薛寒青 王艦 周淑蘭

（青海省農(nóng)林科學(xué)院生物所，青藏高原生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海西寧，810016）

TDZ對(duì)誘導(dǎo)大蒜愈傷組織形成的影響

薛寒青 王艦 周淑蘭

（青海省農(nóng)林科學(xué)院生物所，青藏高原生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海西寧，810016）

TDZ是一種新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有很強(qiáng)的細(xì)胞分裂素活性（CTK），研究了不同濃度TDZ對(duì)大蒜愈傷組織培養(yǎng)和大蒜鱗莖分化的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，15%濃度的TDZ對(duì)大蒜愈傷組織培養(yǎng)的促進(jìn)作用最明顯，誘導(dǎo)率達(dá)到75%；而在MS+15%TDZ的培養(yǎng)基上，愈傷組織增殖最快，誘導(dǎo)出的黃色致密愈傷組織分化能力最強(qiáng)，質(zhì)量最好。

TDZ大蒜愈傷組織 誘導(dǎo)

大蒜為百合科蔥屬植物蒜 （Allium sattvumL.）的鱗莖，味辛辣，適應(yīng)性強(qiáng)。據(jù)資料介紹，我國(guó)大蒜種植面積約0.8萬(wàn)hm2，產(chǎn)量達(dá)54萬(wàn)t，居世界第1位[1]。我國(guó)也是大蒜出口大國(guó)，主要種植地有山東、青海等地。其中青海種植面積達(dá)0.27萬(wàn)hm2，主要種植地區(qū)有樂(lè)都縣和格爾木。大蒜營(yíng)養(yǎng)豐富，含有氨基酸、肽類、蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、無(wú)機(jī)鹽、維生素以及蒜油等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。大蒜作為調(diào)味品已有數(shù)千年的歷史，同時(shí)也是天然的藥劑，其具有抗菌消炎、抗癌防癌、降血壓、提高機(jī)體免疫功能等作用。目前全世界將其作為天然食物和藥用保健食物，隨著藥理保健研究的深入，其食用量呈逐年上升趨勢(shì)[2]。

人工合成的苯基脲衍生物TDZ是一種新型植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有很強(qiáng)的細(xì)胞分裂素活性（CTK），它的CTK活性要比一般CTK高幾十倍至幾百倍，研究表明，它可以促進(jìn)植物芽的再生和繁殖，打破芽的休眠，促進(jìn)種子萌發(fā)，促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)，延緩植物衰老等[3]。并且可以作用其他的植物激素和生理活性物質(zhì)來(lái)調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育，是一個(gè)作用力很強(qiáng)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，在農(nóng)業(yè)上有廣泛的應(yīng)用。

近年來(lái)，它作為一種有效的形態(tài)發(fā)生調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)快繁體系中得到了廣泛的應(yīng)用，其應(yīng)用范圍遍及草本植物和木本植物。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用大蒜品種為格爾木紫皮大蒜，該品種已通過(guò)青海省級(jí)品種審定。MS基本培養(yǎng)基可把其分成4個(gè)部分：大量元素MSⅠ（濃度為10×），微量物質(zhì)MSⅡ（濃度為200×），鐵鹽MSⅢ（濃度為100×），有機(jī)物質(zhì)MSⅣ（濃度為100×），置于4℃的冰箱中，按需取量。消毒劑為70%乙醇（C2H5OH）和0.1%的升汞（HgCl2）等溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。激素為TDZ。

1.2 試驗(yàn)方法

①M(fèi)S培養(yǎng)基配制 取MSⅠ100 mL/L，MSⅡ5 mL/L，MSⅢ10 mL/L，MSⅣ10 mL/L加入蒸餾水定容到1 L，加入蔗糖30 g/L，瓊脂粉6.5 g/L調(diào)節(jié)pH值至5.8，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽121℃滅菌20 min后待用。

②植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配制 取藥品TDZ配制成5%，10%和15%三種不同濃度，置于4℃的冰箱中保存待用。

③消毒劑的配制 將84消毒液配制成1∶200的溶液，配制70%乙醇（C2H5OH）和0.1%的升汞（HgCl2），配制濃度為1 mg/mL的多菌靈溶液。

④數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 在愈傷組織培養(yǎng)試驗(yàn)中，3個(gè)不同TDZ濃度（5%，10%和15%）處理，均在生長(zhǎng)20 d，27 d和34 d時(shí)分別觀察記錄愈傷組織、出愈率和增殖系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

TDZ對(duì)誘導(dǎo)大蒜愈傷組織形成的影響方差分析（表2～4）結(jié)果表明，差異顯著性從F值表中查得F（3，8）= 4.07大于所計(jì)算的F統(tǒng)計(jì)量3.524，表明各濃度之間沒(méi)有差異，這可能由于培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短，愈傷組織生長(zhǎng)不明顯所致。

表1 不同濃度TDZ對(duì)誘導(dǎo)大蒜愈傷率的影響

表2 第20天時(shí)愈傷組織出愈率的方差分析

在愈傷組織形成培養(yǎng)的試驗(yàn)中，不同濃度的TDZ對(duì)愈傷組織形成有不同程度的促進(jìn)作用，而加有15% TDZ濃度的培養(yǎng)組合對(duì)愈傷組織培養(yǎng)的促進(jìn)作用最明顯（表1，5）。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)通過(guò)不同濃度TDZ對(duì)大蒜愈傷組織培養(yǎng)和大蒜鱗莖分化的影響，初步得出，在不同的觀察時(shí)間MS+15%濃度的TDZ培養(yǎng)基對(duì)大蒜愈傷組織培養(yǎng)的促進(jìn)作用最明顯，誘導(dǎo)率達(dá)到75%；愈傷組織增殖最快，誘導(dǎo)出的黃色致密愈傷組織分化能力最強(qiáng)，質(zhì)量最好。

表3 第27天時(shí)愈傷組織出愈率的方差分析

表4 第34天時(shí)愈傷組織出愈率的方差分析

表5 處理間方差分析

[1]Wang H M,Liu H M,Wang W J,et al.Effects of Thidiazuron,basal medium and light quality on adventitious shoot regeneration from in vitro cultured stem of Populus alba×P.berolinensis[J].林業(yè)研究:英文版，2008（3）：257-259.

[2]黃岳.TDZ處理對(duì)蘋果梨坐果率和果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育的影響[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)，2008（3）：176-180.

[3]吳麗君.TDZ和GA3對(duì)提高紅葉石楠組培快繁效率的研究[J].福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2008（2）：180-190.

Effects of TDZ on the Induction of Callus in Garlic Tissue Culture

XUE Hanqing,WANG Jian,ZHOU Shulan
(Institute of Biology,Qinghai Province Agriculture and Forestry Academy of Science,Qinghai-Tibet Plain Biological Technology Ministry of Education Key Laboratory，Xining,Qinghai 810016)

TDZ is a new plant growth regulator,it has very strong activity of kinetin(CTK).The effect of TDZ were studied on the callus formation and bulb differntiation in garlic.The results showed that:15%TDZ could significantly improve the callus induction in garlic had the most obvious promoter action to tissue culture of garlic.The percentage of callus formation reached 75%,but the callus propagated most quickly on the MS+15%TDZ culture medium,the callus were yellow and compact,the differentiation ability was the strongest,the quality was the best.

TDZ;Garlic tissue culture;Induction

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.14.006

青海省科技廳立項(xiàng)重點(diǎn)課題

薛寒青（1965-），女，碩士，研究員，從事蔬菜、花卉組織培養(yǎng)和脫毒工作，電話：0971-5312581，13997070707。E-mail:hanqx77@sina.com

2009-05-04