山豆根菌核病病原菌鑒定及室內(nèi)藥劑篩選

摘要：采用常規(guī)組織分離法分離山豆根（Sophora tonkinensis Radix）菌核病病原菌，利用柯赫式法則進(jìn)行致病性測定，基于形態(tài)特征、菌絲融合群測定、細(xì)胞核熒光染色以及rDNA-ITS序列分析進(jìn)行病原菌的鑒定，并利用菌絲生長速率法測定5種殺菌劑對(duì)病原菌的抑制活性。結(jié)果表明，山豆根菌核病的病原菌為立枯絲核菌（Rhizoctonia solani），屬于融合群AG-1。98%惡霉靈可溶性粉劑（SP）、75%肟菌·戊唑醇水分散粒劑（WG）、250 g/L吡唑醚菌酯乳油（EC）、10億/g哈茨木霉菌懸浮劑（SC）、50%多菌靈可濕性粉劑（WP）對(duì)病原菌菌絲的生長均有較好的抑制效果，抑制中濃度（EC50）分別為0.061 1、0.575 7、0.074 8、0.284 3、0.740 5 mg/L。

關(guān)鍵詞：山豆根（Sophora tonkinensis Radix）；菌核??；病原菌鑒定；室內(nèi)藥劑篩選；立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）

中圖分類號(hào)：S432.1；S432.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2024）09-0089-06

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.09.016 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Identification of pathogen of sclerotinia on Sophora tonkinensis Radix and screening of laboratory agents

SONG Li-sha， JIANG Ni， ZHANG Zhan-jiang， WEI Shu-gen， QIU Zhuo-qiu，HUANG Qi， ZHAN Xin-jie， PAN Li-mei

（Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants/Guangxi Key Laboratory of High-Quality Formation and Utilization of Dao-Di Herbs/Guangxi Traditional Chinese Medicine Breeding Technology Innovation Center/ National Center for Traditional Chinese Medicine Inheritance and Innovation， Nanning 530023，China）

Abstract： The pathogens from Sophora tonkinensis Radix were isolated by conventional tissue separation method， the pathogenicity was determined by Koch’s formula， and the pathogens were identified based on morphological characteristics， mycelium fusion group determination， nuclear fluorescence staining and rDNA-ITS sequence analysis. The inhibitory activities of 5 fungicides against pathogens were measured by the mycelium growth rate method. The results showed that the pathogen was Rhizoctoniao0gamISRjf/xf8MQbjjZmuiBd0thfBlc66y3uhDkKjg= solani， belonging to the fusion group AG-1. 98% hymexazol soluble power （SP）， 75% oxime ·pentazolol water dispersible granule （WG）， 250 g/L pyraclostrobin emulsifiable concentrate （EC）， 1 billion /g Trichoderma harziana suspension concentrate （SC）， and 50% carbendazim wettable power （WP） all had good inhibitory effects on the growth of pathogenic fungi mycelia. The inhibitory medium effective concentrations （EC50） were 0.061 1， 0.575 7， 0.074 8， 0.284 3， 0.740 5 mg/L， respectively.

Key words：Sophora tonkinensis Radix； sclerotinia； identification of pathogen； screening of laboratory agents； Rhizoctonia solani

山豆根（Sophora tonkinensis Radix）為豆科（Leguminosae）槐屬（Sophora）越南槐（Sophora tonkinensis Gagnep）的干燥根及根莖，是中國傳統(tǒng)的中藥材，具有消腫化瘀、清熱利咽、解毒去火的作用，歷年收錄在《中華人民共和國藥典》［1］。廣西是山豆根的道地主產(chǎn)區(qū)［2，3］，山豆根原材料的需求日益增大，其在廣西的種植面積近667萬m2［4］。隨著栽培面積的日益擴(kuò)大，山豆根根腐病、炭疽病、圓斑病等病害陸續(xù)有報(bào)道［5-7］，2021年7月，廣西壯族自治區(qū)藥用植物園在廣西河池市山豆根產(chǎn)區(qū)首次發(fā)現(xiàn)山豆根菌核病，該病害多從山豆根近地面莖部開始發(fā)病，后沿著主莖逐漸侵染枝條、葉柄、葉片，后期莖干枝條枯黃，葉片變黃脫落，整個(gè)植株枯萎死亡。濕度高時(shí)，在發(fā)病處可見白色菌絲體，后期可形成典型的菜子粒至鼠糞狀大小的黑褐色菌核。該病害早期癥狀較為隱蔽，如溫濕度適宜，特別是高溫大雨的天氣，很容易在田間發(fā)生流行，植株從感病到整株枯死只需3～5 d。通常引起植物菌核病的病原菌多為核盤菌或絲核菌，但目前鮮見有報(bào)道山豆根菌核病的病原菌種類，鑒于該病害的危害性極大，通過病原菌的分離、致病性測定、病原菌的形態(tài)及分子鑒定，明確山豆根菌核病的病原種類，進(jìn)而開展室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)，以期為病害的有效防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 2021年9月采集自廣西河池金城江區(qū)感病的山豆根枝葉。

1.1.2 室內(nèi)殺菌劑原藥 5種供試藥劑詳細(xì)信息及使用濃度見表1。

1.1.3 融合群的標(biāo)準(zhǔn)菌株 立枯絲核菌由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所李勇研究員惠贈(zèng)。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的分離和純化 采用常規(guī)組織法進(jìn)行樣品分離，先用清水對(duì)山豆根感病的枝葉清洗干凈，用濾紙吸干表面水分。參照方中達(dá)［8］《植病研究方法》進(jìn)行操作，取病健交界處的枝葉，先用75%乙醇消毒30 s，再用0.1%的氯化汞消毒2.5 min，最后用無菌水漂洗3次，用滅菌濾紙吸干水，然后剪取直徑5 mm莖段，置于PDA平板上，28 ℃恒溫培養(yǎng)，待菌落長出，挑取尖端菌絲純化培養(yǎng)。

1.2.2 致病性測定 采用葉片離體試驗(yàn)和整株活體試驗(yàn)進(jìn)行致病性測定。整株活體試驗(yàn)步驟：取直徑6 mm的菌餅10個(gè)，用無菌研缽棒搗碎菌餅，然后與500 mL無菌水混勻，作為接種液。將長勢一致的 1年生山豆根苗移栽至直徑為18 cm的花盆中，把接種液從上到下均勻噴灑有刺傷的整個(gè)植株的葉片和莖，并用自封袋封住保濕，直到開始發(fā)病取下自封袋。對(duì)照接種無菌水，每處理重復(fù)3次。

葉片離體致病性試驗(yàn)步驟：將直徑6 mm的菌餅接種至長勢一致的1年生山豆根健康的葉片上，以接種直徑6 mm的PDA培養(yǎng)基組織塊為對(duì)照，每處理重復(fù)3次。

1.2.3 形態(tài)特征觀察 將純化培養(yǎng)的菌株接種到PDA培養(yǎng)基上28 ℃培養(yǎng)5～7 d，觀察記錄病菌的菌落特征、顏色、質(zhì)地等以及菌核產(chǎn)生情況；利用光學(xué)顯微鏡觀察菌絲形態(tài)特征。

1.2.4 菌絲融合群測定 參照參考文獻(xiàn)［9，10］的玻片對(duì)峙法培養(yǎng)，取待測菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株的菌餅分別置于PDA培養(yǎng)基的載玻片（無菌）上，兩菌餅間隔 2 cm左右，于28 ℃培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)2～3 d。待2個(gè)菌株的菌落前端菌絲重疊5 mm左右時(shí)，取出載玻片于光學(xué)顯微鏡下觀察融合情況。

1.2.5 細(xì)胞核數(shù)目觀察 將菌株接種于PDA培養(yǎng)基中央，滅菌的蓋玻片XgEq98gYgaJK1BZIY5UK6ThB8T2cvkeD+WxfnEPl9o8=45°斜插在接種點(diǎn)的四周，待菌絲長滿蓋玻片取出。參照參考文獻(xiàn)［11，12］的方法，用熒光染色劑Calcofluor（10 μg/mL）和Hoechst33258（0.8 μg/mL）或DAPI（0.8 μg/mL）對(duì)菌絲染色，置于熒光顯微鏡下觀察菌絲細(xì)胞核數(shù)目。并結(jié)合電鏡操作觀察菌絲隔膜和細(xì)胞核的形態(tài)。

1.2.6 致病菌鑒定 參考方中達(dá)［8］的方法記錄菌落形態(tài)，參考魏景超［13］的方法進(jìn)行菌落形態(tài)初步鑒定。參考 Kumar等［14］的方法，采用MightyAmp DNA PolymeraseVer.3（1.25 U/50 μL）試劑盒（Takara Bio Inc.，Japan，cat.no.R076A），挑取山豆根菌核病菌的菌絲作為模板直接用于PCR反應(yīng)，采用真菌ITS1 （5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和ITS4（5′-TC CTCCGCTTATTGATATGC-3′）通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。反應(yīng)體系50.0 μL：2×MightyAmp Buffer 25.0 μL，10×Addtitive for High Specificity 5.0 μL，引物ITS1和ITS2（15 pmoL/L）各1.5 μL，加ddH2O定容至50.0 μL。擴(kuò)增程序：98 ℃預(yù)變性2 min；98 ℃ 10 s，60 ℃ 15 s，68 ℃ 60 s，進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；68 ℃延伸10 min。用凝膠成像法檢測目的條帶，將有目的條帶的PCR產(chǎn)物送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序；測序結(jié)果與NCBI的GenBank中的序列進(jìn)行BLAST比對(duì)，利用MEGA7.0的鄰位連接法構(gòu)建ITS rDNA系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。

1.2.7 殺菌劑的抑菌作用測定 采用菌絲生長速率法［15］，將病原菌接種到PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d后，按照供試藥劑母液設(shè)定的濃度比例加入到已融化冷卻至50 ℃左右的PDA培養(yǎng)基中，混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中，制成含藥平板，將直徑為6 mm的菌餅置于含藥平板上，以不加入殺菌劑的PDA作為對(duì)照。

選5種殺菌劑進(jìn)行EC50毒力測定。將菌餅接種于稀釋不同倍數(shù)農(nóng)藥的PDA平板中央，每個(gè)處理重復(fù)3次，于28 ℃光照培養(yǎng)箱下培養(yǎng)7 d。按時(shí)觀察并用十字交叉法測量菌落直徑，計(jì)算不同農(nóng)藥的抑制率。供試EC50濃度參照表1。

抑菌率計(jì)算公式［15］如下。

ω＝（N-M）/（N-菌餅直徑）×100% （1）

式中，ω為抑菌率；N為對(duì)照菌落增長直徑；M為處理菌落增長直徑。

采用Excel 2019軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算毒力回歸方程（y=a+bx），先把抑制率換算為幾率值，以自變量x為濃度的對(duì)數(shù)值，y為幾率值，再用此方程求EC50，利用SPSS 19.0軟件計(jì)算斜率標(biāo)準(zhǔn)誤差、卡方值、自由度和P。

1.3 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素ANOVA分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 病害發(fā)生癥狀

山豆根菌核病主要發(fā)生在2～3年生植株。每年6—7月南方雨季，為病害高發(fā)期。多從近地面莖部開始發(fā)病，侵染點(diǎn)初期不規(guī)則形，灰褐色，水漬狀凹陷，后沿著主莖逐漸侵染枝條、葉柄、葉片，后期莖干枝條枯黃，葉片變黃脫落，植株枯萎（圖1a）。濕度高時(shí)，在發(fā)病處可見白色菌絲體，后期可形成菌核。菌核開始為淡黃色菜子狀（直徑0.5～1.0 mm），后期變大（直徑3.0～4.0 mm），棕褐色（圖1b）。

2.2 病原菌分離和致病性測定

從發(fā)病植株的莖和葉片組織分離出的大部分菌株形態(tài)一致，經(jīng)純化保留了1個(gè)代表菌株，編號(hào)為SDG。接種3 d后山豆根葉片逐漸退綠變黃，9 d后枯萎脫落，莖也隨著時(shí)間的推移逐漸退綠，15 d后枯萎，而對(duì)照則無此現(xiàn)象（圖2）。對(duì)SDG接種的莖葉再次進(jìn)行分離，均可分離出同樣的絲核菌。從而確定接種的菌株為山豆根菌核病的病原菌。

2.3 菌株SDG的形態(tài)學(xué)鑒定

致病菌株SDG在PDA培養(yǎng)基上呈輻射狀生長。初期菌絲體呈白色，氣生菌絲生長迅速，隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移，氣生菌絲逐漸變?yōu)樽睾稚?5 d左右在菌落周圍或中部產(chǎn)生大量的菌核，菌核表面粗糙，暗褐色，形狀不規(guī)則（圖3a）。菌絲呈近直角或銳角分枝，近分枝處形成隔膜及分枝處多有縊縮（圖3b）。

2.4 菌株SDG的菌絲融合群及細(xì)胞核數(shù)目

根據(jù)待測菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株的對(duì)峙培養(yǎng)觀察和鑒定標(biāo)準(zhǔn)，菌株SDG與標(biāo)準(zhǔn)菌株發(fā)生菌絲融合（圖4a）。經(jīng)過熒光染色劑處理后，熒光顯微鏡下觀察菌絲細(xì)胞核數(shù)目為多個(gè)，多數(shù)為3個(gè)（圖4b）。在掃描電鏡和透射電鏡下明顯看到菌絲桶狀隔膜（圖4c）和細(xì)胞核（圖4d）。根據(jù)形態(tài)特征和細(xì)胞核數(shù)目，確定山豆根菌核病菌為立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）。

2.5 病原菌的分子生物學(xué)鑒定

病原菌菌株SDG經(jīng)ITSrDNA序列進(jìn)行測定并與AG融合群菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果（圖5）表明，菌株SDG與Rhizoctonia solani AG-1-IA（AY270006和AY270009）聚為同一個(gè)系統(tǒng)發(fā)育分支，同源性達(dá)99%。因此將該菌株鑒定為立枯絲核菌Rhizoctonia solani AG-1-IA。菌株SDG序列已提交GenBank數(shù)據(jù)庫，登錄號(hào)（Accession number）為MW362985。

2.6 殺菌劑對(duì)病原菌的抑制作用和室內(nèi)毒力測定

選用表2中5種殺菌劑進(jìn)行EC50試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)98%惡霉靈SP和250 g/L吡唑醚菌酯EC對(duì)山豆根菌核病菌菌絲生長抑制效果較好，其EC50分別為0.061 1、0.074 8 mg/L；其次為10億/g哈茨木霉菌SC、75%肟菌·戊唑醇WG和50%多菌靈WP，其EC50分別為0.284 3、0.575 7、0.740 5 mg/L。

3 討論與小結(jié)

立枯絲核菌屬于半知菌類無孢目絲核菌屬，其有性態(tài)為擔(dān)子菌門瓜亡革菌（Thanatephorus cucumeris）［16］。立枯絲核菌在自然界中多以無性態(tài)存在，很難發(fā)現(xiàn)有性態(tài)。此外，在田間危害也是以無性態(tài)為主。立枯絲核菌的分類通常以菌絲融合類群來劃分，目前其融合群已有14個(gè)（AG-1至AG-13，AG-B1）［17］。同時(shí)前人又在融合群的基礎(chǔ)上劃分亞群，目前發(fā)現(xiàn)18個(gè)亞群，可在不同作物上引起不同的病害［18-25］。

山豆根菌核病在廣西河池為害枝葉嚴(yán)重，經(jīng)分離和致病性測定以及分子生物學(xué)鑒定為立枯絲核菌；根據(jù)菌絲細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞核的狀態(tài)和融合群測定，確定該病菌為多核絲核菌AG-1-IA類群，這是國內(nèi)對(duì)立枯絲核菌引起山豆根菌核病的首次報(bào)道。根據(jù)文獻(xiàn)檢索，國內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)由立枯絲核菌AG-1-IA類群引起山豆根菌核病菌的報(bào)道。立枯絲核菌寄主范圍廣泛，僅AG-1融合群可侵染多科植物，如禾本科、菊科、豆科、十字花科等植物［19-25］，它還能引起多種植物的立枯和葉枯，由此據(jù)菌株不同寄主的致病性又分為IA、IB、IC亞群［19］。AG-1-IA類群能夠引起水稻和玉米的紋枯病，造成嚴(yán)重的危害和產(chǎn)量損失［26，27］，雖AG-1-IA類群暫時(shí)未見在豆科上報(bào)道，但也有文獻(xiàn)指出AG-1-IA類群中存在適應(yīng)不同宿主感染的基因庫調(diào)控［28］。本研究僅對(duì)廣西河池金城江區(qū)山豆根菌核病的絲核菌鑒定，其他山豆根產(chǎn)區(qū)是否存在不同的絲核菌種類及融合群，仍需進(jìn)一步檢測和研究。

通過5種殺菌劑室內(nèi)對(duì)山豆根菌核病菌的抑菌作用和EC50毒力測試，發(fā)現(xiàn)98%惡霉靈SP和250 g/L吡唑醚菌酯EC對(duì)山豆根菌核病菌菌絲生長抑制效果較好，其EC50分別為0.061 1、0.074 8 mg/L。這些殺菌劑可作為防治山豆根菌核病的候選藥劑，可進(jìn)一步進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。本研究明確了山豆根菌核病的病原菌為立枯絲核菌AG-1-IA，該結(jié)果可為病害綜合防控提供重要參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典 一部［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.

［2］ 彭 成.中華道地藥材［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2011.

［3］ 姚紹嫦，凌征柱，藍(lán)祖栽，等.廣西道地藥材山豆根的適宜氣候條件分析［J］.中國農(nóng)業(yè)氣象，2013，34（6）： 673-677.

［4］ 蔣 妮，宋利沙，陳乾平，等.越南槐圓斑病病原鑒定［J］.植物病理學(xué)報(bào)，2021，51（3）：460-463.

［5］ SONG L S，JIANG N，TAN G Y，et al. First report of round leaf spot on Sophora tonkinensis Caused by Didymella glomerata in China［J］.Plant disease，2021，105（2）：498.

［6］ SONG L S，JIANG N，CHEN Q P，et al. First report of leaf spot caused by Colletotrichum siamense on Sophora tonkinensis［J］.Australasian plant disease notes，2021，16：11.

［7］ 唐小迪，魏升華，秦 睿，等.貴州山豆根根腐病病原菌鑒定［J］.南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2021，52（8）：2140-2147.

［8］ 方中達(dá).植病研究方法［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998.

［9］ 陳延熙，張敦華，段霞瑜，等.關(guān)于Rhizoctonia solani菌絲融合分類和有性世代的研究［J］.植物病理學(xué)報(bào)， 1985，15（3）：139-143.

［10］ 張敦華，陳延熙.雙核絲核菌的菌絲融合［J］.植物病理學(xué)報(bào)，1986，16（3）：13-18.

［11］ HARRIS S D，MORREL J L，HAMER J E. Identification and characterization of Aspergillus nidulans mutants defective in cytokinesis［J］.Genetics，1994，136（2）：517-532.

［12］ XU J R，HAMER J E. MAP kinase and cAMP signaling regulate infection structure formation and pathogenic growth in the rice blast fugus Magnaporthe grisea［J］.Genes and development，1996，10（21）：2696-2706.

［13］ 魏景超.真菌鑒定手冊(cè)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1979.

［14］ KUMAR S，STECHER G，TAMURA K. MEGA7： Molecular evolutionary genetics analysis version 7.0 for bigger datasets［J］.Molecular biology and evolution，2016，33（7）：1870-1874.

［15］ 張凱東，強(qiáng) 遙，劉 冰，等.獼猴桃葉斑病病菌生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑篩選［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，49（18）： 106-110.

［16］ 邵力平，沈瑞祥，張素軒.真菌分類學(xué)［Ｍ］.北京：中國林業(yè)出版社，1984.

［17］ CARLING D E，BAIRD R E，GITAITIS R D，et al. Characterization of AG-13 a newly reported Anastomosis Group of Rhizoctonia solani［J］.Phytopathology，2002，92（8）：893-899.

［18］ 李 菊.中國東北地區(qū)玉米紋枯病菌融合群鑒定及遺傳多樣性研究［D］.山東泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

［19］ OGOSHI A. Ecology and pathogenicity of anastomosis and intraspecific groups of Rhizoctonia solani Kühn ［J］.Annual review of phytopathology，1987，25（1）：125-143.

［20］ GONZ？LEZ G V，PORTAL O M A，RUBIO V. Review. Biology and systematics of the form genus Rhizoctonia［J］.Spanish journal of agricultural research，2006，4（1）：55-79.

［21］ GODOY-LUTZ G，KUNINAGA S，STEADMAN J R， et al. Phylogenetic analysis of Rhizoctonia solani subgroups associated with web blight symptoms on common bean based on ITS-5.8S rDNA［J］.Journal of general plant pathology，2008，74（1）：32-40.

［22］ SHARON M，KUNINAGA S，HYAKUMACHI M，et al. The advancing identification and classification of Rhizoctonia spp. using molecular and biotechnological methods compared with the classical anastomosis grouping［J］.Mycoscience，2006，47（6）：299-316.

［23］ CARLING D E，KUNINAGA S，BRAINARD K A. Hyphal anastomosis reactions， rDNA-internal transcribed spacer sequences， and virulence levels among subsets of Rhizoctonia solani anastomosis group-2 （AG-2） and AG-BI［J］.Phytopathology，2002，92（1）：43-50.

［24］ HYAKUMACHI M，MUSHIKA T，OGISO Y，et al. Characterization of a new cultural type （LP） of Rhizoctonia solani AG2-2 isolated from warm-season turfgrasses， and its genetic differentiation from other cultural types［J］.Plant pathology，1998，47（1）：1-9.

［25］ GONZ？LEZ D，CARLING D E，KUNINAGA S，et al. Ribosomal DNA systematics of Ceratobasidium and Thanatephorus with Rhizoctonia anamorphs［J］.Mycologia，2001，93（6）：1138-1150.

［26］ KANEMATSU S，NATIO S. Genetic characterization of Rhizoctonia solani AG-2-3 by analyzing restriction fragment length polymorphisms of nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacers［J］.Japanese journal of phytopathology，1995，61（1）：18-21.

［27］ SCHNEIDER J H M，SCHILDER M T，DIJST G. Characterization of Rhizoctonia solani AG 2 isolates causing bare patch in field grown tulips in the Netherlands［J］.European journal of plant pathology，1997，103（3）： 265-279.

［28］ HYAKUMACHI M，PRIYATMOJO A，KUBOTA M，et al. New anastomosis groups， AG-T and AG-U， of binucleate Rhizoctonia spp. causing root and stem rot of cut-flower and miniature roses［J］.Phytopathology， 2005，95（7）：784-792.

收稿日期：2023-06-19

基金項(xiàng)目：廣西中醫(yī)藥適宜技術(shù)開發(fā)與推廣項(xiàng)目（GZSY21-03）；廣西衛(wèi)生健康委員會(huì)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目（ZJC2020003）；中醫(yī)藥多學(xué)科交叉創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（GZKJ2305）

作者簡介：宋利沙（1987-），女，河南淇縣人，副研究員，博士，主要從事藥用植物病蟲害防治工作，（電話）18587575152（電子信箱）lishasong@126.com；通信作者，蔣 妮，（電子信箱）jiangni292@126.com。

宋利沙，蔣 妮，張占江，等. 山豆根菌核病病原菌鑒定及室內(nèi)藥劑篩選［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2024，63（9）：89-94，101．