)養(yǎng)殖生產(chǎn)計劃。 豬場不開展檢測，豬未發(fā)病，算是僥幸逃過，但不能保證“明天”豬不得??；一旦得病，無藥可治、無計可施，而且可能大面積污染、大范圍感染，精準清除也不可能了，面臨的是全軍覆沒的風險。

1.2 做到早發(fā)現(xiàn)與早處理 據(jù)報道，豬感染非洲豬瘟病毒后， 一般2～3 d 血液病毒核酸檢測陽性，3～4 d 出現(xiàn)發(fā)熱等癥狀，4～5 d 口腔及肛拭子樣品病毒核酸檢測呈陽性，6～10 d 感染豬大部分發(fā)病死亡，同群接觸豬同樣全部發(fā)病、死亡。非洲豬瘟強毒株感染、發(fā)病、排毒，隨著病程的發(fā)展，排毒量增加，Ct 值減小，這也是非洲豬瘟早期檢測和精準清除的基礎。經(jīng)過幾年實踐發(fā)現(xiàn)，非洲豬瘟傳播是有一個過程的，一般它的潛伏期就是預警預報， 早期預警預防通常為3～15 d 或更長，目的是檢測出陽性后，在還沒有感染到其它健康豬只時進行有效隔離。 通過定期抽檢檢出非洲豬瘟感染豬，采取適當措施，無害化處理患豬，并在短時間內(nèi)轉(zhuǎn)移健康豬只，早發(fā)現(xiàn)、早精準清除，將損失降到最低。

靜默生產(chǎn)與精準清除的依據(jù)。實踐中，一些豬場在發(fā)現(xiàn)異常豬或者在豬死亡后進行檢測， 結(jié)果非洲豬瘟陽性，這時為時已晚。只有在豬場生產(chǎn)非常平穩(wěn)的狀況下，按常態(tài)化監(jiān)測計劃，對豬群進行抽查，即制定一套篩查方法， 按照一定的抽樣比例對正常豬群進行監(jiān)測。一旦發(fā)現(xiàn)問題立即進行徹底篩查，全場靜默生產(chǎn)，發(fā)現(xiàn)異常情況，及時采取相應措施，最大程度減少損失。

2 常態(tài)化非洲豬瘟檢測方案

2.1 檢測頻率 常態(tài)化非洲豬瘟檢測頻率，可根據(jù)不同環(huán)節(jié)風險評估結(jié)果及周邊疫情情況， 結(jié)合本場實際確定，對高風險區(qū)域頻率要高些。如引種、車輛、精液，要求每批次均進行采樣檢測；采購飼料、物資產(chǎn)品等，實行定期監(jiān)測，檢測頻率可按每月或每周進行；每周對豬群、圈舍、倉庫、藥房、通道等區(qū)域進行采樣檢測。

2.2 檢測采樣重點 規(guī)模豬場的非洲豬瘟風險點大小可以依次劃分為引種（精液）、運豬車、人員、飼料、物品。首先，對于實行自繁自養(yǎng)的規(guī)模豬場，調(diào)運生豬的車輛是風險最高的因素。 據(jù)全國非洲豬瘟疫情暴發(fā)以來有關流行病學調(diào)查結(jié)果顯示， 生豬運輸車輛，是疫情傳播擴散的首要因素；其次，由于人員和物資進入豬場，也是引發(fā)疫情的重要原因。做好對生豬運輸車輛以及進入豬場人員和物資的檢測，是常態(tài)化非洲豬瘟檢測的重點。

2.3 檢測采樣方案

2.3.1 豬場外圍環(huán)境采樣 運豬車輛： 對車輛前中后、上下、里外采集環(huán)境拭子，不少于10 個點。 車輛洗消中心：主要采集地面、工作人員身上（包括衣物、手臂、鞋底）等環(huán)境拭子，不少于8 個點。 售豬中轉(zhuǎn)區(qū)：主要采集地面、中轉(zhuǎn)臺欄桿等環(huán)境拭子，不少于8 個點。病死豬及無害處理區(qū)：每頭病死豬鼻肛拭子各1 份；同時采集地面、工作人員身上等環(huán)境拭子，不少于8 個點。 門衛(wèi)值班室： 主要采集地面和門把等環(huán)境拭子，不少于4 個點。 物品消毒間：主要采集地面和物品表面等環(huán)境拭子，不少于4 個點。飼料運輸車：主要采集車輛外圍、司機身上等環(huán)境拭子，不少于8 個點。進場人員：主要采集人員身上及行李表面等環(huán)境拭子，各1 份。

2.3.2 豬場緩沖區(qū)環(huán)境采樣 食堂廚房：地面、案板采樣，不少于5 個點。辦公區(qū)：地面采樣，不少于3 個點。員工宿舍：地面采樣，每房間不少于3 個點。場區(qū)環(huán)境：地面采樣，不少于10 個點。食材：外包裝采樣，不少于3 份。

2.3.3 豬場內(nèi)部環(huán)境采樣 獸醫(yī)室：地面采樣，不少于3 個點。 飼料倉庫：地面采樣，不少于5 個點。 休息間：地面采樣，不少于3 個點。生產(chǎn)區(qū)員工鞋靴：鞋靴外周拭子采樣，取樣比例20%。 豬舍通道：地面采樣，不少于10 個點。 死亡母豬：豬鼻肛拭子采樣，每豬必采1 份。 殘豬、弱豬：鼻肛拭子采樣，每豬1 份。

2.4 采樣注意事項

2.4.1 樣品的種類 對可疑豬、病死豬、殘豬采樣，可采集深部咽拭子、前腔靜脈或尾根抗凝血、口鼻拭子等；對分娩母豬，應采集臍帶血、胎衣；對死胎和流產(chǎn)胎兒，應采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。豬群轉(zhuǎn)群、分娩、免疫等應激會促進非洲豬瘟病毒的復制，可在豬群受到應激刺激后2～3 d 內(nèi)及時采咽拭子、 尾根血、胎衣液等樣品進行檢測，以提高檢出率。

2.4.2 樣品混樣檢測 同一采樣對象可混樣檢測，混樣數(shù)量盡量不要超過10 個。

3 檢測結(jié)果的應用

實驗室檢測是生物安全體系的重要內(nèi)容， 投入人力、物力開展檢測，目的是預警風險，查找漏洞，發(fā)現(xiàn)問題，解決問題。 如車輛樣本為檢測陽性，車輛必須隔離停運，按規(guī)程規(guī)范消毒，再進行檢測評估；外來人員及行李樣本檢測陽性的， 應當拒絕相關人員及物品進入，并對污染場所嚴格消毒；豬場內(nèi)部樣品檢測陽性的，包括獸醫(yī)室、飼料倉庫、休息間、生產(chǎn)區(qū)員工鞋（衣服）、豬舍通道、殘豬、弱豬、病死豬、病死豬無害處理區(qū)等，應立即啟動相關防控應急預案。

4 體 會

4.1 規(guī)范建設企業(yè)自檢實驗室 一是實驗室應建在生產(chǎn)場區(qū)之外，根據(jù)所使用的檢測方法，確定樣品處理室（含核酸提取）、試劑準備室（含體系配制）和擴增室等功能的室內(nèi)布局；二是配齊儀器設備，非洲豬瘟常態(tài)化檢測實驗室必須配備生物安全柜、PCR儀、核酸提取儀、離心機、高壓滅菌鍋等；三是要加強檢測人員的管理，必須配備專職的檢測人員，最好要具有獸醫(yī)、生物醫(yī)學或者相關專業(yè)的學習背景，接受過檢測工作培訓； 四是要做好生物安全防護和生物安全管理技術培訓工作，定期參加實驗室開展比對。

4.2 檢測結(jié)果要與豬群生產(chǎn)數(shù)據(jù)、臨床表現(xiàn)結(jié)合起來進行分析 非洲豬瘟的檢測只針對采樣時的狀態(tài)， 檢測結(jié)果可能受采樣質(zhì)量低、 實驗室檢測不規(guī)范、檢測試劑盒不敏感、實驗室污染、操作失誤等因素影響，因此，當檢測結(jié)果與豬群臨床表現(xiàn)和生產(chǎn)數(shù)據(jù)等不相符時，要重新進行檢測復核。