肖 軍，裴文琪，劉 娜，肇 瑩，肖千明

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所，遼寧沈陽 1101611； 2.東北育才學校，遼寧沈陽 110179）

初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株生長發(fā)育的影響

肖 軍1，裴文琪2，劉 娜1，肇 瑩1，肖千明1

（1.遼寧省農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所，遼寧沈陽 1101611； 2.東北育才學校，遼寧沈陽 110179）

以3個蛹蟲草菌株為研究對象，測定不同初始pH的栽培基質(zhì)對3個菌株子座的影響。試驗結(jié)果表明，當初始基質(zhì)pH 7.0時，2個菌株KP、C1的子實體鮮重、干重、密度、生產(chǎn)周期，子座生物學效率達到最佳。另一菌株K703在初始基質(zhì)pH 7.2時，子實體鮮重、干重、密度、子座生物學效率達到最佳，而生長周期在基質(zhì)初始pH 7.0時達到最小。3個菌株的子座長度隨初始基質(zhì)pH無顯著變化。

蛹蟲草；培養(yǎng)基；子座

蛹蟲草（Cordyceps militaris）又名北冬蟲夏草。含有蟲草素、超氧化物歧化酶、蟲草酸、蟲草多糖、硒等多種生理活性物質(zhì)，還含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素及微量元素等成分，具有抗菌、抗血小板凝結(jié)、抗病毒、改善和提高記憶力、調(diào)節(jié)機體免疫能力、鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛等功能［1］。因此其食用、藥用及商用價值已日益受到國內(nèi)外的普遍關(guān)注和認可。培養(yǎng)基中適宜的碳源、氮源和無機鹽是蛹蟲草生長發(fā)育的重要因素，但環(huán)境因子如通風、溫度等也在蛹蟲草的發(fā)菌、促座和出草中發(fā)揮著重要作用。此外，基質(zhì)初始pH對蛹蟲草生長發(fā)育也具有重要的影響，培養(yǎng)基pH過高或者過低都不利于蛹蟲草產(chǎn)量的提高。Park等（2001）等試驗表明，pH為5～7是蛹蟲草菌絲生長的最適pH，文庭池等（2008）研究表明，蛹蟲草子座產(chǎn)量最高時培養(yǎng)基pH為5.5～6.0時［2，3］。文中主要研究基質(zhì)初始pH對蛹蟲草生長發(fā)育的影響，為蛹蟲草栽培選擇最適的基質(zhì)條件提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗場地

遼寧省農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所自動化智能出菇間。

1.2 供試菌株

選擇形態(tài)差異明顯、親緣關(guān)系較遠的3個優(yōu)良菌株，該次試驗選用蛹蟲草菌株KP、C1、K703。由遼寧省農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所保藏。K703為大孢子頭蛹蟲草，KP、C1為尖頭蛹蟲草。

1.3 試驗方法

采用規(guī)格750 ml罐頭瓶進行栽培，以小麥為主要栽培基質(zhì)。參考文獻和栽培經(jīng)驗，栽培基質(zhì)初始pH用HCl和NaOH調(diào)為6.5、6.8、7.0、7.2、7.5、7.8、8，發(fā)菌條件：培養(yǎng)室溫度15～19℃，空氣相對濕度65%～70%；原基分化條件：培養(yǎng)室白天溫度17～21℃，晝夜溫差5℃，空氣相對濕度65%～80%，光照強度200～500 lx左右，光照時間12 h/d；子座生長空氣相對濕度85%～95%，培養(yǎng)室溫度17～23℃，光照強度200～500 lx左右，光照時間10 h/d。試驗中所有栽培瓶定期調(diào)換上下和左右擺放位置，保持環(huán)境條件均勻一致。采收后測定蛹蟲草子座的鮮重、長度、密度和生產(chǎn)周期等數(shù)據(jù)、并計算子座生物學效率。

子座生物學效率＝子座鮮質(zhì)量/初始基質(zhì)風干質(zhì)量×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株的子座鮮重、干重的影響

當初始基質(zhì)pH從6.5增大到7.0時，3個菌株子座鮮重隨著初始基質(zhì)pH的增大而逐漸增加，當初始基質(zhì)pH 7.0時KP、C1達到最大值，分別為38.7 g、38.5 g。當初始基質(zhì)pH從7.0增大到7.2時，菌株K703子實體鮮重達到最大值，重51.0 g。3個菌株隨著初始基質(zhì)pH的繼續(xù)升高，子座鮮重都隨之減少。初始基質(zhì)不同pH對3個菌株蛹蟲草子實體干重影響趨勢與鮮重相同（圖1，圖2）。

2.2 初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株生產(chǎn)周期的影響

3個菌株不同的初始基質(zhì)pH，菌絲滿瓶天數(shù)有顯著差別，隨著初始基質(zhì)pH從6.5增大到8.0時，3個菌株菌絲滿瓶天數(shù)分別呈先增加后減少的趨勢，當pH為7.0時，3個菌株菌絲滿瓶時間達到最短，分別為7 d、6 d、7 d。生產(chǎn)周期pH從6.5增大到8.0時呈先降低后增加的趨勢，初始基質(zhì)pH為6.8、7.0和7.2時，生產(chǎn)周期相差不大，3個菌株生產(chǎn)周期在初始基質(zhì)pH為7.0時最短。因此，當初始基質(zhì)pH過大或者過小時，蛹蟲草菌絲生長受到不同程度的抑制，導致生長周期相應延長，與張圓圓的研究結(jié)果一致［4］（圖3，圖4）。

2.3 初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株子座密度的影響

隨著蛹蟲草栽培初始基質(zhì)pH從6.5增加到8.0，菌株KP、K703、C1的子座密度都呈先增加后降低的趨勢。當初始基質(zhì)pH增加到7.0時，C1、KP 2個菌株子座密度達到最大值。pH增加到7.2時，K703的子座密度達到最大值?？梢姡|(zhì)初始pH對蛹蟲草子座密度有較大影響，不同菌株子座密度最大時pH值不同（圖5）。

2.4 初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株子座長度的影響

蛹蟲草子座在一定的營養(yǎng)條件和環(huán)境條件下，子座長度隨著初始基質(zhì)pH的增加，3個菌株子座長度無顯著變化。因此初始基質(zhì)pH 6.5～8.0之間對蛹蟲草子座長度無明顯影響（圖6）。

2.5 初始基質(zhì)pH對蛹蟲草不同菌株子座生物學效率的影響

隨著蛹蟲草栽培初始基質(zhì)pH從6.5增加到8.0，菌株KP、K703、C1的子座生物學效率先增加后降低。當pH為7.0時，C1、KP的生物學效率最大。當初始基質(zhì)pH為7.2時，K703的生物學效率最大。由此可見，初始基質(zhì)pH對蛹蟲草子座生物學效率影響較大（圖7）。

圖1 不同基質(zhì)初始pH對蛹蟲草子座鮮重的影響

圖2 不同基質(zhì)初始pH對蛹蟲草子座干重的影響

圖3 不同基質(zhì)初始pH對蛹蟲草菌絲滿瓶天數(shù)的影響

圖4 不同基質(zhì)初始pH對蛹蟲草生產(chǎn)周期的影響

圖5 不同基質(zhì)初始pH對蛹蟲草子座密度的影響

圖6 基質(zhì)初始pH對蛹蟲草子座長度的影響

圖7 基質(zhì)初始pH對蛹蟲草子座生物學效率的影響

3 小結(jié)

適宜的酸堿度是保證蛹蟲草正常生長的關(guān)鍵因素，這是由參與其新陳代謝的酶類所需的pH環(huán)境所決定的。

試驗結(jié)果表明3個蛹蟲草菌株最適初始基質(zhì)pH不同，當初始基質(zhì)pH 7.0時，2個菌株KP、C1的子實體鮮重、干重、密度、生產(chǎn)周期，子座生物學效率達到最佳。另一菌株K703在初始基質(zhì)pH 7.2時，子實體鮮重、干重、密度、子座生物學效率達到最佳，而生長周期在初始基質(zhì)pH 7.0時達到最小。3個菌株的子座長度隨初始基質(zhì)pH無顯著變化。

因此蛹蟲草品種在大面積栽培時根據(jù)品種特性調(diào)節(jié)初始基質(zhì)PH是非常必要的。

［1］韋會平，肖波，胡開始.蛹蟲草藥用價值考［J］.中藥材，2004，27（3）：215～217.

［2］Park J P，Kim S W，Hwang H J.Optimization of submerged culture conditions for the mycelial growth and exo～biopolymer production by Cordyceps Militaris［J］.Letters in Applied Microbiology，2001（33）：76～81.

［3］文庭池，康冀川，李光榮，等.固體培養(yǎng)條件對蛹蟲草產(chǎn)子實體和蟲草菌素的影響［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學，2008，36（4）：92～94.

［4］張圓圓.蛹蟲草培養(yǎng)關(guān)鍵技術(shù)研究［D］.陜西：西北農(nóng)林科技大學，2013.

S567.3+5

B

1002-1728（2017）01-0077-03

10.3969/j.issn.1002-1728.2017.01.021

2016-02-19

肖軍（1974-）女，碩士，研究員，從事食用菌遺傳育種和栽培研究。