劉娟 王以婷

【摘要】 目的：探討某院兒科患兒常見(jiàn)病原菌分布特點(diǎn)及其耐藥性，為針對(duì)性抗菌藥物治療方案的制訂提供數(shù)據(jù)參考。方法：選擇2022年11月—2023年2月深圳市龍華區(qū)婦幼保健院收集的208例患兒的血液、痰液與糞便樣本進(jìn)行接種、培養(yǎng)與分離，對(duì)分離出的235株病原菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，分析感染疾病患兒的主要病原菌及其對(duì)臨床常用抗菌藥物的耐藥性。結(jié)果：208例感染疾病患兒血液、痰液及糞便標(biāo)本中共檢出235株病原菌。兒科感染疾病的主要病原菌屬于革蘭陰性菌，占73.62%（173/235），其中又以流感嗜血桿菌（43.40%）占比最高，其次為卡他莫拉菌（15.32%）與肺炎克雷伯菌（8.94%）。革蘭陰性菌中的流感嗜血桿菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物無(wú)耐藥性，對(duì)頭孢呋辛耐藥性最高，為76.47%?？ㄋ鷮?duì)環(huán)丙沙星、氨曲南及氨基糖苷類、碳青霉烯類抗菌藥物無(wú)耐藥性，對(duì)頭孢呋辛耐藥性最高，為72.22%。肺炎克雷伯菌對(duì)多種頭孢類抗菌藥物均表現(xiàn)出相對(duì)較高的耐藥性。革蘭陽(yáng)性菌中的肺炎鏈球菌對(duì)克林霉素耐藥性高達(dá)100%，而金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素耐藥性為100%。結(jié)論：感染疾病患兒病原菌感染以革蘭陰性菌為主，且經(jīng)分離的常見(jiàn)病原菌，如流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌等均存在多重耐藥現(xiàn)象，流感嗜血桿菌屬于導(dǎo)致患兒感染疾病的主要病原菌。

【關(guān)鍵詞】 兒科 病原菌 分布特點(diǎn) 耐藥性

Distribution Characteristics and Drug Tolerance Analysis of Common Pathogenic Bacteria in 208 Children in Pediatric Department of a Hospital/LIU Juan， WANG Yiting. //Medical Innovation of China， 2024， 21（08）： 0-073

[Abstract] Objective： To investigate the distribution characteristics and drug tolerance analysis of common pathogenic bacteria in children in pediatric department of a hospital， and to provide data reference for the formulation of targeted antimicrobial agent therapy. Method： A total of 208 children's blood， sputum and feces samples collected from Longhua District Maternity & Child Healthcare Hospital from November 2022 to February 2023 were inoculated， cultured and separated. Drug susceptible test were conducted on 235 isolates of pathogenic bacteria， and the main pathogenic bacteria of infectious disease children and their drug tolerance to commonly used clinical antibiotics were analyzed. Result： A total of 235 strains of pathogenic bacteria were detected in the blood， sputum and feces samples of 208 children with infectious diseases. The main pathogenic bacteria of pediatric infectious disease was Gram negative bacterium， accounting for 73.62% （173/235）， among which Haemophilus influenzae （43.40%） accounted for the highest proportion， followed by Moraxella catarrhalis （15.32%） and Klebsiella pneumoniae （8.94%）. Haemophilus influenzae in Gram negative bacterium had no drug tolerance to carbapenems antimicrobial agent， and the drug tolerance to Cefuroxime was the highest， with 76.47%. Moraxella catarrhalis had no drug tolerance to Ciproxacin， Aztreonam and antimicrobial agent of aminoglycoside and carbapenems， and the drug tolerance to Cefuroxime was the highest， with 72.22%. Klebsiella pneumoniae showed relatively high drug tolerance to many kinds of cephalosporin antimicrobial agent. Streptococcal pneumoniae in Gram positive bacterium was up to 100% drug tolerance to Clindamycin， while Staphylococcus aureus was 100% drug tolerance to Penicillin. Conclusion： Gram negative bacterium are the main pathogenic bacteria in children with infectious diseases， and the isolated common pathogenic bacteria， such as Haemophilus influenzae， Moraxella catarrhalis， Klebsiella pneumoniae and Staphylococcus aureus， have multidrug resistant. Haemophilus influenzae is the main pathogenic bacteria that causes children with infectious diseases.

[Key words] Department of pediatrics Pathogenic bacteria Distribution characteristics Drug tolerance

First-author's address： Department of Pediatrics， Longhua District Maternity & Child Healthcare Hospital， Shenzhen 518000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.08.016

兒童因?yàn)樘禺愋耘c非特異性免疫功能均處于發(fā)育過(guò)程中，對(duì)病原菌的抵抗能力較為薄弱，因此易發(fā)生多類型感染疾病[1]。肺炎及呼吸道感染均屬于兒科常見(jiàn)感染類疾病，疾病發(fā)生后患兒多存在高熱、咳嗽、喘息等癥狀表現(xiàn)，疾病進(jìn)展后還可能誘發(fā)其他嚴(yán)重并發(fā)癥，甚至危及患兒生命安全，故及早制訂合理治療方案尤為重要[2]?，F(xiàn)今對(duì)兒科感染疾病患兒主要采用特定的抗菌藥物治療，但考慮到感染疾病臨床治療中抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌耐藥現(xiàn)象越來(lái)越嚴(yán)重，由此可能導(dǎo)致多重耐藥情況發(fā)生，最終導(dǎo)致兒科疾病治療效果降低與治療失敗[3-4]。既往研究提出，對(duì)感染類疾病患者進(jìn)行病原菌種類分析，并根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果制訂對(duì)應(yīng)的抗菌藥物使用方案，可強(qiáng)化抗菌藥物治療效果，保障臨床用藥合理性[5-6]。目前我國(guó)對(duì)兒童常見(jiàn)病原菌種類及其藥敏試驗(yàn)分析的相關(guān)報(bào)道較少，現(xiàn)今臨床對(duì)兒科感染疾病患兒缺乏系統(tǒng)性耐藥性監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)及用藥指導(dǎo)，因此具體疾病的用藥方向缺乏準(zhǔn)確指導(dǎo)[7]。因此，按照統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)保證質(zhì)量的完成具有地區(qū)代表性醫(yī)院兒科病原菌及藥敏試驗(yàn)分析，來(lái)指導(dǎo)臨床規(guī)范選擇抗菌藥物已經(jīng)成為一種迫切需求[8]。基于此，本研究主要分析了深圳市龍華區(qū)婦幼保健院兒科208例患兒常見(jiàn)病原菌分布特點(diǎn)及其耐藥性，旨在為兒科相關(guān)感染性疾病治療方案的擬定與實(shí)施提供數(shù)據(jù)參考，強(qiáng)化治療效果，改善患兒預(yù)后，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2022年11月—2023年2月本院收集的208例患兒的血液、痰液與糞便樣本，進(jìn)行接種、培養(yǎng)與分離，共分離出235株病原菌。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)臨床診斷結(jié)果確診存在感染類疾?。虎谀挲g1～14歲；③發(fā)病至入院接受治療時(shí)間不超過(guò)1周；④研究開展前1個(gè)月未采用過(guò)抗菌藥物治療；⑤意識(shí)狀態(tài)較好。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在多臟器器官損傷；②心功能異常；③既往存在嚴(yán)重感染性疾?。虎懿l(fā)危急重癥需要立即治療；⑤研究資料丟失。男患兒117例，女患兒91例；年齡5～13歲，平均（8.94±0.93）歲。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；純杭覍僦榍液炇鹜鈺?。

1.2 方法

1.2.1 菌株來(lái)源 收集208例患兒的血液、痰液與糞便標(biāo)本，并從中分離非重復(fù)菌株。質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853均由國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2.2 儀器與試劑 血培養(yǎng)儀器選擇BACTEC 9120型全自動(dòng)血培養(yǎng)儀（美國(guó)BD公司生產(chǎn)，包括配套血培養(yǎng)瓶）；病原菌分析儀器選擇VITEK-2型全自動(dòng)微生物分析儀（美國(guó)BD公司生產(chǎn)，包括配套細(xì)菌鑒定與藥敏卡）；真菌培養(yǎng)與鑒定均采用科馬嘉顯色培養(yǎng)基，真菌藥敏試驗(yàn)采用ATB FUNGU藥敏條，上述儀器與試劑均由法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)提供；血瓊脂、中國(guó)藍(lán)瓊脂等培養(yǎng)基均由本院檢驗(yàn)科中的細(xì)菌室制備。紅霉素、克林霉素、頭孢西丁藥敏紙片由Oxid公司生產(chǎn)提供。

1.2.3 藥敏試驗(yàn) 藥敏試驗(yàn)相關(guān)檢驗(yàn)操作均嚴(yán)格參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中常規(guī)檢驗(yàn)方法規(guī)范執(zhí)行。細(xì)致分析菌落形態(tài)并進(jìn)行后續(xù)革蘭染色、觸酶試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)，另外選擇VITEK-2型全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。使用GN鑒定卡與AST-GN09藥敏卡對(duì)革蘭陰性菌進(jìn)行對(duì)應(yīng)的鑒定與藥敏檢測(cè)；使用GP鑒定卡與AST-GP61藥敏卡對(duì)革蘭陽(yáng)性菌進(jìn)行對(duì)應(yīng)的鑒定與藥敏檢測(cè)。針對(duì)藥敏試驗(yàn)中紅霉素耐藥、克林霉素敏感、凝固酶陰性葡萄球菌，參考CLSI2099標(biāo)準(zhǔn)，另外進(jìn)行克林霉素耐藥試驗(yàn)，對(duì)克林霉素耐藥結(jié)果進(jìn)行修正；對(duì)所有葡萄球菌另外進(jìn)行頭孢西丁紙片藥敏試驗(yàn)；肺炎鏈球菌采用AST-GP62藥敏卡進(jìn)行鑒定。使用科馬嘉顯色培養(yǎng)基與YST卡進(jìn)行真菌鑒定，另外采用手工藥敏方法進(jìn)行真菌藥敏試驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）統(tǒng)計(jì)患兒血液、痰液及糞便標(biāo)本中病原菌培養(yǎng)與檢出情況，統(tǒng)計(jì)檢出病原菌中革蘭陰性菌、革蘭陽(yáng)性菌及真菌占比。（2）統(tǒng)計(jì)檢出的常見(jiàn)革蘭陰性菌對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、喹諾酮類、碳青霉烯類等主要抗菌藥物的耐藥性。（3）統(tǒng)計(jì)檢出的常見(jiàn)革蘭陽(yáng)性菌對(duì)青霉素類、頭霉菌素類、喹諾酮類及其他類型抗菌藥物的耐藥性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 21.0進(jìn)行分析。計(jì)量資料以（x±s）表示；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原菌培養(yǎng)與檢出情況分析

收集的208例患兒的血液、痰液與糞便標(biāo)本共分離出235株病原菌。兒科感染疾病的主要病原菌屬于革蘭陰性菌，占73.62%（173/235）；革蘭陽(yáng)性菌占18.72%（44/235）；真菌占7.66%（18/235）。見(jiàn)表1。

2.2 常見(jiàn)革蘭陰性菌耐藥情況分析

革蘭陰性菌中最為常見(jiàn)的流感嗜血桿菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物無(wú)耐藥性；對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物均存在不同程度耐藥性，以頭孢呋辛最高，為76.47%?？ㄋ鷮?duì)環(huán)丙沙星、氨曲南無(wú)耐藥性，對(duì)氨基糖苷類、碳青霉烯類抗菌藥物同樣無(wú)耐藥性；對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、左氧氟沙星均存在不同程度耐藥性，同樣以頭孢呋辛最高，為72.22%。肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林、氨基糖苷類、碳青霉烯類抗菌藥物及氨曲南無(wú)耐藥性，其對(duì)頭孢菌素類抗菌藥物的耐藥性相對(duì)較高。流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌均對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物呈現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象。見(jiàn)表2。

2.3 常見(jiàn)革蘭陽(yáng)性菌耐藥情況分析

革蘭陽(yáng)性菌中的肺炎鏈球菌對(duì)青霉素、克林霉素、阿奇霉素均具有較高的耐藥性，克林霉素耐藥性更是高達(dá)100%；肺炎鏈球菌對(duì)其他各類抗菌藥物均無(wú)耐藥性。金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素耐藥性為100%，對(duì)苯唑西林、阿莫西林、頭孢曲松、頭孢唑林、四環(huán)素、克林霉素及紅霉素也存在不同程度耐藥性。肺炎鏈球菌與金黃色葡萄球菌均對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物呈現(xiàn)多重耐藥現(xiàn)象。見(jiàn)表3。

3 討論

兒童時(shí)期，因自身免疫功能還處于發(fā)育過(guò)程中，免疫能力不完善可能導(dǎo)致多類型細(xì)菌入侵，進(jìn)而導(dǎo)致感染疾病發(fā)生[9]。研究指出，現(xiàn)今兒科90%以上的感染疾病均是由細(xì)菌外源性入侵引起，常見(jiàn)的感染疾病包括：肺炎與呼吸道感染[10]。兩種疾病的臨床癥狀表現(xiàn)有諸多相似之處，疾病發(fā)生進(jìn)展后可能會(huì)導(dǎo)致患兒生長(zhǎng)發(fā)育受限，還可能影響患兒生活質(zhì)量，甚至危及其生命[11]?，F(xiàn)今對(duì)兒科感染疾病患兒主要采用抗菌藥物治療，考慮到不同疾病類型患兒細(xì)菌感染種類存在較大差異，因此需要參考患兒病原菌種類，制訂更為合理的用藥方案[12]。此外，研究指出，不同地區(qū)、不同時(shí)期病原菌種類、構(gòu)成、耐藥性等特點(diǎn)均存在明顯差異[13-14]，因此臨床對(duì)兒科感染疾病患兒缺乏標(biāo)準(zhǔn)的用藥指導(dǎo)，實(shí)際抗菌藥物使用前，仍需要對(duì)患兒進(jìn)行相應(yīng)的病原菌分析與藥敏試驗(yàn)，最終提高治療方案制訂與實(shí)施的合理性與安全性，促進(jìn)患兒預(yù)后結(jié)局的改善。

兒科感染疾病的主要病原菌屬于革蘭陰性菌，占73.62%（173/235）；革蘭陽(yáng)性菌占18.72%（44/235）；真菌占7.66%（18/235），這與既往諸多學(xué)者研究結(jié)果均存在較高的一致性[15-16]。上述結(jié)果表明兒科感染疾病患兒病原菌主要以革蘭陰性菌為主，但仍不可忽視革蘭陽(yáng)性菌與真菌感染的可能性，因此臨床需要重點(diǎn)關(guān)注此類患兒感染特征表現(xiàn)，及早擬定預(yù)防性治療方案，避免患兒疾病發(fā)生嚴(yán)重進(jìn)展[17]。綜合分析既往相關(guān)研究結(jié)論，革蘭陰性菌是導(dǎo)致人類感染性疾病發(fā)生的主要原因之一，伴隨臨床各類型感染疾病發(fā)生率逐漸升高，抗菌藥物濫用情況也逐漸嚴(yán)重，通過(guò)對(duì)病原菌耐藥性進(jìn)行準(zhǔn)確分析，有利于后續(xù)抗菌藥物用藥方案的制訂與實(shí)施[18-19]。本研究中，革蘭陰性菌中流感嗜血桿菌對(duì)目前臨床常用的多種抗菌藥物均具有廣泛耐藥性，且隨著抗菌藥物不合理使用，這一現(xiàn)象可能逐漸嚴(yán)峻；研究中流感嗜血桿菌對(duì)亞胺培南、美羅培南均無(wú)明顯耐藥性，因此推薦臨床對(duì)流感嗜血桿菌感染患兒實(shí)施上述抗菌藥物進(jìn)行治療，考慮到碳青霉烯類抗菌藥物所誘發(fā)的不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)較高，癥狀較為嚴(yán)重，因此實(shí)際臨床用藥過(guò)程中仍需要對(duì)患兒身體狀態(tài)進(jìn)行密切關(guān)注，提高其抗菌藥物使用安全性[20]?？ㄋ鷮?duì)環(huán)丙沙星、氨基糖苷類、碳青霉烯類抗菌藥物及氨曲南均無(wú)耐藥性，而對(duì)青霉素類、頭孢菌素類、左氧氟沙星均存在不同程度耐藥性，屬于多重耐藥菌，因此臨床用藥方案選擇時(shí)需要綜合考慮患兒病原菌耐藥特點(diǎn)，選擇多種抗菌藥物聯(lián)合治療，并在治療過(guò)程中確?；純河盟幇踩?。肺炎克雷伯菌屬于青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類抗菌藥物多重耐藥菌，造成這一現(xiàn)象的原因可能與臨床抗菌藥物不合理應(yīng)用密切相關(guān)，其他不耐藥的多類抗菌藥物均可作為患兒的用藥方案選擇，雖可選擇范圍較廣，但仍不可忽視合理用藥的重要性，在控制患兒病情的同時(shí)，避免嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生。

革蘭陽(yáng)性菌中的肺炎鏈球菌對(duì)青霉素、克林霉素、阿奇霉素均具有較高的耐藥性，而對(duì)其他各類抗菌藥物均無(wú)耐藥性，針對(duì)該類病原菌感染的患兒可選擇的抗菌藥物治療方案較廣。相較而言，金黃色葡萄球菌在革蘭陽(yáng)性菌中占比更低，其對(duì)更多的抗菌藥物表現(xiàn)出了更高的耐藥性，考慮造成這一結(jié)果的原因?yàn)椋阂虻貐^(qū)因素或季節(jié)因素，病原菌感染類別可能出現(xiàn)明顯變化，既往金黃色葡萄球菌感染患兒可能更多，因此對(duì)應(yīng)抗菌藥物表現(xiàn)出了更加明顯的不合理應(yīng)用現(xiàn)象，由此導(dǎo)致更多類型的抗菌藥物耐藥性增加，最終演變成為多重耐藥菌[21-22]。就目前臨床耐藥性分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，青霉素類部分藥物、喹諾酮類、其他類部分藥物均可作為治療肺炎鏈球菌與金黃色葡萄球菌感染患兒的主要用藥方案選擇，需注意的是，抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)引發(fā)的不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)更高，臨床治療需要注重用藥安全性，避免治療期間誘發(fā)嚴(yán)重安全事件。

綜上所述，兒科感染疾病患兒病原菌包括：革蘭陰性菌、革蘭陽(yáng)性菌與真菌，其中革蘭陰性菌屬于誘發(fā)患兒感染疾病的主要病原菌，革蘭陰性菌中的流感嗜血桿菌占比最高，臨床對(duì)兒科感染疾病患兒所檢出的常見(jiàn)病原菌均屬于多重耐藥菌，因此更需依照藥敏試驗(yàn)結(jié)果制訂對(duì)應(yīng)的抗菌藥物治療方案，另外還需注意用藥過(guò)程中抗菌藥物誘發(fā)的不良反應(yīng)，及早處理，在提升患兒治療效果的同時(shí)，確?？咕幬锸褂煤侠硇耘c安全性。

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（收稿日期：2023-08-21） （本文編輯：陳韻）