張 航，沙惠陽(yáng)，黃良宗，趙孟孟

（佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院生命科學(xué)與工程學(xué)院，佛山 528231；河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，鄭州 450002）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reproductive and respirator syndrome virus, PRRSV） 引發(fā)的一種高度接觸性、烈性傳染病。PRRSV感染豬體造成免疫抑制，懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、木乃伊胎等繁殖障礙和仔豬呼吸系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)。

PRRS最早于1987年在美國(guó)北卡羅來(lái)納州被發(fā)現(xiàn)[1]，1991年和1992年分別在歐洲和美洲從感染豬體中分離出LV和VR-2332兩種毒株[2-3]。目前按照抗原差異性將PRRSV劃分為兩大基因型PRRSV-1和PRRSV-2，我國(guó)主要流行PRRSV-2型毒株。1995年中國(guó)首次分離PRRSV[4]，2006年出現(xiàn)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（highly pathogenic PRRSV,HP-PRRSV），給仔豬致死率較高。PRRSV不斷重組和變異，對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失[5-6]。2016年我國(guó)出現(xiàn)新型NADC30株[7]。我國(guó)當(dāng)前潛在的PRRSV流行株NADC34-like與美國(guó)PRRSV流行株1-4-4新型變異株屬于同一分支[8-9]。

PRRSV基因組變異性較強(qiáng)，且不斷重組，以NSP2最為明顯[10]。2001年美國(guó)分離的MN184變異株在NSP2部分不連續(xù)缺失131個(gè)氨基酸[11]。2006年中國(guó)暴發(fā)的HP-PRRSV在NSP2部分缺失30個(gè)氨基酸[12]。我國(guó)新發(fā)NADC34-like PRRSV在NSP2部分連續(xù)缺失100個(gè)氨基酸[13]，探究PRRSV的NSP2遺傳和變異特性對(duì)揭示該病具有重要意義[14-15]。

NSP2有4個(gè)差異較大結(jié)構(gòu)域，分別為N端半胱氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域（PL2）、高變區(qū)、跨膜結(jié)構(gòu)域和C端保守區(qū)。PL2具有催化活性，誘導(dǎo)NSP2/NSP3蛋白裂解，產(chǎn)生7種NSP2亞型，分別為NSP2a、NSP2b、NSP2c、NSP2d、NSP2e、NSP2f、NSP2TF[16]。NSP2對(duì)PRRSV生物學(xué)特性具有重要作用，本文對(duì)NSP2的遺傳變異分析，與自身病毒蛋白互作，與宿主蛋白互作，影響PRRSV復(fù)制、毒力、細(xì)胞噬性，調(diào)節(jié)宿主免疫，在疫苗應(yīng)用等方面進(jìn)行綜述，為PRRSV致病機(jī)理及后續(xù)疫苗研究提供理論基礎(chǔ)。

1 NSP2 遺傳變異分析

PRRSV是一種有囊膜的單股、正鏈RNA病毒，屬于動(dòng)脈炎病毒屬（Arterivirus）。基因組全長(zhǎng)約15 kb，包含10個(gè)開(kāi)放閱讀框（open reading frame,ORF），分別為ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORF3～7和ORF5a[17]。ORF1a翻譯形成的pp1a多聚蛋白可被裂解成9個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白（Non-structural protein, NSP）[18-19]，其中約2.9 kb的NSP2是最長(zhǎng)區(qū)域。不同毒株NSP2之間存在突變、缺失或重組，核苷酸同源性較低。CH-1a株與美洲VR-2332株NSP2同源性約為80%，與歐洲LV株NSP2同源性約為40%。Zhang等[20]發(fā)現(xiàn)同為PRRSVⅠ型的KZ2018株和LV株同源性約88.6%。NSP2高變區(qū)可容忍核苷酸缺失、替換和插入，例如PRRSV疫苗株SP，其NSP2的C端分別插入36和155個(gè)氨基酸，其他動(dòng)脈炎病毒中相應(yīng)蛋白無(wú)類似特征[21]。2006年我國(guó)暴發(fā)HP-PRRSV在NSP2部分不連續(xù)缺失30個(gè)氨基酸[12]。與VR-2332相比，APRRS、PrimePac和EDRD-1在NSP2插入108個(gè)氨基酸。除氨基酸插入外，EDRD-1株的NSP2還存在117個(gè)氨基酸缺失[14-15]。與LV株相比，韓國(guó)首個(gè)Ⅰ型PRRSV KNU-07株NSP2存在60個(gè)氨基酸缺失[22]。來(lái)自中國(guó)的歐洲分離株SD01-08 NSP2部分缺失17個(gè)氨基酸（aa734～750），NSP2仍存在不同程度變異[23]。最新發(fā)現(xiàn)SD18株，其NSP2基因存在31個(gè)氨基酸不連續(xù)缺失，已明顯區(qū)別于JXA1、HuN4、TJ等為代表30個(gè)氨基酸不連續(xù)缺失株[24]。由于NSP2基因變異性極高，使它成為監(jiān)測(cè)PRRSV變異重要指標(biāo)之一。

2 NSP2 與自身蛋白互作

馬動(dòng)脈炎病毒（Equine arteritis virus, EAV）兩個(gè)跨膜非結(jié)構(gòu)蛋白NSP2和NSP3相互作用，病毒感染期間誘導(dǎo)形成雙層膜泡（double-membrane vesicles,DMVs）[25-26]。NSP5共表達(dá)形成均勻DMV，表明NSP5在調(diào)節(jié)膜曲率（membrane curvature）和DMV形成方面發(fā)揮調(diào)節(jié)作用[27]。PRRSV與EAV基因結(jié)構(gòu)相似，推測(cè)PRRSV跨膜蛋白NSP2、NSP3和NSP5相互識(shí)別，并在DMV形成中發(fā)揮類似作用。通過(guò)酵母雙雜交和雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NSP2和NSP5都與NSP3相互作用，表明這三個(gè)PRRSV跨膜蛋白可能形成一個(gè)膜結(jié)合NSP2-NSP3(×n)-NSP5支架（membrane-bound NSP2-NSP3(×n)-NSPX5 scaffold），支持復(fù)制和轉(zhuǎn)錄復(fù)合物形成，促進(jìn)PRRSV復(fù)制和轉(zhuǎn)錄[28]。Song等[29]發(fā)現(xiàn)PRRSV的NSP1α、NSP1β和病毒核衣殼蛋白都與NSP2直接相互作用。通過(guò)免疫熒光分析，NSP1β、NSP2、NSP4、NSP7α、NSP7β和NSP8共定位于細(xì)胞核周邊，這是感染早期PRRSV RNA合成部位[30]。最近發(fā)現(xiàn)NSP2TF與兩種主要PRRSV包膜蛋白GP5糖蛋白和膜蛋白M相互作用，驅(qū)動(dòng)PRRSV組裝和出芽，進(jìn)一步分析表明NSP2TF靶向細(xì)胞外途徑促進(jìn)GP5-M二聚體形成[16]。

3 NSP2 與宿主蛋白互作

PRRSV NSP2在病毒復(fù)制中發(fā)揮重要作用，PRRSV通過(guò)與宿主細(xì)胞蛋白互作完成自身病毒復(fù)制。PRRSV僅在豬肺泡巨噬細(xì)胞（Porcine alveolar macrophages, PAM）、非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero）、MA-104和Marc-145細(xì)胞中增殖。Jin等[31]證明Marc-145細(xì)胞和原代PAM細(xì)胞中NSP2過(guò)表達(dá)使DEADbox RNA解旋酶18（DDX18）從細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)從而促進(jìn)PRRSV復(fù)制。Wen等[32]發(fā)現(xiàn)細(xì)胞白介素-2增強(qiáng)子結(jié)合因子2（interleukin-2 enhancer binding factor 2, ILF2）可參與多種細(xì)胞通路及某些病毒生命周期，在體外與NSP2相互作用，對(duì)PRRSV復(fù)制起負(fù)調(diào)控作用。Song等[29]采用免疫共沉淀和細(xì)胞培養(yǎng)條件下氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記定量互作方法，鑒定PRRSV感染細(xì)胞過(guò)程中與NSP2互作的蛋白，發(fā)現(xiàn)NSP2與細(xì)胞波形蛋白（Vimentin）互作，形成可能對(duì)PRRSV附著和復(fù)制必不可少?gòu)?fù)合物，在一定程度揭示NSP2在PRRSV復(fù)制和免疫逃逸中發(fā)揮的作用。Xiao等[33]利用定量無(wú)標(biāo)簽蛋白質(zhì)組學(xué)方法，鑒定出NSP2高變區(qū)與14-3-3蛋白互作結(jié)合。Han等[34]發(fā)現(xiàn)PRRSV感染過(guò)程中NSP2以不同異構(gòu)體形式存在，熱休克70 kDa蛋白5（heat shock protein family A (Hsp70) member 5, HSPA5）作為一種與NSP2相關(guān)細(xì)胞伴侶，對(duì)PRRSV復(fù)制具有重要意義。Zhu等[35]發(fā)現(xiàn)PRRSV NSP2可與骨髓細(xì)胞2（trigger receptor expressed on myeloid cells 2, TREM2）細(xì)胞質(zhì)尾域互作促進(jìn)PRRSV感染。

4 NSP2 對(duì)病毒復(fù)制影響

NSP2基因復(fù)制過(guò)程在雙層膜泡中進(jìn)行，位于細(xì)胞質(zhì)靠近細(xì)胞核區(qū)域，是PRRSV復(fù)制和轉(zhuǎn)錄關(guān)鍵區(qū)域。研究表明將PRRSV NSP2轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，建立穩(wěn)定表達(dá)NSP2細(xì)胞系，接種PRRSV測(cè)定病毒含量，結(jié)果表明NSP2能促進(jìn)PRRSV增殖[36]，推測(cè)NSP2的aa727～747可能和PRRSV復(fù)制能力相關(guān)[37]。Wang等[38]報(bào)道NSP2在Marc-145上可促進(jìn)PRRSV復(fù)制，而NSP2受到干擾的Marc-145中PRRSV復(fù)制受到抑制。NSP2促進(jìn)PRRSV復(fù)制機(jī)理中發(fā)現(xiàn)，NSP2 C端區(qū)域與PRRSV復(fù)制無(wú)關(guān)[39]，而NSP2中aa323～433和aa628～747區(qū)域在PRRSV復(fù)制過(guò)程中起重要作用[40]。Liu等[41]進(jìn)一步通過(guò)截?cái)嗟鞍姿矔r(shí)表達(dá)方式發(fā)現(xiàn)TJM株NSP2缺失aa628～727區(qū)域能夠抑制PRRSV增殖。最新發(fā)現(xiàn)一種適應(yīng)冷環(huán)境CA-VR2332株NSP2第731位氨基酸發(fā)生突變，推測(cè)該位點(diǎn)在PRRSV適應(yīng)低溫環(huán)境中發(fā)揮重要作用[42]。

除NSP2直接影響PRRSV復(fù)制外，還存在其他途徑影響病毒增殖。Wang等[43]發(fā)現(xiàn)NSP2通過(guò)招募BCL2相關(guān)抗凋亡基因6蛋白（BCL2-associated athanogene 6, BAG6），并利用該蛋白幫助自身定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，通過(guò)促進(jìn)雙層膜泡形成促進(jìn)PRRSV復(fù)制。NSP2可利用N端半胱氨酸蛋白酶去泛素化酶活性，抑制凋亡誘導(dǎo)分子1（apoptosis inducing factor-1, AIF1）泛素化降解，促進(jìn)胞內(nèi)ATP合成從而影響PRRSV復(fù)制[44]。此外在PRRSV復(fù)制過(guò)程中，NSP2可作為NSP4絲氨酸蛋白酶輔助因子，參與多聚蛋白裝配[45]。Gao等[46]發(fā)現(xiàn)NSP2/3可將激活轉(zhuǎn)錄因子4（activating transcription factor 4, ATF4）轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)病毒復(fù)制復(fù)合物中，以促進(jìn)PRRSV RNA合成。最新研究表明NSP2磷酸化對(duì)PRRSV RNA表達(dá)有重要調(diào)節(jié)作用[47]。

綜上，NSP2通過(guò)多種途徑均調(diào)控PRRSV復(fù)制，NSP2高變區(qū)中一些關(guān)鍵區(qū)域能夠影響病毒復(fù)制，其N末端區(qū)域在PRRSV復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

5 NSP2 調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)

Ⅰ型干擾素（Interferon, IFN）在抵抗病毒感染中發(fā)揮重要作用，同時(shí)具有免疫調(diào)節(jié)活性。NSP2在免疫調(diào)控方面主要體現(xiàn)在以IFN為代表的細(xì)胞因子調(diào)控方面。PRRSV編碼蛋白可抑制干擾素產(chǎn)生，并阻礙干擾素激活抗病毒信號(hào)通路，從而造成PRRSV在豬體內(nèi)持續(xù)感染[48]。NSP2分子量較高，具有高免疫原性，包括一個(gè)半胱氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域[49-50]，一個(gè)B細(xì)胞表位和一個(gè)NSP2潛在T細(xì)胞表位[51]。至少有18個(gè)線性B細(xì)胞表位在歐洲株和美洲株NSP2中被鑒定出來(lái)，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高水平抗體，并可通過(guò)多種途徑抑制IFN產(chǎn)生[52-54]。Brown等[53]發(fā)現(xiàn)NSP2能夠參與病毒粒子組成，產(chǎn)生高水平抗體，且該抗體可保持200多天。Beura等[54]發(fā)現(xiàn)PRRSV 4個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白NSP1、NSP2、NSP4和NSP11能不同程度抑制IFN-β啟動(dòng)子活性，抑制Ⅰ型IFN介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)。Li等[55]證明NSP2通過(guò)阻斷IFN調(diào)節(jié)因子3（interferon regulatory factor 3, IRF3）磷酸化進(jìn)而抑制IFN-β產(chǎn)生。Sun[56]等證明NSP2卵巢腫瘤蛋白酶（ovarian tumor-related proteases, OUT）具有泛素連接酶活性，并通過(guò)對(duì)IκB激酶復(fù)合體α（IκB kinase α, IKKα）多聚泛素化而阻止IκBα降解，而IκBα是核轉(zhuǎn)錄因子кB（nuclear factor-Kappa B, NF-кB）抑制因子，通過(guò)阻斷核轉(zhuǎn)移抑制Ⅰ型IFN產(chǎn)生。同時(shí)NSP2還可調(diào)節(jié)PRRSV復(fù)制，其免疫逃逸作用主要是通過(guò)阻斷干擾素刺激基因15產(chǎn)生來(lái)抑制IFN產(chǎn)生。Zhu等[35]發(fā)現(xiàn)TREM2下調(diào)導(dǎo)致Toll樣受體4的NF-κB通路早期激活，從而增加Ⅰ型IFN產(chǎn)生，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞因子表達(dá)，激活脫丁蛋白（Disintegrin）和金屬蛋白酶17（Metalloproteinase 17），促使CD163受體分裂從而抑制PRRSV感染。李洋[57]構(gòu)建NSP2上3個(gè)截短突變體（PL2、中間高變區(qū)和C端跨膜區(qū)（transmembrane domain, TM））真核表達(dá)質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染細(xì)胞后通過(guò)Western blot和間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PRRSV NSP2及其TM結(jié)構(gòu)域能夠抑制HEK293T細(xì)胞蛋白翻譯，并且NSP2對(duì)細(xì)胞翻譯抑制作用依賴NSP2線粒體定位。NSP2及其TM結(jié)構(gòu)域抑制細(xì)胞蛋白翻譯不依賴于真核起始因子2的α亞基（eukaryotic initiation factor 2α, eIF2α）磷酸化，而是阻斷雷帕霉素靶標(biāo)（mammalian target of rapamycin,mTOR）通路抑制eIF4E 活性從而抑制細(xì)胞蛋白翻譯[58]。

綜上所述，PRRSV NSP2可通過(guò)多種機(jī)制抑制IFN產(chǎn)生調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答，如抑制 IFN-β啟動(dòng)子活性、抑制IRF3激活、阻斷核轉(zhuǎn)移等，NSP2在調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)中扮演重要角色。

6 NSP2 與毒力影響

Li等[59]通過(guò)多個(gè)強(qiáng)、弱毒株基因片段置換實(shí)驗(yàn)證明HP-PRRSV NSP2基因不連續(xù)缺失30個(gè)氨基酸并不是其毒力增強(qiáng)主要原因。王興龍等[60]選擇4株P(guān)RRSV分離毒株，即YX0907、BB0907、SY0909（三種毒株均具有30 aa缺失特征）和NT0801（其NSP2上不存在缺失）進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明PRRSV毒力與NSP2 30 aa缺失沒(méi)有直接聯(lián)系。后續(xù)很多弱毒株（HuN4-R、JXA1-2、TJM）也存在30個(gè)氨基酸不連續(xù)缺失進(jìn)一步證實(shí)這一觀點(diǎn)。葉夢(mèng)雪[61]應(yīng)用四重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)兩株HPPRRSV變異株（XJl7-5株和JSTZl712-12株），其NSP2均存在30個(gè)氨基酸不連續(xù)缺失和120個(gè)氨基酸連續(xù)缺失，但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明XJl7-5株具有高致病力，可引起仔豬60%死亡率，而JSTZl712-12株無(wú)致病力。XJl7-5株和JSTZl712-12株有30個(gè)氨基酸不連續(xù)缺失，分別位于NSP2的 481位和533～561位，推測(cè)出缺失位點(diǎn)不同造成兩株P(guān)RRSV毒力存在差異。

7 NSP2 在疫苗研究中應(yīng)用

目前 預(yù)防PRRS主要采取疫苗免疫措施，國(guó)內(nèi)滅活苗來(lái)源于CH-1a經(jīng)典毒株，弱毒苗來(lái)源不同，分為經(jīng)典毒株（VR-2332、CH-1R、R98）和高致病性毒株（JXA1、TJ、HuN4、GD），弱毒苗應(yīng)用較廣泛。現(xiàn)有疫苗功效欠佳，無(wú)法提供全面和普遍保護(hù)，存在毒力反強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)。商品化疫苗在病毒學(xué)和臨床方面對(duì)同源毒株提供良好保護(hù)力，而對(duì)于異源毒株不同疫苗保護(hù)力差異較大。因此PRRS防控任重道遠(yuǎn)，研制基因工程疫苗和標(biāo)記疫苗成為新研究方向。

NSP2缺失和插入片段具有重要診斷意義。一方面能夠通過(guò)RT-PCR方法區(qū)分不同毒株[14]，另一方面已建立131個(gè)氨基酸為基礎(chǔ)的ELISA方法可區(qū)分未缺失毒株與缺失毒株，其中該131個(gè)氨基酸包括常見(jiàn)的30個(gè)氨基酸缺失片段[62]。此外，TJM株由TJ株傳代而來(lái)，帶有120個(gè)氨基酸的連續(xù)缺失，對(duì)于鑒別野毒感染和疫苗免疫具有重要意義[62-63]。

NSP2高變區(qū)因可容忍缺失片段和穩(wěn)定表達(dá)外源插入基因而在PRRSV疫苗研究中扮演重要角色。Xu等[64]從弱毒疫苗HuN4株F112 NSP2區(qū)構(gòu)建一個(gè)缺失75個(gè)核苷酸感染性cDNA克隆，然后將編碼新城疫病毒核蛋白NP免疫優(yōu)勢(shì)B細(xì)胞表位基因片段插入缺失位點(diǎn)。經(jīng)免疫熒光實(shí)驗(yàn)和基因組測(cè)序發(fā)現(xiàn)重組PRRSV在細(xì)胞傳代20次后，插入基因可得到穩(wěn)定表達(dá)。用重組PRRSV免疫仔豬，然后進(jìn)行攻毒，免疫仔豬對(duì)NP和PRRSV均產(chǎn)生特異性抗體，對(duì)NSP2未產(chǎn)生抗體。攻毒后實(shí)驗(yàn)組所有免疫仔豬均無(wú)臨床癥狀，對(duì)照組攻毒后10 d全部死亡。該研究結(jié)果表明重組PRRSV（rHuN4-F112-Δ508-532）可作為PRRS潛在標(biāo)記疫苗。Fang等[65]利用北美Ⅰ型PRRSV野毒株（SD01～08）構(gòu)建全長(zhǎng)感染性克隆，構(gòu)建一種重組綠色熒光蛋白（green fluorescent protein,GFP）基因標(biāo)記PRRSV，其中NSP2免疫原性表位ES4缺失。將重組PRRSV感染豬只后用ELISA方法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)與親代PRRSV相比，重組PRRSV感染引起低水平病毒血癥，這種標(biāo)記PRRSV將為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)標(biāo)記疫苗提供理論依據(jù)。

8 NSP2 對(duì)細(xì)胞噬性影響

PRRSV僅在PAM、MA-104和Marc-145細(xì)胞中增殖，說(shuō)明PRRSV具有嚴(yán)格細(xì)胞噬性。PRRSV通常感染體內(nèi)單核-巨噬細(xì)胞系，特別是PAM以及其他組織間質(zhì)巨噬細(xì)胞，如心臟、胸腺、脾臟、肝竇、腎髓質(zhì)間質(zhì)和腎上腺[66-68]。NSP2某些特定區(qū)域變異可以改變PRRSV感染的細(xì)胞或組織噬性。首個(gè)PRRSV缺失報(bào)道是在HB-2(sh)/2002 的NSP2中缺失aa470～481片段，只影響PRRSV在原代PAM中復(fù)制，而不影響PRRSV在Marc-145細(xì)胞中復(fù)制[69]。Song等[70]發(fā)現(xiàn)HP-PRRSV JXwn06株高變區(qū)缺失NSP2 aa323～521片段在PAM中喪失感染性，但在Marc-145細(xì)胞中仍能高效復(fù)制。Leng等[71]發(fā)現(xiàn)TJ株F19在感染3 dpi和10 dpi后，豬血清中病毒滴度顯著低于TJ株F3，推測(cè)TJ株F19體內(nèi)復(fù)制水平或細(xì)胞噬性發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致毒力降低。以上結(jié)果表明NS P2不同區(qū)域缺失導(dǎo)致PRRSV對(duì)細(xì)胞噬性發(fā)生明顯改變。

9 總結(jié)

由于PRRSV NSP2持續(xù)變異，難以得到有效防制，嚴(yán)重影響世界養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。近年來(lái)NSP2在病毒遺傳變異、復(fù)制、毒力，免疫調(diào)控，細(xì)胞噬性，與自身病毒蛋白和宿主蛋白互作機(jī)理方面認(rèn)識(shí) 逐步加深。這些研究揭示NSP2氨基酸變異不能直接改變PRRSV毒力，但NSP2在PRRSV復(fù)制、免疫調(diào)控、細(xì)胞噬性等方面發(fā)揮重要作用。NSP2能夠通過(guò)直接和間接兩種途徑影響PRRSV復(fù)制，其N末端區(qū)域在PRRSV復(fù)制過(guò)程中占有重要地位。NSP2在免疫調(diào)控方面主要體現(xiàn)在以IFN為代表的細(xì)胞因子抑制或促進(jìn)方面。NSP2可通過(guò)抑制IFN-β啟動(dòng)子活性、抑制IRF3激活、阻斷核轉(zhuǎn)移等方式抑制IFN產(chǎn)生來(lái)調(diào)控宿主免疫。NSP2不同區(qū)域缺失導(dǎo)致PRRSV對(duì)細(xì)胞噬性發(fā)生明顯改變。同時(shí)深入研究NSP2遺傳變異有助于相關(guān)重組疫苗研究和分子標(biāo)簽應(yīng)用，為疫苗株和野毒株鑒定提供參考。NSP2高變區(qū)可穩(wěn)定表達(dá)外源基因?yàn)檠兄浦亟M疫苗和標(biāo)記疫苗提供可能。對(duì)NSP2功能研究有助于闡明PRRSV非結(jié)構(gòu)蛋白參與免疫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，因此對(duì)上述關(guān)鍵問(wèn)題進(jìn)行研究，將進(jìn)一步闡明PRRSV致病機(jī)理和免疫特性提供重要理論基礎(chǔ)，為PRRSV疫苗研究和臨床防控提供新思路。