馬占軍，蔡金山，都占林，李 靜，張總超，陳 帆

（ 青海省動物疫病預(yù)防控制中心，青海 西寧 810000 ）

苦參堿類生物堿是存在于豆科槐屬植物中的生物堿，此類生物堿化學(xué)結(jié)構(gòu)相似?？鄥A類生物堿具有鎮(zhèn)痛、強心、抗心律失常、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、消腫利尿、免疫抑制、抗菌殺蟲等藥理作用[1]。本文結(jié)合近年來國內(nèi)外的相關(guān)研究進(jìn)展，論述苦參堿類生物堿中抗炎藥理活性較強的6 種單體在動物臨床中的研究及應(yīng)用情況，為今后動物炎癥性疾病的臨床診療及苦參堿類生物堿的應(yīng)用提供參考。

1 苦參堿類生物堿的抗炎活性及臨床應(yīng)用

苦參堿類生物堿的抗炎藥理活性一直是國內(nèi)外學(xué)者研究的重要內(nèi)容，臨床中該類生物堿多用于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎、晶狀體蛋白誘發(fā)的家兔虹膜炎和睫狀體炎、支氣管哮喘急性發(fā)作及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎等。目前，藥理活性相關(guān)研究最多的苦參堿類生物堿單體有6種，分別為苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐胺堿以及氧化槐果堿[2]。

1.1 苦參堿

苦參堿主要用于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎、乳腺炎及家兔口腔潰瘍等細(xì)菌引起的炎癥性疾病。于曉紅等[3]用脂多糖（LPS）建立奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞炎癥損傷模型，再使用5、10、20 mg/L苦參堿干預(yù)，RT-PCR檢測各組細(xì)胞因子腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果顯示，苦參堿可顯著降低細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8）的表達(dá)（P＜0.05），具有較強的抗炎作用。韓歡勝等[4]在苦參堿抑菌試驗中發(fā)現(xiàn)，苦參堿制劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌和停乳鏈球菌具有較強的抑菌效果。Li 等[5]研究表明，低濃度的苦參堿（1、5 和10 mg/kg）對微生物菌群具有調(diào)控作用，可間接抑制病原菌生長。Feng等[6]研究發(fā)現(xiàn)，使用苦參堿干預(yù)后，金黃色葡萄球菌中α-溶血素誘導(dǎo)的牛乳腺上皮細(xì)胞損傷可大幅減少。嚴(yán)俊等[7]在冰醋酸燒灼形成的家兔潰瘍處敷苦參堿生物黏附凝膠，發(fā)現(xiàn)4 d后潰瘍面積顯著縮小，炎性細(xì)胞浸潤明顯減少，出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞，組織形態(tài)逐漸恢復(fù)，表明苦參堿對家兔口腔潰瘍炎癥具有良好的治療及改善作用。

1.2 氧化苦參堿

氧化苦參堿對動物支氣管哮喘、潰瘍性結(jié)腸炎等急慢性炎癥均具有抗炎作用[8]。焦霞等[9]在探討氧化苦參堿對哮喘小鼠抗炎作用的研究中，建立小鼠哮喘模型，觀察哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中的炎性細(xì)胞數(shù)目、肺組織病理變化。結(jié)果表明，在氧化苦參堿治療后，哮喘小鼠肺組織中血管周圍及支氣管組織中的炎性細(xì)胞浸潤明顯減輕，黏膜上皮細(xì)胞脫落也得到了一定控制。白細(xì)胞介素-4（IL-4）mRNA 在體內(nèi)的表達(dá)水平超過一定界限后會引發(fā)哮喘，試驗中發(fā)現(xiàn)，哮喘小鼠的IL-4 mRNA表達(dá)受到明顯的抑制。上述試驗說明，氧化苦參堿能夠有效抑制IL-4 mRNA的表達(dá)水平。

韓運洋等[10]在二甲苯致小鼠耳廓腫脹試驗中采用25、50、100 mg/kg 氧化苦參堿對小鼠進(jìn)行灌胃處理。試驗結(jié)果表明，不同濃度的氧化苦參堿均可降低二甲苯致小鼠耳廓腫脹程度，且隨著氧化苦參堿濃度增加，二甲苯致小鼠耳廓腫脹抑制率升高；連續(xù)給大鼠灌胃50、100、200 mg/kg氧化苦參堿7 d還能夠抑制叉菜膠致大鼠足趾腫脹。李如月等[11]通過體外試驗發(fā)現(xiàn)，氧化苦參堿可通過上調(diào)微小RNA-211-5p表達(dá)，下調(diào)把關(guān)受體-4/髓樣分化因子88/核因子-κB 信號通路，抑制炎性細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)，繼而誘導(dǎo)胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)微小RNA-211-5p產(chǎn)生抗炎作用，還能夠?qū)怪嗵窍抡{(diào)胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)微小RNA-211-5p。王帥[12]試驗中使用40、80 mg/kg兩個劑量的氧化苦參堿，采用直腸局部給藥方式，探索其對三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用。結(jié)果表明，氧化苦參堿可顯著改善潰瘍性結(jié)腸炎的病理改變，如杯狀細(xì)胞缺失、炎癥細(xì)胞浸潤、肉芽組織增生等癥狀。

1.3 槐果堿

槐果堿是一種喹諾里西啶生物堿，具有較強的抗腫瘤活性和抗炎鎮(zhèn)痛作用，主要用于動物抗急性炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及結(jié)腸炎[13]。季宇彬等[14]研究不同劑量的槐果堿對小鼠耳輪廓腫脹和角叉菜所致大鼠足腫脹的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，40 mg/kg劑量的槐果堿對小鼠耳腫脹的抑制率超過60%，抗炎作用明顯；30 mg/kg 劑量的槐果堿對大鼠足趾腫脹也具有明顯的抑制作用。槐果堿對抗急性炎癥具有顯著作用。Zhu 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，槐果堿能夠明顯緩解小鼠關(guān)節(jié)腫脹，抑制紅斑擴展，緩解小鼠關(guān)節(jié)組織的損害，并降低LPS 誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1（IL-1）、IL-6、TNF-α 和白細(xì)胞介素-12（IL-12）的表達(dá)。付聰敏等[16]采用10、20、40 mg/kg槐果堿對1%角叉菜膠致炎小鼠足趾腫脹進(jìn)行處理，結(jié)果表明，隨著槐果堿濃度增加，角叉菜膠致小鼠足腫脹的腫脹程度明顯減輕，且炎癥部位氧化應(yīng)激反應(yīng)得到抑制。王婷婷等[17]采用完全弗氏佐劑法建立大鼠炎性疼痛模型，并采用槐果堿（30.0、15.0、7.5 mg/kg）進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果表明，干預(yù)后第4、7 d，槐果堿使大鼠熱刺激縮足反射潛伏期顯著延長，機械刺激縮足反射閾值顯著升高，可抑制大鼠炎癥部位磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt 及核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）蛋白表達(dá)水平。Jiang 等[18]建立模擬膿毒型肝損傷小鼠模型，探究槐果堿（30、60 mg/kg）對LPS介導(dǎo)的炎癥作用。結(jié)果顯示，槐果堿可顯著降低脂多糖誘導(dǎo)小鼠血清TNF-α、IL-1β 和IL-6 表達(dá)水平，表明槐果堿可降低脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)程度。

張宇飛等[19]以小膠質(zhì)細(xì)胞系BV-2 為對象，研究槐果堿對LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥作用。結(jié)果表明，槐果堿可通過AMPK/Nrf-2/HO-1-NF-κB 信號傳導(dǎo)途徑抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞中的炎癥。莫安薇等[20]建立TNBS結(jié)腸炎模型并采用槐果堿進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腸組織炎癥評分、結(jié)腸黏膜炎癥介質(zhì)干擾素（IFN-γ）及TNF-α水平顯著降低，表明槐果堿可改善結(jié)腸炎小鼠腸道炎癥。

1.4 槐定堿

槐定堿可通過抗氧化、抗炎、抗細(xì)胞凋亡等途徑，在炎癥性疾病方面表現(xiàn)出較好的療效[21]。槐定堿在體內(nèi)的藥理活性分布快，范圍廣，不易積蓄，消除快，無代謝飽和，還具有改善心功能的作用，可正性肌力、減慢心率、對抗多種心律失常[22]。槐定堿的抗炎作用通過抑制炎性細(xì)胞因子或抑制環(huán)氧化酶的活性產(chǎn)生。黃秀梅等[23]用LPS 刺激體外培養(yǎng)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，使其劑量依賴性地產(chǎn)生參與早期炎癥反應(yīng)的腫瘤壞死因子，并使用槐定堿進(jìn)行干預(yù)，觀察槐定堿對巨噬細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子影響。結(jié)果表明，在一定劑量范圍內(nèi)，槐定堿可劑量依賴性地抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)LPS 刺激產(chǎn)生的腫瘤壞死因子。梁錦屏等[24]通過尾靜脈注射LPS制備內(nèi)毒素血癥小鼠模型，損傷后給予12 mg/kg槐定堿治療。結(jié)果顯示，治療后小鼠腎小管上皮細(xì)胞水腫減輕，炎細(xì)胞浸潤減少，血清中炎癥介質(zhì)含量下降，表明槐定堿能夠明顯減輕腎部炎癥損傷。

1.5 槐胺堿

槐胺堿具有鎮(zhèn)痛抗炎和免疫抑制作用，可用于治療移植排斥反應(yīng)[25]。張佩等[26]在大鼠進(jìn)行皮膚移植手術(shù)后滴注一定濃度的槐胺堿，結(jié)果顯示，與皮膚移植手術(shù)后未滴注槐胺堿大鼠相比，滴注槐胺堿的大鼠皮膚片存活時間長、存活率高，且無炎癥發(fā)生，表明槐胺堿對皮膚移植排斥反應(yīng)具有明顯的抑制作用，且具有一定的抗炎活性。陳靖等[27]采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型觀察30、60 mg/kg的槐胺堿抗炎作用效果，發(fā)現(xiàn)二甲苯致小鼠耳腫脹均得到明顯抑制，說明此劑量下槐胺堿的抗炎效果顯著。

1.6 氧化槐果堿

氧化槐果堿可用于治療動物乳腺炎、支氣管炎及銀屑病。徐暉等[28]設(shè)置二甲苯致小鼠耳腫脹試驗和角叉菜膠致大鼠足跖腫脹試驗。結(jié)果表明，氧化槐果堿對由二甲苯引起的小鼠耳腫脹具有明顯的抑制作用，其有效藥物濃度為80 mg/kg；氧化槐果堿對角叉菜膠所致大鼠足趾腫脹也具有很好的抑制作用，有效藥物濃度達(dá)60 mg/kg 時，抗炎效果顯著。吳璟等[29]也在小鼠炎癥性疼痛試驗中證實，氧化槐果堿能夠明顯降低小鼠足組織的TNF-α、IL-1β、IL-6和前列腺素E2（PGE2）水平，抑制二甲苯致小鼠耳腫脹程度和角叉菜膠致小鼠足趾腫脹程度。喬樂天等[30]采用高效液相色譜（HPLC）法測定抗婦炎膠囊中氧化槐果堿活性成分，結(jié)果顯示，氧化槐果堿線性關(guān)系良好（r為4.85～242.50 mg/L），平均回收率99.52%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.81%，表明氧化槐果堿可應(yīng)用于乳腺炎的治療。

2 苦參堿類生物堿的藥代動力學(xué)研究

生物堿類苦參堿中，苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿具有豐富的藥理活性而得到了廣泛的臨床應(yīng)用，促使人們對其藥代動力學(xué)進(jìn)行研究。賴遠(yuǎn)波[31]研究發(fā)現(xiàn)，苦參堿的血藥濃度時程符合二房式開放模型，在初期時血藥濃度下降快，之后血藥濃度下降逐漸緩慢。對其作用的組織部位觀察，腎臟最高，依次為脾、肺、腦、心、血；試驗數(shù)據(jù)表明，臟器藥物濃度約在0.5 h 達(dá)到峰值，血藥濃度也在0.5 h 到達(dá)峰值，在給藥后48 h 內(nèi)仍可測得。給藥后32 h 時，尿中藥物原形排泄率超過50%，其中腎清除率為143.8 mL/min，易通過血腦屏障，在心臟和肺中分布也比較多。該研究結(jié)果為苦參堿鎮(zhèn)靜、抗炎、抗心律失常等方面的研究提供了藥代學(xué)基礎(chǔ)。

王建明等[32]研究表明，氧化苦參堿透皮吸收后未發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，依以其原形存在。與苦參堿相比，氧化苦參堿吸收較慢，數(shù)據(jù)擬合度顯示，一級吸收和雙室模型對氧化苦參堿經(jīng)皮給藥血藥濃度方程是適合的。王素軍等[33]選擇6只比格犬進(jìn)行氧化苦參堿（30 mg/kg）灌胃，結(jié)果顯示，氧化苦參堿在體內(nèi)吸收快、分布快，缺陷為絕對生物利用度較低。高佩佩等[34]通過尾靜脈注射和灌胃兩種方式對氧化苦參堿在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究，結(jié)果表明，氧化苦參堿在大鼠體內(nèi)的半衰期較短，生物利用度較低，原因可能是氧化苦參堿具有較強的水溶性，通過生物膜的難度較大。

董海娟等[35]采用雙周期自身交叉設(shè)計，將6 只比格犬分為兩組，一組進(jìn)行灌胃（30 mg/kg），另一組進(jìn)行靜脈注射（6 mg/kg），7 d 后交替。試驗結(jié)果表明，比格犬灌胃的藥-時曲線數(shù)據(jù)符合二房式模型，而靜脈注射槐果堿的藥-時曲線數(shù)據(jù)也符合二房式模型，二者的消除半衰期也基本相當(dāng)；數(shù)據(jù)顯示，該藥的吸收速度快、分布也快，血藥濃度最初下降較為迅速，末端時較為緩慢，進(jìn)行槐果堿單體灌胃的比格犬絕對生物利用度達(dá)到45.28%。

3 結(jié)論

苦參堿類生物堿廣泛存在于自然界豆科槐屬植物中，具有廣泛而有效的抗炎活性。目前，基于苦參堿類生物堿制成的抗炎藥物已在動物臨床上得到了廣泛應(yīng)用，并取得了顯著的治療效果。作為一種天然抗炎藥物，苦參堿類生物堿具有毒副作用小、安全有效、藥用資源豐富等特點，因此在治療動物炎癥性疾病的擴展研究和進(jìn)一步的開發(fā)應(yīng)用方面受到國內(nèi)外很多學(xué)者重視。

苦參堿類生物堿在藥理學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用較多，但其本身也存在一些缺陷：單體成分比較多，質(zhì)量難以控制；總堿與單體成分活性存在差異，且對系統(tǒng)性的研究還不夠，未能全面開發(fā)出其潛在的抗炎藥理活性。因此，運用現(xiàn)代化科技手段開展天然活性成分方面的深入研究和藥理開發(fā)很有必要，還可進(jìn)一步運用化學(xué)理論和技術(shù)對苦參堿類生物堿進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾處理，全面凸顯其抗炎活性能，進(jìn)一步提高其動物炎癥性疾病中的抗炎效果。